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2011年06月07日

【期刊论文】转铁蛋白修饰的载基因前阳离子脂质体制备及其表达研究

何勤, 钟志容, 刘戟, 邓勇, 张志荣, 宋庆国, 何勤*

药学学报:2007,42(2):216-220,-0001,():

摘要

本文制备、优化转铁蛋白修饰的前阳离子脂质体,并研究其相关性质。通过薄膜分散膜挤压法制备空白前阳离子脂质体;以鱼精蛋白缩合质粒DNA与空白前阳离子脂质体作用形成载基因前阳离子脂质体(PLPD);转铁蛋白(transferrin,Tf)再与PLPD作用形成转铁蛋白修饰的载基因前阳离子脂质体(Tf-PLPD);中心组合设计优化制备工艺;以lacZ为报告基因转染人肝癌细胞株HepG2;测定形态、粒径、电位和转染效率。结果显示,PLPD形态近似于球体,平均粒径为(228.9±8.0)nm,多分散指数为0.122±0.020(n=3);zeta电位为(-25.08±2.50)mV(n=3),转染效率(12.18±3.80)mU•mg-1(protein)。Tf-PLPD平均粒径为(240±12)nm,多分散指数为0.150±0.030(n=3);zeta电位为(-24.10±2.50)mY(n=3);转染效率(24.26±2.60)mU•mg-1(protein)是裸质粒的20倍;实验结果也表明血清的存在不影响PLPD和Tf-PLPD的转染效率;PLPD和Tf-PLPD小于阳离子脂质体LPD对人肝癌细胞HepG2,SMMC7721和张氏正常肝细胞3种细胞株的毒性。由此可见,转铁蛋白修饰的前阳离子脂质体作为基因转运的非病毒载体具有良好的应用前景。

关键词: 转铁蛋白, 前阳离子脂质体 制备, 转染效率

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2011年06月07日

【期刊论文】前阳离子脂质体的构建及有关性质研究

何勤, 钟志容, 邓勇, 刘戟, 张志荣, 宋庆国, 何勤*

中国药学杂志:2007,42(9)672~675,-0001,():

摘要

目的制备前阳离子脂质体并考察其相关性质。方法化学合成含二硫键的胆固醇衍生物(2.[[4-[(羟甲基)二硫]-1-亚氨丁基]氨基]乙基]氨基甲酸胆固醇酯,CHETA);薄膜分散-膜挤压法制备空白前阳离子脂质体;以鱼精蛋白缩合质粒DNA再与空白前阳离子脂质体作用,形成载基因前阳离子脂质体;粒度电位测定仪测定前阳离子脂质体的粒径和Zeta电位,电镜观察形态;考察在二硫键还原酶二硫苏糖醇的作用下前阳离子脂质体Zeta电位变化情况;以LacZ为报告基因转染HepG2细胞,X-gat原位染色定性观察,并定量测定β-半乳糖苷酶活性和总蛋白含量计算转染效率。结果前阳离子脂质体形态近似于球体,平均粒径为145.8nm(PDI=0.086),Zeta电位为-33.83mV,载基因前阳离子脂质体转染肝癌细胞HepG2转染效率为12.18mU•mg-1protein,是裸质粒的10.5倍。结论二硫键修饰的前阳离子脂质体是具有发展潜力的非病毒载体。

关键词: 基因治疗, 二硫键, 前阳离子脂质体 转染效率

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2009年10月24日

【期刊论文】c-raf-1反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞放射敏感性的影响

李少林, 任庆兰

实用肿瘤杂志,2003,18(1):27~29,-0001,():

