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2011年05月13日

【期刊论文】槲皮素对前列腺癌细胞增殖及转录因子Sp1功能的抑制作用

苑辉卿, 苑辉卿), 杨玲玲), 姜安丽), 孔峰), 张建业)*Charles Y F YOUNG)*

中国生物化学与分子生物学报,2005,21(5):673~378,-0001,():

摘要

雄激素受体(androgen receptor,AR)作为核转录因子,其高表达、基因突变以及AR辅激活因子的过表达等造成AR的异常激活与前列腺癌细胞的增殖、恶化转移、多药耐药等密切相关。天然黄酮槲皮素(quereetin),是一很有潜力的预防和治疗前列腺肿瘤的化合物。槲皮素不仅抑制前列腺癌细胞LNcaP的增殖,并呈剂量依赖性,而且下调前列腺癌中AR的表达、抑制AR的转录激活功能。GC box是AR核心启动子的主要正调控元件,是转录因子Spl的结合位点。细胞转染结果表明,槲皮素能抑制Spl蛋白对AR启动子的激活作用,可能是槲皮素下调AR表达的机理之一。进一步研究显示,槲皮素还能明显抑制Spl蛋白对AR转录激活功能的增强作用。Western印迹结果显示,槲皮素对Spl蛋白表达无明显影响,但能够诱导c-Jun的高表达,而高表达的c-Jun蛋白能逆转Spl蛋白对AR的转录激活作用,由此推测,槲皮素可能通过介导c-Jun与spl的蛋白质相互作用,抑制spl的功能,进而起到抑制AR表达和功能的作用。免疫沉淀结果又进一步证实了Spl与c-Jun二者的相互作用。因此,槲皮素可能通过抑制前列腺癌细胞中AR的表达和功能抑制了细胞的增殖,其分子机理可能与槲皮素诱导的c-Jun与Spl蛋白相互作用、降低Spl对AR的转录激活作用有关。

关键词: 槲皮素,, 细胞增殖,, Spl,, 前列腺癌细胞,, 抑制作用

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2011年04月21日

【期刊论文】牙鲆消化道组织学观察及内分泌细胞分布1

施志仪, 陈晓武, 顾一峰

,-0001,():

摘要

牙鲆(Paralichthys olivaceus)体重约0.5kg,活体取材,通过免疫组织化学染色和H.E 染色,在光学显微镜下观察牙鲆消化道组织结构。结果表明,牙鲆消化道和高等脊椎动物类似,分为食道、胃、胃盲囊和肠。肠也可分为前肠、中肠和后肠。三者之间没有明显的界限。胃和前肠是消化吸收主要的区域。胃盲囊和前肠结构和功能非常类似。Serotonnin 细胞和P Substance 细胞在牙鲆胃前部的粘膜中零星分布,在胃体中较多见,平均每104μm2 胃体粘膜上皮约各有2.2 和2.0个阳性细胞。而Gastrin 细胞分布在胃盲囊和前肠中,平均每104μm2 粘膜上皮分别有0.98 个和0.71个阳性细胞。可见,牙鲆和哺乳动物消化道一样都分布有肽能神经元。这些结果将为神经内分泌系统的研究提供资料。

关键词: 牙鲆,, 消化道,, 内分泌细胞,, 免疫组织化学

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2011年01月24日

【期刊论文】脑损伤后CD14在小胶质细胞的表达

周亦武, 郭学荣

法律与医学杂志,2003,10(4):240~242,-0001,():

摘要

暂无

关键词: 脑损伤,, CD14,, 小胶质细胞,, 损伤时间

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2010年12月20日

【期刊论文】锦冶炼烟尘对中国仓鼠肺细胞毒性和细胞间隙连接通讯的影响

吴永会, 赵光, 于翠平, 王军

中华劳动卫生职业病杂志,2006(24)2:81~84,-0001,():

