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2011年05月27日

【期刊论文】番茄红素对非特异性免疫功能的体外实验研究

廖林川, 袁暾, 魏大鹏, 王霞, 蔡美英

营业卫生,2003,24(4):133~136,-0001,():

摘要

在细胞培养条件下,观察了番茄红素对机体非特异胜免疫的影响。结果发现适宜浓度番茄红素乙醇溶液对T淋巴细胞转化有促进作用(p<0.01)。适当浓度的番茄红素对NK细胞杀伤功能也有一定的促进作用(p<0.05)。说明番茄红素对非特异性细胞免疫的主要指标有明确的促进。其原因可能是保护了T淋巴细胞的DNA,避免了增殖过程中DNA复制时可能发生的损伤。番茄红素可以促进细胞胞间通信最终也表现为T淋巴细胞功能的促进。

关键词: 番茄红素, 细胞培养 非特异眭免疫, 氧自由基

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2011年05月03日

【期刊论文】2, 5-HD对大鼠DRG神经元神经丝蛋白表达的影响

谢克勤, 王蓣

毒理学杂志,2008,22(4):275~279,-0001,():

摘要

目的比较2,5.己二酮(2,5-HD)和3,3'-亚氨基二丙腈(3,3'-IDPN)对大鼠DRG神经元神经丝蛋白(NF-M)的损伤作用。方法用出生后2d的大鼠背根神经节(DRG)神经元,在培养皿中加不同浓度的2,5-HD和3,3'-IDPN进行培养,用荧光染料测定细胞毒性,计算细胞死亡率。用蛋白免疫荧光方法测定NF-M,计算DRG神经元细胞体的神经丝表达。结果DRG神经元24h接触2,5-HD和3,3'-IDPN的LD。约为32和102mmol/L。DRG细胞体内的NF-M蛋白含量在接触2,5-HD(0、4、8和16mmolL浓度)24和48h后结果显示。各个剂量组均有明显降低(P<0.05,P<0.01);而在接触3,3'-IDPN24h后,各个剂量组之间没有发生明显改变,但在接触48h后,仅有64,128mmol/L组与对照相比,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。在DRG神经元具有相同死亡率时,2,5-HD和3,3'-IDPN24h后对NF-M蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论2,5-HD与3。3'-IDPN对NF-M的损伤不同。2,5-HD减少NF-M蛋白表达要早于细胞死亡。NF-M对2,5-HD比对3,3'-IDPN敏感。

关键词: DRG神经元, 2,, 5-己二酮, 中分子量神经丝, 3,, 3', -亚氨基二丙腈, 细胞培养

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2011年04月21日

【期刊论文】三角帆蚌外套膊细胞蜡弊与组织培养的比较

施志仪, 李巍, 李松荣, 楼允东

上海水产大学学报,2002,11(1):27~30,-0001,():

摘要

通过对三角帆蚌外套膜外表皮进行组织培养和细胞培养的比较研究,表明组织培养比细胞培养更易荻得大量游离细胞,并且通过原子吸收光谱分析,证明体外培养的三角帆蚌组织和细胞皆能正常分泌珍珠质,且两者的分泌能力大体相同。

关键词: 三角帆蚌, 外套膜, 上皮细胞, 珍珠囊, 蛆织培养, 细胞培养

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2011年02月14日

【期刊论文】胰蛋白酶预消化后植块法分离境况人胚成骨细胞***

李玉谷, 马勇江, 窦忠英, 张媛

中国临床康复,2006,70(37):36~38,-0001,():

摘要

目的:改良成骨细胞分离培养方法,为骨形成、骨代谢以及骨组织工程等基础研究提供种子细胞。方法:实验于2002-09/2005-09在陕西省干细胞工程技术研究中心完成。①无菌条件下取五六个月龄流产胎儿颅盖骨(家属知情同意),去除骨膜及周围结缔组织,然后用2.5g/L胰蛋白酶消化20min,终止消化后,去除骨缝组织,剪碎,将碎骨块接种于培养瓶中分离培养成骨细胞。②细胞纯化采用差速贴壁法。通过相差显微镜观察人胚成骨细胞原代和传代培养的生长特征。用碱性磷酸酶染色、钙结节茜素红染色等方法对所获得的成骨细胞进行鉴定。结果:①人胚成骨细胞原代和传代培养的生长特征:原代培养至第5天,骨块边缘出现零散的细胞,这些细胞的形态主要为梭形、三角形或多边形。原代培养第14天后,形成融合层,细胞呈圆形、卵圆形或方形紧密排列,叠层生长。传代细胞主要呈三角形或方形细胞,细胞排列无方向性,出现集落样生长趋势。②人胚成骨细胞的鉴定结果:90%以上分离获得细胞碱性磷酸酶染色和钙结节染色均呈阳性。结论:采用酶消化后植块的改良植块培养法可在较短时间内获得大量成骨细胞,这些细胞具有典型的成骨细胞形态和功能,是一种较好的分离培养人胚成骨细胞的方法。

