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2011年04月21日

【期刊论文】CTL识别的HLA2A2限制性人卵巢癌相关抗原OVA66表位的鉴定

葛海良, 金姝, 王颖, 王树军, 张惠珍, 李美星, 陈影

细胞与分子免疫学杂志,2005,21(2):233~242,-0001,():

摘要

目的:鉴定CTL识别的HLA2A2限制性人卵巢癌相关抗原OVA66表位。方法:以细胞因子从外周血单个核细胞(PBMC)中诱导树突状细胞(DC),通过形态学观察和流式细胞术进行鉴定。用表位预测法选取并合成两种肽分子,分别脉冲成熟的DC,并刺激HLA2A2+健康人自体CD8+T细胞。1wk后,用脉冲肽的自体PBMC以每7 d的间隔刺激该CD8+T细胞3次。以共接受4次抗原肽刺激的T细胞作为CTL,用乳酸脱氢酶(LDH)释放试验,检测CTL对靶细胞的杀伤效应。用酶联免疫斑点法(EL ISPOT),检测CTL中抗原特异性分泌IFN2γ的T细胞数。结果:形态学和流式细胞术的结果显示,PBMC可诱生成熟的DC肽L235(FLPDH IN IV)诱导的CTL,可特异性杀伤L235脉冲的T2细胞和OVA66+、HLA2A2+的SW480细胞,且L235诱导的特异性分泌IFN2γ的T细胞数增加。结论:卵巢癌相关抗原OVA66的HLA2A2限制性CTL表位L235,能激发对肿瘤抗原的特异性免疫应答,为制备肿瘤特异性肽疫苗奠定了实验基础。

关键词: 表位 树突状细胞, CTL, 肽疫苗, EL ISPOT

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2010年12月16日

【期刊论文】A族链球菌表面蛋白Fba单克隆抗体的制备及其对应表位的初步鉴定①

魏林, 马翠卿, 顾海燕, 郭奕阳, 胡光磊, 魏澎

中国免疫学杂志,2008,24(11):1046~1048,-0001,():

摘要

目的:制备抗A组溶血性链球菌(GAS)表面蛋白Fba(fibronectin-binding proteins a)的单克隆抗体(mAb),并对单抗的生物学功能及其相应表位进行了初步鉴定。方法:以重组Fba蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术及间接ELISA筛选出针对Fba的杂交瘤细胞株,以Western blot鉴定mAb的特异性,并将获得的mAb与Fba+GAS和Fba-GAS分别行全菌ELISA、与Fba的分段表达蛋白行Western blot,初步鉴定mAb针对的表位所在区域。结果:获得了稳定分泌抗Fba-mAb的杂交瘸细胞株,其中一株mAb能特异结合天然Fba+链球菌,且该单抗针对的表位包含了Fba蛋白的第104~108位氨基酸,该位点也是链球菌Fab蛋白结合补体调节蛋白FH的位点。结论:成功地制备了抗GAS表面Fba蛋白的mAb,其中一株mAb对应的表位为位于菌体表面的天然表位,并检测出了该mAb对应的表位所在区段,这为深入研究GAS的致病机制提供了有力工具。

关键词: A族链球菌, Fba蛋白, 单克隆抗体, 表位

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2010年12月16日

【期刊论文】丙型肝炎病毒重组蛋白抗原联合免疫的免疫原性和保护性研究

魏林, 曾瑞红, 李广学, 凌世淦, 张贺秋, 姚智燕, 杨建岭, 贺峰, 黄睿, 刘艳坤

中华微生物学和免疫学杂志,2009,29(7):642~645,-0001,():

摘要

目的 研究两个丙型肝炎病毒(HCV)多表位重组抗原联合免疫后诱导的细胞免疫和体液免疫应答,以及对小鼠的保护作用。方法 用两个多表位抗原HCV-T和HCV-E1联合免疫BALB/e小鼠3次,ELISA检测血清中抗体IgG、IgCl和IgG2a滴度;最后一次免疫后10d杀死一半小鼠,取脾细胞,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性;ELISPOT法检测分泌IFN-y和IL-4的细胞;最后一次免疫后2周,在免疫小鼠的背部皮下注射106个SP2/0-NS3细胞,考察联合免疫对小鼠的保护作用;另取BALII/e小鼠,先在背部皮下注射106个SP2/0-NS3细胞,7d后开始联合免疫,免疫3次,考察免疫治疗作用。结果 用HCV-T+HCV-E1联合免疫诱导了高滴度的HCV-E1特异性的IgG、IgG1和IgG2a抗体以及高水平的CTL活性;与单独免疫相比,联合免疫产生的分泌IFN-y和IL-4的细胞数量有协同作用;而且联合免疫能有效预防和治疗SP2/0-NS3对小鼠的攻击。结论 HCV-T+I-ICV—E1联合免疫诱导了保护性的体液免疫和细胞免疫应答,有望进一步开发为一种有效的重组IICV疫苗。

