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2009年04月19日

【期刊论文】细菌毒素和肿瘤坏死因子-α对人腹膜间皮细胞白细胞介素8和纤连蛋白分泌的影响

刘伏友, 段绍斌, 彭佑铭, 夏家辉

中华肾脏病杂志,2001,17(3):160~163,-0001,():

摘要

目的 研究细菌毒素和肿瘤坏死因子(TNF)-α对人腹膜间皮细胞分泌白细胞介素(IL)-8和纤连蛋白(FN)的影响。方法分离人腹膜间皮细胞(HPMC)做体外培养,采用酶联免疫双抗夹心法和逆转录聚合酶链反应,检测细胞产生IL-8和FN水平的情况。采用Lowry方法检测培养液中细胞内总蛋白。结果 脂多糖(10μg/ml)、金黄色葡萄球菌肠毒素(10μg/ml)和TNF-α(1000u/mL)分别刺激HPMC后,培养液内IL-8和FN蛋白质水平显著增高(P<0.0l),并上凋IL-8和FN的mRNA表达。结论 细菌毒素和TNF-α可引起人腹膜间皮细胞IL-8和FN蛋白水平增加,并上调HPMC IL-8和FNmRNA表达;FN合成增加可能是导致腹膜纤维化原因之一。

关键词: 细菌毒素类, 肿瘤坏死因子-α; 白细胞介素8; 纤连蛋白; 腹膜间皮细胞

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2009年04月19日

【期刊论文】生脉液拮抗乳酸盐腹膜透析液对人腹膜间皮细胞的损伤

刘伏友, 段绍斌, 陈星, 彭佑铭, 夏家辉

中华肾脏病杂志,2001,17(6):372~374,-0001,():

摘要

目的 研究生脉液对乳酸盐腹膜透析渡(L-PDS)致腹膜间皮细胞增殖及损伤作用的影响。方法 采用胰蛋白酶-EDTA消化法,从人腹膜组织中分离间皮细胞,并建立体外人腹膜间应细胞(HPMC)培养模型。以四甲基偶氮多胍(MTT)法测定HPMC增殖程度,采用自动生化分析仪检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平示细胞损伤程度。以不同内容的培养液及不同时间进行观察,分为单纯培养液对照,不同浓度葡萄糖L-PDS、不同浓度生脉液加L-PDS。结果 与单纯培养液对照组相比,L-PDS致HPMC培养液中LDH水平明显增高。并显著降低MTT渗人量(P<0.01);而3种浓度(1.5%、2.5%和4.25%)葡萄糖腹膜透析液(腹透液)间差异无显著性意义。在与2.5%L-PDS作用45min后。1mg/ml浓度的生脉液能显著降低LDH水平[(7.21±1.32)U/L对(15.87±4.16)U/L,P<(0.05],提高MTT渗入量(吸光度A值0.201±0.053对0.123±0.036,P<0.01);而100μg/ml浓度生脉液只能显著降低LDH水平[(8.16±2.05)U/L对(15.87±4.16)U/L,P<0.01],对MTT渗入量无明显改变。上述作用240min后。两种浓度生脉液引起LDH水平及MTT渗入量的变化差异均无显著性意义。结论 生脉液能拮抗乳酸盐腹透液对HPMC的损伤及抑制作用。

关键词: 腹膜透析, 腹膜, 乳酸盐类, 间皮细胞 生脉注射液

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2006年09月29日

【期刊论文】过氧化物增生体激活受体-γ激动剂抑制腹膜间皮细胞转化生长因子-β1的表达

彭佑铭, 刘虹, 刘伏友

J Nephrol Dialy Transplant Vol. 14 No.2 Apr. 2005,-0001,():

摘要

腹膜纤维化是长期腹膜透析患者最严重的并发症之一。研究表明转化生长因子β1(TGF-β1)高表达与腹膜纤维化 密切相关[1]。TGF-β1表达的下调在预防或延缓腹膜纤维化的过程中可能有潜在的治疗作用。最近发现过氧化物增生体激活受体(PPAR)亚型PPAR-γ在大鼠和兔新鲜分离的肾小球及培养的系膜细胞存在功能性表达[2]。Troglitazone和Rosiglitazone是PPAR-γ的配体。Ma等[3]报道在5/6肾脏切除模型, Troglitazone能显著降低蛋白尿,血清肌酐和肾小球硬化。这些作用可能与降低TGF-β1的表达有关。本文研究Troglitazone和Rosiglitazone对人腹膜间皮细胞TGF-β1表达和分泌的影响。

关键词: 过氧化物增生体激活受体-γ, 转化生长因子-β1, 人腹膜间皮细胞 腹膜纤维化

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2006年09月29日

【期刊论文】糖皮质激素对人腹膜间皮细胞分泌细胞外基质的影响

彭佑铭, 刘新, 刘伏友, 魏佳莉

Chinese Journal of Blood Purification,July 12, 2005, Vol. 7, No.5,-0001,():

