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2010年12月16日

【期刊论文】A族链球菌表面蛋白Fba单克隆抗体的制备及其对应表位的初步鉴定①

魏林, 马翠卿, 顾海燕, 郭奕阳, 胡光磊, 魏澎

中国免疫学杂志,2008,24(11):1046~1048,-0001,():

摘要

目的:制备抗A组溶血性链球菌(GAS)表面蛋白Fba(fibronectin-binding proteins a)的单克隆抗体(mAb),并对单抗的生物学功能及其相应表位进行了初步鉴定。方法:以重组Fba蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术及间接ELISA筛选出针对Fba的杂交瘤细胞株,以Western blot鉴定mAb的特异性,并将获得的mAb与Fba+GAS和Fba-GAS分别行全菌ELISA、与Fba的分段表达蛋白行Western blot,初步鉴定mAb针对的表位所在区域。结果:获得了稳定分泌抗Fba-mAb的杂交瘸细胞株,其中一株mAb能特异结合天然Fba+链球菌,且该单抗针对的表位包含了Fba蛋白的第104~108位氨基酸,该位点也是链球菌Fab蛋白结合补体调节蛋白FH的位点。结论:成功地制备了抗GAS表面Fba蛋白的mAb,其中一株mAb对应的表位为位于菌体表面的天然表位,并检测出了该mAb对应的表位所在区段,这为深入研究GAS的致病机制提供了有力工具。

关键词: A族链球菌, Fba蛋白, 单克隆抗体 表位

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2010年12月16日

【期刊论文】A族链球菌(GAS)Fba蛋白单克隆抗体对应表位核心氨基酸的确定①

魏林, 郭奕阳, 马翠卿, 魏澎, 王秀荣, 冯惠东, 阎婉依

中国免疫学杂志,2009,25(12):1059~1062,-0001,():

摘要

目的:对A族链球菌Fba蛋白McAb2所对应的表位进行定位。方法:以初步定位的表位区段为线索合成三段重叠多肽,dot-ELISA检测McAb2与合成肽的亲合力,并以McAb2为靶分子,利用噬菌体随机七肽库进行亲和筛选,用竞争ELISA鉴定阳性克隆。结果:dot-ELISA检测结果表明Fba100-112肽段与McAb2的结合能力最强。经过3轮亲和筛选后,随机挑选20个噬菌体克隆,竞争ELISA对其与McAb2的亲和力做检测,其中12个克隆显示较强的阳性结果。阳性克隆DNA测序,与Fba基因第100位氨基酸至110位氨基酸中ITPDL同源性较高。结论:通过dot-ELISA将A族链球菌Fba蛋白McAb2对应的表位定位于100~112位氨基酸,结果同噬菌体随机肽库筛选的核心氨基酸位置吻合。为进一步研制表位肽疫苗、研究Fba蛋白及其单克隆抗体的生物学功能奠定了基础。

关键词: A族链球菌, Fba蛋白, 单克隆抗体 表位, 噬菌体肽库

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2009年11月02日

【期刊论文】CD40L单克隆抗体对HSP患儿PBMC及单核细胞株THP一1产生炎症因子的影日

杨锡强, 李秋, 王利佳

中华微生塑堂塑免疫学杂志,2003,11(23):891~894,-0001,():

摘要

目的观察CINO配体单克隆抗体(CINOL McAb)对HsP(亨诺一许兰紫癜)患儿PBMC及单核细胞株THP-1产生炎症因子的影响。方法采用细胞培养、流式细胞技术及ElJSA法分别检测正常对照、过敏性紫癜患儿的PBMc及单核细胞株THP-1表达膜蛋白分子CINOL、CINO的阳性率、产生炎症因子IL-1、 TNF-α、IL-6水平以及CINOL McAb加入细胞培养体系后上述指标的变化。结果与正常比较,脚患儿的PBMc表达CD40L[(8.26±4.15)%,对照(0.54±0.58)%]显著增高、CINO表达无差异;PBMc培养上清中炎症因子IL广1[(1000.4±574.5)pg/ml,对照(246.8±207.1) ]、 INF-α[(978.7±205.8)pg/ml,对照(452.4±248.5)pg/m1]的水平也显著高于对照,CD40L McAb可使增高的IL-1[(164.7±127.9)pg/ml]、 TNF-α[(674.7±269.2)pg/m1]降至正常水平。THP-1自发表达CINO,低浓度产生IL-1、TNF-α。与正常比较,HSP患儿的PBNC培养上清诱导其表达CD40,产生IL-1,TNF-α增高,CI40L McAb同样具有抑制THP-1表达CD40、分泌IL-1、 TNF-α的作用。结论 CINOL McAb能抑制炎症因子的产生。