摘要

目的 探讨锦冶炼烟尘对中国仓鼠肺细胞(CHL)毒性和细胞间隙连接通讯(CJIC)的影响。方法 以CHL细胞为靶细胞,采用噻唑蓝(MTT)颜色反应法,检测2份锦冶炼烟尘对CHL细胞的毒性作用。采用划痕标记染料示踪技术(Bracpe-loading and dye transfer, SLDT)检测锦冶炼烟尘对CHL细胞CJIC的影响。结果 2从受试物各剂量组在作用6、12h时,CHL细胞增殖情况与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。作用36h时,所有剂量组细胞存活率均降低与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),并呈现剂量-反应和时间-反应的关系。2份受试物作用CHL细胞36h时1C50分别为21.36、23.07ug/ml。锦冶炼烟尘在25.00、50.00、100.00ug/ml时,荧光黄(LY)由伤沿列传向邻近细胞的列数减少,与溶剂对照组比较,并异有统计学意义(P<0.01),细胞间隙连接通讯能力降低。结论 锦冶炼烟尘对体外培养的CHL细胞可产生毒性作用,抑制细胞生长。一定浓度的锦冶炼烟尘能够抑制CHL细胞的CJIC。

关键词: 锦冶炼烟尘, 细胞毒性, 细胞,, 细胞外隙

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2009年10月19日

【期刊论文】管内皮细胞原代培养方法的改良及应用*

陈利国, 何孟栖, 陈利国**

西医学杂志,2004,33(7):581~582,-0001,():

摘要

目的:建立一种简单易行的大鼠主动脉内皮细胞原代培养的改进方法。方法:分离出大鼠主动脉,将主动脉内膜暴露于外,两端折入结扎,以胶原酶磁力搅拌消化和细胞刮擦法交替进行,每次消化l0min,共消化3次,离心后的沉淀再磁力搅拌消化20min,将收集的细胞接种在培养瓶中。结果:细胞在第3天延展,呈短梭形或类三角形。10~14d汇合成单层细胞,呈铺路石状,经第8因子相关抗原ABC法鉴定其为内皮细胞。结论:用此改良的方法可以更好的培养出血管内皮细胞。

关键词: 细胞,, 培养,, 血管内皮细胞

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2009年09月05日

【期刊论文】125I-脱氧尿嘧啶核苷对胰腺癌细胞Bax-Pc的杀伤作用

范我, 杨辰, 何扬, 申咏梅, 劳勤华, 朱然, 李金泉, 吴锦昌

中华核医学杂志,2004,24(3):136~138,-0001,():

摘要

目的 探讨125I-脱氧尿嘧啶核苷(UdR)在胰腺癌细胞Bax-Pc的特异性摄取及其杀伤细胞的能力,分析其作用条件和影响因素。方法 测量Bax-Pc细胞和细胞核在含不同放射性浓度125I-UdR的培养液中培养不同时间后的活度,评价其时间-效应和剂量-效应关系;用细胞克隆形成法评价125I-UdR对Bax-Pc细胞的杀伤作用。结果 ①Bax-Pc细胞摄取125I-UdR的量明显高于Na125I对照组(P<0O1)。②细胞和细胞核中125I-UdR的量随培养基中125I-UdR放射性浓度增加而增加(r=0.984~0.999)。③Bax-Pc细胞和细胞核中125I-Udlt的量随培养时间增加而增加(r=0.867~0.978)。④125I-UdB组的存活分数明显低于Na125I对照组(P<0.01),细胞存活分数有随培养基中放射性浓度和培养时问增加而降低的趋势。结论 125I-UdR可被Bax-Pc细胞特异性摄取并进入细胞核中,进而杀死细胞,其作用具有明显的时间-效应和剂量-效应关系。

关键词: 胰腺肿瘤, 细胞,, 培养的, 脱氧尿苷核苷酸类, 放射疗法, 碘放射性同位素

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2009年09月05日

【期刊论文】125I-[Tyr3]-octreotide内化及杀伤NCI-H446细胞的研究

范我, 孙俊杰, 许玉杰, 张友九, 朱然, 胡明江

中华核医学杂志,2004,24(3):144~146,-0001,():