摘要

目的 探讨癌基因c-raf-1的反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞放射敏感性的影响。方法 设立c-raf-1正义寡核苷酸组和非处理组(仅加入等量的脂质体,作对照,用RT-PCR检测卵巢癌细胞处理前后c-raf-1表达水平的变化。用平板克隆形成试验检测人卵巢癌细胞株SKOV3在脂质体c-raf-1反义寡核苷酸作用前后受60C0γ射线不同剂量照射后的集落形成率。结果 c-raf-1反义寡核苷酸能抑制c-raf-1癌基因的表达,经脂质体介导的c-raf-1反义寡核苷酸作用的卵巢癌细胞经γ射线照射后其集落形成率较转染正义寡核苷酸组及单纯照射组明显下降(P<O.01),而转染c-raf-l正义寡核苷酸组的集落形成率与单纯照射组相比无明显差异(P>0.05)。结论 c-raf-l反义寡核苷酸通过抑制c-raf-1的表达降低人卵巢癌细胞株SKOV3放射抗拒性。该作用可能与c-raf-1反义寡核苷酸抑制了引起细胞辐射抗拒的细胞信号转导途径有关。

关键词: 卵巢肿瘤, 脂质体 寡核苷酸类,, 反义, 辐射耐受性

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2009年08月30日

【期刊论文】国产注射用两性霉素B脂质体治疗深部真菌病的疗效与安全性的临床研究

殷凯生, 王彤, 廖万清, 洪微, 尹有宽, 章婉琴, 诸葛传德, 许蓓

中华医院感染学杂志,2004,14(8):850~854,-0001,():

摘要

摘要:目的评价南京药物研究所和上海先药业有限公司联合研制的新药两性霉素B脂质体(锋克松)注射剂,治疗深部真菌的临床疗效和安全性。方法:采用多中心开放阳性药随机平行对照的研究方法;实际入选深部真菌感染患者116例,其中包括试验(T)组30例(给予两性霉素B脂质体注射剂),对照(B)组31例(给予两性霉素B注射剂),开放试验(0)组55例(给予两性霉素B脂质体注射剂)。结果:T组的痊愈率为63.3%,有效率为96.7%,B组痊愈率为50.0%,有效率为86.7%,两组差异无显著性(P>0.05);中枢神经系统真菌患者中,T组意识障碍消失平均时间(7.75±2.06)d,比B组(21.67±10.4l)d短(P<0.05);T组和B组真菌清除率分别为93.3%和93.5%,两性霉素B脂质体对临床分离出的112株真菌的MICso为0.5mg/L,MIC90为1mg/L,两性霉素B的MICso和MIC90分别为0.5mg/L和2mg/L;T组不良反应发生率(60.0%)显著低下B组(83.9%,P=0.05)。结论:两性霉素B脂质体治疗深部真菌病的疗效与两性霉素B相似,其不良反应发生率低于两性霉素B。

关键词: 两性霉素B, 脂质体 真菌, 感染, 治疗

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2009年07月17日

【期刊论文】红酵母色素抗氧化性质的研究

吕晓玲, 张坤生, 张亮, 陈晓娟

食品科学,2004,25(3):61~63,-0001,():

摘要

本文以红酵母色素清除羟自由基和抗亚油酸脂质体过氧化能力来评价其抗氧化特性,并且用公认的抗氧化剂VE作对照,发现在高浓度时红酵母色素和VE的清除自由基能力相当,而在低浓度时,红酵母色素表现出更强的清除能力。红酵母色素只有在高浓度时才有抑制亚油酸过氧化的作用。

关键词: 红酵母色素, 羟基自由基, 亚油酸脂质体

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2009年06月16日

【期刊论文】脂质体结构特性的原子力显微镜研究*

孙润广, 孙润广), 齐浩), 张静)

物理学报,2002,51(6):1203~1207,-0001,():

摘要

用原子力显微镜(AFM)研究了1,22二油酸甘油232磷酸212甘油(DOPG)脂质体胞囊的形态和脂双层膜结构。报道了AFM探针与吸附在氧化硅膜上脂质体的相互作用结果。实验结果表明,在液晶态的DOPG中,AFM图像是一些球形或椭球形颗粒。这些球形或椭球形颗粒与液晶态的DOPG脂质体的结构特性有关,当AFM的探针与脂质体表面相互作用力超过某临界值时,脂质体胞囊破裂,变成脂双层结构,从图上可以看到,第二层的DOPG膜吸附在第一层上,膜的厚度约为5nm。

关键词: 原子力显微镜,, 脂质体,, 纳米结构

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2009年02月18日

【期刊论文】灯盏花素脂质体的制备及其理化性质的测定

平其能, 吕文莉, 郭健新, 平其能*

,-0001,():