关键词: 丙型肝炎病毒, 表位抗原, 联合免疫, 免疫原性

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2010年12月16日

【期刊论文】A族链球菌(GAS)Fba蛋白单克隆抗体对应表位核心氨基酸的确定①

魏林, 郭奕阳, 马翠卿, 魏澎, 王秀荣, 冯惠东, 阎婉依

中国免疫学杂志,2009,25(12):1059~1062,-0001,():

摘要

目的:对A族链球菌Fba蛋白McAb2所对应的表位进行定位。方法:以初步定位的表位区段为线索合成三段重叠多肽,dot-ELISA检测McAb2与合成肽的亲合力,并以McAb2为靶分子,利用噬菌体随机七肽库进行亲和筛选,用竞争ELISA鉴定阳性克隆。结果:dot-ELISA检测结果表明Fba100-112肽段与McAb2的结合能力最强。经过3轮亲和筛选后,随机挑选20个噬菌体克隆,竞争ELISA对其与McAb2的亲和力做检测,其中12个克隆显示较强的阳性结果。阳性克隆DNA测序,与Fba基因第100位氨基酸至110位氨基酸中ITPDL同源性较高。结论:通过dot-ELISA将A族链球菌Fba蛋白McAb2对应的表位定位于100~112位氨基酸,结果同噬菌体随机肽库筛选的核心氨基酸位置吻合。为进一步研制表位肽疫苗、研究Fba蛋白及其单克隆抗体的生物学功能奠定了基础。

关键词: A族链球菌, Fba蛋白, 单克隆抗体, 表位 噬菌体肽库

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2009年11月16日

【期刊论文】HPV16 E7抗原的HLA-A2限制性细胞毒性T淋巴细胞表位的筛选与鉴定

郝飞, 徐云升, 宋志强, 钟白玉, 郝进, 叶庆佾

中华皮肤科杂志,2004,37(5):283~284,-0001,():

摘要

目的筛选和鉴定人工合成的人乳头瘤病毒16型E7抗原人白细胞抗原A2分子限制性细胞毒性T细胞预测表位。方法对预测的E7抗原人白细胞抗原A2分子限制性细胞毒性T细胞(CTL)表位运用标准Fmoc方案进行合成与纯化,采用标准”Cr释放试验检测特异性CTL诱导活性。结果筛选并鉴定出E711-19(YMLDLQPET)和E749-57(RAHYNIVTF)2条人乳头瘤病毒16型E7抗原人白细胞抗原A2分子限制性CTL表位。结论E711-19(YMLDLQPET)和E749-57(RAHYNIVTF)抗原性较强,有可能作为HPV感染治疗用肽疫苗的候选表位。

关键词: 乳头状瘤病毒, 人, 表位,, T淋巴细胞, E7抗原

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2009年09月28日

【期刊论文】地表位移场的大变形应变参数估计*

于胜文, 于胜文**, 姜岩, 徐咏梅, 周德才

矿业研究与开发,1999,19(2):5~8,-0001,():

摘要

许多工程的地表变形属于大变形范畴。本文以地表大变形为研究对象,把非线性连续介质力学的有限变形几何学应用到地表变形分析中,为精确研究地表变形状态信息提供了理论依据和数据处理方法。

关键词: 表位移场, 大变形, 参数估计

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2009年09月28日

【期刊论文】地表位移场的大变形应变参数估计

韩作振, 于胜文, 姜岩, 徐咏梅, 周德才

矿业研究与开发,1999,19(2):5~8,-0001,():

摘要

许多工程的地表变形属于大变形范畴。本文以地表太变形为研究对象,把非线性连续介质力学的有限变形几何学应用到地表变形分析中,为精确研究地表变形状态信息提供了理论依据和数据处理方法。

