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2009年11月02日

【期刊论文】树突状细胞在小儿哮喘发病机制中的作用

杨锡强, 蒋东波, 周雅德, 李华强, 姚忠凯, 覃世文, 潘凤, 赵锦宁, 周萍, 唐仕芳

中华儿科杂志,2004,7(42):520~523,-0001,():

摘要

目的探讨树突状细胞(DC)在小儿哮喘发病中的可能作用及机制。方法以Thomas法,采用粒-巨噬细胞集落刺激因子,白细胞介素4(IL-4)和肿瘤坏死因子联合培养诱导哮喘患儿外周血细胞,进而检测协同刺激分子23-4的表达诱导自淋巴细胞的增殖反应,以及其分泌的.等水平的变化。结果哮喘患儿外周血诱导自体淋巴细胞增殖反应明显高于对照组值分别为和69,差异有非常显著意义;其分泌.水平明显低于对照组,差异有非常显著意义;分泌。水平也明显低于对照组,差异有非常显著意义;同时,哮喘患儿外周血人类白细胞抗原和协同刺激分子的表达水平明显高于对照组,差异有非常显著意义。结论可能通过诱导细胞分化在小儿哮喘发作时起重要作用。其可能的机制系通过分泌的细胞因子而起作用。

关键词: 哮喘, 树突细胞 白细胞介素10, 白细胞介素12, 抗原,, CD80, 膜糖蛋白类, 抗原, CD

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2009年11月01日

【期刊论文】树突状细胞HBsAg疫苗抗乙型肝炎病毒免疫的体外研究

任红, 李用国, 罗云萍, 兰英华, 梁增伟, 许红梅

中华传染病杂志,2002,20(6):333~336,-0001,():

摘要

目的研究人单核细胞来源的树突状细胞(DC)激活的HBsAg特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对表达HBsAg的HepG2/S靶细胞的杀伤的效应,以探索DC-HBsAg疫苗在抗乙型肝炎病毒(HBV)中的作用方法从健康外间血中分离出单核细胞,在粒细胞巨噬细胞集落刺激因了(GMCSF)和白细胞介素4(11.4)的作用下培养7D诱导出DC,然后以DC为刺激细胞在体外诱导出HBsAg特异性CTL,将携有HBV-S基因的Plxsn/s重组质粒电击导入肝癌细胞系(HepG2),建立表达HBsAg的靶细胞模型HepG2/S;用染色法检测HBsAg特异性CTL寻HepG2/S靶细胞的杀伤效应。结果DC激活的HBsAg特异性CTL对HepG2/S靶细胞具有较强的杀伤效应,不同浓度HBsAg(0μg/L, 50μg/L和100μg/L)诱导的CTL的杀伤率分别为3.8%、69.5%和85.1%,而CTL对HepG2细胞无明显杀伤效应,结论由DC激活HBsAg特异性CTL具有较强的特异性抗HBV作用。

关键词: 树突细胞 抗病毒免疫, 肝炎病毒, 乙型, 肝炎疫苗、乙型

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2006年07月27日

【期刊论文】肝癌细胞HepG2与肝癌患者树突状细胞融合瘤苗的体外效应

任军, 张红梅, 张利旺, 刘文超, 潘伯荣, 斯晓明

第四军医大学学报,2006,27(6):553-555,-0001,():

摘要

目的:将肝细胞癌(HCC)患者树突状细胞(DCs)与肝癌细胞HepG2融合制备瘤苗,检测其体外诱导同源T细胞产生特异性抗HepG2的免疫效应。方法:以血细胞分离机分离富集HCC患者外周血单个核细胞(PBMCs),应用重组人粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(rhGM2CSF)、白细胞介素24(rhlL24)体外诱导培养DCs;聚乙二醇融合DCs与肝癌细胞HepG2,MTT法测定融合细胞(DCs/HepG2)刺激同源T淋巴细胞增殖分化能力,细胞毒性实验检测DCs/HepG2诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL对HepG2的特异性杀伤作用。结果:融合细胞DCs/HepG2高表达成熟DC表面分子,其中CD8390.4%,CD80 87.7%,CD86 84.4%,HLA2DR 98.5%;其刺激同源T淋巴细胞增殖的能力显著高于HepG2和DCs;DCs/HepG2活化的CTL对HepG2具有显著杀伤作用,其杀伤率为(63.5±4.6)% (效靶比例为20:1)。结论:HCC患者外周血DC融合HepG2细胞可有效诱导同源T淋巴细胞产生特异性抗HCC免疫效应,可能成为HCC免疫治疗的有效途径。