摘要

目的:制备灯盏花素脂质体并测定其包封率等理化性质。方法:采用薄膜蒸发法和冷冻干燥法制备灯盏花素脂质体。冻干品水合后,RP-HPLC法测定脂质体含量;并用透析法结合紫外分光光度法测定其包封率;利用马尔文测定仪测定脂质体的粒径、Zeta电位;并考查脂质体胶体溶液在0.9%氯化钠注射液中的释放度。结果:脂质体的载药量为20.%±0.88% (n=3),包封率为81.1%±1.1%(n=3);冻干脂质体再分散后的粒径为50±12nm(n=3),Zeta电位为-24±9mV(n=3);脂质体胶体溶液在氯化钠注射液中2h的释放度为17.2%±0.8%(n=3),8h的释放度为26.1%±0.7%(n=3),24h的释放度为29.9%±0.8%(n=3)。结论:灯盏花素脂质体的载药量和包封率较高,粒径在纳米大小范围,可望实现体内的长循环和靶向给药。

关键词: 灯盏花素, 脂质体 包封率, 透析

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2007年05月29日

【期刊论文】脂质荷大体介导IFN-γ基因治疗肠癌小鼠的实验研究

吴文溪, 丁强, 沈历宗, 范萍, 许德华, 刘新垣

中华普通外科杂志2004年8月第19卷第8期/Chin J Gen Surg, August 2004, Vol. 19, No. 8,-0001,():

摘要

目的:探讨利用γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)基因对大肠癌的治疗作用及其作用机制。方法:构建携带IFN-γ基因的真核表达质粒pcDNA3-IFN-γ,以脂质体作载体,对荷大肠癌小鼠行瘤体内注射IFN-γ基因,检测经基因治疗后小鼠体内IFN-γ基因的表达、脾脏的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphoctye,CTL)活性、肿瘤的大小、肿瘤局部的淋巴细胞浸润情况及荷瘤小鼠的生存期。结果经IFN-y基因治疗后,治疗组小鼠血清中IFN-γ表达量和脾脏的CTL活性明显增强(P<0.01),肿瘤局部淋巴细胞浸润明显,肿瘤生长受到抑制,荷瘤小鼠的存活期明显延长。结论:利用IFN-γ基因治疗大肠癌具有明显的疗效。

关键词: 结肠肿瘤, 干扰素Ⅱ型, 基因治疗, 脂质体

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2006年07月26日

【期刊论文】三七总皂苷脂质体的制备及其生理适应性的初步考察

方晓玲, 沈央, 方晓玲*

中成药,2004,26(5):352~356,-0001,():

摘要

目的:研究三七总皂苷(PNS)脂质体的制备方法并对其生理适应性进行初步考察。方法:以薄膜分散法制备PNS脂质体,采用析因设计确定最优处方;以蟾蜍上腭纤毛摆动频率和大鼠肺水肿指数以及肺组织病理改变作为指标考察PNS脂质体的生理适应性。结果:PNS脂质体为大单室脂质体(LUV),圆形或椭圆形,外形圆整光滑,形态分布均一。平均粒径为(1546.5±321.4)nm,符合肺部给药对制剂粒径的要求,包封率为(78.5±2.15)%;PNS脂质体应用于蟾蜍上腭黏膜后,黏膜纤毛摆动频率是PBS的92.14%,PNS脂质体组大鼠的肺水肿指数和肺组织病理改变均显著轻于PNS溶液组,接近PBS组。结论:PNS脂质体具有良好的生理适应性,具有良好的开发应用前景。

关键词: 三七总皂苷, 脂质体 析因设计, 生理适应性

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2006年07月26日

【期刊论文】·制剂与质量·三七总皂苷脂质体的药剂学性质及大鼠肺部给药药动学研究

方晓玲, 沈央, 方晓玲*

中草药,2004,35(7):745~749,-0001,():

