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2011年06月21日

【期刊论文】子宫内膜容受性相关标志物研究进展

宋殿荣, 徐燕颖

医学综述,2008,14(14):2101~2104,-0001,():

摘要

胚胎着床是复杂的程序化的生理过程。子宫内膜仅在极短时期内允许胚胎植入,此时子宫内膜达到最大胚泡种植容受性。近年来随着辅助生殖技术的发展,促排卵药物的应用成熟,不孕症的治疗也上升到了一个新的高度,但胚胎移植成功率依然不理想。胚胎植入成功在于有良好的胚胎和容受性的子宫内膜。而子宫内膜客受性形成过程受多种细胞因子、蛋白分子调控。本文综述了影响子宫内膜客受性相关因素的研究进展。

关键词: 子宫内膜容受性, 着床, 细胞因子, 分泌蛋白, 转录因子

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2009年11月09日

【期刊论文】JAB1与糖皮质激素受体的相互作用及对其转录活性的影响*

粟永萍, 李淑蓉**, 粟永萍***, 刘云杰, 刘晓宏, 楼淑芬, 程天民

生物化学与生物物理进展,2004,31(2):141~145,-0001,():

摘要

应用酵母双杂交方法筛选到与糖皮质激素受体(GR)结合的蛋白JABI,进一步验证JABI与GR的结合作用并证明其对GR的影响,构建与Ca14-BD融合表达的载体pCBKT7-GR LBD,与构建于pACI2载俸上的入骨髓cDNA文库杂交,在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp选择培养板上培养,经X-a-gal检测,阳性克隆片段插入pCEM@一T Vector载体,测序,再经酵母双杂交和GST pull down蛋白质结合实验验证其结合作用,应用反映CR转录活性的CAT报告基因检测JABI对CR的调节活性,结果在人骨髓cDNA文库中,筛选到42个X-a-gal检测变蓝且含有pAC12质粒序列的克隆,其中有5个克隆的序列皆为Jun活性区结合蛋白JABI的一部分,酵母双杂交和蛋白质结合实验表明,JAB1与COS7真核表达的GR-LBD在体外有结合作用,JABI加强CR转录激活的能力,

关键词: 糖皮质激素受体,, ABI,, 转录因子,, 酵母双杂交系统

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2009年09月13日

【期刊论文】人参皂甙对红系、粒单系、巨核系细胞株的增殖及转录因子的诱导作用*

高瑞兰, 陈小红, 徐卫红, 金锦梅, 林筱洁

,-0001,():

摘要

目的:通过观察人参皂甙(CS)对c-fos、GATA-1转录因子的诱导作用,探讨CS在造血细胞内的作用机理。方法:选用粒系细胞株HL-60、单核细胞株U937、红系细胞株K562和巨核系细胞株Meg-01作靶细胞,MTT法和祖细胞集落培养法观察CS的增殖效应;用WestemBlot来分析核蛋白抗原与c-fos、GATA-1抗体的结合反应。结果:(1)MTT法和祖细胞集落培养法均显示CS/(10μg/ml)能够明显地刺激三系细胞增殖,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。(2)WestemBlot分析表明HL-60、K562和Meg-01细胞经CS处理后核内c-fos转录调控蛋白量分别是未经处理细胞的1.5、2.0和2.5倍,但U937细胞不表达c-fos蛋白。(3)除了U937细胞不表达GATA-1蛋白外,其他细胞株经CS刺激后GATA-1转录调控蛋白量分别是处理前的1.5、2.1和1.3倍。结论:CS能够明显地刺激3种系列的细胞株增殖,并能有效地通过诱导c-fos或GATA-1转录因子而调控造血细胞与增殖或分化有关基因的表达。

关键词: 人参皂甙 c-fos转录因子 GATA-1转录因子

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2009年09月13日

【期刊论文】三七皂甙对造血细胞GATA-1和GATA-2转录调控蛋白的诱导作用

高瑞兰, 徐卫红, 林筱洁, 陈小红, 吴超群

中华血液杂志,2004,25(5):281~284,-0001,():

摘要

目的观察三七总皂甙(PNS)对锌指结构GATA族转录调控蛋白的诱导作用,探讨PNS在造血细胞内的信号传递途径。方法选择恰当浓度的PNS作用于正常人骨髓单个核细胞、HL-60、K562、CHRF-288和Meg-01细胞,2周后提取核蛋白,用GATA-1和GATA-2抗体行Western印迹杂交,检测GATA-1和GATA-2的表达情况。用32P标记的GATA双链寡核苷酸探针行电泳带移动阻滞试验(EMSA)和抗体胶移动实验,检测GATA-DNA复合物及亚型。结果PNS能够促进人骨髓红系、粒系祖细胞增殖。Western印迹杂交显示PNS诱导K562、CHRF-288和Meg-01细胞的GATA-1和GATA-2蛋白表达量增高,分别是未经处理细胞的1.5~2.8倍和2.0~3.1倍;EMSA结果表明PNS诱导三株细胞的GATA-DNA结合复合物条带密度明显增高;HL-60细胞在PNS处理前后均未显示GATA活性。抗体胶移动实验证明PNS诱导的GATA-DNA复合物的主要成分为GATA-1和GATA-2。免疫沉淀显示PNS诱导的GATA-1和GATA-2蛋白均处于磷酸化的功能激活状态。结论PNS可通过诱导GATA-1和GATA-2蛋白合成增加,与相关基因上游调控区的启动子和(或)增强子结合的活性增高,而调控与造血细胞增殖、分化相关基因的表达。

