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2009年11月08日

【期刊论文】内皮细胞生长状态与血管平滑肌细胞增殖迁移能力的关系*

黄岚, 武晓静, 周骐, 赵刚, 周音频, 崔斌

心脏杂志,2004,16(5):403~406,-0001,():

摘要

目的:探讨内皮细胞生长状态与血管平滑肌细胞增殖迁移能力的关系。方法:通过建立细胞共培养体系,检测不同内皮生长状态对血管平滑肌细胞3H-TdR掺入、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达、细胞迁移计数和a-SM-actin mRNA表达的影响。结果:融合生长内皮使平滑肌细胞3H_TdR掺入量和PCNA蛋白表达明显降低,上调平滑肌细胞a-SM-actin mRNA表达;而对数生长内皮细胞使平滑肌细胞3H_TdR掺入量和PCNA蛋白表达明显升高,下调平滑肌细胞a-SM-actin mRNA表达。对照组平滑肌细胞在基础状态下存在少量迁移,对数增殖内皮细胞组平滑肌迁移数比对照组增高约4倍(P<0.05),而融合生长内皮细胞组平滑肌迁移数仅为对照组的0.5倍(P<0.05)。结论:内皮细胞生长状态不同,对平滑肌细胞生物学特性的影响也不同,增殖期内皮明显促进平滑肌细胞增殖迁移、下调平滑肌细胞a-SM-actin mRNA表达。

关键词: 内皮细胞, 平滑肌细胞 增殖, 迁移

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2009年11月07日

【期刊论文】小鼠主动脉平滑肌细胞的培养

雷寒, 周晓莉, 柳青

基础医学与临床,2005,25(6):564~567,-0001,():

摘要

目的 建立一种小鼠主动脉平滑肌细胞体外培养方法,为相关疾病的研究提供实验材料。方法 采用组织贴块法、胰酶消化法进行细胞原代及传代培养,综合运用自然纯化、机械刮除、差异贴壁法进行细胞纯化,并通过形态学特征及免疫细胞化学染色对细胞进行鉴定。结果 90%的组织块接种存活,第5代的平滑肌细胞纯度达98%以上。相差显微镜下培养细胞呈典型的“谷峰状”生长,免疫细胞化学染色显示特异的a平滑肌肌动蛋白阳性表达。结论 本法简便、可靠,培养的平滑肌细胞纯度高、性能好。

关键词: 主动脉, 平滑肌细胞 细胞培养

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2009年09月06日

【期刊论文】三七花总皂苷对人主动脉血管平滑肌细胞增殖及细胞肉钙离子浓度的影响

周端, 王佑华, 苑素云, 杨建梅, 曹敏, 魏莉, 周浩

上海中医药大学学报,2007,21(2):61~63,-0001,():

摘要

目的:观察三七花总皂苷(PNFS)对血管平滑肌细胞增殖及细胞内钙离子浓度的影响。方法:采用去甲肾上腺素诱导的人主动脉血管甲滑肌细胞增殖和钙超载模型,应用CCK-8法观察血管平滑肌细胞增殖活力;钙荧光指示剂Fluo-3/AM检测细胞内钙浓度变化。观察不同剂量PNFS对两者的影响。结果:PNFS能够改善去甲肾上腺素诱导的人主动脉血管平滑肌细胞增殖,降低细胞内钙离子浓度,并呈一定的量效关系。结论:PNFS对去甲肾上腺素诱导的人主动脉血管平滑肌细胞增殖有抑制作用,这一作用可能与降低细胞内钙离子浓度有关。

关键词: 三七花总皂苷, 平滑肌细胞 细胞增殖,

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2009年09月05日

【期刊论文】PAI-1反义RNA对人主动脉平滑肌细胞中血管内皮生长因子的影响

李晖, 富路, 梅宇

,-0001,():

