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2011年04月25日

【期刊论文】梨α-法尼烯合成酶基因的克隆及其序列分析

张元湖, 陈新, 刘庆忠, 张建鹏, 吕慧贞, 李玲玲, 李萌

生物技术通报,2007,(5):113~115,-0001,():

摘要

利用RT-PCR技术从鸭梨的果皮中获得了一个全长为1824bp的α-法尼烯合成酶基因(α-Farnesene Synthase, PFS)克隆,该cDNA包含一个由1728个核苷酸组成的开放阅读框架,编码分子量约66kDa的576十氨基酸残基的蛋白质。序列相似性分析结果表明,它与苹果中克隆到的AFS1基因具有很高的同源性,核苷酸序列一致性为97.34%,且真有典型的萜类合成酶基因保守结构域。与来源于黄瓜、杉树、松树的α-法尼烯合成酶基因的同源性较低。

关键词: 鸭梨 α-法尼烯合成酶 基因克隆 序列分析

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2010年12月15日

【期刊论文】肺炎衣原体CPn0308 的基因克隆及其内源性蛋白定位的研究

刘殿武, 贾天军, 罗建华, 张庶民, 钟光明

卫生研究,2008,37(2):219~222,-0001,():

摘要

目的 克隆肺炎衣原体基因CPn0308,表达融合蛋白,并制备抗体对其表达的内源性蛋白进行初步定位。方法 根据STD基因库提供的信息设计引物,聚合酶链反应(PCR)克隆目的基因,用BamHI/NotI对克隆的目的基因和pGEX-6P2 载体进行酶切,T4 连接酶连接后,重组质粒经42℃转化XL1-blue 细菌:用PCR进行初步筛选,交叉PCR对提取质粒进一步确定,最后对插入片断进行序列分析:用IPTG诱导阳性克隆的细菌使其表达GST融合蛋白,纯化后免疫小鼠制备抗体,使用IFA 对内源性蛋白进行定位分析。结果 克隆出肺炎衣原体基因CPn0308,全长为366bp,编码121个氨基酸;并表达了融合蛋白GST-CPn0308,分子量约为39kD;制备了抗体,IFA实验发现该蛋白初步定位于肺炎衣原体包涵体膜蛋白上。结论 成功克隆肺炎衣原体基因CPn0308,其内源性蛋白初步定位于肺炎衣原体包涵体膜上。

关键词: 肺炎衣原体, 基因克隆 内源性蛋白

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2009年11月09日

【期刊论文】新疆甜瓜Fom-2基因同源序列的克隆及分析

李冠, 赵惠新, 李冠* 马东建, 王贤磊

,-0001,():

摘要

近年来甜瓜枯萎病蔓延迅速,危害严重,分离克隆甜瓜抗病基因,利用转基因技术改良甜瓜抗病品性是一种从根本上解决甜瓜枯萎病危害的新途径。根据已知Fom-2基因序列设计特异引物,采用RT - PCR技术从新疆甜瓜抗瘸性品种黄邑子中扩增出580bp的cDNA片段,序列分析表明它与已发表Fom-2基因具有高度同源性基因片段,命名为X-Fom-2。以X-Fom-2为探针对新疆甜瓜黄旦子、伽什瓜、红心脆、金丽-2号进行Southem blot和NoIthem blot,结果表明,X-Fom-2以多拷贝形式存在。X-Fom-2在抗病品种黄旦子、金丽2号有表达且在病原菌诱导后增强,而在感病品种伽什瓜、红心脆中没有表达。

关键词: 甜瓜, 枯萎病, Fom-2基因, 基因克隆 表达分析

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2009年11月03日

【期刊论文】含人过氧化物酶体增殖物激活受体δ基因高效真核表达载体的构建及其意义

周岐新, 章涛, 杨贵忠, 袁野, 万敬员, 杨俊卿, 蒋建新, 周岐新*

解剖学报, 2007, 38(2):173~177,-0001,():