关键词: 过敏性紫癜, CD40配体单克隆抗体 CINO配体

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2009年10月30日

【期刊论文】McAb 共刺激PBLs介导肝癌细胞凋亡①

黄树林, 罗利琼, 肖兰凤, 崔徐江②, 伍思琪

中国免疫学杂志,1998,14:154~156,-0001,():

摘要

用McAb,抗CD3,CD3+CD28和CD28+CD80激活健康人PBLs,作用于肝癌细咆(BEL-7402),透射电镜观察其超微结构,发现除抗CD3可引起部分淋巴细咆诱导性凋亡外,其他组都可介导肝癌细胞凋亡。结果提示McAb共刺激能促进肿瘤免疫治疗的研究。

关键词: 单克隆抗体共刺激 肝癌细胞 透射电镜 凋亡

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2009年09月05日

【期刊论文】用于肿瘤治疗的90Y标记单克隆抗体和受体

范我

同位素,2002,15(3):168~174,-0001,():

摘要

简述了90Y标记McAb和肽-受体的标记方法、动物实验、临床应用以及剂量估算等方面的研究概况。

关键词: 90Y, 单克隆抗体和受体, 肿瘤治疗

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2009年09月05日

【期刊论文】188Re 标记抗CEA单克隆抗体及荷瘤裸鼠治疗实验研究

范我, 吾为一, 鲍君杰, 吴锦昌

核技术,2002,25(11):952~956,-0001,():

摘要

为建立188Re标记抗癌胚抗原(CEA)单克隆抗体(McAb)C50的直接标记方法,探讨其标记条件,用抗坏血酸还原McAb,并以葡萄糖酸钠为中间螯合剂,以氧化亚锡作还原剂,用188Re标记C50。观察188Re标记McAb的体外稳定性,探讨还原剂SnCl2深度、螯合剂葡萄糖酸钠深度、抗体深度、加人抗体间隔的时间对标记物放化纯度的影响。SPECT显像观察荷瘤裸鼠瘤内注射188Re-C50后放射性分布,对治疗后的瘤体行病理观察。实验结果显示,188Re标记C50的合适条件为:2.2-4.0g/LSnCl2、0.3mol/L葡萄糖酸钠溶液、2.5×105mol/LMcAb,反应2h后放化纯度可达90%。荷瘤裸鼠瘤内注射188Re-C50后,放射性集中在瘤内,2周后瘤体明显缩小,镜下观察至肿瘤破裂,坏死。

关键词: CEA,, 单克隆抗体 放射性同位素,, 188Re

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2009年07月14日

【期刊论文】抗膀胱癌J82及丝裂霉素C单链抗体基因的研究

朱理玮, 梁晓宇, 王炜, 何强, 何向辉, 邱宇杰, 王鹏志

中华实验外科杂志,2001,18(4):361~363,-0001,():

摘要

目的 研制单链抗体,以减少鼠源抗体的异源性,为寻找合理的导向治疗方案提供工具。方法 将经抗原刺激的BALB/C小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤,用多聚酶链反应(PCR)方法克隆其抗体可变区基因,并用重叠延伸拼接法(SOE)构建相应的单链可变区抗体片段(SeFv)基因。结果 获得杂交瘤细胞株D10及1C8,酶联免疫吸附法及免疫组织化学法证实所分泌的抗体可分别与人膀胱癌细胞及丝裂霉素C特异性结合。获得两种抗体的可变区基因(320bp及340bp片段)及SeFv基因(75Obp片段)。结论 应用PCR-SOE方法可快速便捷地获得目的抗体的SeFv基因,为进一步研制双特异性SeFv提供了实验基础。

关键词: 单克隆抗体 基因,, 合成, 丝裂霉素类

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2007年05月28日

【期刊论文】猪伪狂犬病病毒单抗双夹心ELISA的构建

崔保安, 祁小乐, 牛春玲, 王莉娟, 刘占通

河南农业大学学报2004年12月第38卷第4期/Journal of Henan Agricultural University Dec., 2004, Vol. 38, No. 4,-0001,():

