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2010年12月07日

【期刊论文】水牛卵泡GCs体外培养发生凋亡的生物学特征

余四九, 何宝祥, 杜玉兰, 冯贵雪, 郑喜邦, 余四九*, 李恭贺

中国兽医学报,2007,27(5):747~751,-0001,():

摘要

为了解水牛卵巢卵泡中颗粒细胞(GCs)和卵母细胞在体外培养过程中发生凋亡的变化特征,通过体外培养、血清撤除法诱导水牛卵泡GCs凋亡,并应用苏木精伊红(腿)染色和DNA原位末端标记的TUNEL方法观察其病理特征;通过水牛腔前卵泡体外培养、诱导或等待其中的卵母细胞及卵泡细胞发生凋亡,然后应用透射电镜技术检查其超微结构改变。结果显示:凋亡卵泡Gc8的眦染色特征包括细胞体积缩小,染色较深呈紫黑色,且多成簇分布。DNA原位末端标记检查的特征是DNA发生降解,其降解碎片呈,TUNEL阳性。原始卵泡体外培养中调亡卵母细胞的超微结构表现为胞核碎裂成电子密度高的大碎片,或出现形态奇特的凋亡小体;初级卵泡中的调亡GCs,细胞内外均出现凋亡小体,细胞内还见有典型的螺层状内质网结构,其中包涵部分核质。

关键词: 水牛, 卵泡 颗粒细胞, 细胞凋亡, 体外培养

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2010年12月07日

【期刊论文】牦牛发情周期中卵巢卵泡发育状况的组织学观察

余四九, 蒙学莲, 崔燕, 刘学荣

中国兽医科学,2006,36(1):57~61,-0001,():

摘要

运用组织学技术对36头处于发情周期的健康成年母牦牛卵巢卵泡的结构与发育状况进行了观察。结果表明,牦牛发情周期中卵巢卵泡发育的组织结构与其他牛基本相似。每对卵巢中原始卵泡数和生长卵泡数在发情前期、发情期、发情后期和发情间期之间差异不显著(P>0.05);发情前期的囊状卵泡数与发情期、发情后期和发情间期之间差异不显著(P>0.05),发情期和发情后期均与发情间期差异显著(P<0.05)。闭锁生长卵泡数在4个时期之间差异不显著(P>0.05);发情期的闭锁囊状卵泡数与其他3期之间差异极显著(P<0.01),发情前期和发情间期均与发情后期差异显著(P<0.05)。各级卵泡的闭锁形式各有特点。在生长卵泡、囊状卵泡及相应闭锁卵泡的卵泡膜中均见到了胶原纤维和网状纤维。

关键词: 牦牛, 发情周期, 卵泡 组织结构

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2010年12月07日

【期刊论文】牦牛卵泡细胞及其卵母细胞不同发育时期的结构变化*

余四九, 雍艳红, 巨向红, 崔燕**

动物学报,2005,51(6):1050~1057,-0001,():

摘要

采集成年母牦牛卵巢,通过光镜和电镜对牦牛卵泡及其卵母细胞不同发育时期的结构变化进行了观察。结果发现:当卵母细胞被单层立方卵泡细胞包围时,微绒毛开始出现,而皮质颗粒、透明带则在包被2-4层卵泡细胞时开始出现。随着卵母细胞的继续发育,透明带增厚,微绒毛由粗短变为细长,密度增加;皮质颗粒、线粒体、滑面内质网等细胞器的数目不断增加,并逐渐移行到质膜下;在移行的过程中,皮质颗粒成团存在。在囊状卵泡中,卵母细胞皮质颗粒呈线形分布于质膜下,线粒体、滑面内质网又移向胞质中央。卵母细胞借助微绒毛穿过透明带与卵泡细胞胞质突起相联系。结果证明牦牛卵泡和卵母细胞不同发育时期的结构变化与其它哺乳动物的基本相似。

关键词: 牦牛, 卵泡 卵母细胞, 超微结构

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2010年12月07日

【期刊论文】水牛胎儿卵泡细胞和卵母细胞凋亡的特征

余四九, 何宝祥, 郑喜邦, 杜玉兰, 李彩萍, 李恭贺, 余四九*

畜牧兽医学报,2006,37(1):23~27,-0001,():

