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2011年06月27日

【期刊论文】雌激素对慢性间歇性低氧大鼠颏舌肌线粒体细胞色素C氧化酶活性及其亚基表达的影响

刘月华, 齐娟, 贾珊珊

中华口腔医学杂志:2008,43(10):604~607,-0001,():

摘要

目的:通过研究雌激素对慢性间歇性低氧(chronic intermittent hypoxia CIH)大鼠颏舌肌线粒体细胞色素c氧化酶(cytochrome C oxidase, COX)活性及其亚基(C0x I、coxⅣ)表达的影响,探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)发病中雌激素所起的作用。方法:3个月龄健康雄性SD大鼠48只,分为正常对照组(NC组)、慢性间歇性低氧组(CIH组)及慢性间歇性低氧雌激素干预组(E+CIH组)。后两组建立CIH模型,同时E十CIH组给予苯甲酸雌二醇0.2 mg/kg,NC组、CIH组给予无菌橄榄油O.2 ml/次,2次/周,肌肉注射。密度梯度离心法分离大鼠颏舌肌线粒体,极谱法测量cox活性;western blottiIlg分析C0X I和coxⅣ蛋白表达;实时聚合酶链反应(real time p01ymerase chain action)法检测COX I和coxⅣ的基因表达。结果:CIH组大鼠颏舌肌线粒体C0X活性为(O.143±O.029)jkat/mg,与Nc组[(0.273±0.058)ukat/mg]相比显著降低(P<0.01),E+CIH组COX活性[(O.203±O.073)ukat/mg]较CIH组有所回升(P<0.05),但仍显著低于NC组(P<0.05)。CIH组与E+CIH组COX I蛋白表达分别为(10.789±8.144)和(25.593±11.108),与NC组(47.325±7.502)相比均显著降低(P<0.01),且E+CIH组COX I蛋白表达显著高于CIH组(P<O.05)。3组COXⅣ蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05);3组COX I、COXⅣ mRNA表达量的差异无统计学意义(P>O.05)。结论CIH可抑制大鼠颏舌肌线粒体COX蛋白表达及活性,而雌激素干预可部分恢复C0X蛋白表达及活性。

关键词: 雌激素类, 细胞色素c类, 缺氧, 基因表达, 颏舌肌

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2010年01月07日

【期刊论文】急性长时间运动对大鼠心肌线粒体NOS/NO, COX和HIF-1mRNA表达的影响

丁树哲, 许纲, 高彩暇, 缪明永

中国动力医学杂志,2005,7(4):395~399,-0001,():

摘要

探讨急性长时间运动对大鼠心肌线粒体一氧化氮合酶/一氧化氮(NOS/NO)、细胞色素c氧化酶(COX)活性、COXIV亚基和低氧诱导因子(HIF-1)a亚基mRNA表达的影响。方法:23只8周龄的雌性SD大鼠,体重:215±23g,随机分为对照组(7只)、运动即刻组(8只)和运动后4小时组(8只)。游泳时间平均为:249±54min。运动后分别测定大鼠心肌线粒体NOS活力和NO含量、COX活性、COXIV和HIF-1amRNA的表达。结果:对照组、运动即刻组和运动后4小时组NOS活力无显著差异(P>0.05);运动即刻组和运动后4小时组心肌线粒体NO含量低于对照组,有显著性差异(P<0.01);运动即刻组COX活性高于对照组,有显著性差异(P<0.01),运动后4小时略有下降,但仍高于对照组(P<0.05)。COXIV和HIF-1amRNA表达3组之间无显著性差异。结果表明,急性长时间游泳运动大鼠心肌线粒体NOS活力相对稳定,但运动后即刻线粒体NO含量明显降低,COX活性明显增高,COXIV和HIF-1amRNA表达无明显变化。结果提示,一次长时间运动后大鼠心肌线粒体呼吸链功能相对完好,该运动模型对COXIV和HIF-1amRNA表达诱导作用不明显。

关键词: 运动, 心肌, 线粒体, 呼吸功能, 一氧化氮合酶/, 一氧化氮, 细胞色素c氧化酶, 低氧诱导因子

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2009年08月17日

【期刊论文】维生素E琥珀酸酯诱导人胃癌细胞凋亡中线粒体的作用

吴坤, 李贵昌, 赵艳, 张晓华

卫生研究,2005,34(1):58~60,-0001,():

