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2009年04月28日

【期刊论文】神经元样细胞与控释神经营养因子联合移植对脊髓损伤猴后索结构修复和功能恢复的作用***★

邓宇斌, 刘晓刚, 刘祖国, 朱文标, 王建云, 张成

中国临床康复,2005,7(26):96~100,-0001,():

摘要

目的:探讨骨髓间质干细胞源性神经元样细胞与胶质细胞源性神经营养因子控释生物材料联合移植治疗猴急性脊髓损伤过程中,对后索结构修复与功能恢复的影响。方法:实验于2004-03/11在中山大学附属第一医院实验动物中心完成。选择雄性恒河猴8只,随机分为2组,每组4只。制作猴脊髓损伤模型后损伤治疗组植入3.0×106个/kg神经元样细胞与含2μg胶质细胞源性神经营养因子的单甲氧基聚乙二醇聚乳酸嵌共聚体用200μL磷酸盐缓冲液制成悬液,损伤对照组给予等体积磷酸盐缓冲液;各组动物分别于术前和治疗后四五个月进行皮质体感诱发电位检测;处死动物前3周将TmeBlue注射到脊髓损伤部位下界下部后索部位,制备石蜡切片应用苏木精一伊红染色观察脊髓损伤处脊髓后角的组织形态学改变。应用甘氨酸银浸镀法染色观察后索结构。结果:8只恒河猴全部进入结果分析。(1)两组动物皮质体感诱发电位结果:脊髓损伤后,皮质体感诱发电位信号消失,治疗后四五个月与治疗前比较,损伤治疗组潜伏期无明显延长。损伤治疗组波幅降低度明显低于损伤对照组[(3.78土1.32)μV,(9.85土0.84)μV,t=-11.194,P<0.01]。②病理结果表明,损伤治疗组后角轻度胶质增生;损伤对照组后角神经元少见,胶质浸润。③脊髓后索神经纤维密度和积分吸光度值:损伤治疗组后索神经纤维密度明显高于损伤对照组[(1338±276)个/视野,(574±168)个/视野,t=4.734,P<0.01];积分吸光度值高于损伤对照组(9966.73±3753.78,4323.25±1040.92,t=2.897,P<0.05)。④荧光显微镜下,损伤治疗组大脑皮质躯体感觉区(对侧)存在蓝色荧光阳性细胞,损伤对照组无此现象。结论:①注射骨髓问充质神经元样细胞与控释胶质细胞源性神经营养因子的恒河猴皮质体感诱发电位的潜伏期基本正常,波幅降低,表明其本体感觉获得了一定程度恢复,同时说明波幅的变化在判断脊髓损伤方面比潜伏期更敏感。②后角神经元明显增多,说明骨髓间充质神经元样细胞与控释胶质细胞源性神经营养因子可以促进脊髓损伤猕猴后索组织结构的修复。

关键词: 脊髓, 神经组织蛋白质类, 诱发电位, 生物相容性材料, 猕猴

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2006年11月15日

【期刊论文】用去细胞同种异体神经构建猕猴组织工程化神经的实验研究

刘小林, 许扬滨, 胡军, 江长青, 杨光诗, 朱家恺

中华显微外科杂志,2005,28(2):136~139,-0001,():

摘要

目的评价用自体源骨髓问充质干细胞(MSCs)或许旺细胞(SCs)作种子细胞,与去细胞同种异体神经构建的组织工程化外周神经修复猕猴尺神经4cm缺损的实验效果,为临床研究提供资料。方法分别用4种移植物桥接猕猴4cm尺神经缺损。A组:种植自体MSCs的去细胞同种异体神经;B组:种植自体SCs的去细胞同种异体神经;C组:去细胞同种异体神经;D组:自体神经移植、通过功能学、神经电生理学及组织学指标评价各组修复神经缺损的效果。结果A、B组术后6个月能引起小鱼际肌群产生复合动作电位的潜伏期、复合动作电位的最大振幅、神经传导速度和再生的神经纤维数目与自体神经移植组相比无统计学意义(P>0.05);但A、B、C、D组分别与C组相比,差异有统计学意义(P>0.05)?结论用自体源SCs或MSCs作种子细胞,与去细胞同种异体神经构建的组织工程化外周神经修复猕猴4cm尺神经缺损,均能取得与自体神经移植相近的效果。

关键词: 组织工程, 外周神经, 神经移植物, 化学萃取, 猕猴

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2006年11月15日

【期刊论文】猕猴骨髓问充质干细胞与去细胞神经优化人工神经的体外构建

刘小林, 杨光诗, 许扬滨, 朱家恺, 朱庆棠

中华显微外科杂志,2005,28(1):35~38,-0001,():

摘要

目的探讨猕猴骨髓间充质干细胞作为种子细胞与去细胞同种异体神经作为支架,体外构建人工神经的研究。方法采用密度梯度离心的方法分离并培养猕猴骨髓间充质干细胞,利用相差显微镜观察细胞生长情况并描绘其生长曲线;取猕猴3段4cm的周围神经,其中2段用4%triton-X-100及4%脱氧胆酸钠液分别萃取1次和2次,在新鲜神经和萃取神经中段取材,组织学检测及电镜学观察萃取前后的形态学变化;采用显微注射的方法把猕猴骨髓间充质干细胞种植到萃取两次的异体神经内,HE染色观察细胞在支架内的生长情况。结果猕猴骨髓间充质干细胞自我增殖能力强;萃取1次的异体神经细胞及髓鞘结构仍部分存留,而萃取2次的其细胞及髓鞘结构消失;HE染色可见细胞在萃取2次的异体神经内可爬行生长。结论猕猴骨髓间充质干细胞与化学萃取的去细胞同种异体神经适合体外构建人工神经。