摘要

目的探讨纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogenactivatorinhibitor-1,pai-1)反义RNA对离体培养的主动脉平滑肌细胞(smoothmusclecell,SMC)PAI-1表达的作用及对血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的影响。方法PCR扩增PAI-1第2外显子,将PCR产物纯化克隆后连入真核细胞表达载体pcDNA3。1,构建PAI-1反义RNA重组质粒。将pcDNA3。1-反义PAI-1重组质粒转染SMC中。通过免疫组化。Western印迹,ELISA检测细胞中PAI-1表达的改变;通过免疫荧光技术观察细胞中PAI-1表达量的变化对VEGF的影响。结果转染后第3天,细胞中PAI-1含量最低,VEGF也相应增加。第7天,PAI-1含量接近于正常,CEGF也增加至正常水平。结论反义PAI-1RNA能有效阻断SMC中PAI-1的蛋白合成,同时抑制细胞中VEGFDE的表达。

关键词: 纤溶酶原激活物抑制剂-1, 反义RNA, 血管内皮生长因子, 平滑肌细胞

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2009年08月31日

【期刊论文】消瘀片对粥样硬化兔血浆ET和血清NO水平的影响

谢梅林, 顾振纶, 陈可冀, 周文轩, 郭次仪

,-0001,():

摘要

目的 探讨消瘀片抑制血管平滑肌细胞增生的可能作用机理。方法 采用高脂饮食加腹主动脉内膜剥脱术制成兔腹主动脉粥样硬化模型,通过放免法和比色法分别测定口服消瘀片0.16~0.32g/(kg.d)12周后血浆内皮素(Endothelin-1,ET-1)和血清一氧化氮(Nitric Oxide,NO)含量的消长变化。结果 服用消瘀片后的兔血浆ET-1 水平明显降低,而血清NO含量明显增加。结论 消瘀片可能是通过降低血浆ET-1水平,增加血清NO含量而抑制动脉粥样硬化血管壁平滑肌细胞的增殖。

关键词: 消瘀片, 内皮素, 一氧化氮, 血管平滑肌细胞

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2009年07月14日

【期刊论文】反义碱性成纤维细胞生长因子对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

陈剑秋, 孙晋津

中华实验外科杂志,2004,21(9):1123~1125,-0001,():

摘要

目的 观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)反义脱氧寡核苷酸(A0DN)对血管平滑肌细胞(vSMCS)增殖的影响,并探讨其作用机制。方法 利用脂质体分别将浓度为5μmol/L的bFGF反义、正义及随机寡核苷酸(ODN)导入体外培养的VSMCs;应用逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)和westem blot半定量测定方法,观测ODN对bFGF基因表达的影响;通过细胞活性测定观察ODN对VSMCs增殖的抑制作用。结果 bFGF AODN作用于VSMCs后1~5d,其相应的mR-NA表达和蛋白表达均明显减弱,细胞增殖活性受到抑制。反义组与对照组相比,mRNA在第1~4天表达差异有非常显著性(P<0.01),第5天有显著性(P<0.05);蛋白表达在1~5d差异有显著性(P<0.05);细胞增殖率在1~4d差异有非常显著性(P<0.01),第5天差异无显著性(P>0.05)。而正义、随机组无此效应,同单纯脂质体和空白对照组相比差异无显著性(P>0.05)。结论 反义bFGF ODN可通过特异性抑制其相应基因表达来实现阻遏血管平滑肌细胞增殖。

关键词: 寡核苷酸类,, 反义, 成纤维细胞生化因子,, 碱性, 平滑肌细胞 增殖

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2009年07月14日

【期刊论文】大鼠血管平滑肌细胞中bFGF及其受体FGFR-1的基因表达

陈剑秋, 孙晋津

天津医科大学学报, 2005,11(1):8~10(下转第l4页),-0001,():

摘要

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其受体FGFR-1在大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)的表达情况。方法:建立大鼠血管平滑肌细胞原代培养并鉴定;使用原位杂交检测VSMCs中bFGF及其受体FGFR-l的mRNA表达;用免疫组织化学和Western Blot技术鉴定bFGF蛋白表达情况。结果:通过光镜和免疫组织化学技术从细胞形态和结构上使VSMCs得到鉴定;原位杂交证实大鼠VSMCs表达bFGF及其受体FGFR-l的mRNA;免疫组织化学表明VSMCs的胞核和胞浆中有bFGF蛋白表达,Western Blot显示bFGF有18KDa、22KDa、22.5KDa 3种异构体形式。结论:大鼠血管平滑肌细胞表达bFGF及其受体FGFR-1 mRNA,bFGF有多种异构体形式并分布在VSMCs的胞核和胞浆中。

