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2006年11月15日

【期刊论文】用去细胞同种异体神经构建猕猴组织工程化神经的实验研究

刘小林, 许扬滨, 胡军, 江长青, 杨光诗, 朱家恺

中华显微外科杂志,2005,28(2):136~139,-0001,():

摘要

目的评价用自体源骨髓问充质干细胞(MSCs)或许旺细胞(SCs)作种子细胞,与去细胞同种异体神经构建的组织工程化外周神经修复猕猴尺神经4cm缺损的实验效果,为临床研究提供资料。方法分别用4种移植物桥接猕猴4cm尺神经缺损。A组:种植自体MSCs的去细胞同种异体神经;B组:种植自体SCs的去细胞同种异体神经;C组:去细胞同种异体神经;D组:自体神经移植、通过功能学、神经电生理学及组织学指标评价各组修复神经缺损的效果。结果A、B组术后6个月能引起小鱼际肌群产生复合动作电位的潜伏期、复合动作电位的最大振幅、神经传导速度和再生的神经纤维数目与自体神经移植组相比无统计学意义(P>0.05);但A、B、C、D组分别与C组相比,差异有统计学意义(P>0.05)?结论用自体源SCs或MSCs作种子细胞,与去细胞同种异体神经构建的组织工程化外周神经修复猕猴4cm尺神经缺损,均能取得与自体神经移植相近的效果。

关键词: 组织工程, 外周神经 神经移植物, 化学萃取, 猕猴

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2006年11月15日

【期刊论文】去细胞组织工程化神经支架的制备与形态学研究

刘小林, 朱庆棠, 朱家恺, 赖英荣, 江长青, 杨光诗, 胡军

中华显微外科杂志,2004,27(1):35~38,-0001,():

摘要

目的探讨如何去除人类长段粗大神经中的细胞。为构建人类组织工程化神经提供具有仿生结构的支架方法取4段长10cm、直径6mm人的胫神经,其中3段用3%三硝基甲苯和4%脱氧胆酸钠分别萃取1、2和3次,在萃取神经和未萃取神经的中段取材,行HE染色、砂罗铬花青染色和S-100免疫组化染色,在光镜和电镜下观察神经萃取前后形态学的变化结果用三硝基甲苯和脱氧胆酸钠萃取后,胫神经内的细胞消失,I纤维性支架结构与未经萃取的神经相仿,电镜下可见萃取后的神经由空的神经基底膜管和管之间的胶原纤维构成。随着萃取次数的增加,神经内残留的S-100蛋白显著减少,但反复萃取后神经的支架结构受破坏。结论用硝基甲苯和脱氧胆酸钠萃取2次可去除人体长段、粗大神经的细咆而保留完整的神经基底膜管和纤维支架结构,可能是制备具有仿生结构的人类组织工程化神经支架较为理想的方法。

关键词: 外周神经 组织工程, 人类, 化学萃取

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2006年11月15日

【期刊论文】可降解材料对外周神经的毒性作用研究

刘小林, 朱庆棠, 朱家恺, 程钢, 黎志明, 许扬滨

中华显微外科杂志,2003,26(2):127~129,-0001,():

摘要

目的研究聚乳酸、聚羟基乙酸和壳聚糖等可降解材料对正常外周神经有无毒性作用,为研制组织工程化神经筛选相容性好的支架材料。方法取l5只SD大鼠,随机分成3组,打开坐骨神经外膜后,分别将聚乳酸、聚羟基乙酸和壳聚糖植入神经束之间。术后7周取材,观察坐骨神经组织结构的变化以及材料在神经组织内引起的异物反应。结果各组的神经干内均有纤维结缔组织轻度增生,但神经束的形态结构无明显变化;各种材料周围均有纤维假膜形成,假膜内有淋巴细胞和巨噬细胞浸润,而包裹壳聚糖的假膜最厚,细胞浸润最明显。结论聚乳酸、聚羟基乙酸和壳聚糖对外周神经均无毒性,可作为组织工程化神经的支架材料,但壳聚糖引起的异物反应较聚乳酸和聚羟基乙 酸明显。

关键词: 生物材料, 生物相容性, 外周神经 组织工程,, 壳聚糖

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2006年11月15日

【期刊论文】化学萃取同种异体神经种植许旺细胞的体外实验

刘小林, 王建云, 朱家恺, 李文萍, 向剑平

中华显微外科杂志,2002,25(3):189~191,-0001,():

摘要

目的通过自体许旺细胞与化学萃取同种去细胞异体神经桥接物体外结合培养的研究,寻找一种在结构功能上与自体神经相似而抗原性少或无的物质来修复较长距离的神经缺损。方法使用近交系F344乳鼠和双差速贴壁及Arab-C抑制成纤维细胞生长的细胞培养方法来获得大量高纯度的许旺细胞。成年SD大鼠作为异体神经来源,利用化学萃取去除其中细胞成分以降低其抗原性,制备去细胞神经桥接物,再把前者通过微注射方法注入到后者内部继续培养观察细胞生长情况。用抗s100标记许旺细胞计算纯度,用HE染色、电镜观察神经萃取及细胞种植其内后生长情况。结果许旺细胞培养纯度达92%以上。Triton-X-100及脱氧胆酸钠具有完全萃取掉神经纤维中的许旺细胞及髓鞘,萃取后所得到的桥接物适合于许旺细胞体外生长,并且细胞在其内有迁移排成行的特性。结论通过化学萃取方法所得的异体去细胞神经桥接物种植自体许旺细胞后可能为一种理想的神经缺损修复材料。

关键词: 许旺细胞, 外周神经 化学萃取

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2006年11月15日

【期刊论文】聚乳酸微丝在外周神经内的降解性研究

刘小林, 朱庆棠, 朱家恺, 许扬滨, 闫玉华

中华显微外科杂志,2003,20(1):33~35,-0001,():

摘要

目的研究聚乳酸微丝在神经干内的降解特点以及在降解过程中对外周神经的影响,探讨其是否适合作为组织工程化外周神经的支架。方法在20只sD大鼠两侧的坐骨神经内分别植入聚乳酸微丝(实验侧)和Vicryl微丝(对照侧),于术后1、4、8和l2周观察微丝的形态和神经组织结构的变化以及植入部位的组织和细胞反应。结果聚乳酸微丝植入神经干后在表面和内部同时发生崩裂,至12周时已大部分降解;在降解过程中始终伴随着巨噬细胞活跃的吞噬活动;两种微丝植入神经干后均引起类似的轻度异物炎性反应;在聚乳酸微丝的降解过程中,神经束和神经纤维的组织结构没有明显变化。结论聚乳酸微丝在外周神经内的降解时间超过12周;微丝在降解时引起的轻度非特异性炎性反应对神经组织没有不良影响。

关键词: 聚乳酸, 降解, 外周神经 组织工程

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