关键词: 表位移场,, 大变形,, 参数估计

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2009年04月06日

【期刊论文】运用噬菌体随机肽库分析系统性红斑狼疮的Sm抗原模拟表位

谢红付, 树叶, 张慧, 施为, 冯浩

临床皮肤科杂志,2004,10(10):600~603,-0001,():

摘要

目的:应用噬菌体呈现技术分析系统性红斑狼疮(SLE)Sm抗原的模拟表位。方法:以鼠单克隆抗Sm抗体为筛选配基,对噬菌体随机12肽库进行3轮亲和筛选。分离10个噬菌体克隆进行Dot-ELIsA和双抗体夹心ELISA鉴定。将阳性克隆进行DNA序列测定,并将混合阳性克隆与患者血清反应。结果:经3轮筛选,每轮筛选的投入与产出比逐轮升高,显示良好的富集效果。两种ELIsA鉴定9个噬菌体克隆具有特异性。经过DNA测序得到6个不同的序列,推导出保守的氨基酸序列为RR/PR/IS。混合克隆诊断SLE血清的敏感性是51.72%,特异性是100.00%。结论:噬菌体呈现技术能够分析Sm抗原的模拟表位,将有利于研制表位水平的诊断试剂。

关键词: 红斑狼疮, 系统性; 噬菌体呈现技术; 抗原, Sm; 表位

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2009年02月11日

【期刊论文】重组人纽表位肽12的胃蛋白酶切肽图分析方法的研究*

王旻, 纪宏, 王军志

药物生物技术,2004,11(5):290~293,-0001,():

摘要

采用反相高效液相色谱法建立重组人纽表位肽12 的标准肽图分析法,固定相为十八烷基硅烷键合硅胶,流动相A 液:0.1%TFA的水溶液,流动相B 液;0.1%TFA的乙腈溶液;梯度洗脱程序;0~70min内B%由0%增至70%。结果3批重组人纽表位肽12样品的反相高效液相色谱图完全一致,与重组人纽表位肽12理化对照品的肽图比较,完全吻合,同时胃蛋白酶并不干扰肽图的测定,该法准确度高、重现性好,可用于重组人纽表位肽12的质量控制。

关键词: 重组人纽表位肽12, 肽图, 反相高效液相色谱法, 胃蛋白酶切

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2007年05月31日

【期刊论文】噬菌体肽库中筛选NMDA受体抗原表位

孙长凯, 康晓楠, 范明, 薛沿宁, 邵宁生, 赵杰, 韩大跃, 施广霞

生物化学与生物物理进展/Prog. Biochem. Biophys. 2003;30 (4),-0001,():

摘要

为了获得人N-甲基-天冬氨酸受体(NR)主亚基(NR1)M3-M4环B细胞表位,以人NR1分子M3-M4环单克隆抗体MAB363淘筛噬菌体展示随机12肽库,对筛选克隆进行特异性ELISA检测和竞争结合实验分析。从30个克隆中得到一个阳性克隆序列“VHTNPSTWQPIL”(克隆1),原核表达的NR1 M3-M4环可以与克隆1竞争结合MAB363。固相合成5个表位探针短肽,发现其中只有R(22)LRNPSKD可以与M3-M4环竞争结合抗体,将NPS三个氨基酸残基逐一敲除,缺失N或NP的合成肽和M3-M4环竞争抗体的能力减弱,缺失NPS的合成肽完全没有竞争能力,证明MAB363的表位为NPS,S可能是关键性残基。上述结论为免疫干预防治兴奋毒性脑损害策略的实施提供了一个重要线索和依据。

关键词: 噬菌体展示, B细胞表位 NMDA受体

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2006年08月21日

【期刊论文】应用免疫球蛋白重链可变区上框架区来源的抗原九肽获得的细胞毒T细胞功能分析

朱平, 郭晓玲, 刘英, 刘静, 朱霞

Chin J Hernator, August 2005, Vol 26. No.8,-0001,():