摘要

目的构建高效表达人过氧化物酶体增殖物激活受体δ(hPPARδ)的真核表达载体,为hPPARδ受体功能和基于hPPARδ受体靶点的药物筛选提供分子研究平台。方法 采用逆转录一聚合酶链式反应(RT-PCR),从HepG2细胞总RNA克隆hPPARδ全长基因,与经BamHI、Sa/I相同双酶切的pIRES2-EGFP载体连接,构建重组质粒phPPARδ-IRES2-EGFP,经酶切及基因测序鉴定重组质粒中hPPARδ基因的完整性和忠实性;荧光显微镜观察重组质粒转染的293细胞GFP报告基因表达强度,并对转染细胞hPPARδ的表达进行荧光定量PCR和免疫细胞化学检测。结果 经酶切和测序证实重组赝粒构建正确,并在转染的293细胞巾获得hPPAR6的高效表达。结论 成功构建phPPARδ-IRES2-EGFP重组质粒。

关键词: 过氧化物酶体增殖物激活受体δ, 基因克隆 真核表达, 逆转录-聚合酶链反应

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2009年11月03日

【期刊论文】携带人PPARα基因高效真核表达载体的构建及其意义

周岐新, 章涛, 杨贵忠, 袁野, 李苌清, 万敬员, 蒋建新

中国药理学通报,2007,23(3): 413~417,-0001,():

摘要

目的 构建可以高效表达人过氧化物酶体增殖物激活受体(αahPPARa)的真核细胞表达载体,为筛选作用于PPARa受体的药物提供分子平台。方法将HepG2细胞总RNA经逆转录一聚合酶链式反应(RT-PCR)克隆hPPARα全长基因,用BamHI、SalI双酶切后,与相同双酶切的pIRES2-EGFP载体连接,构建phPPARα-IRE52-EGFP重组质粒,用酶切及基因测序鉴定重组质粒中hPPARα綦因的完整性和可靠性;重组质粒转染293细胞,荧光显微镜观察EGFP报告基因表达强度,并对转染细胞的hPPARα表达进行荧光定量PCR及免疫细胞化学检测。结果 经酶切和测序证实重组质粒构建正确,并在转染的293细胞中获得hPPARα的高效表达。结论 成功构建重组质粒phPPARa-IRES2-EG-FP,为基于hPPARα受体靶点的药物筛选平台的建立提供了高效表达hPPARα的重组载体。

关键词: 过氧化物酶体增殖物激活受体d, 基因克隆 真核表达

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2009年10月24日

【期刊论文】家蝇抗菌肽Cecropin-His6融合基因的克隆、序列分析及其表达载体构建

朱家勇, 徐建华, 朱家勇*, 金小宝, 许琴英

生物技术,2005,15(1):3~7,-0001,():

摘要

克隆家蝇幼虫抗菌肽Cecropin-His_6融合基因,构建其真核表达载体,为更深入的抗菌肽活性研究及制备新型肽类抗生素创造条件。该文从家蝇幼虫组织中提取总RNA,RT-PCR扩增编码Cecropin开放阅读框cDNA序列,将其克隆至pUCm-T载体进行序列测定;然后用含6×His标签序列的下游引物克隆Cecropin-His_6融合基因,并将其构建于真核表达载体pcDNA3.1(+)中;同时应用生物信息学对融合基因的理化性质和二级结构进行预测分析。结果表明,RT-PCR扩增得到约230bp的目的cDNA片段,与Genebank中报道的家蝇Cecropin cDNA序列存在一个无义变异差异(Lys:AAG→AAA);6×His标签成功融合到Cecrapin的C端。Cecropin-His_6融合基因的克隆和真核表达载体的成功构建,为进一步制备抗耐药菌的肽类抗生素奠定了基础。

关键词: 家蝇, 抗菌肽, 基因克隆 生物信息学分析, 真核表达载体

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2009年08月30日

【期刊论文】宫颈癌组织中人乳头瘤病毒16型L1基因的克隆及序列分析

凌虹, 谷鸿喜, 张凤民, 钟照华, 王文阁, 郭淑元, 娄阁, 郭彩玲

,-0001,():

摘要

目的 人乳头瘤病毒16型(HPV16)晚期基因区(L1)编码病毒的主要衣壳蛋白,且HPV16感染与宫颈癌发生、发展关系密切,故对中国妇女感染的HPV16基因进行克隆及序列分析有重要实际意义。方法 采用聚合酶链反应技术(PCR)扩增了3 例中国妇女宫颈癌组织中HPV16的L1基因片段,并对其进行了克隆及全序列分析。结果 发现3个HPV16L1基因核苷酸序列有4处均与最初报道的HPV16L1 DNA序列不同,并由此引起所编码的氨基酸亦发生变化。结论 中国妇女宫颈癌组织中HPV16L1核苷酸有一定程度变异。