关键词: 成骨细胞, 细胞培养技术, 组织工程

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2010年12月16日

【期刊论文】兔眼与猪眼视网膜色素上皮细胞分离及培养方法的对比

马景学, 刘丽娅, 高彦军, 安建斌, 温晓英

眼科研究,2010,28(1):11~14,-0001,():

摘要

目的 分别对兔眼及猪眼视网膜色素上皮(RPE)细胞进行体外分离、培养和鉴定,探讨二者的异I司点及注意事项。方法 对有色兔眼和猪眼的RPE细胞采用胰蛋白酶消化法进行分离、培养和传代,取第4代细胞用于实验。免疫细胞化学染色对传代的细胞进行鉴定。光学显微镜F观察并比较培养的2种动物来源RPE细胞的形态、特征,并对2种动物来源的RPE细胞的培养过程进行比较。结果 2种动物来源的RPE细胞分离片法的不同与各自眼球的解剖结构相关,主要体现在消化过程,猪眼RPE细胞1次消化即可分离,兔眼RPE细胞需2次消化得到。原代猪眼RPE细胞24 h内贴壁较兔眼48~72 h贴壁时间。培养早期细胞生长活跃,随传代次数增加活力下降,色素颗粒减少。免疫细胞化学染色提示细胞角蛋白(AEl/AEl3)表达阳性。结论 2种动物来源的RPE细胞均可通过胰蛋白酶消化法分离,获得的RPE细胞数量多,培养成功率高。猪眼RPE细胞的分离培养更为容易。4代以内的RPE细胞适合于实验研究。

关键词: 视网膜色素上皮细胞, 兔, 猪, 细胞培养

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2009年11月20日

【期刊论文】人脑胶质母细胞瘤细胞系SHG-44中血管生成因子和细胞周期调控因子的表达

卞修武, 陈自强, 郭德玉, 杜林林, 辛榕, 史景泉

中华病理学杂志,1999,28(3):178~179,-0001,():

摘要

目的探讨人脑胶质母细胞瘤细胞系SHG-44长期传代后的某些生物学特性和免疫表型特征。方法采用免疫组织化学和原位杂交技术对SHC-44细胞增殖活性。中间丝蛋白共存、肿瘤蛋白、血管生成因子和细胞周期调控相关蛋白表达水平进行检测。结果传代l30-150代的SHC-44细胞呈腔质纤维酸性蛋白弱阳性而波形蛋白强阳性:Ki-67、增殖细胞核抗原平均标记指数分别为83.5%±10.2%、70.0%±18.7%. p21 ras、c-erb B-2、表皮生长因子及其受体、碱性成纤维细胞生长因子受其受体FGFR均显过度表达。血管内皮生长因子(VEGF)厦VEGF mR\A的表达情况亦相似。该细胞还具有诱导型一氧化氮合酶表达和p16. p53、周期素依赖性激酶4、cyclin D1蛋白积聚(平均标记指数分别为43.1%±11.2%、30.7%±6.6%、33.1%±11.4%和29.8%±4.7%)。结论SHC-44细胞存在上述生长因子、肿瘤蛋白表达异常和细胞周期的失控。使SHC-44细胞生长旺盛。增殖活性高,并且血管生成能力强,具有很高的恶性表型。

关键词: 神经胶质瘤 肿瘤细胞培养的 虚构生成因子 细胞周期蛋白质类

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2009年11月08日

【期刊论文】小鼠骨髓基质细胞的生物学特性及血管新生能力

黄岚, 张坡, 蒋世忠, 武晓静, 宋明宝

中华心血管杂志,20003,31(9):681~684,-0001,():