摘要

目的 探讨小细胞肺癌NCI-H446细胞株内化[Tyr3]-奥曲肽([Tyr3]-octreotide,TOC)的能力及125I-TOC杀伤NCI-H446细胞的效应。方法 以125I-TOC为放射配基,生长抑素受体(SSTR)阳性细胞NCI-H446于37℃与125I-TOC共同保温不同时间后,分别检测细胞的总结合、内化及结合到核上的125I-TOC;采用噻唑蓝(MTT)法检测不同剂量125I-TOC、游离125I及TOC在不同时间对细胞存活率的影响。结果 NCI-H446细胞内化125I-TOC和细胞核结合125I-TOC呈时间依赖性,至24h最高,结合到核上125I-TOC的量为0.5h的7倍;125I-TOC对SSTR阳性的NCI-H446细胞的杀伤作用呈剂量-效应、时间-效应关系,以74kBq125I-TOC作用96h的杀伤效应最大,细胞存活率降至(44.8±7.2)%。结论 125I-TOC可在SSTR介导下内化进入细胞并可杀伤细胞,呈时间-效应和剂量-效应关系。

关键词: 癌,, 小细胞肺, 细胞,, 培养的, 放射疗法, [Tyr3 ]-octreotide

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2009年02月20日

【期刊论文】纤维堆囊菌的多细胞形态发生过程*

李越中, 吴斌辉, 李越中**, 胡玮, 周璐, 侯配斌

微生物学报,2002,42(6):854~956,-0001,():

摘要

粘细菌是具有复杂多细胞行为的革蓝氏阴性细菌,纤维堆囊菌是粘细菌中唯一能够降解纤维素的粘细菌种属。本文通过扫描电子显微镜和相差光学显微镜,分析了纤维堆囊菌在纤维素基质上的生长和子实体形态发生的多细胞行为特征,给出了生长和子实体发育的模式图谱。

关键词: 粘细菌,, 纤维堆囊菌,, 多细胞,, 形态发生

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2011年05月03日

【期刊论文】食管癌细胞NGAL基因-152~-60区段存在TPA反应元件

许丽艳, ), 李恩民)**, 牛永东), 蔡唯佳), 袁华敏), 常静霞), 沈忠英), 曾毅)

生物化学与生物物理进展,2006,33(2):140~148,-0001,():

摘要

以往研究发现。在TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophilgelatnase-associate lipocaIin,NGAK)基因过表达,但过表达机制不明。最近研究提示,食管癌细胞,NGAL启动子及其邻近区域可能存在着TPA反应元件。为了对NGAL的这-TPA反应元件进行更准确定位,采用PcR法结合嵌套缺失实验从食管癌细胞中克隆NGAL5’侧翼区-152~+84、-140~+84、-78~+84、-59~+84、-50~+84、-41~+84、-37~+84、-29~+84和-10~+84等片段,并定向插入pGLB、pGLP或pGLE等萤火虫荧光素酶报告基因表达载体中,构建了pGLB-152、pGLP-152、pGLE-152、paLB-140、pGLB-78、pGLB-59、pGLB-50、pGLB-41、pGLB-37、pGLB-29和pGLB-10等系列报告基因表达载体。将上述报告基因表达载体分别同pRL一_rK共转染食管癌细胞Ecl09,并用TpA刺激,检测TPA刺激转染ECl09的相对荧光素酶活力,综合判定NGAL-152~+84区不同长度片段的TPA反应性,对NGAL启动f区的TPA反应兀件给进一步分段定位。结果表明,NGAL启动子区的TPA反应元件位于-152~-60区段,而且应答TPA刺激的反应能力很强。生物信息学分析结果显示,NGAL工启动子区所存在的TPA反应元件很可能是一种新结构类型研究说明,NGAL在DNA序列上有应答TPA刺激的结构基础,将有助于深入到分子水平揭示TPA诱导永牛化食管上皮细胞癌变中NGAL三过表达机制,也有助于进一步认识TPA信号细胞内传递途径网络在肿瘤发生发展中的作用。

关键词: 中件粒细胞明胶酶相关载脂蛋白基因,, 食管癌细胞,, 基因表达调控,, TPA反应元件

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2006年09月29日

【期刊论文】鞘内泵人吗啡对大鼠细胞免疫功能的影响

郭曲练, 张阳德, 邹望远, 王锷, 蔡进

中国麻醉学杂志,2005,25(2):118~121,-0001,():