摘要

目的 探讨在维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)诱导人胃腺癌SCC-7901细胞凋亡过程中线粒体的作用。方法 SGC-7901细胞经5、10、20µg/ml VES处理后,用荧光染色法观察线粒体跨膜电位(△Ψm)改变,用Westem Blot法检测细胞质中细胞色素c的表达情况和caspase-3的表达与激活。结果 VES可使线粒体△Ψm。明显降低,有明显的剂量-效应和时间-效应关系。胞质中细胞色素c和caspase-3表达增加,同时激活caspase-3。结论 VES可能是通过使线粒体通透性改变并释放细胞色素c, 激活下游caspase-3, 从而诱导SGC-7901细胞凋亡。

关键词: 维生素E琥珀酸酯, 线粒体通透性, 细胞色素c caspase-3有机锡, 有机锡

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2009年07月23日

【期刊论文】细胞色素c突变体的共振拉曼光谱研究

郑军伟, 顾仁敖, 陆天虹

高等学校化学学报,2002,1,23:42~45,-0001,():

摘要

采用共振拉曼光谱技术研究了细胞色素(-次突变体WT)及其二次突变体Y67F和N 521在低频区的光谱特征结果表明,以苯丙氨酸替代WT中酪氨酸残基Tyr 67并没有明显影响血红素丙氨酸侧基周围多肽氨基酸残基的构象,而异亮氨酸对天冬酰胺残基Asn52的取代则较大程度地改变了蛋白质内部水分子与周围氨基酸残基间的氢键作用和多肽空腔的疏水性,进而使氨基酸残基和血红素的构象相应发生调变两种取代都导致形成血红素周围空腔的多肽氨基酸残基构象的变化。

关键词: 细胞色素c 突变, 共振拉曼光谱, 氨基酸构象

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2009年07月23日

【期刊论文】吸附色素蛋白与纳米银粒子间的光诱导电子传递

郑军伟, 周群, 丁红

高等学校化学学报,2003,3:419~421,-0001,():

摘要

采用表面增强拉曼光谱研究了吸附态微过氧化物酶和细胞色素c的光诱导还原。结果表明,吸附于粗糙银电极表面的过氧化物酶和细胞色素c在413nm激光连续照射下被部分还原.光诱导还原可归因于电极表面纳米银粒子的定域表面等离子体吸收使得自由电子受激,受激电子进而转移进入吸附分子空轨道,导致吸附蛋白质的还原。

关键词: 光诱导电子转移, 微过氧化物酶, 细胞色素c 银粒子

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2007年09月28日

【期刊论文】线粒体细胞色素C氧化酶RNAi慢病毒载体的构建

邵建永, 陈艳, 吴秋良, 江高峰, 夏云飞, 陈忠平

中国病理生理杂志 Chinese Journal of Pathophysiology 2005, 21(6): 1117-1123,-0001,():

摘要

通过构建携带细胞色素C氧化酶基因的RNAi慢病毒载体,获得可供转染的滴度,为下一步研究该基因缺陷在真核细胞中的影响提供物质基础。方法:根据线粒体细胞色素C氧化酶设计的两条互补的单链寡核苷酸退火后形成双链,插入到pENTR/U6质粒缺口末端,连接在质粒上生成含RNAi盒的pENTR/U6载体;通过重组作用将pENTR/U6载体的RNAi盒重组到pLenti6/BLOCK-iT-Dest载体上,构建含U6启动子、靶序列和P0lⅢ终止子表达框的MTCOX-I shRNA表达重组体;经脂质体导入293FT细胞,包装成慢病毒,收集病毒上清并检测其滴度。Western blotting检测干扰后细胞内线粒体细胞色素C氧化酶I亚基的表达。结果:将目的序列成功连接到载体上,并经测序分析证实载体构建成功;成功包装成高滴度的慢病毒。Western blotting检测结果证实构建的MTCOX-I shRNA表达重组体可显著抑制线粒体细胞色素C氧化酶I亚基的表达。结论:成功构建了携带细胞色素C氧化酶基因的RNAi慢病毒载体。

关键词: 基因, 线粒体, 重组, 慢病毒属, 载体, 细胞色素C氧化酶

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2006年10月25日

【期刊论文】平肝熄风汤对脑出血大鼠海马细胞色素C氧化酶活性和细胞凋亡影响的同步研究*

梁清华, 陈疆, 蔡颖, 谭勇, 唐涛, 包太成, 李春燕

Chinese Journal of Chinical Rechabilitation, February 7 2005 Vol.9 No.5,-0001,():