摘要

目的探讨体外培养的骨髓基质细胞的一些生物学特性及体内移植后在缺血区新血管生成中的作用。方法分离5~6周龄的小鼠胫骨、股骨,用预冷的DMEM/F12培养基冲洗出骨髓,经密度梯度离心分离出骨髓单个核细胞,接种后12~16 d形成单层贴壁的成纤维样细胞。体外诱导分化鉴定分离的细胞,用传代的细胞进行生长曲线测定,观察其接种贴壁率、分裂指数,检测细胞周期和超微结构,并建立下肢缺血模型。荧光标记的体外扩增的骨髓单个核细胞被移植入缺血组织。移植后2周,荧光显微镜及内皮细胞碱性磷酸酶染色,检查荧光阳性细胞与染色阳性细胞的时空关系。结果体外传代培养的单个核细胞倍增时间约为42 h。传代10 h贴壁率达90%以上。分裂指数曲线与生长曲线相似。细胞周期显示约83%的细胞处于G1期。结论体外培养的骨髓基质细胞生长稳定,传代后的细胞适应性强,增殖较快,表现出较早期细胞特点,在体外及移植入体内缺血区能分化为血管内皮细胞,有望用于改善组织缺血。

关键词: 骨髓细胞, 细胞培养 细胞分化, 血管, 缺血

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2009年11月07日

【期刊论文】小鼠主动脉平滑肌细胞的培养

雷寒, 周晓莉, 柳青

基础医学与临床,2005,25(6):564~567,-0001,():

摘要

目的 建立一种小鼠主动脉平滑肌细胞体外培养方法,为相关疾病的研究提供实验材料。方法 采用组织贴块法、胰酶消化法进行细胞原代及传代培养,综合运用自然纯化、机械刮除、差异贴壁法进行细胞纯化,并通过形态学特征及免疫细胞化学染色对细胞进行鉴定。结果 90%的组织块接种存活,第5代的平滑肌细胞纯度达98%以上。相差显微镜下培养细胞呈典型的“谷峰状”生长,免疫细胞化学染色显示特异的a平滑肌肌动蛋白阳性表达。结论 本法简便、可靠,培养的平滑肌细胞纯度高、性能好。

关键词: 主动脉, 平滑肌细胞, 细胞培养

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2009年11月02日

【期刊论文】大鼠脑微血管内皮细胞的体外培养

罗勇, 陈彬

Stroke and Nervous Diseases, Apr 2005, vol. 12, No. 2,-0001,():

摘要

目的 探讨大鼠脑微血管内皮细胞的培养方法。方法 取Wistar大鼠乳鼠脑组织,采用筛网过滤、胶原酶消化、离心等技术获取脑微血管内皮细胞,并进行培养。通过形态学、免疫细胞化学方法进一步鉴定,采用MTT方法测定生长曲线。结果 经形态学、免疫细胞化学方法鉴定所培养的细胞为脑微血管内皮细胞,观察到原代脑微血管内皮细胞有3种表型,细胞呈单层生长,并可传代培养。结论 建立大鼠脑微血管内皮细胞的培养方法可为体外研究脑血管病提供有益帮助。

关键词: 脑 微血管内皮细胞 细胞培养 大鼠

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2009年11月02日

【期刊论文】托呲酯对原代培养海马神经元癫痫样放电的抑制效应

胡长林, 曾可斌, 陈阳美

中国新药与临床杂志,2005,24(3):197~199,-0001,():

摘要

目的:探讨托吡酯对原代培养海马神经元癫痫样放电的抑制作用及其特点。方法:分离原代培养1日龄SD大鼠海马神经元,d 9~15采用膜片钳全细胞模式记录托吡酯(20,100μmol.L-1)和苯妥英(10μmol.L-1)对电流刺激及谷氨酸诱导神经元癫痫样放电的抑制效应。结果:苯妥英(10μmol.L-1)、托吡酯(20,100μmol.L-1)抑制电流刺激诱导神经元动作电位,分别减少100%,(38±25)%和(70±l9)%。苯妥英(10 μmol.L-1)及托吡酯(100μmol.L-1)分别完全或部分抑制谷氨酸诱导海马神经元的癫痫样放电。结论:托吡酯抑制原代培养海马神经元的癫痫样放电,并与其浓度及作用时间有关。

关键词: 海马, 神经元, 细胞培养 谷氨酸, 癫痫样放电, 托呲酯

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2009年11月01日

【期刊论文】人胚胎生殖细胞在人胚胎成纤维细胞饲养层上的生长

王亚平, 刘永刚, 韩兵, 陈地龙, 李芳菲, 王亚平*, 王莎莉

解剖学报,2005,36(3):716~719,-0001,():