摘要

选择5月龄胎儿水牛的卵巢,采用石蜡切片、HE染色的光镜观察和DNA末端原位标记技术(TUNEL)进行了研究。结果表明:5月龄胎儿卵巢上分布着大量的凋亡细胞;在皮质部存在的大量腔前卵泡中,均匀分布有单个凋亡的卵泡细胞和卵母细胞,凋亡细胞的主要组织学变化是细胞缩小,核浓缩;DNA末端标记变化主要显示出TuNEL阳性。上述结果提示:水牛卵泡细胞和卵母细胞凋亡在胎儿时期已经存在,细胞凋亡是启动水牛腔前卵泡闭锁的潜在机理。

关键词: 水牛胎儿, 卵巢, 细胞凋亡, 卵母细胞, 卵泡细胞

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2010年12月07日

【期刊论文】水牛健康与闭锁优势卵泡中颗粒细胞凋亡的生物学特征

余四九, 何宝祥, 杜玉兰, 郑喜邦, 余四九*

中国兽医学报,2007,27(6):950~954,958,-0001,():

摘要

采用组织学苏木精伊红(HE)染色与光镜检查、荧光显微镜检查和DNA电泳技术,检查了水牛健康优势卵泡(HDF)和闭锁优势卵泡(ADF)中颗粒细胞(GCs)调亡的生物学特征。此外还应用孕酮处理早期的ADF。应用流式细胞术(FCM)方法检查该激素诱发CCs凋亡的情况。HE染色和荧光显微镜检查结果显示,HDF和ADF都含有凋亡的GCs,只是ADF中凋亡的GCs较多。凋亡GCs的HE染色表现细胞体积缩小,染色浓黑,荧光原位检测发现核浓缩。DNA电泳分析表明,在HDF中未发现GCs的DNA降解。而在ADF中因闱锁程度不同而表现不同程度的DNA降解,出现典型的“拖尾”带,但均未出现具有细胞凋亡特征的DNA“Ladder”。FCM检查结果见到早期的ADF存在着DNA的降解。孕酮处理使DNA降解碎片显著增加。上述结果提示。在水牛的HDF中,GCs的凋亡很少。在ADF中GCs的凋亡较多。水牛ADF中GCs的死亡。少量是以凋亡方式发生的。而坏死是主要方式。

关键词: 水牛, 卵泡颗粒细胞, 优势卵泡 细胞凋亡

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2010年12月07日

【期刊论文】抗坏血酸和NAC对水牛卵泡颗粒细胞存活的影响

余四九, 何宝祥, 郑喜邦, 李彩萍, 杜玉兰, 房慧伶, 郭亚芬, 李恭贺

中国兽医科技,2004,35(7):542~546,-0001,():

摘要

体外培养水牛卵泡颗粒细胞(BFGCs),待一定阶段后撤除胎牛血清,在对照组培养基中不加任何抗氧化剂,在试验组培养基中分别加入不同浓度的抗坏血酸(AA)和N-乙酰L-半胱氨酸(NAC),培养6h后观察细胞生长变化,并用噻唑蓝比色法进行细胞计数,探讨了AA和NAC对撤除血清后BFGCs存活的影响。结果表明,对照组和试验组的BFGCs都有不同程度的体积变小、细胞浓缩、变圆、离壁等类似凋亡的特征。其中0.5和1.0mmol/LAA组凋亡细胞最少,150.0mmol/LAA组无存活细胞,0.5mmol/LAA组的细胞存活率显著高于对照组和除1mmol/LAA组以外的其他AA组(P<0.05)。5mmol/LNAC组凋亡的BFGCs最少,其余5个试验组随NAC浓度升高,凋亡细胞逐渐增多,5mmol/LNAC组BFGCs的存活数量显著高于对照组和其他各组(P<0.05)。说明抗氧化剂AA、NAC在低浓度时能抑制撤除血清后体外培养BFGCs的凋亡,而高浓度时可促进其凋亡,它们的作用都是双向的、剂量依赖性的。

关键词: 卵泡颗粒细胞, 抗坏血酸, N-乙酰L-半胱氨酸, 水牛, 细胞凋亡

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2009年08月07日

【期刊论文】激活素A对离体培养大鼠卵泡发育的影响

朱辉, 刘国艺, 李庆雷, 倪江

基础医学与临床,2001,21(6):560~562,-0001,():

