您当前所在位置: 首页 > 学者
为您找到 5 条相关结果
按相关度
  • 按相关度
  • 按时间
  • 按阅读量
  • 代表性成果优先

上传时间

2009年11月02日

【期刊论文】P53基因对K562细胞增殖的影响

蒋利萍, 王靖雪, 杨锡强, 王莉佳

免疫学杂志,2004,20(2):106~109,-0001,():

摘要

目的观察恢复K562细胞的p53蛋白功能后该细胞的生物学行为的改变,探索用野生型p53基因治疗白血病的可能性。方法以K562细胞为研究对象,电穿孔法转导野生型p53基因,RT-PCR和免疫细胞化学方法检测p53基因的表达,3H-TdR掺人法检测细胞增殖,用流式细胞仪分别以TUNEL、annexin-V、细胞周期检测细胞的凋亡情况和细胞周期分布情况。结果转染p53基因的K562细胞,出现明显细胞周期C1期停滞,增殖抑制率为24.17%,但用TUNEL、annexin-V和亚二倍体峰检测未发现与未转染p53基因组有凋亡细胞比例差异。结论P53基因对K562细胞有一定的治疗效应,但不能诱导其发生凋亡。

关键词: P53, K562细胞 细胞增殖, 细胞凋亡

  • 17浏览

  • 0点赞

  • 0收藏

  • 0分享

  • 38下载

  • 0评论

  • 引用

上传时间

2009年01月19日

【期刊论文】汉防己甲素联合屈洛昔芬对K562细胞ber/abl表达的影响

陈宝安, 钱习军, 程坚, 高峰

中国实验血学杂志,2004,13(1):95-99,-0001,():

摘要

为了研究汉防己甲素(Tet)联合屈洛昔芬(DRL)对K562细胞株凋亡相关因子bcr/abl mRNA及蛋白表达的影响,Tet(1μmol/L)和DRL(5μmol/L)单用及联合应用于K562细胞一定时间后,分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测K562细胞bcdabl mRNA和蛋白表达的变化。结果表明:Tet和DRL单独应用对K562细胞bcr/abl mRNA及蛋白表达均无影响,两药联合应用于48小时K562细胞bcr/abl mRNA表达开始下调。K562细胞BCR/ABL蛋白表达于72小时开始下调。结论:Tet和DRL联合应用可下调K562细胞bcr/abl的表达。这可能是两药联用逆转耐药的机制之一。

关键词: 汉防己甲素, 屈洛昔芬, bcr/, abl基因, P210BCR/, ABI 蛋白, K562细胞

  • 9浏览

  • 0点赞

  • 0收藏

  • 0分享

  • 84下载

  • 0评论

  • 引用

上传时间

2009年01月19日

【期刊论文】细胞内钙与K562/A02细胞多药耐药相关性的研究

陈宝安, 周云, 程坚, 董颖, 钱习军, 盛茗, 王婷, 高峰

中国实验血学杂志,2004,12(2):159-162,-0001,():

摘要

本研究旨在探讨白血病耐药细胞的发生及其逆转机制与细胞内钙离子浓度的关系。用甲基四唑蓝法(椰)测定柔红霉素(daunomycin,DNR)的细胞毒性,用Fura-Z/aM 方法测定耐药细胞株K562/A02及其敏感株K562的静息[Ca2]i水平,并观察了柔红霉素及耐药调节剂汉防己甲素(Tetrandrine,Tet)、屈洛昔芬(droloxifene,DRL)单独或联合应用后细胞内游离钙离子浓度的变化。结果表明:1/mao1]L Tet,5 L DRL均能增加DNR对耐药细胞系K562/A02的细胞毒作用,Ic50(半数抑制量)分别为(7.28±2.06)ml,(7.58±3.44) rnl,逆转倍数为2。94和2。82倍。两药联合作用明显增强,I为(1.66±0.41)ml,逆转倍数达12.9倍。静息状态下K562/A02细胞的游离钙离子浓度显著高于K562细胞。1/mao1]L Tet,5/mao1]L DRL单独作用于K562/A02细胞引起[Ca2]的明显升高,两者联合应用有拮抗作用。结论:K562/A02细胞内Ca2浓度的增高可能是导致其耐药的原因之一,但耐药调节剂Tet,DRL对耐药细胞[Ca]的影响在其逆转耐药中的作用有待进一步研究。