关键词: 碱性成纤维细胞生长因子, 受体, 血管平滑肌细胞 大鼠

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2009年04月23日

【期刊论文】静止压力诱导血管平滑肌细胞的增殖与凋亡

王深明, 钱结胜, 刘大钺, 林颖, 黄雪玲

中华医学杂志,2005,8(29):2062~2064,-0001,():

摘要

目的 探讨静止压力对血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响。方法 将胚胎鼠血管平滑肌细胞系A10细胞分别在正常大气压下、80、100、200mmHg等静止压力下培养;利用MTT法测定细胞成活率,流式细胞仪测试样品的细胞周期与凋亡率。结果 在较低压力下(100mmHg)A10细胞成活率增加,细胞增殖,处于G0/G1期的A10细胞百分比显著降低,增殖指数(PI)显著升高,凋亡率与正常无差异;在200mmHg的压力下成活率降低,G0/G1期A10细胞百分比显著升高,细胞增殖受抑制,凋亡率亦显著增加。结论 较低的压力可促进血管平滑肌细胞增殖,而过高的压力则可诱导细胞凋亡。

关键词: 压力, 血管平滑肌细胞 脱噬作用

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2009年02月11日

【期刊论文】西红花苷对牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的影响

钱之玉, 何书英, 唐富天

Acta Pharmaceutica Sinica 2004, 39(10)778-781,-0001,():

摘要

目的 研究西红花苷对血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响。方法 以Fluo-3/AM作为Ca2+荧光探针,采用激光扫描共聚焦显微镜观察牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的变化。结果 无论细胞外有无钙离子,西红花苷(1×10-8,1×10-7,1×10-6mol·L-1)均能明显抑制1×10-2mol·L-1 H202引起的细胞内钙离子浓度的升高,其抑制率含钙条件下分别为34.1%,57.1%和74.3%(P<0.01),无钙条件下分别为26.2%,32.1%和50.0%(P<0.01);在胞外无钙的条件下,西红花苷(1×10-8,1×10-7,1×10-6mol·L-1)能抑制70 mmol·L-1 CHC13导致雷洛丁敏感钙池的释放,其抑制率分别为27.8%,27.8%和50.0%(P<0.01)。结论 西红花苷能抑制胞外钙离子的内流及内质网上钙离子的释放。

关键词: 西红花苷, 激光共聚焦显微镜, 平滑肌细胞 Fluo-3/, AM, 钙离子

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2007年05月10日

【期刊论文】PA I-1反义RNA 对人主动脉平滑肌细胞中血管内皮生长因子的影响

富路, 梅宇, 李晖

,-0001,():

摘要

目的探讨纤溶酶原激活物抑制剂-1 (plasminogen activator inhibitor-1, PA I-1) 反义RNA对离体培养的主动脉平滑肌细胞(smooth muscle cell, SMC) PA I-1 表达的作用及对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, V EGF) 表达的影响。方法PCR 扩增PA I-1 第2 外显子, 将PCR 产物纯化克隆后连入真核细胞表达载体pcDNA 311, 构建PA I-1 反义RNA 重组质粒。将pcDNA 3.1-反义PA I-1 重组质粒转染SMC 中。通过免疫组化、Western 印迹、EL ISA 检测细胞中PA I-1 表达的改变; 通过免疫荧光技术观察细胞中PA I-1 表达量的变化对V EGF 的影响。结果转染后第3 天, 细胞中PA I-1 含量最低,V EGF 的表达也减少。第5 天, PA I-1 含量逐渐升高,V EGF 也相应增加。第7 天, PA I-1 含量接近于正常,V EGF 也增至正常水平。结论反义PA I-1 RNA 能有效阻断SMC 中PA I-1 的蛋白合成, 同时抑制细胞中V EGF 的表达。