摘要

目的探讨以人胚胎成纤维细胞为饲养层分离、培养人胚胎生殖细胞的方法和条件。方法分离、培养3-4月胚胎成纤维细胞,取3~15代细胞经丝裂酶素处理后铺板备用;分离6~11周胚胎原始生殖细胞,将其置于人胚胎成纤维细胞饲养层上,在含生长因子、分化抑制因子的培养体系中培养胚胎生殖细胞;用免疫细胞化学方法检测胚胎生殖细胞表面标志SSEA-1和SSEA-4;钙,钴法检测碱性磷酸酶活性;RT-PCR检测转录因子Oct-4的表达。结果人胚胎成纤维细胞可连续传代25代以上(6月),3~15代细胞可以用作饲养层细胞。分离的胚胎生殖细胞在饲养层上可增殖形成典型胚胎生殖细胞集落,并能连续在体外培养超过8代。集落未分化标志检测显示SSEA-1、SSEA-4呈阳性,碱性磷酸酶活性呈强阳性,Oct-4表达阳性。结论用人胚胎成纤维细胞作为饲养层能获得可连续增殖的胚胎生殖细胞。

关键词: 胚胎生殖细胞, 胚胎成纤维细胞, 细胞培养 免疫细胞化学, 逆转录聚合酶链反应, 人胚

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2009年10月21日

【期刊论文】中药复方补肾活血液对成骨细胞影响的实验研究*

张荣华, 舒晓春

中国病理生理杂志,2003,19(6):769~772,-0001,():

摘要

目的:观察中药复方补肾活血液对体外培养新生sD大鼠成骨细胞增殖、分化、矿化的影响。方法:采用二次酶消化法从新生SD大鼠颅骨获取成骨细胞进行培养,取第3代成骨细胞为实验模型,将其分为4组,在各组中分别加入双蒸馏水(对照组),低(20 mg/L)、中(4O mg/L)、高(80 mCL)浓度的补肾活血中药提取液。用M'IT法(波长570 nrn处 值表示)测定细胞增殖功能;用对硝基苯基磷酸二钠(PNPP)法测定碱性磷酸酶( )活性;用放免分析方法测定细胞培养液中的骨钙素(BGP)含量;用茜素红染色法,在40倍光镜下作矿化结节计数。结果:中药中、高浓度组的A值在24 h、48 h、72 h时明显高于对照组(P<0.01),且与药物浓度呈剂量依赖性;低浓度组的A值在72 h时点明显高于对照组(P<0.05),在24 h、48 h时点与对照组相比无显著差异(P>0.05)。不同浓度给药组培养48 h、72 h、96 h后,ALP(除低浓度组培养48 h外)、BGP均呈不同程度增加(P<0.01)。在中、高浓度组矿化结节数量/视野,显著多于对照组(P<0.01),低浓度组与对照组比较无显著差异(P>0.05)。结论:补肾活血液具有促进体外培养的新生SD大鼠成骨细胞增殖、分化及矿化作用,这种作用呈剂量相关性。

关键词: 中草药, 大鼠, 细胞培养 成骨细胞

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2009年08月07日

【期刊论文】大鼠胎脑组织冻存与同种异体移植

金连弘, 林道红, 王启弘, 庄敏, 凌虹, 郭淑元, 谷鸿喜

中华器官移植杂志,2001,22(1):54~56,-0001,():

摘要

目的 探讨冻存大鼠胎脑细胞体外培养的活性及其移植后的存活情况。方法 对经冷冻保存1~24周的WK大鼠胎脑细胞进行体外培养,观察其存活情况,并将保存24h后培养14d的胎脑细胞行脑内定位移植。结果 冻存1~24周的胎脑组织其活细胞率在90%以上,复苏后培养14d的胎脑细胞活性最强;胎脑细胞移植后可在受者体内存活至少30d以上。结论 冷冻保存后培养的胎脑细胞能够存活,并可用于移植。

关键词: 胚胎, 脑, 组织保存, 脑组织移植, 细胞培养

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2009年06月09日

【期刊论文】小鼠骨髓问充质干细胞的分离与培养

赵连三, 张怡, 唐红

生物医学工程学杂志(5):1-4,-0001,():