摘要

目的明确存B淋巴细胞肿瘤表面的免疫球蛋白重链可变区(IgHV)的框架区(FR)是否存在可以激发细胞毒T淋巴细胞(CTL)的抗原表位,这些来源于FR的抗原肽是否能够激发家族特异性的免疫反应,探讨按照B淋巴细胞肿瘤的IgHV基因分型进行家族性的免疫治疗的可能性方法利用生物信息学系统预测了40例B淋巴细胞肿瘤表面的免疫球蛋白序列的抗原表位,人T合成不同基因家族的抗原几肽,利用1、2细胞结合实验检测预测的抗原肽和HLA分子的亲合力利用体外CTL刺激扩增体系,诱导特异性的CTL细胞增殖,用肽/HLA四聚体检测特异性CTL的数目,应用LDH释放实验检测CTL的细胞毒活性并验证其家族特异性?结果在B淋巴细胞肿瘤的7个IgHV基因家族中找到了l2个高亲和力的抗原九肽,其中l0个(83%)位于FR,以HLA-A 0201正常供者的外周血单个核细胞(PBMNC)负荷该九肽作为抗原呈递细胞去刺激自身PBMNC,经过4轮刺激,CD8和肽/HLA四聚体双阳性细胞从0.38% J二升到49.38% LDH释放实验证明对HLA-A{0201(+)、IgHV1(+)靶细胞有明显的杀伤作用,并且被IgHV1肽刺激的CTL不能识别负荷IgHV3肽的靶细胞:结论IgHV基因FR抗原九肽可以刺激产生具有HLA限制性的并且肽特异性的CTL,同时这样的杀伤作用具有家族特异性,以此为靶位有望对B淋巴细胞肿瘤进行家族特异性的免疫治疗.

关键词: 表位,, B淋巴细胞, 肿瘤,, B淋巴细胞, T淋巴细胞,, 细胞毒性

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2006年08月21日

【期刊论文】急性B淋巴细胞白血病免疫球蛋白重链可变区的细胞毒T淋巴细胞识别表位

朱平, 刘英, 胡亚美

Chin J Once. February 2005, Vol 27, No.2,-0001,():

摘要

目的分析儿童急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)细胞免疫球蛋白重链可变区(IgHV)的基因特征,确定IgnV的细胞毒T淋巴细胞(饥)识别表位。方法PCR扩增37例儿童B-ALL的7个IgnV基因家族,PCR产物直接测序,利用生物信息资源,分析所得序列的特征并预测AIJI|细胞IgnV上与HLA-A*0201分子结合的九肽。合成预测九肽QLVQSGAEV,进行T-B杂交瘤细胞系(T2)结合实验,用荷肽抗原呈递细胞,反复刺激HLA.A*0201正常供者外周血中肽特异性CD8 T细胞的扩增。结果37例B-ALL均检测到IgHV基因,经PCR产物测序,得到40份IgHV基因序列,它们优先利用基因片段Vh4-34(12.5%)和vH4-59(10.0%)。AIJI|细胞的IgHV基因利用D7-27片段的频率(15.4%)和在DJH结合区缺乏非编码核苷酸的频率(20.0%),均明显高于正常成人外周血淋巴细胞的IgHV基因。17.5%的序列含有不到2%的替代突变。从40份AIJI|细胞的IgHV序列,预测出12条与HLA-A*0201分子有高亲和力的九肽,10条(83.0%)位于框架1和3区。合成九肽QLVQSGAEV使细胞表面HLA-A.A*0201分子的表达强度提高1.6倍。HLA-A.A*0201正常供者外周血中的QLVQSGAEV特异性CD8 T细胞,在荷肽抗原呈递细胞的重复刺激下,由2轮刺激后的1.6% 增至3轮刺激后的82.6%。结论儿童HLA的IgHV基因为胚系基因,重链框架区有与HLA-A.A*0201结合的抗原九肽,这些九肽能够诱导特异性CD8 T细胞的活化和增殖。

关键词: 白血病,, 淋巴细胞性, 免疫球蛋白, 细胞毒T淋巴细胞, 表位

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2006年08月21日

【期刊论文】免疫球蛋白重链框架区的抗原九肽诱导特异性细胞毒T细胞增殖

朱平, 刘英朱平, 胡亚美

Natl Vled J Chioa, 17 Juahuan, 2004, Vol 84, No.2,-0001,():