摘要

目的 观察镇痛剂量吗啡鞘内泵入对大鼠细胞免疫功能的影响。方法 4J0只雄性SD大鼠随机分为5组(n=8):假手术组(F组)、生理盐水组(Ns组)、M1、M2、M3组(吗啡泵入速率分别为2.5、5、10ug·h-1)。除F组外各组采用改良Yaksh法进行鞘内置管,置管后5d采用Alzet泵持续泵人生理盐水或吗啡,共7d。第7天各组大鼠进行福尔马林炎性疼痛实验,根据痛级(PIS)评分评价吗啡镇痛效应,处死大鼠后计算脾脏指数并分离脾脏单个核细胞进行培养,甲基-3H胸腺嘧啶核苷掺入法检测脾T淋巴细胞增殖水平,乳酸脱氢酶释放法检测自然杀伤细胞活性。结果 与Ns组比较,Ml、M2、M3组在福尔马林炎性疼痛第一时相和第二时相的PIS评分值、脾脏指数、脾脏T淋巴细胞增殖转化水平和NK细胞活性降低(P<0.05或0.01);与Ml组比较,M2、M3组脾脏T淋巴细胞增殖转化水平及NK细胞活性降(P<0.05);与M2组比较,M3组脾脏NK细胞活性降低(P<0.05)。结论 镇痛剂量吗啡鞘内泵入可抑制大鼠细胞免疫功能,且泵入速率越大,免疫抑制效应越明显。

关键词: 吗啡, 注射,, 脊髓, T淋巴细胞, 杀伤细胞,, 天然, 免疫,, 细胞

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2006年08月21日

【期刊论文】三氧化二砷不同给药方法治疗急性粒细胞白血病的临床观察和随访

周晋, 孟然, 王艳, 杨宝峰

中华医学杂志,2004,84(5):405-408,-0001,():

摘要

目的:评价三氧化二砷(AS2O3)的两种给药方法在治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)中的有效性及安全性。方法:观察并随访了分别应用AS2O3两种给药方法治疗的APL 96例,试验组48例,按0.16mg/kg计算每例患者AS2O3的日治疗总量,分2次加5%的葡萄糖液250ml稀释,缓慢静脉滴注,每分钟8滴,2次给药间隔2-3h;对照组48例,按常规给药0.16mg/kg计算AS2O3日治疗总量,每日用药1次,2 h完成。分别测两组患者不同时间点的血砷浓度,并随访治疗后6个月中的复发率和砷蓄积情况。结果:连续用药28d,试验组总有效率为93.8%,对照组为83.3%。血砷促凋亡有效浓度在0.2mg/L以上的持续时间分别为试验组18.4h±3.3h,对照组9.4h±1.6h。患者达到完全缓解的时间分别为26.4d±2.0d和35.7d±4.8d。随访6个月两组骨髓抑制和复发率均未发现有差异。结论:分次缓慢静脉给药不良反应轻,并可缩短APL的完全缓解的时间,提高缓解率。

关键词: 砷剂, 白血病,, 粒细胞,, 急性, 分次缓慢给药

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2006年08月21日

【期刊论文】三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞白血病心脏毒性的研究

周晋, 孟然, 王巍, 吕成芳, 杨宝峰

中华内科杂志,2003,42(11):785-788,-0001,():

摘要

目的:研究治疗量的三氧化二砷(AS2O3)对心脏的毒性。方法:通过对28例急性早幼粒细胞自血病(APL)患者临床症状、基础心率、心电图的动态观察和AS2O3,作用于豚鼠单个心肌细胞后,动作电位、L-型钙电流(I)、外向整流钾电流(I)的即刻变化,分析静脉滴入AS2O3,引起心脏毒性的可能机制。结果:28例APL患者中,有71.4%的患者产生不同程度的心脏毒性反应,表现为心率加快和心电图上QT间期(QTc)延长。膜片钳显示AS2O3μmol/L使豚鼠心肌细胞90%动作电位时程从(563.0±55.8)ms延长至(737.7±131.7)ms(P<0.05)。使ICa-L和Ik增加。结论:AS2O3可使部分APL患者出现心动过速和QTc延长,并随治疗时间的延长逐渐恢复。AS2O3延长豚鼠心室肌细胞的动作电位时程,影响ICa-L和Ik可能是导致QTc延长的原因。