摘要

北景:细胞色素C氧化酶(eytochrome C oxidase, CCO)是线粒体呼吸链中的终端每,在细胞的有氧代谢及氧化磷酸化产能过程中起关链作用,近来发现线粒体能暗生成与细胞凋亡关系极为密切,其CCO活性改变与脑缺血缺氧后神经元元损伤密切相关。目的:从神经元线粒体能量代谢和细胞凋亡的角度探讨中药复方方平肝熄风汤对脑出血神经元损伤的保护作用机制。设计:以实验动物为研究对象,随机对照的实验研究。单位:湘雅医院中西医结合研究所和远程医学中心。材料:实验于2003-11-02/11-09在中西医结合研究所动物实验室(省重点实验室)完成,选健康性SD大鼠80只,由卫生部湘雅医学院实验动物中心提供。方法:采用VI型胶原酶诱导大鼠脑出血模型,以组织化学方法结合灰度值半定量测宽CCO活性,采用Tunel法检测细胞凋亡。主要观察指标:①脑出血大鼠术侧海马CAI区CCO活性。②脑出血大鼠术侧细胞凋亡。结果:造模12h脑出血大鼠海马CAI区CCO活性52.12+3.75较假手术组26.98+6.32明显降低(P<0.01凋亡细胞[(13.56±1.72)个/视野]较假手术组(4.32±1.40)个/视野 明显增多(P<0.01.随后均呈进行性加重,用平肝熄风汽治疗可维持其CCO活性,减少细胞凋亡。结论:脑出血神经元损伤与神经元CCO活性降低及细胞凋亡有关。平肝熄风汽能维持线凿体关健酶CCO活性,改善细胞有氧代谢,减少细胞凋亡,可能为平肝熄风汤对脑出血继发性神经元损伤保护机制之一。

关键词: 中风(, 中医), 平肝熄风药, 细胞色素C氧化酶, 细胞凋亡, 疾病模型,, 动物

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2006年10月25日

【期刊论文】脑溢安对实验性脑出血大鼠细胞色素c氧化酶活性的影响

梁清华, 唐涛, 梁清华①, 黎杏群, 何纲, 张花先

湖南医科大学学报,2000,25(6)542-544,-0001,():

摘要

目的:神经元能量代谢的角度,探讨脑溢安治疗脑出血的作用机制。方法:用胶原酶诱导大鼠脑出血模型,组织化学方法结合灰度值半定量法测定细胞色素c 氧化酶(ytochrome c oxide, CO)活性,配合Nissl's 染色和细胞计数。结果:脑溢安可维持大鼠海马CA1区CO活性,减少细胞缺失。结论:脑溢安在脑出血中的神经元保护机制可能与其维持CO活性,改善细胞有氧代谢,增加细胞供能有关。

关键词: 中药, 脑出血, 细胞色素c氧化酶3, 组织化学, 尼氏染色3, 大鼠

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2006年10月25日

【期刊论文】平肝熄风汤对脑出大血鼠神经元线粒体内细胞色素C释放的影响*

梁清华, 包太成, 染清华, 王安宇, 谭勇, 李春燕, 陈疆, 王立, 候俊良

Chinese Journal of Chinical Rechabilitation, February 7 2005 Vol.9 No.5,-0001,():

摘要

目的:观察大鼠脑出血肿周围神经元线粒体内细胞色素C释放规律,及中药复方平肝熄风汤的干的干预作用。 方法:实验于2003-10在湘雅医院中西医结合研究所进行。用VII胶原酶脑内立体定位注射诱导大鼠脑出血模型,免疫组织化学法检测社经元线粒体内细胞色素C的释放情况。结果:大鼠脑出血后血肿周围神经元于6H即有细胞色素C释放,出现脑浆染色的阳性细胞;1d后胞浆染色最浓,细胞形态得不规则,阳性细胞表太最多:3d 后染色变淡,阳性细胞数减少;5d后胞浆染色继续变淡,阳性细胞继续减少,治疗组与模型组比较在4.3.5d时阳性细胞减少明显(P <0.01,染色亦较模型组淡。结论:脑出血后血肿周围神经元细胞色素C于6h即开始从线粒体释放,1d达高峰下降,平肝熄风汤能阻制细胞色素C的解释。

关键词: 脑细血, 平肝熄风药, 细胞色素C

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