关键词: [Ca2+, ], 多药耐药, 汉防己甲素, 屈昔芬, K562细胞 A02细胞

  • 16浏览

  • 0点赞

  • 0收藏

  • 0分享

  • 45下载

  • 0评论

  • 引用

上传时间

2006年11月15日

【期刊论文】HLA-E真核表达载体的构建及其在K562细胞中的表达与鉴定

方建培, 刘四喜, 徐宏贵, 陈国华, 黄绍良

中国实验血液学杂志,2005;13(3):464~467,-0001,():

摘要

本研究旨在亚克隆HLA-E真核表达载体,并使其在HLA-I类阴性的靶细胞K562细胞上获得稳定表达。首先采用PCR方法从多顺反子表达载体(pG/A2E)扩增出目的片段A2/EcDNA,与真核表达载体pcDNA3.1(+)重组,构建成HLA-E真核表达载体pcDNA3.1(+)/A2E,然后采用脂质体转染的方法将重组质粒转入K562细胞,最后经G418筛选及有限稀释,利用抗HLA-E特异的单克隆抗体K0126-3进行FACS检测,以观察}玎LA-E分子在靶细胞表面的表达情况。结果显示,HLA-E分子在经pcDNA3.1(+)/A2E转染的靶细胞表面获得表达(27.76%),而经空载体pcDNA3.1(+)转染的靶细胞则未获得表达。结论:成功构建了pcDNA3.1(+)/A2E真核表达载体,并使HLA-E分子在HLA-I类阴性的K562细胞表面表达,为进一步研究HLA-E作用的分子机制以及探索HLA-E与NK受体之间的相互作用和HLA-E体外表达对NK细胞功能的影响奠定了基础。

关键词: HLA-E, 真核表达载体, K562细胞 先导肽

  • 23浏览

  • 0点赞

  • 0收藏

  • 0分享

  • 156下载

  • 0评论

  • 引用

上传时间

2006年10月27日

【期刊论文】DAPK1基因开放读码序列的克隆、序列分析及诱导Raji细胞凋亡*

朱振宇, 张海涛, 朱振宇△, 吉琼梅, 李秀英, 李民友, 马涧泉, 梁念慈

中国病理生理杂志,2004,20(1):88~93,-0001,():

摘要

目的:探讨死亡相关蛋白激酶(DAPK1)在肿瘤的形成、转移中所起作用,克隆DAPK1基因的开放读码序列(ORF)。方法:根据GenBank提供的核苷酸序列,自行设计引物,用RT-PCR从K562细胞中扩增DAPK1基因的ORF;用质脂体将pcDNA311(+)-DAPK1转染到Raji细胞,Hoechst33258染色观察细胞凋亡,MTT法观察DAPK1基因对细胞生存的影响。结果:DAPK1基因的ORF克隆到质粒pMD18-T,测序鉴定;分析结果显示,从K562细胞成功扩增4300bp的DAPK1基因ORF有7处突变,其中6处是同义突变,1处是基因的单链核苷酸多态性;DAPK1基因的ORF克隆到真核表达载体pcDNA311(+),转化到Raji细胞;转染48h后,可以检测到DAPK1的表达,并可以观察到细胞发生凋亡。结论:大片段的基因可以采用RT-PCR法直接克隆,采用常规的转染技术可以将大片段基因转染到宿主细胞;成功克隆具有活性功能DAPK1基因ORF,过表达的DAPK1基因可以诱导Raji细胞凋亡。

关键词: 死亡相关蛋白激酶, 细胞凋亡, 甲基化, Raji细胞, K562细胞

  • 20浏览

  • 0点赞

  • 0收藏

  • 0分享

  • 78下载

  • 0评论

  • 引用