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2006年01月11日

【期刊论文】人间充质干细胞体外扩增及生物学特征的研究

黄绍良, ZHOU Dun-hua, HUANG Shao-liang, WU Yan-feng, WEI Jing, CHEN Ge-yu, LI Yang, Bao Rong

中华儿科杂志,2003,41(8):607-610,-0001,():

摘要

目的 探讨成人骨髓,胎儿骨髓和人脐血3种不同的人类间充质干细胞(MSC)体外扩增及其生物学特性。方法 观察3种来源的MSC的生长、增殖和表面标志的表达,从面评价MSC的纯化、增殖能力及其免役学特性。结果 (1)3种不同来源的人MSC的细胞形态、集落数、集落大小均无关差异;但成人骨髓MSC在集落形成及集落交错融合时间上均早于胎儿骨髓和脐血MSC;(2)3种来源的人MSC传代培养增殖速度无差异,但脐血和胎儿MSC融合后无接触抑制,而成人骨髓MSC存在接触抑制;(3)来源于骨髓单个核细胞(MSC)8×10 6或脐血MSC25×10 6的MSC,经体外扩增3代5代或10代后,细胞数分别为10 7,10 8和010个;(4)MSC易纯化,P2代细胞均为一性为90%,P3代细胞均一性为95%,P5代细胞均一性达到99%;(5)不同来源的MSC表面重要志:CD29、CD44、CD59、CD90、CD105、CD166表达均为阳性,其造血细胞表面标志:CD11a、CD14、CD33、CD34、CD28、CD45、CD117表达均为阴性,与移植免疫排斥发生密切相关的表面标志:HLA-DR、B7-1(CD80)、B7-2(CD86)CD40和CK40L均为阴性。3种不同来源的人MSC表面标志,差异无显著性。(6)两种不同培养体系对人MSC的纯化扩增及生物学特性无影响。结论 (1)不同来源的人MSC生物学特性无明显差异;(2)人MSC在体外易扩增纯化,增殖能力强,符合临床组织工程的需要;(3)人MSC不表达造血细胞及其与移植免疫排斥发生密切相关的表面标志,有可以突破HLA屏障,广泛应用于临床。

关键词: 干细胞, 细胞分裂, 细胞分化, 免疫表型分型 组织工程

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