您当前所在位置: 首页 > 学者
为您找到 11 条相关结果
按相关度
  • 按相关度
  • 按时间
  • 按阅读量
  • 代表性成果优先

上传时间

2011年04月25日

【期刊论文】猪雌激素受体基因(ESR)点突变的PCR—SSCP检测

姜运良, 李宁, 习欠云, 吴常信

遗传,2000,22(4):214 ~216,-0001,():

摘要

雌激素受体基因(ESR)是控制猪高产仔数的主效基因之一,具有明显的基因效应BB型比AA型母猪胎总产仔数和产活仔数分别高出1.40~3.37和0.63~3.58头。是目前商品猪育种和生产中重点检测的主要基因之一。常规采用PCR-RFLPs方法区分该基因由点突变造成的3种不同的基因型。本研究建立1种基于PcR的SSCP(single-stranded corformation polymorphism)方法对猪ESR该位置的点突变进行检测,具有操作简便、灵敏度高和不需要酶切等优点,可以在育种实践中广泛应用。

关键词: 猪, ESR基因, 点突变 PcR-SSCP

  • 29浏览

  • 0点赞

  • 0收藏

  • 0分享

  • 53下载

  • 0评论

  • 引用

上传时间

2011年02月18日

【期刊论文】古核嗜热菌组蛋白基因多点突变的新方法

冯雁, 翁梁, 纪昕, 王智, 刘丹, 马吉胜, 李娜, 曹淑桂, 冯雁*

药物生物技术,2002,9(5):264~266,-0001,():

摘要

嗜热菌组蛋白基因序列中精氨酸密码子在大肠杆菌中的表达率极低,限制了组蛋白的大量获得。运用分子生物学技术,在传统PCR定点突变技术的基础上进行改进,参照古核嗜热菌组蛋白基因序列和大肠杆菌偏爱密码子表,设计了一对含有5个精氨酸突变密码子的单链DNA,全长为115nt,在3'端有20nt互补序列。将单链DNA在94℃变性,45℃复性,使其互补结合,72℃进行延伸反应,得到含有突变位点的组蛋白基因;再以此基因为模板设计相应的一对引物进行PER扩增反应,得到大量组蛋白突变基因。该研究为一些序列已知,片段较小基因的多点突变提供了一种简单、易行的方法。

关键词: 点突变 聚合链式反应, 组蛋白

  • 13浏览

  • 0点赞

  • 0收藏

  • 0分享

  • 52下载

  • 0评论

  • 引用

上传时间

2011年02月18日

【期刊论文】植酸酶最新研究进展

冯雁, 康伟, 王智

《生命的化学》,2005,25(2):94~97,-0001,():

摘要

植酸酶是一种能广泛应用于食品、饲料和医药工业的商业酶。目前较多的研究工作是通过随机突变、定点突变和晶体结构对照来阐明植酸酶的反应机制以及重要氨基酸的贡献。并以此为基础对酶分子进行改造。其中真菌和细菌分泌的植酸酶的最适pH较低.能够应用于生物体内,因此具有很大的商业前景。

关键词: 植酸酶, 随机突变, 点突变 晶体结构

  • 24浏览

  • 0点赞

  • 0收藏

  • 0分享

  • 28下载

  • 0评论

  • 引用

上传时间

2009年01月28日

【期刊论文】煤层底板突水的突变理论预测方法及其应用

王凯, 位爱竹, 陈彦飞, 俞启香

中国安全科学学报,2004,14(1):011~015,-0001,():

摘要

基于煤层底板突水的尖点突变特征,应用突变理论的方法,针对煤层底板突水预测指标监测信号,分析了单变量序列尖点突变模型及其稳定判据,提出了煤层底板突水的突变理论预测方法。实例表明,预测结果与现场工程实际情况相一致,证明了该方法可望成为预测煤层底板突水危险性的一条新的有效途径。

关键词: 煤层底板突水, 突变理论, 点突变模型, 稳定判据, 预测

  • 16浏览

  • 0点赞

  • 0收藏

  • 0分享

  • 177下载

  • 0评论

  • 引用

上传时间

2007年05月29日

【期刊论文】大肠腺瘤、腺癌中DCC基因表达与201密码子点突变的研究

吴文溪, 伍世余

实用癌症杂志2004年5月第19卷第3期/The Practical Journal of Cancer, May 2004, Vol. 19, No. 3,-0001,():