摘要

目的探索免疫球蛋白重链可变区(IgHV)是否存在T细胞识别的表位。方法PCR扩增108例急性淋巴细胞白血病(ALL)的7个IgHV家族的重排基因,PCR产物直接测序并翻译成氨基酸。利用互联网生物信息资源分析B-ALL IgHV基因的重排类型和基因变异,利用SYFPEITHI和BIMAS软件预测IgHV基因编码蛋白质的T细胞表位。合成代表性九肽IgHV1家族的QLVQSGAEV,进行T2结合分析、合成九肽诱导的T细胞扩增、扩增细胞的HLA-A 0201/QLVQsGAEV四聚体检测等实验,确定合成九肽的免疫原性。结果66%的B-ALL检测到IgHV基因重排克隆。在40份测序得到的B-ALL IgHV序列中,选出26份进行HLA-A 0201分子结合九肽的预测,发现7个IgHV家族共有12条抗原九肽。除1条位于第3互补决定区(CDR3)外,10条(83%)位于框架区(FR),并与相应胚系V 家族的代表序列相同;为同一IgHV家族的白血病细胞所共有。合成的IgHV1抗原九肽可将12细胞表面HLA-A 0201分子的表达提高1.63倍。HLA-A 0201正常供者的外周血淋巴细胞接受该九肽负荷的自身PBMC的1轮刺激,CD8 四聚体细胞达1.64%,继续接受该九肽负荷的12细胞的2轮刺激,CD8 四聚体细胞增至82.57%。结论B淋巴细胞的免疫球蛋白重链框架区有CTL识别的IgHV家族特异的抗原九肽,正常人外周血T细胞库存在这些抗原九肽特异的CTL,这些抗原九肽可诱导特异性CTL的增殖。

关键词: 免疫球蛋白类, 表位; 白血病, T细胞

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2005年04月29日

【期刊论文】利用噬菌体展示肽库筛选和鉴定沙门氏菌O9抗原的模拟表位*

焦新安, 张扬**, 焦新安***刘文博, 潘志明, 高崧, 张如宽, 刘秀梵

中国人兽共患病杂志,2003,19 (1):60~63,-0001,():

摘要

目的 用生物素标记沙门氏菌O9单克隆抗体(3-47-O)作为分子探针,从两个九肽噬菌体展示文库中筛选鉴定该抗体所识别的抗原模拟表位,从而为模拟多糖的多肽疫苗或编码该模拟表位的DNA疫苗研制奠定基础。方法 与结果经过三轮的亲和筛选,得到了两个能与O9单抗反应的强阳性单克隆扩增物gm62和gm68,其序列分别为SHHVRGGGG和YQKWYLPKS。竞争SLISA实验表明,1010转导单位噬菌体gm68对肠炎沙门氏菌与3-47-O结合的抑制率达到65%,而噬菌体gm62的抑制率仅为20%且gm68可以诱导产生针对沙门氏菌O9的抗体,而gm62则不能。结论 实验结果显示九肽YQKWYLPKS是具有免疫原性的O9抗原模拟表位。

关键词: 沙门氏菌, O9抗原, 模拟表位 噬菌体展示肽库

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2005年04月29日

【期刊论文】重组卡介苗表达的MalE蛋白T细胞表位的鉴定

焦新安, Richard LO-man, Edith Dériaud, Sophie Burgaud Brigitte Gicquel, Nathalie Winter, Claude Leclere, 刘秀梵

中华微生物学和免疫学杂志,2002,22(1):53~57,-0001,():

摘要

目的 鉴定重组卡介苗表达的MalE蛋白T细胞表位。方法 用抗原提呈试验、T细胞增殖试验、ELISPOT试验和表位作图测试重组MalE蛋白的T细胞表位。结果 重组BCG. MalE功能性表达了MalE蛋白的4种H-2d限制性T细胞表位。结论 在4种表位中,p68~82是重组MalE蛋白的主要T细胞表位,而其余3个为次要表位。

关键词: 重组卡介苗, MalE蛋白, T细胞表位

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2005年04月29日

【期刊论文】应用噬菌体肽库技术定位沙门氏菌鞭毛蛋白上属特异性共同抗原表位

焦新安, 刘文博, 高崧, 张扬, 潘志明, 王芳, 张如宽, 刘秀梵

畜牧兽医学报,2003, 34 (2), 183-187 ,-0001,():