摘要

建立了检测猪伪狂犬病痛毒(Pseudo rabies virus,PRV)的单克隆抗体双夹心酶联免疫吸附试验(Enzyme-Iinked immunosor-bent assay,ELISA)方法,为该病的快速诊断奠定了基础,作者对其组装条件进行了筛选,认为兔抗PRV IgG最佳包被质量浓度为4.59mg·L-1;抗PRV的单克隆抗体(Monoclonal antibodies,McAb)的最佳质量浓度为6.45mg·L-1;最佳封闭剂为10gL-1BSA(牛血清白蛋白),封闭时问为60min,制定了科学的结果判定标准,最低病毒检出量为200µg·L-1.与病毒分离、动物试验和中和试验相比较,该方法特异、灵敏、可靠、方便。

关键词: 猪伪狂犬病病毒, 单克隆抗体 双夹心ELISA

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2007年03月22日

【期刊论文】抗胶质瘤免疫放疗制剂35S标记单抗SZ39细胞毒效应

兰青, 黄强, 庄道玲, 吴元芳, 孙志方

中华微生物学和免疫学杂志1998年5月第18卷第3期,-0001,():

摘要

目的 证实新制各的纯β射线免疫放疗制剂35S-McAb SZ39对胶质瘤的特异性杀伤作用。方法采用MTT法。以人脑胶质瘤细胞系SHG-44为靶细胞。检梗35S-McAb SZ39及其对照组35S-nIgG;35S+McAb SZ39;35S持续作用组的细胞杀伤率,求取50细胞抑制谁度。结果 S-McAb SZ39的细胞杀伤力与 S持续作用相近,较35S-nIgG强4.2倍.较35S +McAb SZ39强4.0倍(P<0.05)。结论5S -McAb SZ39具有高效的靶选择性细胞毒效应。作为一种免疫放疗制剂具有良好的应用前景。

关键词: 单克隆抗体 胶质瘤, 细胞毒作用, 免疫放疗制剂35S

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2007年03月22日

【期刊论文】免疫放疗制剂35S.MAb SZ39在荷瘤鼠体内药代动力学研究

兰青, 黄强, 庄道玲, 吴元芳, 孙志芳

中国药学杂志1999年10月第34卷第10期/Chin Parm J, 1999 October, Vol. 34, No. 10,-0001,():

摘要

建立35S-MAbSZ39药代动力学模型,求取药代动力学参数,设计合理用药方案。方法:以药代动力学程序包处理35S-MAb SZ39给药后荷瘸鼠各时间点的血药浓度,进行药代动力学研究;以35S-nIgG厦”S为对照组,了解35S-MabSZ39的荷瘤鼠体内分布特点。结果:35S-MAb SZ39在荷^脑胶质瘸裸小最体内药代动力学符合三室线性模型,总药时方程为ct=1.764e-349t +1.106e-0.5r+0.025e-0.017t, 1/2n为0.23h,为1.46h,t1/2γ为42.9h。体内分布研究表明,35S -MA BSZ39可特异性浓聚于胶质瘤,在正常组织中无明显蓄积,发挥了单抗导向的高选择r陛作用,在培药后第5天,与35S相比,特异指数分别为4.1和4.87,具有显著优越性(P<0.05)。结论35S-MAb SZ39有望作为一种高效低毒的导向放疗制荆应用于胶质瘤治疗,以一周问隔多疗程治疗方案为佳。

关键词: 35S, 胶质瘤, 单克隆抗体 裸小鼠, 药代动力学

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2006年12月15日

【期刊论文】131I标记抗CEA单抗预防人结肠癌肝转移的实验研究

葛海燕, 左国华, 高明发

第三军医大学学报,2000,22(5):430~432,-0001,():

摘要

目的 探索早期应用131I标记抗CEA单抗预防结肠腺癌肝转移的可行性。方法 在建立人结肠腺癌裸鼠肝转移后,于15min,、10、20d经尾静脉注射131I标记抗CEA单抗;于放射免疫疗法后4周和裸鼠死亡时,检查肝转移癌的数目、大小、瘤重、组织学和生存期。结果 早期冶疗组的肝转移癌数目、大小和瘤重均明显减小,瘤结节内有明显坏死,生存期延长。结论 早期应用131I标记抗CEA单抗能有效地抑制肝转癌的形成。