关键词: 树突细胞 细胞融合, 癌,, 肝细胞, 免疫疗法

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2006年07月27日

【期刊论文】AFP基因转染CD34+造血干细胞来源的树突状细胞诱导特异性抗肝癌免疫

任军, 贾军, 张利旺, 张红梅, 郭晓彤, 斯晓明, 王九花, 程婕

第四军医大学学报,2005,26(8):755-757,-0001,():

摘要

目的:以AFP基因转染CD34+造血干细胞来源的树突状细胞(DC),诱导DC产生特异性抗肝癌免疫,观察其对肝癌细胞的杀伤。方法:采用化疗和集落刺激因子动员肝癌患者外周血造血干细胞,血细胞分离机采集CD34+造血干细胞,IL24、GM2CSF联合TNF2α刺激CD34+细胞分化为DC。通过脂质体转染的方法将携带人AFP基因质粒pEGFP-AFP转染树突状细胞,MTT法检测对人肝癌细胞HepG2的特异性杀伤。结果:经细胞因子刺激诱导培养的DC具有典型的分枝状突起,高表达CD11C,CD80,CD86。转染AFP基因后可见到转染细胞表达绿色荧光蛋白,细胞化学染色胞质内可见到红色颗粒。MTT法检测AFP基因转染后的DC可诱发特异性CTL反应杀伤HepG-细胞,AFP基因转染组、空载体组和对照组的杀伤率分别为(92.0±3.5)%,(75.5±4.1)%和(72.9±3.4)%,转染组与空载体组和对照组间存在显著性差异(P<0.05)。结论:AFP基因转染CD34+造血干细胞来源的DC可诱导特异性CTL反应杀伤肝癌细胞。

关键词: 甲胎蛋白类, 转染, 树突细胞 肝肿瘤

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2006年08月18日

【期刊论文】黄芪注射液与白细胞介素2增强树突细胞抗肿瘤转移作用的比较研究

董竞成, 董晓辉

中国中西医结合杂志,2005,25(3):236-239,-0001,():

摘要

目的:观察比较黄芪注射液与白细胞介素(IL)-2增强树突细胞(DCs)的抗肿瘤转移作用。方法:制备C57BL/6小鼠骨髓来源的DCs,用Lewis肺癌特异性多肽Mutl预激DCs,并联合黄芪注射液或IL-2治疗转移性肺癌小鼠,通过流式细胞仪分析其脾细胞内T淋巴细胞亚群比例的变化,用Elisa法检测荷瘤小鼠血清IL,2、IL-4含量。结果:肿瘤抗原多肽致敏的DCs与黄芪注射液或IL-2联合治疗后,肺癌结节减少,小鼠脾脏中T淋巴细胞亚群(CL4+和CD81)升高,血清IL-2/IL-4比值也明显升高。在观察期间,经DCs联用IL-2和DCs联用黄芪注射液免疫小鼠成瘤率均低于单用DCs组。结论:黄芪注射液和IL-2均能增强DCs的抗肿瘤转移作用,有效地促进荷瘤宿主的免疫应答,具有显著的体内抑制肺癌转移的效果。对正常动物免疫保护作用更加明显。

关键词: 黄芪注射液, 白细胞介素-2, 树突细胞 肺癌, 抗肿瘤转移

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2006年08月18日

【期刊论文】黄芪注射液增强树突细胞的抗肺癌作用

董竞成, 董晓辉

中国实验方剂学杂志,2005,11(1):25-28,-0001,():