关键词: 纤溶酶原激活物抑制剂-1, 反义RNA, 血管内皮生长因子, 平滑肌细胞

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2007年05月10日

【期刊论文】球囊损伤后血管迁徙平滑肌细胞弹力蛋白酶 mRNA 的表达

蒋健, 舒强, 凌光烈, 三俣昌子, 前田秀一郎, 吉田洋二

,-0001,():

摘要

目的 探查血管平滑肌细胞有否弹力蛋白酶 mRNA 的表达、其在血管组织中的分布及与细胞迁徙的关系。方法 采用球囊损伤大鼠动脉的模型,克隆成大鼠胰腺弹性蛋白酶Ⅱ的RNA探针,运用原位杂交及免疫组化、电镜等方法。结果 弹性蛋白酶ⅡmRNA 的表达见于正常动脉部分平滑肌细胞,并因血管损伤而增强。中膜迁徙性平滑肌细胞毫无例外均有弹性蛋白酶mRNA的强烈表达,其细胞周围基质显著减少,内弹性板遭到破坏。结论中膜平滑肌细胞的丝氨酸弹性蛋白酶表达亢进是促进向内膜迁徙并形成平滑肌增生性血管疾病的重要机理之一。

关键词: 球囊损伤, 中膜迁徙性平滑肌细胞 弹力蛋白酶Ⅱ, 原位杂交

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2007年05月30日

【期刊论文】针刺足阳明经穴对家兔胃窦平滑肌细胞舒缩长度及胞内钙离子浓度的影响

易受乡, 邓元江, 严洁, 林亚平, 郭晖, 向志勇, 吴芳, 刘卫英, 张泓

中国中医药科技2005年1月第12卷第1期/Jan., 2005, Vol. 1, No. 1,-0001,():

摘要

目的:从细胞水平探讨足阳明经与胃相关的特异性及针刺足阳明经穴对胃平滑肌细胞胞内钙离子浓度的影响。方法:将45只家兔随机分为生理盐水组(A)、阿托品模型组(B)、针刺足阳明经穴组(C)、针刺足少阳经穴组(D)、针刺足太阳经穴组(E)。阿托品造模处理后,分离胃窭平滑肌细胞,制成活的单个平滑肌细胞悬液,在显微镜下以测微尺测定细胞长度,以荧光分光光度计测定胞内钙离子浓度。结果:针刺足阳明经组(C)的细胞舒缩长度明显短于其他各组(P<0.01),且胃窦平滑肌细胞胞内钙离子浓度明显高于其他各组(P<0.01)。结论:针刺足阳明经穴能使阿托品阻断的胃窦平滑肌细胞产生明显的收缩效应.进一步证实足阳明经与胃之间存在特异性的联系,其效应的产生与引起胃窦平滑肌细胞内钙离子释放有关。

关键词: 胃疾病/, 针灸疗法, 胃窦平滑肌细胞/, 针灸效应,

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2006年07月21日

【期刊论文】人脑动静脉畸形血管平滑肌细胞的培养和鉴定

陈衔城, 曾涛, 孙安, 童菊芳*

Chin J Clin Neurosci 2005, 13 (1): 83~85,-0001,():

摘要

目的:建立一个稳定的人脑动静脉畸形血管平滑肌细胞的培养体系。方法:取手术切除的人脑动静脉畸形组织块以酶消化法接种于铺有胶原底层的培养瓶中进行原代及培养,并对其进行形态学观察,免疫组化染色及透射电镜等-系列细胞定性研究。结果:接种后6~8d后可见少量细胞贴壁,所获培养细胞经免疫组化、透射电镜鉴定证实为血管平滑肌细胞,而且细胞纯度较高,细胞可以连续传代18代。结论:应用酶消化法可获得纯化的血管平滑肌细胞,细胞可以连续传代培养。培养动静脉畸形血管平滑肌细胞可应用于体外作一步的深入研究。

关键词: 脑动静脉, 血管平滑肌细胞 培养

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2006年07月24日

【期刊论文】肾上腺髓质素对内皮素促家兔气道平滑肌细胞增殖的抑制作用

赵鸣武, 方秋红, 刘秀华*, 唐朝枢*

基础医学与临床,1997,17(4):64~67,-0001,():