摘要

目的 制备三七总皂苷(P anax notog inseng saponins, PN S)脂质体,研究其药剂学性质及在大鼠体内药动学行为。方法 采用薄膜分散法制备PNS脂质体,考察其形态、粒径、包封率及稳定性,采用肺部滴注给药考察脂质体在大鼠体内的药动学行为。结果 PNS脂质体包封率为78150%,平均粒径为115Lm,外形圆整,体外泄漏慢,需低温保存。PNS脂质体经大鼠肺部滴注给药后,体内人参皂苷Rb1的药动学参数分别为T1ö2A=7100h,T1ö2B=27172h,AUC=221819Lg·hömL,绝对生物利用度为70114%。结论 PNS脂质体包封率高,性质稳定,延长PNS在血循环的时间,提高了经血管外给药途径的PNS生物利用度。

关键词: 三七总皂苷脂质体 包封率, 粒径, 稳定性, 药动学

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2006年03月23日

【期刊论文】前列地尔脂质体的制备及刺激性考察

王秋娟, LI Qin, PING Qi-neng, WANG Qiu-juan, GUO Jian-xin

中国新药与临床杂志,2004,23(7):423-426,-0001,():

摘要

目的:制备前列地尔脂质体以减少其静脉注射的刺激性。方法:采用逆相蒸发法制备前列地尔脂质体,用超滤膜测定脂质体的包封率及其释放、马尔文粒径仪测定平均粒径;并通过动物实验比较静脉注射的刺激性。结果:前列地尔脂质体的包封率可达到94%,超声后和高压匀质后的粒径为(732±s35)nm和(67±7)nm,刺激性得到显著改善。结论:前列地尔脂质体可以显著降低静脉注射引起的刺激性

关键词: 前列地尔, 脂质体 输注,, 静脉内, 刺激,, 化学性, 逆相蒸发法

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2005年02月24日

【期刊论文】脂质体-C-erbB2反义脱氧寡核苷酸对卵巢癌细胞的作用

丰有吉, 沈梅, 葛柏青, 吴直江, 朱铭伟

中华妇产科杂志,1999,34(8):485~487,-0001,():

摘要

目的 探讨脂质体-C-erbB2反义脱氧寡核苷酸(脂质体-C-erbB2 S-ODNs)对卵巢癌细胞系C-erbB2癌基因表达及细胞增殖的影响。方法 应用流式细胞仪技术,3H-胸腺嘧啶核苷掺入方法,观察脂质体-C-erbB2 S-ODNs对卵巢癌细胞系SKOV3 C-erbB2癌基因表达及细胞生长、细胞周期的作用。结果 脂质体-C-erbB2 S-ODNs能够降低C-erbB2的表达,并抑制细胞生长;脂质体-C-erbB2 S-ODNs降低细胞C-erbB2癌基因表达的作用效率较单用C-erbB2反义脱氧寡核苷酸(C-erbB2 S-ODNs)增强约40倍。结论 C-erbB-癌基因的反义调控在卵巢癌基因治疗中有一定作用;脂质体可有效增强C-erbB2 S-ODNs调控细胞C-erbB2癌基因表达的作用。

关键词: 卵巢肿瘤, DNA,, 反义, 基因,, erbB-2, 脂质体

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2005年04月16日

【期刊论文】固定化脂质体色谱研究中药复方的细胞膜通透性成分及其质量控制

李萍, 盛亮洪, 李睿岩, 李萍*, 邹汉法, 孔亮

分析化学研究报告,2004,32(12):1595~1598,-0001,():

摘要

提出了固定化脂质体色谱(immobilized liposome chromatography, ILC)研究中药复方的细胞膜通透性成分及其质量控制的方法。以当归补血汤及其组分为例,考察了它们在ILC色谱柱上的分离效果;当归补血汤水提取液和75%乙醇提取液在ILC色谱柱上各有8个保留峰,当归水提取液、甲醇提取液和75%乙醇提取液在ILC色谱柱上分别有7个保留峰;黄芪水提取液、甲醇提取液和75%乙醇提取液在ILC色谱柱上各有7个保留峰;建立了当归补血汤及其组分中阿魏酸和蒿本内酯的定量分析方法,当归补血汤水提取液和75%乙醇提取液中阿魏酸的含量分别为0.0743%和0.0688%蒿本内酯的含量分别为0.0472%和0.457%,当归水提取液和75%乙醇提取液中阿魏酸的含量分别为0.0694%和0.0691%,蒿本内酯的含量分别为0.0781%和0.455%。