摘要

激活素A是一种由卵泡液中提取出来的蛋白,主要以旁分泌和自分泌途径调节卵泡颗粒细胞功能,而对卵泡发育的影响却不十分清楚。本实验目的旨在探讨激活素A对大鼠离体培养卵泡发育的影响。用胶原酶分离窦前卵泡并分别加入激活素A(140μg/L)、FSH(0.1IU/mL)以及卵泡抑素(FS)在DMEM培养液中进行离体卵泡培养4d,观察卵泡直径、雌二醇分泌的变化。结果表明:激活素A处理组和FSH+激活素处理组的卵泡直径显著增大(P<0.01)。FSH+激活素A处理组雌二醇的分泌显著增加。FS可抑制激活素A 对卵泡发育的影响。结果显示:激活素A可以促进未成年大鼠窦前卵泡的生长发育。

关键词: 激活素A, 卵泡 离体培养

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2009年06月12日

【期刊论文】促性腺激素在白蚁脑中的免疫细胞化学定位

奚耕思, 苏晓红, 奚耕思**, 李柯

动物学报,2004,50(2):240~244,-0001,():

摘要

为研究昆虫卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)的存在与分布,我们用免疫细胞化学染色技术对FSH和LH在尖唇散白蚁(Reticulitermes aculabialis)脑中的分布进行了定位研究。结果显示:FSH免疫阳性神经细胞及神经纤维分布在雌性繁殖蚁分飞期前脑的左叶、右叶及中部,雌性末龄若虫前脑的右叶,雄性繁殖蚁前脑的右叶;LH免疫阳性物质分布在雌、雄繁殖蚁前脑左叶;在工蚁和兵蚁中未见有FSH和LH免疫阳性物质存在。研究结果表明:FSH和LH在白蚁脑中的存在具有发育阶段特异性,并且有可能像其在脊椎动物中那样参与调节性腺发育及精卵成熟;可能调节繁殖蚁、兵蚁、工蚁的产生[动物学报50(2):240-244,2004]。

关键词: 尖唇散, 白蚁, 脑, 卵泡刺激素, 黄体生成素, 促性腺激素, 免疫细胞化学

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2011年04月06日

【期刊论文】人尿促性腺激素中卵泡刺激素的分离与纯化*

孙淑斌, 衣艳君, 张培玉

曲阜师范大学学报,1996,22(4):89~92,-0001,():

摘要

通过磺基水杨酸沉淀、SP-Sephadex柱层析的R试剂处理等步骤,将人尿促性腺激素(HMG)粗品提纯为精品。此方法可将HMG中卵泡刺激素(FSH)比活提到30~40iu/mg,活力,回收率较高,简单易行,适于大批量生产。

关键词: 人尿促性腺激素, 卵泡刺激素, 磺基水杨酸, 层析

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2005年04月22日

【期刊论文】卵泡穿刺配合人工授精治疗多囊卵巢综合征引起的不孕症

乔杰, 王旭初, 李美芝

中国妇产临床杂志,2004,5(4):258~260,-0001,():

摘要

目的 了解阴道超声引导下卵泡穿刺后行人工授精治疗多囊卵巢综合征(polycystic ovary syn-drome,PCOS)所致不孕症的效果。方法 选择对克罗米芬治疗无反应的PCOS 患者应用促排卵药治疗后, 随机选择60例在阴道超声引导下卵泡穿刺后行人工授精术;另选择60例患者直接指导性生活。结果 对照组60例患者临床妊娠率23133%,卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS)发生率40100%,卵泡穿刺组60例患者临床妊娠率48133%,OHSS发生率35100%。结论 促排卵治疗后, 阴道超声引导下卵泡穿刺配合人工授精治疗,提高了PCOS所致的不孕症患者的临床妊娠率, OHSS的发生率未降低。

关键词: 卵泡穿刺, 人工授精, 多囊卵巢综合征, 不孕症

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2005年04月22日

【期刊论文】子宫内膜异位症患者卵泡液对精子与透明带结合能力的影响

乔杰, 杨树标, 姚元庆, 何柏松

中华医学杂志,1998,78(2):98~100,-0001,():