摘要

目的:探讨国人大肠腺瘤、腺癌中结直肠缺陷(DCC)基因蛋白表达与该基因201密码子的突变情况,及其与大肠肿瘤临床病理因素的关系。方法采用免疫组织化学和PCR结合限制性酶切多态性分析(PCR-RFLP)方法,检测30例正常大肠黏膜、40例大肠腺瘤、46例大肠癌及相应癌旁黏膜组织中DCC基因蛋白表达及201密码子突变情况。结果DCC蛋白在正常大肠黏膜、腺瘤组织及癌组织中阳性表达率分别为100%、83%和28%,三者比较,均有显著性差异(P<0.05)。腺瘤伴重度不典型增生者DCC蛋白表达缺失率(55%)明显高于腺瘤伴轻、中度不典型增生者(3%)。Dukes C、D期大肠癌DCC基因蛋白表达缺失率明显高于Dukes A、B期。腺瘤伴重度不典型者201密码子突变率(64%)明显高于腺瘤伴轻、中度不典型增生者(21%)(P<0.05);大肠癌突变率最高达78%;Dukes C、D期大肠癌201密码子突变率明显高于A、B期;大肠癌DCC基因201密码子纯合突变率(50%)显著高于癌旁黏膜(6%),有显著性差异。201密码子突变与患者性别、年龄、肿瘤组织学分型等因素无关。结论大肠腺瘤向癌演变的过程中DCC基因201密码子突变率和蛋白表达缺失率逐渐增高,这与大肠癌的病情进展及转移能力增强有关。

关键词: 大肠腺瘤, 大肠癌, 结直肠癌缺陷基因, 点突变 免疫组织化学

  • 36浏览

  • 0点赞

  • 0收藏

  • 0分享

  • 53下载

  • 0评论

  • 引用

上传时间

2005年11月29日

【期刊论文】煤层底板突水突变模型*

王连国, WANG Lian-guo, SONG Yang

工程地质学报,2000, 8 (2):160~163,-0001,():

摘要

本文建立了煤层底板突水的一个尖点突变(cusp)模型,并分析了煤层底板失稳破坏发生突水的机制。基于定态曲面方程,可求得煤层底板水压应力比Ip。当Ip>1时,发生突水;当Ip<1时,不会发生突水。基于分支曲线方程,可求得煤层底板突水临界采动导水裂隙带深度h1l,当h1>h1l时,发生突水;当h1<h1l时,不会发生突水。

关键词: 煤层底板, 突水, 点突变模型

  • 11浏览

  • 0点赞

  • 0收藏

  • 0分享

  • 67下载

  • 0评论

  • 引用

上传时间

2005年11月29日

【期刊论文】基于尖点突变模型的煤层底板突水预测研究*

王连国, Wang Lianguo, Song Yang, Miao Xiexing

岩石力学与工程学报,2003,22(4):573~577,-0001,():

摘要

当煤层开采后,底板岩层承受的水压超过自身强度时,而发生的不连续的发散突变,即底板岩层失稳破坏形成底板突水的现象,属于突变理论研究的范畴,故煤层底板突水可以引用突变理论来研究。通过建立煤层底板突水的一个尖点(cusp)突变模型,对煤层底板失稳破坏发生突水的机理进行了分析。基于平衡曲面方程,可求得煤层底板水压应力比Ip。当Ip>l时,发生突水;当Ip<1时,不会发生突水。实例分析表明:尖点突变模型用于描述煤层底板水压应力比的发展规律是恰当的,用其进行煤层底板突水预测也是较准确的。

关键词: 采矿工程, 煤层底板, 突水, 点突变模型, 机理

  • 36浏览

  • 0点赞

  • 0收藏

  • 0分享

  • 59下载

  • 0评论

  • 引用

上传时间

2005年11月29日

【期刊论文】岩石渗透率与应力、应变关系的尖点突变模型

王连国, WANG Lian-guo, MIAO Xie-xing

,-0001,():

摘要

应用突变学理论,研究了试验全过程中渗透率与应力、应变之间的关系,建立了岩石渗透率与应力、应变关系的尖点突变模型。实例分析表明:尖点突变模型用于描述渗流条件下岩石应力、应变关系是恰当的。

关键词: 岩石力学, 渗透率, 应力, 应变, 点突变模型

  • 35浏览

  • 0点赞

  • 0收藏

  • 0分享

  • 293下载

  • 0评论

  • 引用

上传时间

2005年01月28日

【期刊论文】KatG基因点突变与结核分枝杆菌异烟肼耐药相关性研究

翁心华, 莫凌, 张文宏, 王骥, 庞茂银

中华传染病杂志,2004,22(2):94~97,-0001,():