关键词: 固定化脂质体色谱,, 中药复方,, 当归补血汤,, 细胞膜通透性成分,, 质量控制

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2005年03月16日

【期刊论文】哌仑西平脂质体的研制及评价

曾骏文, 戴淑真, 王子亮, 吴昌凡

中山大学学报(医学科学版),2004,25(3):217-221,-0001,():

摘要

目的 制备稳定性好、包封率高、缓释性能优的哌仑西平脂质体。方法 采用均匀设计等方法筛选制备哌仑西平脂质体的处方和工艺,并对其形态、粒径、包封率、加速实验结果及体外释放规律进行考察。结果 制得的哌仑西平脂质体为单层脂质体,平均粒径为480nm,包封率为77.24%±9.83%其稳定性好,缓释效果优于哌仑西平磷酸缓冲液。结论 哌仑西平脂质体达到设计要求。

关键词: 哌仑西平, 脂质体 眼部给药, 质量

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2005年02月24日

【期刊论文】阿霉素的不同盐型对其脂质体体外药物泄漏和体内长循环的影响

陆伟跃, 张磊, 潘弘, 刘敏, 陆伟跃*

,-0001,():

摘要

目的 探讨阿霉素不同盐型对脂质体的体内外稳定性的影响。方法 以薄膜分散-挤压法制备含有不同缓冲对的空白脂质体,用pH 梯度和化学梯度法包载阿霉素,对其在脂质体内状态进行观察,测定了阿霉素脂质体理化性质;用透析法检测阿霉素脂质体在不同介质中的药物泄漏;用HPLC法研究不同盐型阿霉素脂质体在大鼠体内药动学行为。结果 甘氨酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液和硫酸铵溶液作内水相制得的空白脂质体的平均粒径分别为103.3±7.6nm、101.9±11.7nm 和97.3±8.4nm,Zeta 电位分别为-21.3±0.5mv、-21.7±0.4mv、-20.9±0.7mv,对阿霉素的包封率分别为47.8%、96.7%、98.6%;甘氨酸盐制得的脂质体体外泄漏最快,硫酸铵制得的脂质体泄漏最慢;甘氨酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液和硫酸铵溶液作内水相制得的阿霉素脂质体大鼠体内平均滞留时间分别为12.13h、23.31h 和29.79h。结论 阿霉素在脂质体内水相中不同盐型影响其脂质体的体内外稳定性,以硫酸铵为内水相制得的阿霉素脂质体最稳定,其稳定次序与内水相中酸的强度有关,酸性越弱的其脂质体稳定性越高

关键词: 阿霉素, 脂质体 盐型, 稳定性

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2005年02月24日

【期刊论文】叶酸-脂质体制备及对HeLa细胞靶向作用*

陆伟跃, 刘敏, 潘俊, 力弘△, 马俊

上海医科大学学报,2000,27(1)4~8,-0001,():

摘要

目的 研制一种能通过叶酸受体途径靶向肿瘤细胞的叶酸O脂质体。方法 将叶酸(F)、聚乙二醇二胺(NH2 -PEG-NH2)、琥珀酸酐(SUC)和卵黄磷脂酰乙醇胺(EPE)按序共价连接,并与胆固醇(chol)、卵黄磷脂酰胆碱(EPC)以10∶40∶56 配比,用成膜-水化结合冷冻-熔融超声法制备内含钙黄绿素叶酸-脂质体,以负染色-电镜法确定其粒径;用荧光显微镜观察HeLa细胞摄取叶酸-脂质体与脂质体的差异;以荧光定量法确定浓度、时间、游离F、磷脂酶D(PLD)和磷脂酰肌醇特异磷脂酶C(PIPLC)对HeLa细胞摄取叶酸-脂质体影响程度。结果 (1)F-PEG-SUC-EPE连接物为色谱纯;叶酸-脂质体平均粒径为200nm。(2)叶酸-脂质体进入HeLa细胞质内量明显高于脂质体。(3)浓度增大、时间延长,叶酸-脂质体摄取量递增幅度明显减缓;HeLa细胞摄取叶酸-脂质体量均在脂质体的4倍以上。(4)50μmol/L游离F可使叶酸-脂质体摄取量降低50%; PIPLC(0.2U/ml)和PLD(0.5mg/ml)处理后,叶酸-脂质体摄取量分别降低71%和70%。结论 200nm 粒径的叶酸-脂质体能通过细胞膜上F受体介导内吞入胞,并能显著靶向富集F受体的肿瘤细胞。