摘要

在体外培养的家兔气道平滑肌细胞(ASMC)上, 观察肾上腺髓质素(AM)对内皮素(ET)促A SMC 增殖的影响及丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)活性的变化。以探讨AM对ASMC增殖的调控。结果显示10-8mol/L ET-1显著刺激ASMC3H-TdR参入及MAPK激活(P<0.01)。AM(13-52)呈剂量依赖地抑制ET-1的上述作用(P<0.05, P<0.01)。单独应用AM(13-52)对ASMC3H-TdR参入及MAPK活性无明显影响。表明AM(13-52)可抑制ASMC对ET-1的增殖反应, 其机理可能涉及MAPK活性的抑制。

关键词: 肾上腺髓质素, 内皮素, 气道平滑肌细胞 增殖, 丝裂素活化蛋白激酶

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2006年02月27日

【期刊论文】心肌细胞和血管平滑肌细胞收缩调控机制的研究进展*

臧伟进, L Jun, ZANG Wei-Jin, ZHANG Chun-Hong

生理科学进展,2003,34(3):207~211,-0001,():

摘要

心脏和血管构成体内的心血管系统,两者都具有收缩性。心脏收缩要求在很短的时间内升高室内压,因此要求细胞收缩快速和有力,这就需要细胞的收缩结构和钙调控过程能满足其要求。血管收缩缓慢而持久,其收缩结构及机制也正好与之功能相适应。本文从细胞水平讨论了心脏和血管的收缩结构和收缩机制,以及钙调控机制,并分别对两者之间的异同点作了介绍。

关键词: 心肌细胞, 平滑肌细胞 超微结构, 钙, 细胞收缩

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2005年01月19日

【期刊论文】17β-雌二醇下调血管平滑肌内皮素A型受体的表达

王庭槐, 王庭槐*, 谈智, 刘培庆, 鲁伟, 杨丹, 潘敬运

生理学报,2001,53(5):380~384,-0001,():

摘要

为进一步探讨雌激素对心血管的保护作用,实验在双侧卵巢去势大鼠模型和培养的血管平滑肌细胞(VSMCs)上,观察17β2雌二醇(E2)对血管反应性及VSMCs增殖的影响,以RT2PCR和Western blot检测内皮素受体(ETAR) 的表达。结果显示:去势雌性大鼠血管对内皮素(ET21)的反应性明显增高,ETAR特异性受体阻断剂BQ123能完全阻断ET-1对VSMCs增殖的影响,E2能明显抑制ET-1对VSMCs增殖的作用,RT-PCR结果显示E2能抑制ETAR mRNA的表达,Western blot进一步证实E2 能抑制ETAR蛋白表达;E2受体阻断剂Tamoxifen能部份抑制ET-1对VSMCs的增殖及ETAR的mRNA和蛋白的表达。以上结果提示:ET21促VSMCs增殖的效应主要是由ETAR介导的,雌激素能通过下调ETAR来抑制ET-1对VSMCs促增殖的作用和血管对ET-1的反应,且此作用与雌激素受体有关。

关键词: 雌激素, 雌激素受体, 血管平滑肌细胞 内皮素, 内皮素受体

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2005年01月19日

【期刊论文】ERK在17β-雌二醇抑制大鼠血管损伤后平滑肌细胞增殖中的作用

王庭槐, 王庭槐*, 谈智, 付晓东, 杨丹, 胡飞雪, 李永勇

生理学报,25,2003,55(4):4ll~416,-0001,():

摘要

本实验旨在研究细胞外信号调节激酶(extracellular signall-regulated kinase, ERK)在17β-雌二醇(17β-estra-diol, E2)介导的一氧化氮(nitric 0xide, NO)抑制血管损伤后平滑肌细胞(vsscuJlar smooth muscle cell, VsMc)增殖中的作用。在去势雌性大鼠中建立颈总动脉球囊损伤模型,实验分单纯去势组(OVx)、去势给予E2治疗组(E1+0Vx)、去势后球囊损伤组(OVx+Inj)和去势后球囊损伤给予E2治疗组(E2+0Vx+Inj)。分别检测各组血管壁的厚度、血浆中NO的浓度、ERK蛋白表达和活性的变化以及eNOS蛋白表达情况。结果显示,与OVx组相比,OVX+Inj组血浆N0含量明显下降和血管壁厚度明显增厚,E2可增加血浆中NO含量和抑制球囊损伤后血管壁的增厚;E2可以抑制ERK蛋白表达和活化,诱导eNOs蛋白的表达。血浆中NO含量与eNOs蛋白的表达呈正相关,与血管壁厚度和ERK蛋白表达呈负相关。以上结果提示,E2可通过增加血管组织eNOs蛋白表达,促进NO生成,抑制ERK蛋白的表达和活性,从而抑制血管损伤后VSMc的增殖。