摘要

探索在体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞(Bonemarrow mesenchy malstemcells, BMSCs)的最适条件。以密度梯度离心技术及贴壁筛选法相结合,在体外分离BALB/C小鼠的BMSCs,通过MTT法测定了不同离心力、不同换液时间、不同血清浓度、不同种植密度等因素对BMSCs分离和培养的影响。在500g×30min的离心力下分离细胞,加入10%的胎牛血清,原代按(12~20)×105/ml的细胞密度接种,接种24h后换液,继代种植密度为6.4~25.6×104/ml时最适宜细胞生长;在此条件下,细胞快速增殖,传代后8h贴壁达90%以上,24h便进入对数生长期,直至第5d,细胞约增殖3倍。本研究建立了在体外分离培养骨髓间充质干细胞的细胞生物学方法和技术参数。

关键词: 骨髓间充质干细胞, 细胞培养 细胞生物学

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2009年05月31日

【期刊论文】外源性端粒酶基因对人脐静脉内皮细胞的影响

李旭, 杨玉琮, 陈葳, 程小丽

细胞生物学杂志,2003(6):365-369,-0001,():

摘要

为了观察外源性端粒酶逆转录酶基因(hTERT)在人脐静脉血管内皮细胞(HIJVEc)的表达及对细胞功能和生长的影响。采用逆转录病毒载体转导的方法,将hTERT基因转入HU-VEC。检测基因转导后内皮细胞端粒酶的活性和生物学特性。结果发现hTERT转导后细胞端粒酶表达阳性,未转导的亲代细胞为阴性;转导细胞的体外生存时间延长但未永生化,而内皮细胞黏附分子表达的功能未受影响。

关键词: 端粒酶, 血管内皮细胞, 基因转导, 细胞培养

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2009年04月23日

【期刊论文】大鼠牙囊细胞体外培养技术的建立及其鉴定

凌均棨, 凌均, 谷海晶, 高燕, 王阿丹

华西口腔医学杂志,2004,22(1):19~22,-0001,():

摘要

目的 建立体外培养大鼠牙囊细胞的方法,观察牙囊细胞体外生长的生物学特性。方法 分离乳鼠下颌第一、第二磨牙牙胚的牙囊组织,应用组织培养的方法进行牙囊细胞原代和传代培养。显微镜观察培养细胞的形态,电镜观察体内牙囊组织和体外培养的牙囊细胞的超微结构。免疫组化法检测细胞波形蛋白、Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白的表达。结果 分离组织培养24h后,梭形细胞和多角形细胞从组织块中游出,经消化排除法获得纯化的牙囊细胞。显微镜下牙囊细胞为成纤维细胞样,电镜下牙囊细胞无桥粒,胞浆中含有高密度电子颗粒和大量粗面内质网(RER)。免疫组化染色显示牙囊细胞表达波形蛋白、Ⅰ型胶原和纤维连接蛋白。结论 运用组织培养和细胞生物学技术可以成功获得原代和传代培养的大鼠牙囊细胞,体外培养的细胞具有与正常大鼠牙囊细胞相一致的生物学特性。

关键词: 牙囊, 细胞培养 成纤维细胞, 牙齿萌出

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2009年04月19日

【期刊论文】人腹膜间皮细胞的培养及特征

刘伏友, 段绍斌, 龙志高, 肖平, 陈星, 潘乾, 罗季安, 彭佑铭

湖南医科大学学报,2001,26(4):321~324,-0001,():

摘要

目的:建立人腹膜司皮细胞(HPMC)培养模型,检测HPMC细胞外基质蛋白及白细胞介素(IL-8)的表达。方法:采用胰蛋白酶-EDIA消化法,从人的腹膜组织中分离HPMC。采用形态学和链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(即SP法),对培养细胞进行鉴定。采用SP法检测HPMC纤维连接蛋白(FN)、胶原Ⅲ和胶原V及转化生长因子(TGF)β1表达。采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测HPMC IL-8 mRNA和FN mRNA的表达。结果:光镜示细胞融合后呈多边形,超微结构下可见丰富的微绒毛和内质网,免疫组化染色结果示HPMC可表达角蛋白,波形蛋白,胶原Ⅲ,FN,TGFβ1蛋白,Ⅷ因子、胶原V表达阴性。人腹膜司皮细胞亦表达FN mRNA和IL-8 mRNA。结论:HPMC培养模型的建立,可为进一步研究腹膜纤维化的防治及IL-8在腹膜透析中的作用提供理论依据。