关键词: 结肠癌, 单克隆抗体 放射性同位素

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2006年07月27日

【期刊论文】免疫聚合酶链反应新技术在胃癌血清诊断中的应用

任军, 樊代明, 张学庸, 周绍娟, 杨安钢, 胡家露, 陈峥

中华消化杂志,1996(16)14-16,-0001,():

摘要

应用本所建立的免疫聚合酶链反应技术(IMMUNO-PCR)检测胃癌患者血清中的肿瘤相关抗原MG7Ag,以探讨其在胃癌诊断中的价值。结果发现,在198例胃癌患者血清中MG7Ag阳性者164例,阳性率为82.8%,其他肿瘤患者的阳性结果分别为:食管癌(15/86),结肠病(40/90),肝癌(o/84),卵巢癌(1/45),子宫癌(0/27),肺癌(4/66),在非癌患者的检测结果:溃疡病(6/78),慢性胃炎(7/118),慢性肠炎(2/60),正常献血员(2/236)。结粜提示,免疫PCR技术对于胃癌包括部分早期胃癌的论断具有重要价值,同时也可能成为胖瘤音查时筛选高危人群的一种有用的工具。

关键词: 胃癌, 单克隆抗体 聚合酶链反应, 诊断

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2005年11月10日

【期刊论文】稻瘟病菌单克隆抗体的研制及其对稻瘟病菌附着胞形成的影响*

林福呈, Wu Jianxiang, Liu Fucheng, Li Debao, Chen Zhengxian, Lou Yichun

,-0001,():

摘要

Selecting by indirect ELISA eleven hybridoma cell lines, secreting monoclonal antibodies (McAbs) against Magnaporthe grisea were produced by fusing mouse myeloma cells (SP2/0) with spleen cells from BALB/c mice immunized with the mixture of conidia、germ tubes and appressoria of M. grisea using 50% PEG. The result of IFTC test showed that four McAbs, named as 2B4、4A1、1D1、and 2H4 specificlly bound to the cell wall surface of the fungus; Western blotting revealed that 2B4、4A1、1D1 were recognized different protein antigens from the surface of conidia and germ tubes; These four McAbs could effectively interfere with the appressorium formation both on cellophane membrance and the surface of onion epidermis and inhibit the disease leaf lesions development in vitro test.

关键词: 稻瘟病菌附着胞,, 单克隆抗体,, 间接免疫荧光试验

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2005年02月25日

【期刊论文】几种不同高分子生物材料吸附FG与单克隆抗体M1结合亲合力的研究

万昌秀, 李天全

,-0001,():

摘要

利用鼠抗人血纤维蛋白原(Fibrinogen, FG)单克隆抗体M1作为血小板替代物,以酶联免疫吸附测定(Enzyme Linkedlm musorbent Assay,ELISA)为手段,通过FG-M1复合物结合亲合力常数ka的测定,对几种高聚物材料血液相容性进行了评价。测定了不同材料表面的XPS谱,比较了不同组成的材料表面血液相容性的差异。

关键词: 单克隆抗体 蛋白吸附, 结合亲合力

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2005年02月25日

【期刊论文】单克隆抗体M1、R1对材料表面吸附FG的作用的研究*

万昌秀, 李天全

,-0001,():

摘要

在血液与生物材料的相互作用中,血浆蛋白特别是纤维蛋白原(Fibrinogen,FG)的吸附起着重要的作用。本文利用酶联免疫吸附检测手段(ELISA),测定了两种鼠抗人FG的单克隆抗体M. 和R. 同吸附在材料表面的FG结合的亲合力(Ka)。由于两种抗体与FG结合的位点不同,其Ka值随温度和放置时间的变化呈现不同的变化规律,从而推测材料表面吸附的FG的构象变化。

关键词: 纤维蛋白原, 单克隆抗体 表面吸附

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2005年02月25日

【期刊论文】测定FG-血小板结合亲合力变化的新方法

万昌秀, 李天全

,-0001,():

摘要

本研究以单克隆抗体M1(4A 5)为工具, 酶联免疫测试技术(EL ISA)为途径,研究吸附在生物材料表面的纤维蛋白原(FG)的三个可能位点,与粘附的血小板相结合的结合亲合力(affinity)变化。通过测定一系列不同浓度的M.(4A 5) 单克隆抗体同FG的结合数量变化,利用相应数学模型,可计算出结合亲合常数Ka,从而为深入认识材料表面的血液相容性质,提供了一种定量尺度。该方法比过去仅利用FG与单一浓度抗体反应,测其被吸附的数量,并用以作为血液相容性的一个定量指标的方法,更为灵敏、准确。