摘要

目的 探讨糖皮质激素对人腹膜间皮细胞分泌细胞外基质的影响。方法 采用胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞,建立稳定的体外培养模型。将第三代细胞转板,至细胞融合后,将其分为:① 对照组(F12);② 2.5% 葡萄糖组(F12+葡萄糖2.5%);③ LPS组(F12+LPS10mg/L);④ 2.5%葡萄糖加DXM组(DXM为3种不同的浓度,依次为10nmol/L、100nmol/L、1000nmol/L);⑤ LPS加DXM组(DXM为三种不同的浓度,依次为10nmol/L、100nmol/L、1000nmol/L);所有分组均培养24h后收集细胞上清液,低温离心(1000r/m)5min后,采用酶联免疫吸附法检测上清液中纤维连接蛋白(FN)和纤溶酶原抑制剂(PAI-1)的含量。结果 ① 腹膜间皮细胞在2.5%葡萄糖和10mg/L LPS刺激下分泌FN及PAI-1明显增加,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.01);10mg/L LPS组分泌FN及PAI-1较2.5%葡萄糖组分泌高,差异有显著性意义(P<0.01);② 腹膜间皮细胞在2.5%葡萄糖加入不同浓度的DXM(10nmol/L、100nmol/L、1000nmol/L)干预后,24h内分泌FN及PAI-1较2.5%葡萄糖组减少,差异有显著性(P<0.05);③ 腹膜间皮细胞在LPS加入不同浓度的DXM(10nmol/L、100nmol/L、1000nmol/L)干预后,24h内分泌FN及PAI-1较LPS组减少,差异有显著性意义(P<0.05)。

关键词: 糖皮质激素, 细胞外基质, 腹膜间皮细胞

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2006年09月29日

【期刊论文】环氧化酶-2抑制剂对人腹膜间皮细胞转化生长因子-β1表达的影响

彭佑铭, 刘虹, 刘伏友

J Nephrol Dialy Transplant Vol. 12 No.6 Dec. 2003,-0001,():

摘要

目的:研究环氧化酶-2(COX-2)抑制剂对人腹膜间皮细胞(HPMC)转化生长因子-â1(TGF-â1)表达的影响。 方法:采用胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞,建立稳定的体外培养模型。用COX-2抑制剂干预高糖(4.25%D-葡萄糖)和细菌脂多糖(LPS)刺激下的HPMC。采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)半定量分析HPMC 中TGF-â1 mRNA的表达。采用双抗夹心法酶联免疫吸附实验检测HPMC培养液中TGF-â1蛋白质水平。结果:HPMC在高糖和LPS的刺激下可明显上调TGF-â1的表达(P<0.01),COX-2抑制剂干预组(20nmol/L,40nmol/L,60nmol/L)明显下调TGF-â1的表达(P<0.05)。结论:COX-2抑制剂能够明显抑制在高糖和LPS的刺激下的HPMCTGF-â1的基因表达,为临床用COX-2抑制剂防治腹膜透析患者的腹膜纤维化提供实验和理论依据。

关键词: 环氧化酶-2抑制剂, 转化生长因子-â1, 人腹膜间皮细胞 腹膜纤维化

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2005年08月05日

【期刊论文】CD40在人腹膜间皮细胞的表达及调控

阳晓, 叶任高, 杨琼琼, 孙玉玲, 孔庆瑜, 汪涛, 余学清

CAPD. Nephrol Dial Transplant 1999; 14: 1208-1216,-0001,():

摘要

背景CD40-CD40配体(CD40L)不仅在体液免疫和细胞免疫中发挥重要作用,而且在炎症反应中起重要作用。我们曾发现CAPD相关性腹膜炎腹腔巨噬细胞高表达CD40L。然而腹膜间皮细胞是否能表达CD40及通过CD40信号参与腹膜炎症反应,目前尚不知晓。目的对人腹膜间皮细胞CD40的表达、调节因素及其与细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的相关性进行初步探讨。方法从CAPD患者的透出液中分离、培养间皮细胞,用IFN-γ、TNF-α、IL-1、LPS刺激24小时,通过流式细胞仪检测分析间皮细胞CD40、CD40L及ICAM-1的表达。结果间皮细胞结构性表达少量的CD40;IFN-γ可显著增加间皮细胞表面CD40蛋白的表达,而TNF-α、IL-1、LPS对间皮细胞表面CD40蛋白的表达无显著影响。未见间皮细胞表达CD40L。IFN-γ、TNF-α、IL-1、LPS对间皮细胞ICAM-1表达均有显著增强作用。IFN-γ增强ICAM-1表达作用极显著高于TNF-α、IL-1、LPS,间皮细胞CD40表达强度与ICAM-1呈显著正相关。结论腹膜间皮细胞功能性表达CD40。其与腹腔中CD40L+细胞相互作用,可能在腹腔局部防御中发挥重要作用,其结果对于限制炎症的发生和发展具有积极意义。

关键词: 腹膜间皮细胞 CD40 信号 ICAM-1

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