摘要

目的 探讨过氧化氢酶编码基因(KatG)基因点突变和结核分枝杆菌异烟肼(INH)耐药性之间的关系,筛选相关位点用于筛查临床INH耐药株基基型。方法 采用三步法聚合酶链反应(PCR)对临床耐异烟肼菌株中发现的6个位点进行定点诱变,用含诱变基因的pET24b质粒转化大肠埃希菌BL21菌株,在异丙基硫代-D半乳糖苷(IPTG)导下表达,使用镍亲和柱和Q-琼脂糖快速流动凝胶纯化各KatG诱变蛋白并测定其过氧化氢酶和过氧化物酶活性。结果 完成KatG基因6个位点的诱变及相应诱变蛋白的表达和纯化,过氧化氢酶、过氧化物酶活性测定发现,3个诱变蛋白[KatG(W321G)、KatG(R418Q)和KatG(A456S)]基本失活,其余3个诱变蛋白的活性亦有不同程度下降。结论 所引入的6个突变均可造成KatG蛋白过氧化氢-过氧化物酶活性下降,与结核分枝杆菌1NH耐药有关,可用于筛查临床INH耐药株基因型。

关键词: 分枝杆菌,, 结核, 过氧化氢酶, 点突变诱变,, 定点, 异烟肼,, 抗药性,, 微生物

  • 18浏览

  • 0点赞

  • 0收藏

  • 0分享

  • 70下载

  • 0评论

  • 引用

上传时间

2005年02月25日

【期刊论文】抗真菌蛋白Rs-AFP2基因定点突变及其对大肠杆菌中表达的影响①

杨志荣, 朱建清****②, 刘柱***, 胡新文**③, 杨志荣*

高技术通讯,2003,4:18~23,-0001,():

摘要

为了研究遗传密码子对表达调控的影响,利用PCR重叠延伸法,对萝卜抗真茵蛋 白Rs-AFP2基因编码序列区的部分核苷酸进行沉默突变,构建突变体Rs-AFPm。序列分析 表明,PCR产物全长240bp,有一个阅读框,编码的蛋白由29个氨基酸的信号肽和51个氨 基酸的抗真菌蛋白组成。突变体与突变前的Rs-AFP2基因相比,在编码区第3号氨基酸 LyS相差一个碱基(17FG→TTA),第5号氨基酸Gln相差一个碱基(CAG→CAA),第6号稀有密码子Arg相差两个碱基(CAG→CGA)。重新合成引物,将切除信号肽的Rs-AFP2基因 和Rs-AFPm基因与原核表达载体pET-2lb(+)分别重组到大肠杆菌BL21菌株。IPTG诱 导后,二者均得到了表达。软件分析显示,突变前pETAFPo表达产物占全菌蛋白的3%,突 变后pETAFPm的表达产物占全茵蛋白含量的8%;表达蛋白主要以包涵体的形式存在,包涵体经超声波破碎后,蛋白质复性,抑菌结果表明,pETAFPm表达产物的抑菌半径大于 pETAFP2表达产物的抑菌半径。这些都说明改造后的Rs-AFPm基因与Rs-AFP2基因相 比,已有效地提高表达量。

关键词: 萝卜抗真菌蛋白(, Rs-AFP2), ,, 点突变,, 密码偏爱性,, 表达

  • 28浏览

  • 0点赞

  • 0收藏

  • 0分享

  • 116下载

  • 0评论

  • 引用

上传时间

2005年02月25日

【期刊论文】耐氟康唑白念珠菌ERG11的基因突变

张永信, 龙丰, 兰和魁, 王荫榆, 朱德妹, 任大明

中华传染病杂志,2002,20(4):211~214,-0001,():

摘要

目的研究国内临床耐氟康唑白念珠菌的吡咯类药物作用靶酶——细胞色素P-450羊毛固醇14-a脱甲基酶的基因ERG11突变。方法用酶消化和碱裂解法抽提基因组DNA,PCR扩增ERG11基因的读码框片段,将目的片段与PBS载体(Bluscript M13)连接,重组体转入DH5a中,从而测定序列。结果在15株耐药菌中共发现了12个有义点突变、17个无义点突变和一个菌株的部分移码。12个有义点突变的氨基酸变异是F72L、D81G、D116E!K128T、Y132H、E266D、D294G、S361P、M374V、P386L、H400R和Q474K,突变主要靠近羧基端;而敏感株的氨基酸变异为F72、K128T和E266D,靠近氨基端。耐药株的D294G、S361P、M374V、P386L、H400R和Q474K氨基酸变异与文献报道不同。结论耐药株和敏感株的点突变不同,D294G、S361P、M374V、P386L、H400R和Q474K变异位点可能与耐药性有关,做整段编码基因的功能表达,有助于明确变异与耐药的关系。

关键词: 念珠菌,, 白色, 细胞色素P-450, 羊毛甾醇14a去甲基化酶, ERG11基因, 点突变

  • 21浏览

  • 0点赞

  • 0收藏

  • 0分享

  • 93下载

  • 0评论

  • 引用