关键词: 自血病,, 早幼粒细胞,, 急性, 砷剂, QT延长综合征

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2006年08月21日

【期刊论文】常规剂量三氧化二砷对心脏功能影响的临床和实验研究

周晋, 孟然, 刘影, 王巍, 李宝馨.杨宝峰

华血液学杂志,2004,25(1):31-34,-0001,():

摘要

目的:研究常规剂量的三氧化二砷(AS2O3)对急性早幼粒细胞白血病(APL)患者心脏能的影响。方法:通过对患者基础心率和心电图的动态观察,膜片钳技术对豚鼠心肌细胞用药前动作电位和电流的监测,激光共聚焦技术对用药前后豚鼠心肌细胞内钙的测定,分析AS2O3对患者心脏功能影响的可能机制。结果:常规剂量的AS2O3静脉给药第1~2周,52.5%~35.0%的APL患者产生不同程度的心脏不良反应,心电图上QT间期延长等。膜片钳监测显示l,2,5mol/L03使豚鼠心肌细胞动作电位时程从(563.0±55.8)-分别延长到(737.7±131.7)/IIS、(842.4±115.6)和(1103.2±96.3)Ins(P值分别<0.05,0.01,0.01),使L广型钙电流增加。激光共聚焦检测结果显示,1,2,5 tanol/L As203使心肌细胞内钙增加,并可以被钙通道阻滞剂阻断。结论:常规剂量的03可使部分APL患者出现过性心动过速、crr问期延长等不良反应。AS2O3对心脏功能的影响可能是通过响心肌离子通道和细胞内钙来实现的。

关键词: 砷剂, 钙通道, 白血病,, 早幼粒细胞,, 急性

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2006年07月19日

【期刊论文】花背蟾蜍早期胚胎两类表皮细胞超微结构的比较研究

王子仁

甘肃科学学报,1993,5(1):46~50,-0001,():

摘要

电子显微镜观察下表明,花背蟾蜍早期胚胎具有的两类表皮细胞在超微结构上的主要不同点是:无纤毛细胞含较多的线粒体、高尔基体和内质网等细胞以及大量的粘液泡,含较少的黑色素颗粒,细胞游离面具丰富的微突起。纤毛细胞含较多的黑色素颗粒、大量的卵黄小板和脂滴,很少能观察到细胞器,无粘液泡,细胞游离面具很多较长的纤毛,这些结构特点与它们执行不同的功能相关。

关键词: 花背蟾蜍,, 胚胎,, 纤毛细胞,, 无纤毛细胞,, 超微结构。

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2006年01月10日

【期刊论文】单克隆抗体对活化腹腔巨噬细胞抗胰腺癌作用的影响①

陈其奎, Chen Qikui, Yuan Shizhen

中山医科大学学报,1997,18:73~75,-0001,():

摘要

观察重组人白细胞介素2(γ-IL2)体外诱导的腹腔巨噬细胞,在YPC3抗人胰腺癌单克隆抗体(YPC3mAb)介导下,通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)机制对胰腺癌细胞的杀伤作用。4h51Cr释放实验表明,在YPC3mAb作用下,活化腹腔巨噬细胞对Capan-2人胰腺癌细胞的杀伤活力明显增强,比单用巨噬细胞杀伤活力约提高70.0%,而对照1-F/7抗登革热病毒单抗无明显影响。γ-IL2作用的腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞具有类似的ADCC杀伤效应。结果提示,γ-IL2和YPC3mAb联合腹腔注射,可能为胰腺癌的局部治疗提供一个新方法。

关键词: 胰腺肿瘤/, 治疗, 抗体,, 单克隆/, 治疗应用, 巨噬细胞,, 淋巴因子活化, 细胞毒性,, 免疫

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2006年01月11日

【期刊论文】人脐血间充质干细胞对脐血CD34+细胞体外扩增作用的研究

黄绍良, ZHOU Dun-hua, HUANG Shao-liang, ZHANG Xu-chao, WEI Jing, WU Yan-feng, HUANG De, LI Yang, FANG Jian-pei

中华儿科杂志,2005,43(7):194-498,-0001,():

