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2010年12月07日

余四九，何宝祥，杜玉兰，冯贵雪，郑喜邦，余四九*，李恭贺

中国兽医学报，2007，27（5）：747～751，-0001，（）：

为了解水牛卵巢卵泡中颗粒细胞（GCs）和卵母细胞在体外培养过程中发生凋亡的变化特征，通过体外培养、血清撤除法诱导水牛卵泡GCs凋亡，并应用苏木精伊红（腿）染色和DNA原位末端标记的TUNEL方法观察其病理特征；通过水牛腔前卵泡体外培养、诱导或等待其中的卵母细胞及卵泡细胞发生凋亡，然后应用透射电镜技术检查其超微结构改变。结果显示：凋亡卵泡Gc8的眦染色特征包括细胞体积缩小，染色较深呈紫黑色，且多成簇分布。DNA原位末端标记检查的特征是DNA发生降解，其降解碎片呈，TUNEL阳性。原始卵泡体外培养中调亡卵母细胞的超微结构表现为胞核碎裂成电子密度高的大碎片，或出现形态奇特的凋亡小体；初级卵泡中的调亡GCs，细胞内外均出现凋亡小体，细胞内还见有典型的螺层状内质网结构，其中包涵部分核质。

关键词：水牛，卵泡，颗粒细胞，细胞凋亡，体外培养

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2010年12月07日

【期刊论文】水牛健康与闭锁优势卵泡中颗粒细胞凋亡的生物学特征

余四九，何宝祥，杜玉兰，郑喜邦，余四九*

中国兽医学报，2007，27（6）：950～954，958，-0001，（）：

摘要

采用组织学苏木精伊红（HE）染色与光镜检查、荧光显微镜检查和DNA电泳技术，检查了水牛健康优势卵泡（HDF）和闭锁优势卵泡（ADF）中颗粒细胞（GCs）调亡的生物学特征。此外还应用孕酮处理早期的ADF。应用流式细胞术（FCM）方法检查该激素诱发CCs凋亡的情况。HE染色和荧光显微镜检查结果显示，HDF和ADF都含有凋亡的GCs，只是ADF中凋亡的GCs较多。凋亡GCs的HE染色表现细胞体积缩小，染色浓黑，荧光原位检测发现核浓缩。DNA电泳分析表明，在HDF中未发现GCs的DNA降解。而在ADF中因闱锁程度不同而表现不同程度的DNA降解，出现典型的“拖尾”带，但均未出现具有细胞凋亡特征的DNA“Ladder”。FCM检查结果见到早期的ADF存在着DNA的降解。孕酮处理使DNA降解碎片显著增加。上述结果提示。在水牛的HDF中，GCs的凋亡很少。在ADF中GCs的凋亡较多。水牛ADF中GCs的死亡。少量是以凋亡方式发生的。而坏死是主要方式。

关键词：水牛，卵泡颗粒细胞，优势卵泡，细胞凋亡

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2010年12月07日

【期刊论文】抗坏血酸和NAC对水牛卵泡颗粒细胞存活的影响

余四九，何宝祥，郑喜邦，李彩萍，杜玉兰，房慧伶，郭亚芬，李恭贺

中国兽医科技，2004，35（7）：542～546，-0001，（）：

摘要

体外培养水牛卵泡颗粒细胞（BFGCs），待一定阶段后撤除胎牛血清，在对照组培养基中不加任何抗氧化剂，在试验组培养基中分别加入不同浓度的抗坏血酸（AA）和N-乙酰L-半胱氨酸（NAC），培养6h后观察细胞生长变化，并用噻唑蓝比色法进行细胞计数，探讨了AA和NAC对撤除血清后BFGCs存活的影响。结果表明，对照组和试验组的BFGCs都有不同程度的体积变小、细胞浓缩、变圆、离壁等类似凋亡的特征。其中0.5和1.0mmol/LAA组凋亡细胞最少，150.0mmol/LAA组无存活细胞，0.5mmol/LAA组的细胞存活率显著高于对照组和除1mmol/LAA组以外的其他AA组（P<0.05）。5mmol/LNAC组凋亡的BFGCs最少，其余5个试验组随NAC浓度升高，凋亡细胞逐渐增多，5mmol/LNAC组BFGCs的存活数量显著高于对照组和其他各组（P<0.05）。说明抗氧化剂AA、NAC在低浓度时能抑制撤除血清后体外培养BFGCs的凋亡，而高浓度时可促进其凋亡，它们的作用都是双向的、剂量依赖性的。