摘要

目的 探讨子宫内膜异位症及非子宫内膜异位症患者卵泡液对精子与透明带结合能力的影响。方法 卵泡液取自20例进行体外授精胚胎移殖的不孕症患者,其中10例为子宫内膜异位症,10例为单纯炎症性输卵管不通。应用半透明带配对研究、培养液EBSSöB SA做为对照,观察子宫内膜异位症及非子宫内膜异位症患者卵泡液对精子与透明带结合能力的影响。结果 经子宫内膜异位症患者卵泡液与非子宫内膜异位症患者卵泡液处理后的精子与透明带结合的数目均明显低于经培养液处理后的精子与透明带结合的数目(91±21与239±35,P<01001;109±22与211±42,P<01005),经子宫内膜异位症患者卵泡液处理的精子结合半透明带指数明显低于经非子宫内膜异位症患者卵泡液处理后的精子结合半透明带指数(36±4与54±4,P<0.005)。结论 子宫内膜异位症患者卵泡液对精子与透明带结合能力具有较强的抑制作用,子宫内膜异位症患者卵泡液对配子相互作用的影响可能是其不孕的原因之一。

关键词: 子宫内膜异位症, 卵泡液, 精子, 透明带

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2005年04月22日

【期刊论文】PCOS患者药物促排卵中LUFS发生的相关因素

乔杰, 李美芝

中国妇产科临床,2000,1(3):137~140,-0001,():

摘要

目的 探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者药物诱导捧卵治疗中生未破裂黄素化卵泡综合征(LUFS)的相关因素。方法 对比克罗米酚(DC)及人绝经后促性腺激素(HMG)方案用药前后POCS患者血清PRL、FSH、LH、E2、T水平,阴道超声检查卵巢形态,分析PCOS患者LUFS发生与基础性激素水平和卵巢形态的关系。结果 应用CC加用HCG45例。卵泡发育率66.67%,周期妊娠率为22.22%,LUFS发生率33.33%;应用CC无效者,应用删G方案30例,卵泡发育率高(86.67%),但LUFS和过度刺激综合征(OHSS)发生率高分别为36.67%和13.33%,周期妊娠率16.67%。T水平LUFS组高于排卵组,表明LUFS的发生与血清睾酮水平有关。周边囊泡型多囊卵巢(HCP)LUFS发生率25%,普通囊泡型多囊卵巢(GCP)LUFS发生率75%。结论 普通囊泡型多囊卵巢患者易于发生卵泡黄素化不破裂综合征,可能与患者雄激素水平相对较高,卵巢包膜厚,优势卵泡不是发生在卵巢周边有关。

关键词: 多囊卵巢综合征, 不孕症, 未破裂黄素化卵泡综合征

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2005年08月01日

【期刊论文】游离的小鼠胚胎卵巢细胞体外重组形成卵泡

夏国良, 王海滨, 夏国良*, 王群, 李美玲, 吕忠显

科学通报,2001,46(1):54~56,-0001,():

摘要

胚胎期生殖细胞和体细胞相互作用形成卵泡是一个复杂的生理过程。生殖细胞定向分化成卵母细胞后,必须以卵泡的形式存在才有可能完成最终的生长发育。因此,研究生殖细胞和体细胞体外重组形成卵泡的可能性具有重要的理论和实践意义。利用微滴培养法将胶原酶消化分离的12~16d胎龄的小鼠卵巢细胞分别培养,发现不同胎龄的卵巢细胞均能相互黏连形成多细胞聚集体;12~13d胎龄小鼠卵巢细胞体外不能形成卵泡;14~15d胎龄小鼠卵巢细胞体外经过4d培养后形成少量卵泡样复合体;16d胎龄小鼠卵巢细胞培养2d后形成大量具有典型卵泡特征的小卵泡.实验结果直接证实一定胎龄的小鼠卵巢生殖细胞和体细胞能够在体外重新构建形成卵泡;胎鼠卵巢生殖细胞获得诱导体细胞分化形成卵泡的能力是一个渐进过程.该研究为卵泡体外重组并重新构建卵巢进行卵巢移植提供了直接的实验依据。

关键词: 小鼠, 胚胎卵巢, 体外重建, 卵泡

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