摘要

目的:研究黄芪注射液联合MHCI类限制性肿瘤抗原多肽Mutl致敏的树突细胞(DCs)对肺癌小鼠的治疗作用及其免疫学原理。方法:制备小鼠骨髓来源的树突细胞,用转移性Lewis肺癌特异性多肽Mutl预激DCs并联合黄芪注射液治疗肺癌小鼠,通过FACS分析其脾细胞内T淋巴细胞比例的变化,用Elisa法检测荷瘤小鼠血清内IL-2、IL4浓度的变化,间接提示Thl/Th2比例的变化。同时免疫正常小鼠,观察宿主对随后肿瘤细胞攻击的保护作用。结果:肿瘤抗原多肽致敏的DCs与黄芪注射液联合治疗后,比单用DCs更有效的治疗转移性肺癌,小鼠脾细胞内CD4'T和CD8 T细胞明显比例升高,联合治疗组的II广2,IL4比例也明显升高。在观察时间内经黄芪注射液和DCs联合免疫的小鼠成瘤率低于对照组和单用DCs组。结论:以肿瘤抗原多肽致敏的DCs与黄芪注射液联合治疗能更有效的促进荷瘤宿主的免疫应答,具有显著的体内抑制肺癌转移的效果。对正常动物免疫保护作用更加明显。

关键词: 树突细胞 肺癌, 黄芪注射液

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2005年02月25日

【期刊论文】两步法从脐血CD34+细胞获得大量树突细胞的初步研究

邱录贵, 王亚非, 李茜, 孟恒星, 于珍, 刘津华, 崔雯, 周余, 麦玉洁, 尤胜国

中华血液学杂志,2004,25(2):70~73,-0001,():

摘要

目的 探索利用先扩增后诱导的“两步法”从脐血(CB)CD34+细胞高效大量地获得树突细胞(DC)。方法 疫磁珠法从CB分选获得CD34+细胞,以干细胞因子(SCF)、IL23、Flt23配体(FL)、Tpo组合刺激,扩增7d、10 d和14d(依次为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组) 后以GM-CSF+IL-4+TNF-α诱导8d或5d获得DC,通过相差显微镜、电镜观察形态,流式细胞仪检测表型,混合淋巴细胞培养、ELISA法检测培养液上清IL-12含量评价其功能。结果 CBCD34+细胞经SCF+IL-3+FL+Tpo刺激扩增7d、10d 和14d后细胞总数分别扩增了(53.39±20.59)倍、(307.17±119.59)倍和(1117.25±335.49)倍。经GM-CSF+IL-4+TNF-α诱导8d后所得CD1a+细胞是扩增前细胞数的(21.40±16.70)倍、(143.20±60.35)倍和(150.80±42.16)倍,Ⅱ、Ⅲ组明显多于Ⅰ组(P<0.05),但Ⅱ、Ⅲ组间无显著性差异(P>0.05)。所得DC的形态、表型及刺激异基因T细胞增殖能力、IL-12分泌量,三组无显著性差异(P>0.05)。当诱导时间缩短至5d时,各组DC功能均显著下降(P<0.05)。结论 CBCD34+细胞扩增7~10再诱导8d可以高效大量获得具有正常功能的DC,而扩增时间超过10d并不能显著增加DC产量,诱导时间少于 8d将降低所得DC的功能。

关键词: 树突细胞 胎血, 造血干细胞, 体外扩增, 诱导

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2009年03月30日

【期刊论文】核因子-kB对小鼠树突状细胞分化成熟及其体外刺激T细胞免疫反应的影响

钟翠平, 徐东亮, 唐孝达, 李博, 刘永, 张新华, 吴超群

中华器官移植杂志,2004,3(2):89-92,-0001,():

摘要

目的 探讨在小鼠树突状细胞(DC)成熟过程中核因子-kB(NF-kB)基因的作用。方法 应用特异性NF-kB寡聚脱氧核甘酸诱骗剂(NF-kBODNDecoys)阻断NF-kB活性,观察DC形态、细胞表面分子表达以及同种T淋巴细胞增殖反应的变化,了解NF-kB其因对DC成熟及免疫生物活性的影响。结果 NF-kBODNDecoys的有效摄取,抑制了DC表面共刺激分子CD80、CD86、CD40的表达和白细胞介素12(IL-12)的分泌,阻碍了DC的发育成熟,这种阻碍作用不可被脂多糖(LPS)所逆转。混合淋巴细胞反应显示,NF-kBODNDecoys的应用可诱导DC刺激同种T淋巴细胞低反应活性,抑制了T细胞IL-2和y-十扰素(IFN-y)的分泌。结论 NF-kB是DC发育成熟过程中关键性调控基因。应用NF-KbODNDecoys可抑制DC的成熟,从而为生成耐受原性未成熟DC、诱导移植免疫耐受提供了一种新的途径。

关键词: 核因子-KB, 寡核苷酸探针, 树突细胞 免疫耐受

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