关键词: 人乳头瘤病毒16型, L1基因克隆 核苷酸序列测定

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2009年08月30日

【期刊论文】人高亲和力IgE受体а链基因克隆及表达

毕志刚, 孙蔚凌

中国麻风皮肤病杂志,2005,21(8):609~612,-0001,():

摘要

目的:克隆人高亲和力IgE受体а链基因,并进行原核表达,制备出可溶性FceRIa蛋白。方法:应用RT - PCR技术,从皮肤组织的总RNA中扩增人高亲和力IgE受体a链基因,连接至PUCm-T载体,重组克隆进行DNA测序。将测序证实的目的片段与高效表达载体pFI30a连接,构建重组质粒并转入表达宿主菌BI21(DE3),以IPTG诱导表达,Ni- NTA树脂柱亲和层析纯化。结果:RT-PCR扩增出一个约950 bp的DNA片段,测序结果显示该片段与GenBank上登录的FceRla基因序列完全一致;经原核表达后,获得相对分子质量37 000的FceRIa融合蛋白。结论:本实验成功克隆、表达了人FcRla基因,制备出可溶性FceRla蛋白,为抗FceRIa抗体的检测及自身免疫性慢性荨麻疹发病机制的研究提供了条件。

关键词: 基因克隆 基因表达, 人高亲和力IgE受体а链, 自身免疫性慢性荨麻疹

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2009年08月30日

【期刊论文】人乳头瘤病毒11型早期蛋白E6和E7基因的克隆及序列分析

毕志刚, 王飞, 王群, 毕志刚*, 李光富, 王新军, 张兆松

中国麻风皮肤病杂志,2005,21(2):81~84,-0001,():

摘要

目的:从尖锐湿疣(CA)标本中克隆出人乳头瘤病毒11型(HPV 11)早期蛋白E6、E7基因,并进行序列测定及编码氨基酸序列分析,为HPV感染的检测和基因工程疫苗研究奠定基础。方法:用PCR法,从CA标本中扩增出HPVII E6、E7基因,与载体pGEX-6P-1连接成重组质粒pGEX-6P-1,E6、pCEX-6P-1,E7,酶切鉴定及双脱氧法测序观察其变异状况。结果:克隆出HPV11早期蛋白E6、E7基因,成功构建重组质粒pGEX-6P-l/E6、pGEX-6P- W7。本研究克隆出的HPVII E7基因与GenBank标准株序列完全相同,E6基因有两个位点的变化。结论:本研究克隆出的HPVlI E6、E7基因与标准株基蔫相同,这将为进一步研究E6、F7基因的表达、免疫活性及流行病学奠定基础。

关键词: 尖锐湿疣, 人乳头瘤病毒11型, E7基因, 基因克隆

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2009年08月07日

【期刊论文】导入TAP基因上调其在肺腺癌细胞系的表达

李殿俊, 吕雪莹, 李大林, 谷金宇, 王兰, 杨秋霞

国外医学免疫学分册,2004,27(4):242~245,-0001,():

摘要

目的 克隆TAP1及TAP2基因,分别转染TAP1及TAP2表达下调的人肺腺癌细胞系Anip973,以提高其表达水平,从而增强肿瘤细胞的抗原提呈能力。方法 采用RT-PCR方法自EBV刺激的B-LCLs克隆TAP1及TAP2基因,与pcDNA3.1/V5-His-TOPOTAExpressionvector连接,构建真核细胞表达载体,脂质体法(LipofectamineTM2000)转染人腺癌细胞系Anip973,经C418筛选4~6周,通过RI-PCR检测TAPI及TAP2的表达。结果 经测序确认已成功克隆人TAP1及TAP2基因,建立稳定表达TAP1或TAP2的细胞系,经RT-PCR分析,Anip973细胞TAPl、TAP2的mRNA表达明显增加。结论 基因转染可恢复肿瘤细胞TAP1及TAP2的表达,为增强MHCI类分子提呈肿瘤抗原奠定了基础。

关键词: 抗原处理相关转运体, 基因克隆 转染及表达

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2009年08月07日

【期刊论文】人类TAP1基因克隆及表达载体的构建

李殿俊, 刘玉, 吕雪莹, 杨秋霞, 谷金宇, 王兰

细胞与分子免疫学杂志,2004,20(1)53~54,-0001,():

