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2010年09月28日

【期刊论文】Expression of cytoplasmic and nuclear Survivin in primary and secondary human glioblastoma

谢丹, D Xie*, YX Zeng, HJ Wang, JM Wen, Y Tao, JST Sham and XY Guan*

British Journal of Cancer (2006) 94, 108-114,-0001,():

摘要

暂无

关键词: glioblastoma multiform, Survivin immunohistochemistry, apoptosis

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2009年11月03日

【期刊论文】凋亡抑制因子survivin基因的克隆及在真核细胞中的表达

黄爱龙, 闫歌, 蒲丹, 唐霓, 张秉强, 高小玲, 宋文鑫, 何通川

重庆医科大学学报,2004,29(3):266~268,-0001,():

摘要

目的:克隆Survivin编码序列并在真核细胞中表达。方法:RT-PCR扩增Survivin编码序列,建立与绿色荧光蛋白(GFP)共表达的融合重组质粒,转染哺乳动物细胞,利用GFP绿色荧光和Western Blot检测Survivin蛋白的表达。结果:RT-PCR扩增出421bp的Survivin编码序列,构建融合重组质粒Pegfp-Cl-Survivin,利用GFP荧光和Western Blot证实Survivin蛋白的表达。结论:成功克隆Survivin基因并在真核细胞中表达。

关键词: Survivin 绿色荧光蛋白, 真核细胞, 表达

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2009年11月03日

【期刊论文】RNA干扰技术对肝癌细胞内源survlvln基因表达的影响*

黄爱龙, 闫歌), 蒲丹), 唐霓), 高小玲), 宋文鑫), 卢年芳), 吴刚), TONG-CHUAN HE)黄爱龙)**

生物化学与生物物理进展,2004,31(9):829~832,-0001,():

摘要

应用RNA干扰技术(RNAi)研究针对凋亡抑制因子survlvln的siRNA抑制肝癌细胞株内源survlvln基因的表达,转染重组质粒pshRNA-survivin至肝癌细胞株SMMC-7721,通过免疫荧光、蛋白质印迹和半定量RT-PCR检测survlvln蛋白表达及mRNA转录水平的变化。结果表明:构建的三种重组质粒pshRNA-survivinl/2/3均能明显抑制survlvln基因的表达;应用免疫荧光检测survlvln基因的表达,转染重组质粒pshRNA-survivin的实验组survlvln荧光强度明显低于转染载体pTZU6+1和pshRNA-GFP对照组;蛋白质印迹结果表明,重组质粒pshRNA-survivin明显抑制survlvln蛋白韵表达,抑制率为62%~78%,通过半定量RT-PCR检测到su rvivln基因mRNA转录明显减少,抑制率为57%~64%。由上述结果可以得出结论:重组质粒pshRNAsurvivlri可明显抑制SMMC-7721细胞内源survivin的表达和mRNA的转录,为survlvln介导的肿瘤基因沉寂疗法提供实验基础。

关键词: RNA干扰,, 肝癌细胞株,, survIvin基因

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2009年11月03日

【期刊论文】肿瘤特异性Survivin启动子与甲胎蛋白启动子的活性评价与比较

黄爱龙, 况舸, 唐霓

中华肝脏病杂志,2005,13(6):440~442,-0001,():

摘要

目的研究并比较肿瘤特异性Survivin和甲胎蛋白(AFP)基因启动子在不同肝细胞癌细胞系中的转录活性,为肝癌靶向性基因治疗提供依据。方法采用聚合酶链反应法扩增获得Survivin和AFP基因的启动子片段,并克隆入表达虫荧光素酶基因的报告质粒中,通过测定荧光素酶报告基因的表达情况,测定Survivin与AFP基因启动子的转录活性,同时采用巨细胞病毒启动子为对照,评价其转录活性水平。结果Survivin启动子在肝癌细胞中具有相当强的活性,其活性水平在高表达AFP的肝癌细胞中为AFP启动子的54~100倍,达到巨细胞病毒启动子活性的16%~21%。结论Survivin启动子在肝癌细胞系中具有较强的启动活性,可望开发成为新的肝癌靶向性基因治疗工具。

关键词: 癌,, 肝细胞, 启动区(, 遗传学), 基因疗法, Survivin基因

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2006年11月02日

【期刊论文】Survivin在多发性骨髓瘤患者骨髓细胞中的表达及其临床意义

李娟, 赵莹, 张殿宝, 黄蓓晖

Chinese Journal of Cancer, 2005, 24 (12): 1522-1526,-0001,():

