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2011年05月03日

【期刊论文】细胞周期依赖性蛋白激酶5/p35在2, 5-己二酮中毒大鼠神经组织中的表达

谢克勤, 王青山, 侯丽艳, 张翠丽, 曾涛, 杨曦伟

中华劳动卫生职业病杂志,2008,26(6):336~340,-0001,():

摘要

目的探讨细胞周期依赖性蛋白激酶5(CDK5)在2,5-己二酮(HD)中毒性周围神经病发病过程中的作用。方法30只雄性Wistar大鼠,随即分为对照组、200mg/kgHD染毒组和400mg/kgHD染毒组,每组10只。染毒途径为腹腔注射,每周5次,连续8周,建立HD中毒性神经病模型。利用Westernblotting方法检测大脑、脊髓和坐骨神经胞浆蛋一和膜蛋白中CDK5、p35和p25的相对含量。结果与对照组相比,P35蛋白含量在200、400mg/kgHD染毒大鼠大脑和脊髓胞浆蛋白组分中明显降低,而在脊髓和坐骨神经膜蛋白组分中含量明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);p25变化趋势与p35基本一致。CDK5在200、400mg/kgHD染毒大鼠大脑胞浆和膜蛋白中均明显下降;除坐骨神经膜蛋白组分中未检出外,在脊髓和坐骨神经中CDK5含量明显升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论HD中毒后大鼠神经组织中CDK5及其激活因子p35和p25发生明显改变,这种改变可能与HD中毒性周同神经病的发病机制有关。

关键词: 己烷类, 细胞周期蛋白质依赖激酶类, 神经组织

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2011年04月29日

【期刊论文】深Ⅱ度烫伤大鼠创缘皮肤组织中表皮细胞增殖的研究

陆树良, 谢挺, 牛轶雯, 葛奎, 田鸣, 董炜, 青春, 史济湘

中华烧伤杂志,2005,24(2):128~131,-0001,():

摘要

目的 观察大鼠深Ⅱ度烫伤后创缘皮肤组织中表皮细胞的增殖活动规律,探讨其可能机制。方法 将24只SD大鼠随机分为正常组(未烫伤)、烫伤后3d组、7d组及14d组,每组6只。采集正常组大鼠皮肤及烫伤大鼠创缘皮肤,观察其表皮组织学特征;用流式细胞仪检测表皮细胞的细胞周期;蛋白印迹法检测表皮细胞增殖调节因子细胞周期素(cvclinD1、cvclinB1)和细胞周期素依赖性激酶(CDK)4的表达水平,并测定M期促进因子(MPF)的组蛋白激酶活性。结果 组织学观察显示,伤后3d组大鼠创缘表皮细胞核及核仁较正常组增大;伤后14d组胞核及核仁增大明显,细胞数显著增多。伤后14d组S期表皮细胞百分比出现上升趋势;G2/M期百分比自伤后3d起逐渐升高,伤后7、14d组(4.5±0.6、5.4±1.0)显著高于正常组(2.9±1.1,P<0.05)。cyclinD1表达量伤后3d即明显增高;cvcllnB1表达无显著波动。伤后3d组的CDK4表达水平较低,14d组开始回升。伤后14d组表皮细胞MPF活性显著增强。结论 在细胞周期调控因子作用下,大鼠深Ⅱ度烫伤后皮肤组织中表皮细胞在伤后早期即出现DNA合成及有丝分裂的增加,伤后14d增殖明显活跃。cyclinD1/CDK4复合物的表达及MPF的活性在伤后早期并未同步增高,但自伤后14d起其表达显著增多,提示创面愈合过程中细胞周期调控因子的调控规律具有特殊性。

关键词: 烧伤, 细胞周期, 表皮细胞, 增殖, 细胞周期蛋白

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2009年11月20日

【期刊论文】人脑胶质母细胞瘤细胞系SHG-44中血管生成因子和细胞周期调控因子的表达

卞修武, 陈自强, 郭德玉, 杜林林, 辛榕, 史景泉

中华病理学杂志,1999,28(3):178~179,-0001,():