关键词: 司皮细胞, 基质, 转化生长因子β1, 白细胞介素-8, 细胞培养

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2009年03月17日

【期刊论文】丙肝病毒全基因组cDNA克隆侵染细胞培养体系的建立

郑从义, 姚相杰①, 郭佳①, 郑从义①*, 方呈祥①, 屈三甫①, 陈震球②, 李中红②, 李信墙②*, 李卫云②

科学通报,2004,49(10):965~970,-0001,():

摘要

以含有丙肝病毒全基因组 cDNA的重组质粒(pHCV)为材料, 通过基因转染、重组痘病毒辅助使之在HeLa细胞中表达HCV病毒体,建立了一种新的HCV体外细胞培养系统。采用RT-PCR,荧光定量RT-PCR,链特异性RT-PCR,免疫印迹,免疫电子显微镜和电子显微镜负染技术跟踪检测HCV的增殖效率,结果显示,该培养体系中有HCV正链RNA的合成和HCV结构蛋白、非结构蛋白的表达,并组装成直径约47nm的HCV病毒体,病毒体可被偶联有胶体金的抗HCV结构蛋白E2的单抗标记;该体系产生的HCV病毒体滴度达107基因拷贝/mL,远远高于病人血清中的HCV基因拷贝数,也高于迄今报道的任何一种HCV细胞培养体系的病毒滴度,检测结果证明,转染细胞裂解上清中的HCV病毒体可以感染肝癌细胞系Huh7,并在感染细胞中增殖和合成负链RNA中间体,病毒滴度达106基因拷贝/mL。

关键词: 丙型肝炎病毒(, HCV), 全基因组, 侵染性cDNA, 克隆, 重组痘病毒, 细胞培养体系

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2007年05月31日

【期刊论文】N-甲基-D-门冬氨酸受体主亚基单克隆抗体抗谷氨酸兴奋毒性的体外实验研究

孙长凯, 康晓楠, 范明, 丁爱石, 赵杰, 王吉庆, 韩大跃, 施广霞

中华医学杂志2003年9月25日第83卷第18期/Natl Med J China, September 25, 2003, Vol. 83, No. 18,-0001,():

摘要

目的 研究人N-甲基-D-2门冬氨酸受体(NMDAR, NR)主亚基(NR1)单克隆抗体mAbN1是否对兴奋毒性脑损害有防护作用。方法 取10只新生大鼠海马神经细胞进行体外原代培养,建立了谷氨酸对培养海马神经细胞兴奋毒性神经损伤模型,观察抗体保护后神经细胞形态,检测细胞存活率(锥虫蓝拒染法)和细胞培养上清乳酸脱氢酶漏出量,每组2个平行皿,实验重复4次。结果 经0. 3μmol/ L mAbN1预处理后,神经元具有明显抗谷氨酸兴奋毒性损伤能力,存活率提高35 %;抗体表位合成肽可以阻断这种保护,提示该抗体的保护功能是特异性的。结论 NR1单克隆抗体mAbN1具有体外抗兴奋毒作用,该研究为兴奋毒性脑损害抗体治疗提供了重要依据。

关键词: 受体, N-甲基-D-天冬氨酸, 兴奋性氨基酸类, 细胞培养 治疗

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2007年05月31日

【期刊论文】新银杏叶提取物抗兴奋毒性神经损害研究

孙长凯, 孙晶, 范明, 丁爱石, 尹琳, 邬伟, 王小同

中国临床药理学与治疗学2006, Jan; 11(1): 95-98,-0001,():

摘要

目的:观察新银杏叶提取物(nGBE)在不同给药模式下对谷氨酸所致海马神经元毒性作用的影响。方法:采用CO2超临界萃取的方法制备nGBE,建立新生Wistar大鼠原代培养的海马神经元谷氨酸毒性模型,采用台盼蓝染色、程序性细胞死亡检测技术及乳酸脱氢酶测定的方法,观察预处理与急救两种给药模型下nGBE的神经保护作用,并与MK2801急性给药相比较。结果:nGBE在两种给药模式下均能不同程度地提高细胞存活率,降低凋亡率,减少LDH漏出量。其中预处理的效果明显优于急救给药处理,但均弱于MK2801组。结论:银杏叶制剂按其现有的临床给药途径即用于脑血管病的急救治疗,就其抗兴奋毒性机制而言,作用较弱,但如果我们将其用于高危人群的预防干预可能有更大价值。

关键词: 海马神经元, 大鼠, 兴奋毒性, 细胞培养 细胞凋亡

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