摘要

背景与目的:Survivin是凋亡抑制蛋白家族成员之一,在多种恶性肿瘤中高表达,但在正常成人分化组织无表达。其表达与多种肿瘤的预后及肿瘤对放、化疗的耐受有关。本研究旨在通过检测Survivin在正常人、初治及复发/难治多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)患者骨髓细胞及骨髓瘤细胞系KM3中的表达,以揭示Survivin在骨髓瘤中的表达与耐药及疗效的关系。方法:RT-PCR和Westernblot法检测29例MM患者(其中初治17例,复发/难治12例)、9例正常人骨髓标本及KM3细胞系中SurvivinmRNA和蛋白质水平表达。结果:骨髓瘤细胞系KM3高表达Survivin。SurvivinmRNA在正常人、初治和难治/复发MM患者骨髓细胞中阳性率分别为22.2%、70.5%和83.3%,表达水平(Survivin/β-actin比值)分别为0.06±0.04、0.31±0.14和0.69±0.24,骨髓瘤患者表达率和表达水平显著高于正常人(P<0.01),而难治/复发MM组表达水平高于初治组(P<0.05)。所有的正常人标本中均未检测到Survivin蛋白,在初治和难治/复发MM组Survivin蛋白阳性率分别为41.1%和58.3%(P>0.05),表达水平(Survivin/α-tubulin半定量比值)分别为0.11±0.07和0.21±0.12,难治/复发MM组明显为高(P<0.05)。17例初治患者中,7例Survivin阳性者4例部分缓解(partialresponse,PR),1例微小反应(minorresponse,MR),2例无变化(nochange,NC),有效率[完全缓解(completeresponse,CR)+PR+MR]71.4%;10例Survivin阴性者中2例CR,4例PR,2例MR,2例NC,有效率80%,略高于阳性组。但统计学分析未发现两组有效率存在显著性差异。结论:Survivin在骨髓瘤患者中的高表达可能是部分患者对化疗不敏感的原因之一,由于Survivin仅特异性表达于骨髓瘤细胞,Survivin可作为逆转骨髓瘤细胞耐药治疗中的潜在靶点。

关键词: 骨髓瘤, 多发性, Survivin KM3细胞, 耐药, 疗效, 逆转录-聚合酶链反应, 免疫印迹

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2005年11月10日

【期刊论文】弥漫大B细胞淋巴瘤survivin表达与临床预后关系探讨

何友兼, Xiang Xiao-juan He Youliali

中国肿瘤临床,2004,31(9):509~512,-0001,():

摘要

目的:探险讨弥漫大B细胞淋巴瘤survivin表达与临床表现的关系。 方法:收集本院自1997年至1999年的初治弥漫大B细胞淋巴瘤其63例,均接受治疗并进行随访。用免疫组化SP法检测其survivin表达情况。应用SPPSS10..软件生存分析并对各临应酬指标与预后的关系进行单因素和多因素分析。结果:63例弥漫大B细胞淋巴瘤病例中有43例survivin表达阳性,阳性率为68。3%,其表达与性别、年龄、分期、结外病灶数目无明显相关关系,与PS、LDH、B症状、IPI显著相关)P<0.05)。其5年总生存率为50.04%。survivin表达阳性的弥漫大B淋巴瘤患者的总生存率明显人低于survivin表达阴性患者(P=0.0001),二者的5年生存率分别为30.36%和90%。多因素分析显示survivin表达是弥漫大B 细胞淋巴瘤的独立预后指标。结论:survivin是弥漫大B细胞淋巴瘤的一个极有价值的预后指标与IPI结合可于早期筛选出常规治疗预后不良的病例,有助于指导治疗及改善预后。

关键词: 淋巴瘤, 凋亡, 抑癌基因, survivin

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2005年08月06日

【期刊论文】孤立性大肝癌分子病理特征的初步研究

杨连粤, 刘合利, 黄耿文, 杨平洲, 杨建青, 易为民

,-0001,():

摘要

目的 研究孤立性原发性大肝癌的分子病理特征。方法 比较20例孤立性大肝癌与13例小肝癌、10例结节性肝癌的病理特征,并且采用免疫组织化学方法检测三组肝癌组织中与恶性肿瘤侵袭转移有关分子标志物的表达情况,包括PTEN蛋白、Survivin 蛋白、整合素αv 亚基、基质金属蛋白酶2(MMP2)以及微血管密度(MVD)。结果 孤立性大肝癌大多有包膜且呈膨胀性生长,肝硬化少,癌细胞分化较结节性肝癌好(P<0.05)。孤立性大肝癌的Survivin蛋白、整合素αv亚基、MMP2的表达及MVD均低于结节性肝癌,而PTEN蛋白明显高于结节性肝癌(P<0.05),上述指标在孤立性大肝癌组与小肝癌组比较均无统计学差异(P>0.05)。结论 孤立性大肝癌具有特殊的临床和分子病理特征及相对好的肿瘤生物学行为。

关键词: 癌, 肝细胞, PTEN, Survivin 整合素, 基质金属蛋白酶类

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2005年02月25日

【期刊论文】人survivin的克隆、在大肠杆菌中的表达及活性鉴定

孙茂盛, 别俊, 孙强明, 郑建平, 孙雯佳

第一军医大学学报,2004,24(8):913~916,-0001,():

摘要

目的在原核中高效表达及活性鉴定重组人survivin蛋白分子。方法应用RT-PcR的方法得到survivin的cDNA,并构建成pBV220-survivin原核表达质粒,将其导入E.coli B121(G01d)中,诱导表达survivin蛋白。通过DEAE sepbaroseFastFlow离子交换柱和Sephacryl S-200分子筛二步柱纯化以获取目的蛋白。用Western blotting检测表达产物。结果PT-PCR产物经测序分析与预期结果完全一致,表达质粒在E.coli B121(Gold)中得到高效表达,表达的survivin蛋白占总蛋白含量的30%以上表达产物以包涵体的形式存在。通过离子交换柱和分子筛二步柱纯化及复性后获得的目的蛋白,其纯度达到95%以上。wester blotting证明表达产物具有特异性。结论获得了较高纯度的survivin蛋白,为进一步深入研究该蛋白的细胞调亡调控功能提供了工具。

关键词: sunvlvm, 克隆, 基因表达, 纯化

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