摘要

目的探讨人脑胶质母细胞瘤细胞系SHG-44长期传代后的某些生物学特性和免疫表型特征。方法采用免疫组织化学和原位杂交技术对SHC-44细胞增殖活性。中间丝蛋白共存、肿瘤蛋白、血管生成因子和细胞周期调控相关蛋白表达水平进行检测。结果传代l30-150代的SHC-44细胞呈腔质纤维酸性蛋白弱阳性而波形蛋白强阳性:Ki-67、增殖细胞核抗原平均标记指数分别为83.5%±10.2%、70.0%±18.7%. p21 ras、c-erb B-2、表皮生长因子及其受体、碱性成纤维细胞生长因子受其受体FGFR均显过度表达。血管内皮生长因子(VEGF)厦VEGF mR\A的表达情况亦相似。该细胞还具有诱导型一氧化氮合酶表达和p16. p53、周期素依赖性激酶4、cyclin D1蛋白积聚(平均标记指数分别为43.1%±11.2%、30.7%±6.6%、33.1%±11.4%和29.8%±4.7%)。结论SHC-44细胞存在上述生长因子、肿瘤蛋白表达异常和细胞周期的失控。使SHC-44细胞生长旺盛。增殖活性高,并且血管生成能力强,具有很高的恶性表型。

关键词: 神经胶质瘤 肿瘤细胞培养的 虚构生成因子 细胞周期蛋白质类

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2009年06月02日

【期刊论文】粘液表皮样癌中热休克蛋白70和细胞周期调节蛋白p27表达与预后的研究

张引成, 张政华, 刘军

中华口腔医学杂志,2001,36(6):471~474,-0001,():

摘要

目的 研究热休克蛋白70(heat shock proteins 70,HSP70)和细胞周期调节蛋白p27在粘液表皮样癌(mucoepidermoid carcinoma,MEC)中的表达及其与临床病理特征的关系和对预后的影响。方法 应用免疫组化LSAB 法检测44 例MEC 中HSP70 和p27 表达,选用10例多形性腺瘤(plemorphic adenomas,PAs)作对照。结果 HSP70 在MEC 中表达明显高于在PAs中(P<0.05)。p27在MEC中表达显著低于在PAs中(P<0.01)。在MEC和PAs中,HSP70和p27表达呈负相关(P<0.05)。在MEC中,HSP70表达与肿瘤组织学分级、临床分期、肿瘤大小呈正相关(P<0.05),p27表达与组织分级、临床分期、肿瘤大小和淋巴结转移呈负相关(P<0.05)。多因素生存分析显示HSP70表达与不良预后显著相关。结论 HSP70可能是MEC独立的预后预测指标,p27对MEC预后预测有一定意义。

关键词: 癌,, 粘液表皮样, 热休克蛋白质类, 细胞周期蛋白质类

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2009年08月17日

【期刊论文】胶质瘤细胞周期蛋白、p53表达和DNA含量分析

赵世光, 李力仙, 叶远柱, 滕雷, 甄云波, 邹慧超, 刘恩重

中华神经外科疾病研究杂志2004,3,(2):153~154,-0001,():

摘要

本研究在手术中应用激光扫描细胞计数仪(laser scanning cytometry,LSC)分析胶质瘤细胞的DNA含量和细胞周期,并结合术中病理诊断,来判断肿瘤恶性程度和决定切除范围,术后对同一标本用免疫组化分析细胞周期蛋白(Cyclin)B1、D1和p53的表达。

关键词: 胶质瘤, 细胞周期蛋白 P53

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2009年08月17日

【期刊论文】As2O3对不同p53 表型的人胶质瘤细胞系细胞周期蛋白B1、D1表达的影响

赵世光, 李力仙, 张建华, 叶远柱, 甄云波, 滕雷, 邹慧超, 刘恩重, 河本圭司

中华神经外科杂志2004,20,(3):202~206,-0001,():