摘要

抗原处理相关转运体(TAP)属于ABC(ATP-bindingcas-sette)转运体超家族B亚家族。人类TAP基因位于6号染色体上的MHC-Ⅱ类基因区,其编码的TAP1和TAP2分子,分别由748和686个氨基酸残基所组成,两者可形成异源二聚体参与肽类的转运过程,在MHC-Ⅰ类分子介导的抗原递呈途径中起着重要作用[1,2]。因此,TAP的异常将严重影响抗原递呈,成为病毒感染及肿瘤细胞逃避免疫监视的重要机制[3],如卵巢癌[4]、肝癌[5]及宫颈癌[6]细胞中TAP1的表达量明显下降。我们在本实验中,从B淋巴母细胞系中克隆出TAP1基因,并构建了其表达载体pcDNA3.1/V5-HisTOPOTA-TAP1。

关键词: TAPI, 基因克隆 表达载体的构建, 序列分析

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2009年06月27日

【期刊论文】菜豆DnaJ-like基因组DNA片段的克隆及其表达分析

张玉秀, 张延红, 杨水云, 柴团耀, 赵文明

西安交通大学学报,2002,36(2):199~203,-0001,():

摘要

以PvSR6cDNA编码一种菜豆DnaJ-like蛋白,并利用PCR的方法克隆出基因组部分序列,核苷酸序列分析表明PvSR6基因在这段编码区内无内含子;Southern blot分析表明菜豆基因组中存在多个PvSR6基因拷贝;Northern blot分析结果表明PvSR6是组成型表达蛋白,重金属Hg、Cd和As,过量的Cu和Zn及受伤、高温、病毒侵染和水杨酸等均能强烈地诱导其基因在叶片中的表达,表明DnaJ-like蛋白与植物的抗逆性有关。

关键词: DnaJ类蛋白, 基因克隆 菜豆

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2009年04月27日

【期刊论文】登革病毒2型NSI蛋白DNA疫苗的构建及其免疫效果观察

江丽芳, 高阳, 方丹云, 周俊梅

中华微生物学和免疫学杂志,2003,23(10):787~791,-0001,():

摘要

目的 以登革病毒2型(dengue virus 2,DV2)结构蛋白(non-structru]protein 1,NSl)为靶基因,构建DV2-NSl的候选DNA疫苗;并探讨其在小鼠体内诱导特异性体液免疫和细胞免疫的作用。方法将登革病毒2型NSl/NS2a基因片段克隆至含AG强启动子的真核表达载体pCXN2上,构建成重组体pCXN2-NSI/NS2a。在体外将重组质粒转染Cos-7细胞,间接免疫荧光检测其在真核细胞中的表达。大量提取空质粒和重组质粒,进行动物免疫实验。结果重组质粒可在真核细胞中有效地表达NSI蛋白。免疫接种小鼠后可诱发机体产生针对NSI蛋白的特异性体液免疫和细胞免疫。末次免疫前已有抗体产生,4周后达高峰。抗体依赖补体介导的溶细胞作用(antibody-dependent comple-ment-mediated cytolysis,ADCC)试验结果显示产生的抗体在体外具有特异的杀细胞作用。淋巴细胞增殖实验结果显示,实验组小鼠的淋巴细胞增殖能力与对照组比较差异有显著性。流式细胞计数仪(FAcS)检测DNA免疫鼠CD4+、CD8+T淋巴细胞变化情况,与注射空载体pCXN2的阴性鼠相比,CD4+、CD8+细胞水平有较大升高(P<0.01)。动物保护性实验结果显示,当用致死剂量登革病毒攻击免疫鼠时,有66.6%的免疫鼠受到保护。结论NSI/NS2a基因重组质粒免疫小鼠可以诱发小鼠产生特异性的体液和细胞免疫应答。这些结果为进一步研制登革病毒DNA疫苗提供了参考依据。

关键词: 登革病毒2型, NSl蛋白, 基因克隆 DNA免疫

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2009年04月27日

【期刊论文】登革病毒2型E蛋白基因真核表达和DNA免疫的研究

江丽芳, 高阳, 江丽芳**, 方丹云, 曾祥凤

中国病毒学,2003,18(3):201~205,-0001,():