关键词: 骨髓间充质干细胞, 组织工程, 去细胞神经, 猕猴

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2006年11月15日

【期刊论文】构建猕猴组织工程化周围神经的实验研究

刘小林, 胡军, 朱庆棠, 许扬滨, 朱家恺

中华创伤骨科杂志,2005,7(12):1152~1156,-0001,():

摘要

目的评价组织工程化周围神经修复猕猴4cm尺神经缺损的实验效果,为临床研究提供资料。方法分别用6种移植物桥接4cm尺神经缺损。A组:自体BMSCs+去细胞同种异体神经支架;B组:自体SCs+去细胞同种异体神经支架;c组:自体BMSCs+PLGA支架导管;D组:去细胞同种异体神经支架;E组:PLGA支架导管;F组:自体神经。通过功能学。神经电生理学及组织学研究评价各自的实验效果。结果A、B、c三种组织工程化神经实验组,术后6个月神经电生理和组织学检查,能引起小鱼际肌群产生复合动作电位的潜伏期、复合动作电位的最大振幅、神经传导速度和再生的神经纤维数目与自体神经移植组(F组)相比差异无显著性意义(P>0.05),但分别大于未加细胞的支架组(D、E组),差异有显著意义(P<0.05)。结论用自体源scs或BMSCs作种子细胞与去细胞同种异体神经支架,或自体源BMSCs与PLGA支架导管构建不同的组织工程化周围神经,修复猕猴4cm尺神经缺损均取得较好的效果。

关键词: 组织工程, 周围神经, 神经移植, 猕猴

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2006年11月15日

【期刊论文】猕猴骨髓基质干细胞体外培养及其生物学特性的研究

刘小林, 胡军, 朱家恺, 邓宇斌, 向剑平, 王建云, 邹一丰

中华显微外科杂志,2004,27(2):113~117,-0001,():

摘要

目的通过体外分离、培养猕猴骨髓基质干细胞(BMSCs),研究其生物学特性、表面标志和遗传学性能,为BMSCs用作组织工程化神经种子细胞提供研究基础。方法通过密度梯度离心分离猕猴BMSCs,体外培养、扩增,用倒置相差显微镜进行形态学的观察,通过绘制生长曲线、计算克隆形成率来研究细胞的活力和增殖能力,流式细胞仪检测表面标志,核型分析反应遗传学性能。结果密度梯度离心的方法能获得较纯的猕猴BMSCs,第7代以前的细胞有较强的活力和增殖能力,具有与人的BMSCs相似的形态和表面标志,体外培养第10代细胞仍稳定为二倍体核型。结论用本实验方法能较容易地获得大量的猕猴BMSCs,具有与人的BMSCs相似的形状和表面标志,第3-6代的细胞可满足以猕猴为动物模型的组织工程化神经种子细胞的研究要求。

关键词: 猕猴 骨髓基质干细胞, 细胞培养

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2005年05月17日

【期刊论文】高温胁迫对猕猴桃幼苗叶片某些生理效应的影响*

马锋旺, 耶兴元, 王顺才, 梁东

西北农林科技大学学报(自然科学版),2004,32(12):33~37,-0001,():

摘要

在45℃下对猕猴桃一年生盆栽苗进行2,4,6,8,10h的高温胁迫,测定高温胁迫下叶绿素含量、相对膜透性、丙二醛(MDA)含量、抗氧化酶活性和抗氧化剂含量及热激蛋白等生理生化指标。结果表明,高温胁迫下叶绿素含量下降,相对膜透性增大,MDA 含量增加; 超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸还原酶(APX)活性均在胁迫初期呈上升趋势,随处理时间延长,活性下降;随胁迫时间延长,还原型谷胱甘肽(GSH) 含量先升后降,抗坏血酸(ASA)含量总体呈下降趋势,谷胱甘肽还原酶(GR)和脯氨酸含量一直呈上升趋势;热激蛋白(HSP)在高温下被诱导。

关键词: 高温胁迫, 猕猴桃, 幼苗叶片, 生理效应

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2005年01月19日

【期刊论文】超滤在猕猴桃汁澄清中的应用

李元瑞, 师俊玲, 程江峰

《食品工业科技》,1999,32(1):20~22,-0001,():

摘要

用膜材质为聚砜的中空纤维膜超滤澄清猕猴桃汁的试验表明,用超滤法生产的猕猴桃清汁,透光率可达99%,Vc保存率高,果汁褐变程度小且操作简单,所需时间短。

关键词: 超滤, 中空纤维膜, 澄清, 猕猴桃果汁

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2005年01月19日

【期刊论文】果胶酶在猕猴桃果汁澄清中的应用研究

李元瑞, 王鸿飞, 师俊玲

西北农业大学学报,1999,27(3):107~109,-0001,():

摘要

应用果胶酶澄清猕猴桃果汁的试验结果表明,果胶酶使用的最小剂量为90μL/L,最适pH为3~3.5,最适温度为40~50℃;用此澄清工艺条件所得猕猴桃清汁的透光率可达96%,营养成分损失较小。

关键词: 澄清工艺,, 果胶酶,, 猕猴桃果汁

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