摘要

目的 研究三氧化二砷(As2O3)对两种不同p53表型的人胶质瘤细胞系(U87MG和T98G)胞周期蛋白B1、D1表达及细胞周期的影响。方法 应用激光扫描细胞计数分析仪(LSC),共聚焦显微镜以及Westem印迹分析等方法检测As2O3对细胞周期蛋白B1、D1和p53 及细胞周期的作用。结果 As2O3能使两个胶质瘤细胞系的p53 蛋白水平升高,细胞周期蛋白B1表达降低及G2/M期俘获,但仅U87MG细胞的细胞周期蛋白D1表达下降。As2O3还能诱导U87MG细胞凋亡。结论 体外低浓度的As2O3能有效地抑制U87MG和T98G 细胞增殖,提示As2O3有希望用于神经胶质瘤患者的治疗。

关键词: 三氧化二砷, 胶质瘤, 细胞周期, 细胞周期蛋白 p53

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2007年05月14日

【期刊论文】卵巢上皮性肿瘤p27kip1及细胞周期蛋白E的表达及临床意义

郑建华, 邵茵, 孙茹欣

哈尔滨医科大学学报2004年2月第38卷第1期/JOURNAL OF HARBIN MEDICAL UNIVERSITY Feb., 2004, Vol. 38, No. 1,-0001,():

摘要

目的 检测p27kip1和细胞周期蛋白E(Cyclin E) 在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其与卵巢癌临床病理参数之间的关系。方法 应用免疫组化SP法检测24例良性卵巢肿瘤以及52例恶性卵巢上皮性肿瘤中p27kip1 和Cyclin E的表达情况,并分析它们与临床病理参数之间的关系。结果 同良性卵巢肿瘤组织相比,卵巢癌组织中p27kip1的表达显著降,Cyclin E的表达则明显增高,差异均有显著性。p27kip1阴性表达与卵巢上皮性肿瘤低组织分化,淋巴结转移有关( P < 0. 05),Cyclin E阳性表达与卵巢上皮性肿瘤的临床分期、腹水及淋巴结转移有关( P <0. 05)。结论 p27kip1和Cyclin E的表达与卵巢上皮性肿瘤的发生、发展及恶性程度密切相关,可作为估计卵巢肿瘤恶性程度和预后的重要指标。

关键词: 卵巢肿瘤, p27kip1, 细胞周期蛋白E, 免疫组织化学

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2006年10月18日

【期刊论文】大鼠混合反流模型中COX-2、PCNA、Cyclin D1的表达

龚均, 汪涛, 陈谦, 王进海

Journal of Xi'an Jiaotong University (Medical Sciences) Vol.26 No.5 Oct. 2005,-0001,():

摘要

目的 探讨环氧合酶-2 (COX-2)、增殖细胞核抗原(PCNA)及细胞周期蛋白D (Cyclin D1)这3项指标在反流性食管炎的发生、发展及癌变过程中的变化情况。方法 健康SD大鼠54只,随机分为2组:反流模型组46只,正常对照组8只。分别观察反流模型组术后5、17、28、4O周,正常对照组40周时食管黏膜的病理变化,检测COX-2、PCNA、Cyclin D1的表达情况。结果 在反流性食管炎的发展过程中,COX-2、PCNA、Cyclin D1从正常一反流性食管炎(RE) Barrett食管(BE) 食管腺癌(EAC)的阳性表达率分别为0.0%、42.1%、73.7%、100.0%;0.0%、42.1% 、63.2%、100.0%;12.5%、42.1%、63.2%、100.0%。COX-2、PCNA、Cyclin D1的表达程度逐渐增强。RE、BE、EAC的表达明显高于正常对照(P<0.05),RE与BE、EAC间有显著性差异(P<0.05),BE和EAC间无统计学差异可能是EAC的例数较少。结论 在混合反流造成黏膜损伤形成RE的同时,cox-2、PCNA 和Cyclin D1的表达增强,并随病程的发展逐渐增强。说明 COX-2、PCNA 和Cyclin D1基因的高表达参与了从RE BE EAC的发展过程,是BE、EAC发生、发展的早期分子事件。