摘要

用生物素标记的沙门氏菌属特异性单克隆抗体de7作为分子探针,应用亲和筛选法从噬菌体肽库中筛选该单抗所针对的表位克隆,最终进行定位。经三轮筛选后,用斑点印迹法检测,得到良好的富集效果。通过免疫筛选法从第三轮筛选物中挑取了24个阳性克隆,再以斑点印迹、竞净ELISA进一步鉴定阳性克隆,证实已获得了沙门氏菌鞭毛属特异性共同抗原的模拟表位。测得的序列为SRRSFTTTE,将其与沙门氏菌共毛蛋白氨基酸序列相比较,同源性较小,但在不同血清型沙门氏菌鞭毛蛋白氨基酸序列的I区高度保守序列为RAXXT,且这种序列排列的几率为1/205,因此推断该单抗所针对的表位在该区段上。此外,以阳性克隆免疫Balb/c小鼠,并制备高免血清进行间接荧光检测和竞争ELISA鉴定,结果表明其具有优良的免疫原性和高度的特异性,这亦为模拟表位疫苗的研究提供了新思路。

关键词: 沙门氏菌, 鞭毛蛋白, 属共同抗原表位 模拟表位 噬菌体肽库, 表位定位

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2005年04月15日

【期刊论文】免疫信息学

王月丹, 陈慰峰

自然科学进展,2004,14(10):1081~1085,-0001,():

摘要

免疫信息学是在21世纪初才被建立的一门以信息学与现代免疫学为基础的交叉学科。在中外科学家的共同努力下,免疫信息学的概念和理论体系正在逐步走向成熟,其自身的发展也促进了现代免疫学和新型疫苗研究工作的进步。文中对免疫信息学概念的建立过程及免疫信息学的最新进展做一简要概述。

关键词: 免疫信息学,  抗原表位  疫苗设计

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2005年02月25日

【期刊论文】戊型肝炎病毒ORF2编码多肽抗原的表达及其特性研究

孙茂盛, 谢天宏, 李洪钊, 张光明, 冮宏映, 孙强明*, 丁云菲, 马雁冰

生物技术,2004,14(1):8~10,-0001,():

摘要

迄今所发现的唯一的戊型肝炎病毒(HEV)中和表位定位于开放读码框架2(ORF2)编码蛋白的第578和第607氨基酸(aa)之间的区域。将对应于此区域的基因片段通过一段柔性的甘氨酸铰链与乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HbsAg)基因的3'端相连,构建成HBV/HEV融合基因。该融合基因在毕赤酵母细胞内的表达产物为分子量约29 kDa的融合蛋白,具有组装成嵌合病毒样颗粒(VLP)的能力。此嵌合VLP具有与HBsAg VLP 相似的特性且保留了天然HBV/ HEV双重抗原性。对此嵌合VLP特性的初步研究提示其可能具有HBV/HEV 双价重组疫苗的潜在应用前景。

关键词: 戊型肝炎病毒, ORF2, 中和表位 表达

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2007年12月19日

【期刊论文】弓形虫多表位基因植物表达载体的构建

周晓红, 陈晓光, 张晓东, 杨培梁, 习佳飞, 胡建军, 王亚楠, 李林, 沈树满

中国寄生虫学与寄生虫病杂志2003年4月第21卷第2期/Chin Parasitol Parasit Dis 2003-04, Vol. 21, No. 2: 106-109,-0001,():

摘要

目的 构建弓形虫多表位基因(TGMG)植物表达载体。方法 ①将TGMG亚克隆人pBAC55构建中间载体pB35MG,再将其中E35S/TGMG/NOS3'结构单元亚克隆人pCAMBIA2300构建植物表达载体pC35MG。②将番茄果实特异性启动子E81.1插入pB35MG构建中间载体pB35E1MG,再将其中E35SE81.1/TGMG/NOS3'结构单元亚克隆人pCAMBIA2300构建植物表达载体pC35E1MG。③将番茄果实特异性启动子E82.2插入pB35MG构建中间载体pBE2MG,再将其中E82.2/TGMG/NOS3'结构单元亚克隆人pCAMBIA2300构建植物表达载体pCE2MG。测序鉴定pB35MG、pC35E1MG、pCE2MG中的TGMG序列。④pC35MC、pC35E1MG、pCE2MG转化根癌农杆菌LBA4404.结果 重组质粒用酶切鉴定均得到预期片段,pB35MG、pC35E1MG、pCE2MG测序结果正确。结论 成功构建TGMG中间载体pB35MG、pB35E1MG、pBE2MG,以及植物表达载体pC35MG、pC35E1MG、pCE2MG。并将3种植物表达载体导入根癌农杆菌。

关键词: 弓形虫, 表位基因, 番茄果实特异性启动子, 植物表达载体

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