关键词: 造血干细胞, 转录因子,, GATA, 转录调控, 三七皂甙

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2009年09月13日

【期刊论文】三七皂苷对造血细胞AP-1家族转录调控蛋白NF-E2,c-jun和c-fos的诱导作用

高瑞兰, 徐卫红, 陈小红, 钱煦岱, 吴超群

中国实验血液学杂志,2004,12(1):16~19,-0001,():

摘要

为了进一步研究三七总皂苷(PNS)对转录调控蛋白AP-1家族的主要成员NF-E2、c-jun和c-fos转录因子的诱导作用,探讨PNS在造血细胞内的信号传递途径,选用人粒系HL-60、红系K562、巨核系CHRF-288和Meg-014个细胞株作靶细胞,经PNS刺激处理后提取细胞核蛋白,分别用人抗NF-E2、c-jun和c-fos抗体与核蛋白作Westernblot杂交实验,并用32P标记的具有与NF-E2、c-jun和c-fos转录因子共同结合位点的AP-1双链寡核苷酸探针作电泳带移动阻滞实验(EMSA)。结果表明:①Westernblot显示PNS诱导HL-60,K562,CHRF-288和Meg-014株细胞的NF-E2和c-jun转录因子蛋白水平分别是未经处理细胞的1.5-2.5倍和2.0-3.0倍。诱导的c-fos蛋白在K562,CHRF-288和Meg-013株细胞分别提高2.0-3.0倍,但HL-60细胞的c-fos在PNS处理后无明显变化;②EMSA显示AP-1转录调控蛋白与DNA结合复合物的特异性条带,经PNS诱导后4株细胞的AP-1蛋白与DNA复合物条带密度明显高于未经处理的细胞。结论:PNS在造血细胞内对基因的转录调控涉及到AP-1家族转录因子成员NF-E2、c-jun和c-fos,通过诱导这些转录因子量的增加,与特异性DNA促进子结合的活性增高而调控与细胞增殖分化相关的基因的表达。

关键词: 三七皂苷, 造血细胞, AP-1家族转录因子 NF-E2, c-jun, c-fos

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2009年09月06日

【期刊论文】升清胶囊对胆色素结石豚鼠肝细胞核因子-KB蛋白表达的影响

朱培庭, 顾宏刚, 张静喆, 章学林, 刘建文, 李婷

中西医结合学报,2006,4(5):518~521,-0001,():

摘要

目的:探讨疏肝利胆中药升清胶囊防治胆色素结石的作用机制。方法:用原代细胞培养方法建立胆色素结石豚鼠肝细胞模型;采用血清药理学方法制备不同浓度含升清胶囊药物血清;建立脂多糖刺激下体外培养原代肝细胞高核转录因子-KB(nuclear factor-KB, NF-KB)蛋白表达的实验模型,用Western-blotting检测不同浓度含药血清对于NF-KB蛋白表达的影响。结果:升清胶囊能降低脂多糖刺激引起的NF-KB蛋白的表达;随着用药浓度的增加,升清胶囊对脂多糖刺激引起的NF-KB蛋白表达的抑制作用也越强。结论:疏肝利胆中药升清胶囊能降低脂多糖刺激引起的NF-KB蛋白的表达,可能是其防治胆色素结石成石及胆道炎症反应的作用机制之一。

关键词: 肝细胞, 转录因子-KB, 豚鼠, 胆结石

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2009年07月14日

【期刊论文】c-myc反义寡核苷酸对人肝癌细胞SMMC-7721端粒酶活性的影响

陈剑秋, 陈传贵, 吴义生, 沈洪

天津医药,2003,3(19): 593~595,-0001,():

摘要

目的:探讨c~myc反义基因治疗肿瘤的机制。方法:将正义(sense)、反义(antisense)、错配(mismatch)的c-myc寡核苷酸作用于体外培养的人肝癌细胞SMMC-7721,分别应用免疫组化、RT-PCR、PCR-ELISA等方法,观察对c-myc蛋白表达、端粒酶亚单位及活性表达的影响。结果:10μmol/L浓度的反义c-myc寡核苷酸作用于SMMC-772l 24h、48h后,相应的c-myc蛋白、端粒酶催化亚单位hTERT mRNA及其端粒酶活性与空白对照组相比,差别有统计学意义(P<O.O1);而正义组和错配组与空白对照组相比,差别无统计学意义(P>O.O5)。结论:c-myc反义寡核苷酸可能通过抑制端粒酶活性而抑制肿瘤细胞增殖。

关键词: 寡核苷酸类,, 反义, 端粒, 末端转移酶, 转录因子

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2009年06月16日

【期刊论文】红毛七提取物对H202损伤内皮细胞核转录因子-KB的表达和NO生成的影响

刘俊田, 林蓉, 贺浪冲, 甘伟杰, 杨广德

中国药学杂志,2004,11(11):826-828,-0001,():