摘要

将编码登革病毒2型(DV2)氨基末端80%的E蛋白的DNA片段克隆到真核表达载体pCXN2AG强启动子下游,构建成DV2E重组真核表达质粒pCXN-E。间接免疫荧光显示其可在COS-7细胞中表达。ELISA法检测pCxN2-E DNA免疫BALB/c鼠血清中的E抗体变化和维持规律,结果显示三次免疫后2周已有抗体产生,l5周时仍维持较高的水平;血清空斑减数中和实验显示其中和滴度高于1∶640:流式细胞计数仪(FAcs)检测DNA免疫鼠CD4、CD8 T淋巴细胞变化情况,与注射空载体pCXN2的阴性鼠相比,CD4淋巴细胞水平略有上升,CD8+细胞水平有较大升高(P<0.01);动物保护性实验结果显示,当用致死剂量登革病毒攻击免疫鼠时,其保护率为60%。以上结果表明:pCXN2-E在实验动物内表达出的DV2E蛋白可以诱导免疫动物的体液免疫和细胞免疫应答,尤其是MHC.I限制性杀伤性CD8 T淋巴细胞水平的提高对清除病毒是十分有利的。因此,DV2 E DNA免疫为登革病毒DNA疫苗的发展进行了有益的探索。

关键词: 登革病毒2型(, DV2), E蛋白, 基因克隆 DNA免疫

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2009年02月11日

【期刊论文】东方拟无枝酸菌糖基转移酶基因gtfE的克隆

王旻, 金飞燕, 李国亮, 王日文, 戈梅, 陈代杰

中国抗生素与杂志,2004,29(3):134~137,-0001,():

摘要

糖基转移酶基因g tf E 位于万古霉素产生菌东方拟无枝酸菌(Amycolatopsis orientalis) 染色体上。通过PCR的方法并对PCR反应条件进行了优化,扩增得到了较高产量的PCR产物。PCR产物经酶切回收后克隆到pB luscript Ⅱ KS+质粒载体, 转化E. coli DH5A感受态细胞,筛选得到一阳性克隆。测序后与文献报道的基因序列做同源比较,结果仅有两个碱基的差异。

关键词: 万古霉素, 东方拟无枝酸菌, 糖基转移酶, 基因克隆

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2007年05月08日

【期刊论文】逆代谢工程—基于有用表型的定向遗传工程策略

陈宁, 谭青乔

生物技术通讯/LETTERS IN BIOTECHNOLOGY Vol. 13, No. 1, Jan., 2002,-0001,():

摘要

代谢工程分为推理性代谢工程和逆代谢工程,逆代谢工程是避开对代谢网络充分认识的一种全新的遗传工程。本文简要介绍了逆代谢工程的策略,并以实例详细分析了逆代谢工程的具体应用.最后,分析了逆代谢工程的问题和发展前景。

关键词: 逆代谢工程, 基因克隆 基因型, 基因组计划

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2006年11月16日

【期刊论文】日本血吸虫组织蛋白酶L2(SjCL2)基因巴氏毕赤酵母表达载体的构建*

詹希美, 易冰, 何蔼, 雷智刚, 郑小英, 张瑞林, 孟锦绣, 中川军, 李卓雅

中国人兽共患病杂志,2004,20(5):390-393,-0001,():

摘要

目的扩增SjCL2基因,构建巴氏毕赤酵母表达载体pPICZB-SjCL2,为进一步研究其蛋白酶的功能奠定基础。方法运用RT-PCR技术,从日本血吸虫(中国大陆株)成虫总RNA中扩增获得SCL2基因;将其定向克隆至巴氏毕赤酵母表达载体pPICZaB质粒;经KpnI、xbaI双酶切分析和PCR鉴定筛选出阳性克隆,测序分析SCL2基因并确定其读码框的正确插入。结果利用RT—PCR技术从日本血吸虫成虫总RNA中扩增到约1Kb大小的S]CL2基因,通过双酶切分析、PCR鉴定以及DNA序列分析确定SjCL2基因被克隆到巴氏毕赤酵母表达载体pPICZaB中。结论成功构建了含有SjCL2基因编码区序列的巴氏毕赤酵母表达载体pPICZaB-CL2质粒。

关键词: 日本血吸虫, 组织蛋白酶L2, 基因克隆 巴氏毕赤酵母表达载体

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2006年11月16日

【期刊论文】日本血吸虫组织蛋白酶L1基因的编码区全序列分析及克隆

詹希美, 雷智刚, 孟锦绣, 何蔼, 李卓雅, 易冰

中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2002,20(6):325-327,-0001,():