关键词: 单克隆抗体M,, 纤维蛋白原,, 结合亲合力,, 血小板粘附

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2005年03月04日

【期刊论文】用单克隆抗体展示猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白在菌体表面的形态和分布

陆承平, 曾巧英,

中国农业科学, 2004, 37 (1): 143-147,-0001,():

摘要

用猪链球菌2型江苏分离株HA9801全菌免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞和Sp2/0细胞融合,以电泳纯溶菌酶释放蛋白(MRP)为抗原,间接ELISA筛选MRP抗体阳性孔并用有限稀释法单克隆化,剔除与胞壁杂蛋白交叉反应阳性的克隆,获得3株特异针对MRP的单克隆抗体细胞株3A3、4D5和6B4。将HA9801和HEp22细胞共孵育,使细菌粘附于细胞表面,用3株MRP单克隆抗体联合介导FITC标记HA9801菌体表面的MRP,激光共聚焦显微观察,代表MRP的荧光图像显示,MRP是一线形表面大分子,一端锚定在细胞壁,另一端向空中伸展,其分布状态有单在和丛集2种。

关键词: 猪链球菌2型, 溶菌酶释放蛋白, 单克隆抗体 激光共聚焦显微术

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2005年02月25日

【期刊论文】恩诺沙星单克隆抗体的制备及鉴定

曾振灵, 蔡勤仁, 杨桂香, 陈杖榴, 方炳虎

中国农业科学 2004,37(7):1060~1064,-0001,():

摘要

碳二亚胺法合成了2种恩诺沙星(enrofloxacin,ENFX)人工抗原ENFX-BSA 和ENFX-OVA,用紫外扫描和分析载体蛋白的氨基酸组成等方法对人工抗原进行鉴定,ENFX 与BSA 的结合比约为48∶1。用ENFX-BSA 免疫BALB/C 小鼠,采用显微克隆技术最终筛选出2 株特异性分泌细胞2C5 和5D5 并获取腹水,纯化后腹水效价分别为1∶3 200和1∶6 400。2C5 和5D5 均属IgG2a 型抗体。单抗5D5 间接竞争ELISA(Ci-ELISA)的工作浓度为1∶1 000,ENFX 的抑制曲线在0.13~10 000 ng·ml-1 之间线性关系良好(r =-0.9782),检测限(LOD)为0.13ng·ml-1,ENFX 的IC50为21.67ng·ml-1。单抗对氟喹诺酮类药物有很高的选择性,与环丙沙星、麻保沙星、沙拉沙星、达氟沙星的交叉反应率分别为110.84%、27.40%、71.05%和37.41%,而与头孢氨苄、氯霉素、磺胺间甲氧嘧啶等没有交叉反应。

关键词: 恩诺沙星, 单克隆抗体 交叉反应

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2007年12月19日

【期刊论文】抗重组日本血吸虫P38抗原单克隆抗体的制备与鉴定

周晓红, 吴锦雅, 陈晓光

中国寄生虫与寄生虫病杂志2005年4月第23卷第2期/Chin J Parasitol Parasit Dis Apr., 2005, Vol. 23, No. 2,-0001,():

摘要

目的 在大肠埃希菌中可溶性表达日本血吸虫P38(SjP38)抗原分子,并以其纯化产物为抗原,制备抗SjP38单克隆抗体(McAb)。方法 将pET32(a)-P38重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),在1mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导下表达,超声破菌后获得可溶性表达产物,通过镍柱一步法纯化,以纯化的重组SjP38为抗原,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备McAb,用ELISA和有限稀释法筛选出高分泌滴度McAb杂交瘤细胞株,测定其免疫球蛋白亚类及其效价,蛋白质印迹法(Western blotting)分析其特异性。结果 筛选出能稳定分泌抗重组SjP38单克隆抗体的8株杂交瘤细胞株,均为IgG1;Western blotting分析显示8株单抗能与日本血吸虫虫卵抗原中的天然P38发生特异性结合。结论 制备的抗P38杂交瘤细胞株能分泌高滴度、高特异性的McAb。

关键词: 日本血吸虫, P38抗原, 可溶性表达, 纯化, 单克隆抗体

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