关键词: 细胞外信号调节激酶, 17β-雌二醇, 一氧化氮, 血管平滑肌细胞

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2005年01月19日

【期刊论文】Caveolin-1蛋白在17β-雌二醇抑制内皮素-1诱导血管平滑肌细胞增殖中的作用

王庭槐, 谈智, 林桂平, 王庭槐*

生理学报,2004,56(3):379~383 ,-0001,():

摘要

本工作旨在研究Caveolin-1在17β-雌二醇(17β-estradiol, E2)抑制内皮素-1(endothelin-1, ET-1)诱导血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)增殖中的作用。在培养的VSMCs上,使用[3H]Thymidine([3H]TdR)掺入法、荧光免疫组化方法和Western blot观察E2处理VSMCs 前后ET-1对DNA合成和caveolin-1蛋白表达的影响。结果显示,ET-1可以刺激VSMCs增殖。E2作用24h后,可明显抑制ET-1的上述作用。免疫荧光证实,在VSMCs上有caveolin-1分布,ET-1刺激VSMCs增殖的过程中,VSMCs上caveolin-1蛋白荧光强度下降,而事先给予E2可逆转这种下降。Western blot证实,ET-1可抑制caveolin-1蛋白的表达而E2则可增加caveolin-1蛋白的表达。以上结果表明E2抑制ET-1诱导的VSMCs增殖可能与其增加caveolin-1蛋白表达有关。

关键词: caveolin-1蛋白, 细胞质膜微囊, 内皮素, 血管平滑肌细胞 17β-雌二醇

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2005年01月21日

【期刊论文】腺病毒介导的HCY2基因对血管平滑肌细胞凋亡的诱导作用

高炜, 李黔, 郭艳红, 曲明娟, 陈光慧

中国介人心脏病学杂志,2003,11(2):96~98,-0001,():

摘要

目的 观察高同型半胱氨酸诱导基因HCY2 对于平滑肌细胞的作用。方法 以复制缺陷型腺病毒作为载体,将HCY2 基因转移到平滑肌细胞中。提取平滑肌细胞的DNA,进行凝胶电泳及ELISA,行DNA片段化分析。用流式细胞术观察平滑肌细胞的亚二倍体。结果 转染HCY2后平滑肌细胞的DNA 断裂成相差200 bp左右的片段,流式细胞术测定时发现,位于亚二倍体区的平滑肌细胞明显增多。结论 HCY2基因能引起平滑肌细胞的凋亡。

关键词: 平滑肌细胞 凋亡, 腺病毒

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2005年02月25日

【期刊论文】大黄素对豚鼠结肠带平滑肌细胞钾通道活性的影响*

杨文修, 李俊英, 胡文卫, 王津, 金正根, 王新宇, 许文胜

Acta Pharmaceutica Sinica 1998, 33 (5): 321~325,-0001,():

摘要

用检测平滑肌细胞电活动和张力技术,研究了大黄素对豚鼠结肠带平滑肌细胞电和收缩活动的影响并cromakalim,glybenclamide,四乙胺及BaCl2的作用进行比较。结果表明,大黄素加强平滑肌细胞电和收缩活动,作用效果与剂量有关;大黄素与cromakalim的作用相互抑制。其促进平滑肌细胞电和收缩活动的作用与glybenclamide相似,而与四乙胺和BaCl2有明显区别。提示大黄素的作用机制与抑制细胞膜KATP等钾通道的活性相关。

关键词: 大黄素, 豚鼠结肠带, 平滑肌细胞 钾通道阻断剂, KATP通道开放剂

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