摘要

目的分析日本血吸虫组织蛋白酶LI(SjCL1)基因编码区的完整序列,并定向克隆到真核表达质粒pcD。NA3中。方法从日本血吸虫成虫提取总RNA,进行反向巢式RT-PCR,T载体克隆后测序。PCR扩增SjCL1基因的编码区序列,并将扩增产物克隆到pcDNA3质粒的BamHI和XhoI位点上。结果通过反向巢式RT-PCR扩增出332bpSjCL1基因5端序列,测序后与报道的SjCL1基因部分序列拼接,可得到一个编码317个氨基酸的完整编码区序列。PCR特异性扩增出SjCL1编码区基因序列,其大小约为1kb。经酶切、PCR鉴定和测序表明所构建的质粒pcDNh-SiCL1中含有所扩增的基因序列。结论构建了含SjCL1基因的编码区序列的真核表达质粒pcDNA。SjCL1。

关键词: RT-I, 日本血吸虫, 组织蛋白酶L, 基因克隆

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2006年11月16日

【期刊论文】日本血吸虫组织蛋白酶L2基因扩增及克隆*

詹希美, 雷智刚, 何蔼, 李卓雅, 孟锦绣, 易冰

中国人兽共患病杂志,2003,19(6):34-37,-0001,():

摘要

目的体外扩增日本血吸虫中国大陆株组织蛋白酶L2(SjeL2)的编码区基因序列,将其克隆到真核表达质粒pcDNA3中,为进一步对其进行功能研究奠定基础。方法用TRIZOL分离日本血吸虫成虫RNA,RT-PCR扩增目的基因。将扩增产物定向克隆到真核表达载体pcDNA3中。结果RT-PCR特异性扩增出S)CL2编码区基因序列。其片段大小为lkb左右,经酶切和PCR鉴定表明所构建的质粒pcDNA一CL2中含有所扩增的基因序列。结论RT-PCR扩增的SCL2编码区基因序列与预期长度相符合,成功构建了含CL2编码区基因的真核表达质粒pcDNA-SfCL2。

关键词: 日本血吸虫, 组织蛋白酶, RT-PCR, 基因克隆

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2006年11月01日

【期刊论文】华支睾吸虫成虫转录辅激活因子基因在原核细胞中的克隆、表达及其生物功能分析

余新炳, 张咏莉, 余新炳*, 吴德, 吴忠道, 毕惠祥

中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2005,23(1):18~23,-0001,():

摘要

目的构建华支睾吸虫成虫转录辅激活因子(transcriptionalcoactivator,Tc)基因(TC基因)原核重组质粒,进行原核表达、鉴定及生物功能分析:方法根据TC基因已知序列设计1对引物,从华支睾吸虫成虫cDNA文库中扩增TC基因片段;将目的基因进行聚合酶链反应(NR),其产物和空质粒pGEX-4T-1.pET30a(+)同时用限制性内切酶BamHJ、SalI双酶切,纯化回收后连接并转化大肠埃希菌(E.coliBL21)将构建的重组质粒pGEX-4T-1-TC和pET30a(+)-TC分别经双酶切、PCR及测序鉴定后在大肠埃希菌BL21中诱导表达。用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹祛(Westemblotting)鉴定其表达效果。用亲和层析法纯化重组质粒pET30a(+)-TC表达产生的组氨酸重组蛋白(His-TC)结果构建了TC基因原核重组质粒pGEX-4T-1-TC和pFT30a(+)-Tc0sPS-PAGE结果表明TC基因在大肠埃希菌BL2l系统获得高效表达,其重组蛋白分子量与理论值相符:Westemblotting结果表明重组质粒pGEX-4T-1-TC表达的谷胱甘肽硫转移酶(GST)重组蛋白(GST-TC)可被华支睾吸虫免疫兔血清识别,具有免疫反应性。纯化的TC基因的组氨酸(His)重组蛋白(His-TC)经sDSPAGE显示单一条带:结论通过生物信息学方法由华支睾吸虫成虫cDNA文库中筛选出TC基因,并成功予以克隆、表达及纯化。

关键词: 华支睾吸虫, 转录辅激活因子基因, 基因重组, 基因克隆 原核表达

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