摘要

目的 折探讨含人脐血来源的间充质干细胞(MSCs)体系在体外对脐血造血干细胞(HSCs)扩增作用。方法 (1)用含人脐血MSCs及不同造造血生长因子(HGFs)组合的无血清扩增体系对人脐血CD34+细胞进行体外扩增。(2)于扩增前及增后笫6、12天分别用双色流式细胞仪动态检测HSCs表面抗原标记:CD34+、CD34+、CD38-、CD34+CD3+、CD34+CD19+、CD34+CD33+和CD34+CD41a+细胞的含量。(3)按本实验室方法行体外半固体培养,观察扩增前后脐血细胞粒-单核细胞集落形成单位(CFU-GM)、爆式红系集落形成单位(BFU-E)、混合集落形成单位(CFU-Mix)及高增殖集落形成单位(CFU-HPP)集落形成情况。结果 (1)含人脐血MSCs体系对脐血CD34+;CD38-细胞的扩增倍数在笫6天和第12天分别为159和437倍。该亚群百分比在单纯因子组增第12天时为1.98%,而在含脐血MSCs组为9.98%,明显高增前。(2)集落培养表明,含脐血MSCs组增第12天与增第6天相比,其CFU-Mix和CFU-HPP的扩增倍数增加,而单纯因子组这两种集落的增数下降。(3)随增天数的增加,两组相比,含脐血MSCs组差异更显著。结论 (1)含脐血MSCs体系不仅能扩增更原始的造血干/祖细胞(HSPC),且具有在短期内(12d)保持HSCs不耗竭。(2)含脐血MSCs体系对脐血CD34+细胞向定向祖细胞的扩增,主要为髓系及巨核系祖细胞,而对其向淋巴系祖细胞的扩增具有抑制作用。

关键词: 间质干细胞, 细胞,, 培养的, 抗原,, SD34+, ,, 流式细胞术, 胎血

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2006年01月10日

【期刊论文】问充质干细胞与脐血联合移植的I期临床观察

黄绍良

中山大学学报(医学科学版),2003,24(3),-0001,():

摘要

为促进无关供体脐血移植(UD-UCBT)患儿的造血干细胞(HSC)植人和造血恢复,我们在2001年9月至2003年3月,以自体或异基因双亲(母亲或父亲)骨髓源性间充质干细胞(MSC)联合脐血移植的I期临床观察,操讨MSC是否可 促进Hsc植入及造血恢复、对GVHD的影响及安全性。

关键词: 脐血移植,, 无关供体, 干细胞,, 间充质, 造血系统

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2006年08月21日

【期刊论文】应用免疫球蛋白重链可变区上框架区来源的抗原九肽获得的细胞毒T细胞功能分析

朱平, 郭晓玲, 刘英, 刘静, 朱霞

Chin J Hernator, August 2005, Vol 26. No.8,-0001,():

摘要

目的明确存B淋巴细胞肿瘤表面的免疫球蛋白重链可变区(IgHV)的框架区(FR)是否存在可以激发细胞毒T淋巴细胞(CTL)的抗原表位,这些来源于FR的抗原肽是否能够激发家族特异性的免疫反应,探讨按照B淋巴细胞肿瘤的IgHV基因分型进行家族性的免疫治疗的可能性方法利用生物信息学系统预测了40例B淋巴细胞肿瘤表面的免疫球蛋白序列的抗原表位,人T合成不同基因家族的抗原几肽,利用1、2细胞结合实验检测预测的抗原肽和HLA分子的亲合力利用体外CTL刺激扩增体系,诱导特异性的CTL细胞增殖,用肽/HLA四聚体检测特异性CTL的数目,应用LDH释放实验检测CTL的细胞毒活性并验证其家族特异性?结果在B淋巴细胞肿瘤的7个IgHV基因家族中找到了l2个高亲和力的抗原九肽,其中l0个(83%)位于FR,以HLA-A 0201正常供者的外周血单个核细胞(PBMNC)负荷该九肽作为抗原呈递细胞去刺激自身PBMNC,经过4轮刺激,CD8和肽/HLA四聚体双阳性细胞从0.38% J二升到49.38% LDH释放实验证明对HLA-A{0201(+)、IgHV1(+)靶细胞有明显的杀伤作用,并且被IgHV1肽刺激的CTL不能识别负荷IgHV3肽的靶细胞:结论IgHV基因FR抗原九肽可以刺激产生具有HLA限制性的并且肽特异性的CTL,同时这样的杀伤作用具有家族特异性,以此为靶位有望对B淋巴细胞肿瘤进行家族特异性的免疫治疗.