关键词: 反流性食管炎(, RE), Barrett食管(, BE), 食管腺癌(, EAQ), 环氧合酶-2(, COX-2), 增殖细胞核抗原(, PCNA), 细胞周期蛋白D1 (, Cyclin D1),

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2005年03月16日

【期刊论文】永生化人晶状体上皮细胞细胞周期调控相关基因表达的检测

曾骏文, 吴明星, 李绍珍, 高劲松, 刘奕志

中华眼科杂志,2002,38(6):367-372,-0001,():

摘要

目的 探讨人类晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)周期调控中的细胞周期蛋白E、细胞周期蛋白激酶(cyclin dependent kinase 2,CDK2)和细胞周期蛋白激酶抑制因子(cyclindependent2kinase inhibitor,CKI) p21基因的表达,阐明HLEC增殖和晶状体后囊膜混浊(posterior capsule opacification,PCO)的分子机制。方法 体外培养永生化HLEC系HLE-B3,用二步过量胸苷阻断法进行细胞周期同步化;流式细胞仪检测细胞周期;收集不同时相的细胞提取总RNA。用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测细胞周期蛋白E、CDK2和p21的mRNA表达;分别用免疫组织化学染色和Western blot法检测细胞周期蛋白E和CDK2及p21的蛋白表达。结果 流式细胞仪检测:HLE-B3细胞周期处于G1期,占33.5%;S期,占46.1%;G2期,占20.4%;处于S期及G2期细胞的比例约占总数的66.5%。RT-PCR检测:可见不同周期时相的HLE-B3细胞(细胞周期蛋白E和CDK2)mRNA的表达,但在不同步化的细胞时相中未检测出细胞周期蛋白E的表达。而在同步化的S期细胞中有少许p21mRNA表达。免疫组织化学染色未检测出细胞周期蛋白E阳性细胞,仅可检测出少部分p21阳性细胞。Western blot法检测结果:CDK2阳性表达以S期细胞明显,G1期和G2期略低于S期表达。不同步化细胞也有CDK2的表达。提示细胞周期蛋白E、CDK2与p21的mRNA蛋白表达不平衡。结论体外培养HLE-B3细胞周期过程中存在细胞周期蛋白E、CDK2和p21的表达,且存在表达不平衡。细胞周期蛋白E、CDK和CKI间的表达不平衡有可能是其体外增殖细胞周期分子机制之一。

关键词: 晶体, 上皮细胞, 细胞培养, 细胞周期蛋白E, 细胞周期蛋白质依赖激酶类

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2005年03月16日

【期刊论文】外源性细胞周期蛋白激酶抑制因子p21基因对人晶状体上皮细胞周期的影响

曾骏文, 吴明星, 李绍珍, 刘奕志

中华眼科杂志,2003,39(4):209-214,-0001,():

摘要

目的 研究细胞周期蛋白激酶抑制因子p21基因转染对人晶状体上皮细胞(lensepithelial cells,LEC)周期调控的影响,在基因水平探讨防治后发性白内障的可能性。方法 构建含人p21基因真核表达的载体质粒pcDNA3/p21,采用基因转染技术将质粒DNA转染至永生性人LEC系HLE2B3,使用流式细胞仪观察细胞生长和周期的变化,并采用逆转录聚合酶链式反应方法检测p21mRNA的表达;分别采用免疫组化和免疫印迹(western blotting,WB)方法检测p21蛋白的表达。结果 体外构建的载体质粒pcDNA3/p21经酶切鉴定含有人p21基因全长cDNA片段。基因转染后细胞HLE-B3,经传代培养,48h后出现缓慢生长且部分细胞漂浮死亡的现象,G1期细胞明显增多。与对照细胞比较,转染后细胞的p21mRNA表达明显增多;p21蛋白表达明显增强,在经筛选的阳性克隆细胞中WB方法可检测到相对分子质量为21000的阳性蛋白带。结论 外源性p21基因可在人LEC系HLE2B3中过度表达,并对细胞周期调控产生抑制作用。基因转染抑制LEC增殖可能成为防治后发性白内障的新途径。

关键词: 细胞周期, 细胞周期蛋白类, 转染, 上皮细胞, 晶体

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