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2009年07月14日

【期刊论文】T3对人神经干细胞分化为少突胶质细胞的影响

李兰英, 刘奔, 刘春蓉, 庞智玲

解剖学报,2003,34(2):213~216,-0001,():

摘要

目的 以体外诱导生成的人神经干细胞(NSCs)为模型,研究甲状腺激素(TH)对其分化的影响。方法 无菌状态下取因治疗目的而终止妊娠的胎龄10-22周的人胎大脑半球,机械法分散细胞后,以105个/ml细胞密度接种于含N-2配方的DMEM/F12培养基中,同时添加表皮生长因子(EGF,20μg/L)和/或碱性成纤维生长因子(bFGF,20μg/L)。采用自然分化以及T3诱导的方法诱导分化,免疫组织化学方法鉴定分化后的细胞类型,抗体分别为NF-200、GFAP、Ga1-C,并采用抗MBP、O4、A2B5抗体鉴别少突胶质细胞发育的不同阶段。结果 T3有助于向胶质细胞方向发展。包括少突与星形胶质细胞,MPB阳性细胞比例超过80%,尤其在EGF+T3组,这种现象更为突出。结论 NSCs的定时分化是内外源信号共同作用的结果。TH就是这样一种信号,激活“生物钟”机制的效应组件。在有限次的分化后诱导NSCs分化为少突胶质细胞。

关键词: 神经干细胞, 甲状腺激素 表皮生长因子, 碱性成纤维生长因子, 少突胶质细胞

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2009年07月14日

【期刊论文】T3对人神经干细胞分化过程中甲状腺激素受体表达的影响

李兰英, 刘春蓉, 刘奔, 臧晓怡, 陈祖

中国内分泌代谢杂志,2003,19(5):348~350,-0001,():

摘要

目的 探讨三碘甲状腺原氨酸(T3)在神经干细胞(NSC)分化中的作用以及甲状腺激素受体(TR)mRNA在NSC分化过程中的表达变化。方法 在体外成功诱导扩增NSC,用T3对NSC进行诱导分化,半定量RT-PCR法检测NSC在分化前后TRsmRNA的表达变化,免疫细胞化学方法鉴定分化后的细胞类型。结果 T3可诱导NSC分化为神经元、少突和星形胶质细胞,其中髓鞘碱性蛋白(MBP)阳性细胞约占80%。当NSC分化时存在不同的TRsmRNA的时间顺序表达。结论 T3能诱导NSC向胶质细胞分化,是少突胶质细胞分化的重要调控因子,并通过TRs的时间顺序表达来发挥其重要生理作用。

关键词: 三碘甲状腺原氨酸, 神经干细胞, 受体,, 甲状腺激素

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2009年07月14日

【期刊论文】人胎脑发育早期甲状腺激素受体mRNA的表达

李兰英, 刘春蓉, 李兰英*, 刘奔, 臧晓怡, 苗军, 陈祖培

解剖学报,2003,34(6):667~670,-0001,():

摘要

目的 动态观察甲状腺激素受体(TRs)mRNA在人脑发育过程中的表达变化。方法 用RT-PCR半定量法检测3、5月龄人胎各脑区TRsmRNA表达变化。结果 3、5月龄人胎大脑、小脑、海马、丘脑、脑干及脊髓均有TRsmRNA表达,其中3月龄胎脑各脑区TRsmRNA表达以TRα1、TRα2为主,TRβ1次之。5月龄胎脑各脑区TRsmRNA表达中以TRβ1、α2为主,TRα1次之。TRsmRNA在大脑、小脑、海马处表达相对丰富。实验中发现的与TRα2始终伴行的特异条带经测序证实,除在371-412位氨基酸处比TRα2少42个氨基酸,余序列两者完全相同。结论 在脑发育过程中,TRsmRNA呈时空性表达,参与调节CNS的分化、成熟。首次验证了人TRα3与TRα2编码区的差异序列。

关键词: 甲状腺激素受体, RT-PCR, 人胎脑

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2009年07月14日

【期刊论文】TSH和高碘对FRTL细胞甲状腺激素合成相关基因表达的影响

李兰英, 孙云, 聂秀玲, 陈祖培

中国地方病学杂志,2005,24(3):255~257,-0001,():

摘要

目的 观察不同浓度TSH和高碘对FRTL细胞钠/碘转运体(NIS)mRNA、甲状腺过氧化物酶(TPO)和甲状腺球蛋白(Tg)基因表达的影响。方法 采用FRTL细胞系,用不含有TSH的培养基培养7d后,用不同水平TSH(0.1、0.5、1、10、50、100U/L)刺激。培养24h后,检测3种基因NIS、TPO、Tg的mRNA水平。高碘组按照10-7、1O-6、10-4、1O-3、mol/L的碘离子浓度加入培养基,在第24和48小时,收集细胞,检测3种基因NIS、TPO、Tg的mRNA水平。结果 TSH刺激24h后,FRTL细胞内NIS、TPO、Tg基因表达都伴随TSH水平的升高而上升。TSH从0.1U/L开始就对NIS基因表达增加有显著性影响(P<0.05),TSH对TPO基因表达的刺激从1U/L开始有显著性影响。TSH对Tg基因表达的作用从0.1U/L开始就有刺激作用(P<0.05)。高碘组对细胞这3种基因的表达没有刺激作用。结论 TSH对FRTL细胞系产生甲状腺激素具有明显的刺激上调的作用。但高碘对该细胞3种基因的表达没有上调的作用。

关键词: 碘, FRTL细胞系, 甲状腺激素 钠碘转运体, 甲状腺球蛋白, 甲状腺过氧化物酶

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