关键词: 表位,, B淋巴细胞, 肿瘤,, B淋巴细胞, T淋巴细胞,, 细胞毒性

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2006年08月21日

【期刊论文】淋巴瘤相关抗原肽刺激所获细胞毒性T细胞克隆的特征

朱平, 郭晓玲, 朱霞, 刘静, 欧媛, 杜金伟

Natl Med J China, June 8, 2005, Vol 85, No.21,-0001,():

摘要

目的研究抗肿瘤细胞毒性T淋巴细胞(CTL)克隆识别靶细胞的肽特异性和人类白细胞抗原(HLA)限制性,以及其赖以识别抗原肽的T细胞受体(TCR)基因表达序列的分子特征。方法利用体外CTL刺激扩增体系,应用免疫球蛋白重链可变区(IgHV)框架区上的B淋巴瘤相关抗原九肽(IgHV1-QLVQSGAEV和IgHV3-SLYLQMNSL)负荷的抗原递呈细胞(APC),刺激正常HLA-A 0201供者的外周血单个核细胞(PBMC),每周1次共4次,用流式细胞仪检测体外培养细胞的免疫表型的变化,并用肽/主要组织相容性基因复合体(MHC)-四聚体方法检测肽特异性的CTL增殖情况。应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测CTL与不同的靶细胞共同孵育时释放干扰素(IFN-)的能力。应用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)和T细胞受体(TCR)基因指纹谱型图方法检测培养前后的淋巴细胞的克隆变化,并用直接测序的方法得到CTL克隆的TCR基因序列。结果B淋巴瘤相关抗原肽4次刺激体外培养的PBMC后CD8’CTL大量增殖,CD4/CD8明显下降(0.10 VS 1.43,P<0.05)。IgHV1-QLVQSGAEV/HLA-A 0201四聚体和CD8双阳性的肽特异性CTL数量(49.38%)比刺激前(0.04%)明显上升。ELISA检测IFN- 的分泌表明其识别靶细胞是肽特异性和HLA限制性的。TCR基因指纹谱型图显示抗原肽反复刺激获得的CTL的TCR表达集中于个别基因家族,呈克隆性增殖。结论应用IgHV基因框架区来源的B淋巴瘤相关抗原九肽可以使特异性CTL克隆增殖,这些克隆以肽特异性和HLA限制性的方式识别靶细胞。了解这些CTL的作用和TCR识别相关抗原肽的分子结构,将有助于确定体内T细胞和B细胞相互调节的机制。

关键词: 免疫球蛋白类,, 表面, 淋巴瘤,, B细胞, T淋巴细胞,, 细胞毒性, 受体,, 抗原,, T细胞

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2005年10月13日

【期刊论文】钙依赖型蛋白激酶调节保卫细胞膜内向钾离子通道的实验证据*

张继澍, 王喜庆, 武维华**

植物学报,1998,40(11):1001~1009,-0001,():

摘要

保卫细胞内钙离子浓度的变化对气孔保卫细胞质膜上的内向钾离子通道活性有显著调节作用,而钾离子通道活性的变化可导致细胞渗透压的改变,进而调节气孔的开闭运动。然而,钙离子通过何种机制实现对钾离子通道的调节尚不清楚。作者利用膜片钳全细胞记录方法探讨了钙依赖型蛋白泊酶(CDPK)是否参与了钙离子调节保卫细胞钾离子通道的信号转导过程。当胞内钙离子浓度为1.5μmol/L时,保卫细胞全细胞内向钾电流被抑制约60%;同时加入CDPK的底物组蛋白Ⅲ-S或CDPK的底物竞争性抑制剂鱼精蛋白可完全逆转钙离子的作用;但在胞内同时加入纯化的CDPK蛋白则可进一步促进钙离子对保卫细胞内向钾电流的抑制。研究结果初步证明,CDPK介导了钙离子调节保卫细胞内向钾离子通道的信号转导过程。

关键词: 钙依赖型蛋白激酶,, 保卫细胞,, 钾通道,, 信号转导,, 磷酸化,, 去磷酸化

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