关键词: 叶酸-脂质体 制备, HeLa细胞, 叶酸受体, 靶向

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2005年02月24日

【期刊论文】脂质体粒径的分光光度法检测

陆伟跃, 牛国琴, 潘俊, 陆伟跃*

Acta Pharmaceutica Sinica 2003, 38(7):547-551,-0001,():

摘要

目的 确立分光光度法判断脂质体相对大小,为评估脂质体物理稳定性提供一种简便、快捷的方法。方法 以Rayleigh-Gans-Debye理论为基础,固定脂质体膜材的种类、比例及其在溶液中的总量,分别用乙醇注入法和高压乳匀法制备不同粒径的空间稳定脂质体,以电镜法和热力学光散射法测得的粒径作为标准,找出不同方法制得脂质体在436nm波长处的吸光度A与粒径D的关系。结果 单位磷脂浓度的脂质体溶液在436nm 处log(A436nm PCp)与脂质体粒径的对数logD呈线性相关(r2≥E0.93,n=5)。结论 脂质体溶液的吸光度能反映脂质体相对大小,可作为一种评定脂质体物理稳定性的方法。

关键词: 分光光度法, 空间稳定脂质体 物理稳定性, 粒径

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2005年02月24日

【期刊论文】用连接叶酸的脂质体增加对体外培养的HeLa细胞的输送

陆伟跃, 力弘, 刘敏, 贾永锋, 谢成英

Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 2000, 9(2)96 ~99,-0001,():

摘要

在传代培养的HeLa细胞上观察了叶酸对脂质体靶向摄取功能的影响。将内含钙黄绿素的叶酸-脂质体和脂质体分别加入HeLa细胞中培养,并以荧光法检测细胞摄取量。共同培养4h,细胞摄取叶酸-脂质体量为脂质体4倍以上,在0.45mg·mL.1时达饱和;过量游离叶酸竞争抑制细胞对叶酸-脂质体的摄取;磷脂酶D或磷脂酰肌醇特导性磷脂酶C通过影响叶酸受体而抑制细胞对叶酸-脂质体的摄取。因此,HeLa细胞主要通过叶酸受体途径介导摄取叶酸-脂质体;叶酸受体高表达或高活性细胞摄取叶酸-脂质体的能力较未接叶酸的脂质体显著提高。

关键词: 叶酸受体, 叶酸脂质体 HeLa细胞, 靶向

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2005年02月24日

【期刊论文】甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺的制备及其对脂质体的稳定作用

陆伟跃, 牛国琴, 潘弘, 张静, 徐雯, 陆伟跃*

Chinese Journal of Pharmaceuticals 2003, 34(10),-0001,():

摘要

采用两步反应法制备脂质体空间稳定膜材料甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺(MPEG-EPE),度用以制备空间稳定脂质体(SLs),同时制备不含MPEG-EPE的传统脂质体(CLs),比较两者放置过程中粒径变化、加乙醇后浊度变化、包封钙黄绿素后的在冻干再水化过程中的荧光泄露程度及其与人血浆蛋白的吸附指标,评价MPEG2000-EPE对脂质体的稳定作用。结果表明,试验前后SLs的粒径及浊度变化不大,荧光泄露程度和人血浆蛋白吸附量也远小于CLs,提示其对脂质体有良好的稳定作用。

关键词: 甲氧基聚己二醇-磷脂酰乙醇胺, 制备, 脂质体 稳定作用

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