摘要

目的 观察红毛七的提取物(HMO4)对H202损伤内皮细胞核转录因子-KB的表达和一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOs)的影响。方法 用H2O2造成血管内皮细胞损伤模型,采用MTT法观察HMO-4对血管内皮细胞活性的影响;用比色法测定细胞培养液中NO,NOs含量;免疫细胞化学法观察内皮细胞核转录因子-kB的表达。结果 H2O2对血管内皮细胞具有损伤作用,HMO4在一定剂量内减少细胞的死亡;HMO-4还可促进H2O2损伤的血管内皮细胞内No,Nos释放的增加和抑制核转录因子-kB的表达的加强。结论 HMO-4对H2O2损伤的血管内皮细胞具有保护作用,其机制可能与其增加NO,N0s释放和转录因子-KB的表达有关。

关键词: 红毛七, 内皮细胞, 转录因子-KB

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2007年04月29日

【期刊论文】烟草DREBP转录因子结合DRE元件的关键氨基酸

刘卫群, 王永亮, 郭红祥, 赵同金, 周海梦, 郭蔼光

中国生物化学与分子生物学报2006年2月/Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology 22 (2): 111-116,-0001,():

摘要

从烟草品种本塞母氏中分离出2条DREB类转录因子基因, 分别命名为NbDREB1和NbDREB2。根据测序结果推导出的氨基酸序列分析显示,NbDREB1和NbDREB2都具有典型的AP2/EREBP转录因子家族EREBP亚族A类特征。酵母单杂交结果显示,它们都不具有激活功能。连接pGADT7反式激活载体形成融合基因表达结果显示,NbDREB1能与DRE顺式作用元件结合,NbDREB2则不能。比较NbDREB1和NbDREB2的AP2区,发现两者的第2和49位氨基酸残基不同。对NbDREB2的第2位氨基酸残基N点突变为Y,NbDREB2也显示出与DRE顺式元件结合的活性,表明烟草DREB转录因子的AP2区第2位氨基酸残基Y是识别及结合DRE顺式作用元件必需的氨基酸残基。

关键词: 烟草; 转录因子 AP2/EREBP结构域, DRE顺式元件, 关键氨基酸

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2006年10月10日

【期刊论文】骨形态发生蛋白2在骨髓源性心肌干细胞向心肌分化中的作用

谭玉珍, 贺其志, 王海杰, 王新艳, 孙丽莉

解剖学报,2005,36(5):498~502,-0001,():

摘要

目的 研究骨形态发生蛋白-2(BMP-2)对骨髓源性心肌干细胞(MCSC)向心肌分化的作用,探讨MCSC向心肌分化中的BMP-2信号转导机制。方法 从SD大鼠骨髓中筛选MCSC,用BMP-2诱导向心肌定向分化。RT.PCR检测诱导前后BMP-2受体BMPRIA和BMPRII、心肌早期转录因子Nkx2.5和GATA-4以及cTnT mRNA的表达。免疫细胞化学标记诱导后细胞cTnT和cx-43的表达。结果 用BMP-2诱导后,MCSC的形态和排列发生变化。RT-PCR检测结果显示,诱导前BMPRIA和BMPRII以及Nkx2.5和GATA-4呈低表达,诱导后1周表达增加,3~4周表达明显。cTnT mRNA在诱导前不表达,诱导后l周开始表达,3~4周表达明显。免疫细胞化学染色显示,cTnT和c-43从诱导后2周开始表达。3~4周cTnT表达增强,呈现密集的横纹样结构。cx-43在2周位于细胞膜下,3周分布于相邻细胞连接处,4周呈颗粒状密集分布于肌管的相邻细胞连接处。结论 BMP-2通过BMPRIA和BMPI的介导作用诱导MCSC分化为心肌细胞。

关键词: 骨形态发生蛋白-2, 骨髓源性心肌干细胞, 心肌早期转录因子: cTnT, Cx-43, 大鼠

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2005年03月04日

【期刊论文】急性非淋巴细胞白血病中转录因子GATA-2基因插入突变*

李扬秋, 杨力建, 陈少华, 卢育洪, 张洹

Journal of Ex perimental Hematology 2000; 8 (4),-0001,():

摘要

采用RT-PCR,单链构象多态性(SSCP)和核苷序列分析检测85例急性非淋巴细胞白血病(ANLL)病人外周血单个核细胞中GATA-2基因的表达和突变情况。结果发现绝大多数ANLL都表达了GATA-2基因(89.4%),并发现1例M1病人的PCR产物较正常产物大,序列分析显示在GATA-2基因第二锌指区出现18个核苷酸的插入突变,使其GATA-2因子的第二锌指增加6个氨基酸,其中含有1个能与锌离子结合的半胱氨酸。该插入突变可能引起GATA-2的功能改变,该结果为首次发现ANLL中的GATA-2基因的插入突变。

关键词: 急性非淋巴细胞白血病,, 转录因子,, GATA-2基因,, 插入突变

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