关键词：卵泡颗粒细胞，抗坏血酸， N-乙酰L-半胱氨酸，水牛，细胞凋亡

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2010年10月12日

【期刊论文】1-甲基-4-苯基吡啶离子诱发大鼠小脑颗粒细胞凋亡

蒲小平，李晓蓉，李慧农，李长龄

中草药，2001，32（8）：715～718，-0001，（）：

摘要

目的建立1-甲基-4-苯基吡啶离子（1-methy1-4-phenyl pyridinium ion，MPP+）诱导的大鼠小脑颗粒细胞调亡横型。方法 MPP+处理大鼠小脑颗粒细胞。分别用甲基绿-派诺宁染色，DNA凝胶电泳。流式细胞术进行检测。结果浓度为50 μrnol/L MPP+使小脑颗粒细胞发生调亡。结论以MPP+为诱导剂建立的大鼠小脑囊粒细胞调亡模型，可用于研究和帕金森病（PD）有关的细胞调亡的调控机制和筛选抗PD药物。

关键词： 1-甲基-4-苯基毗啶离子(， MPP+， )，，小脑颗粒细胞，调亡

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2009年08月07日

【期刊论文】大鼠多囊卵巢颗粒细胞凋亡时MDA含量及SOD活性的变化*

朱辉，倪江，张玮，李庆雷

中国应用生理学杂志，2001，17（3）293～295，-0001，（）：

摘要

目的和方法：以大鼠多囊卵巢（PCO）为动物模型，观察了PCO大鼠卵泡颗粒细胞凋亡的发生率，并检测了颗粒细胞凋亡时丙二醛（MDA）的含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性的变化。结果：①PCO颗粒细胞凋亡发生率明显高丁十正常（P<0.001）；②PCO颗粒细胞发生凋亡时，细胞内MDA含量增加而SOD活性降低。结论：大鼠PCO颗粒细胞的凋亡可能与细胞内MDA含量增加和SOD活性降低有关。

关键词：多囊卵巢，颗粒细胞凋亡，丙二醛(， MDA)，，超氧化物歧化酶(， SOD)，

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2009年08月07日

【期刊论文】大鼠多囊卵巢颗粒细胞凋亡的实验观察

朱辉，倪江，边淑玲，张玮

生殖医学杂志，2O01，10（4）：214～217，-0001，（）：

摘要

目的：观察多囊卵巢颗粒细胞凋亡的情况。方法：以大鼠多囊卵巢为动物模型，采用电子显微镜及3'-末端原位标记法观察了大鼠多囊卵巢颗粒细胞凋亡的情况，结果：（1）电子显微镜显示，多囊卵巢大鼠颗粒细胞存在凋亡所特有的形态学变化。（2）用3'-末端原位标记法在大鼠多囊卵巢俭测到棕褐色深染的凋亡颗粒细胞。结论：在大鼠多囊卵巢颗粒细胞发生了凋亡。

关键词：多囊卵巢，颗粒细胞，凋亡，大鼠

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2005年04月22日

【期刊论文】多囊卵巢综合征相关基因的差异表达研究

乔杰，胡振兴，乔杰△，李美芝，张小为，陈咏健，李蓉，孙春玲

北京大学学报（医学版），2004，36（6）：60～65，-0001，（）：

摘要

目的：研究多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）患者相关基因的差异表达。方法：应用人类全基因组基因芯片U133A，以体外受精一胚胎移植（in uitro fertilizatiorl embryo transfer, IVF-ET）的多囊卵巢综合征（polycyvstic ovarv syndrome, PCOS）患者和对照者取卵后所剩的卵泡颗粒细胞为研究对象，检测5例PcOs患者和5例对照者颗粒细胞中相关差异表达的基因。结果：与对照组比较，共筛查出与Pcos明显相关的差异表达基因46个，其中25个基因表达增加（上凋），21个表达减少（下调）。这些差肆表达基因具有多种生物学功能，如脂类代谢调节、细胞问的信号传导和免疫炎症反应，反映了PCOS患者临床症状的多样性。结论：应用基因芯片技术，可筛查出新的PCOS遗传相关候选基罔。

关键词：多囊卵巢综合征，卯泡颗粒细胞，基因芯片，基因表达谱

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