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2010年12月16日

【期刊论文】A族链球菌表面蛋白Fba单克隆抗体的制备及其对应表位的初步鉴定①

魏林, 马翠卿, 顾海燕, 郭奕阳, 胡光磊, 魏澎

中国免疫学杂志,2008,24(11):1046~1048,-0001,():

摘要

目的:制备抗A组溶血性链球菌(GAS)表面蛋白Fba(fibronectin-binding proteins a)的单克隆抗体(mAb),并对单抗的生物学功能及其相应表位进行了初步鉴定。方法:以重组Fba蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术及间接ELISA筛选出针对Fba的杂交瘤细胞株,以Western blot鉴定mAb的特异性,并将获得的mAb与Fba+GAS和Fba-GAS分别行全菌ELISA、与Fba的分段表达蛋白行Western blot,初步鉴定mAb针对的表位所在区域。结果:获得了稳定分泌抗Fba-mAb的杂交瘸细胞株,其中一株mAb能特异结合天然Fba+链球菌,且该单抗针对的表位包含了Fba蛋白的第104~108位氨基酸,该位点也是链球菌Fab蛋白结合补体调节蛋白FH的位点。结论:成功地制备了抗GAS表面Fba蛋白的mAb,其中一株mAb对应的表位为位于菌体表面的天然表位,并检测出了该mAb对应的表位所在区段,这为深入研究GAS的致病机制提供了有力工具。

关键词: A族链球菌, Fba蛋白, 单克隆抗体, 表位

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2010年12月16日

【期刊论文】A族链球菌(GAS)Fba蛋白单克隆抗体对应表位核心氨基酸的确定①

魏林, 郭奕阳, 马翠卿, 魏澎, 王秀荣, 冯惠东, 阎婉依

中国免疫学杂志,2009,25(12):1059~1062,-0001,():

摘要

目的:对A族链球菌Fba蛋白McAb2所对应的表位进行定位。方法:以初步定位的表位区段为线索合成三段重叠多肽,dot-ELISA检测McAb2与合成肽的亲合力,并以McAb2为靶分子,利用噬菌体随机七肽库进行亲和筛选,用竞争ELISA鉴定阳性克隆。结果:dot-ELISA检测结果表明Fba100-112肽段与McAb2的结合能力最强。经过3轮亲和筛选后,随机挑选20个噬菌体克隆,竞争ELISA对其与McAb2的亲和力做检测,其中12个克隆显示较强的阳性结果。阳性克隆DNA测序,与Fba基因第100位氨基酸至110位氨基酸中ITPDL同源性较高。结论:通过dot-ELISA将A族链球菌Fba蛋白McAb2对应的表位定位于100~112位氨基酸,结果同噬菌体随机肽库筛选的核心氨基酸位置吻合。为进一步研制表位肽疫苗、研究Fba蛋白及其单克隆抗体的生物学功能奠定了基础。

关键词: A族链球菌, Fba蛋白, 单克隆抗体, 表位, 噬菌体肽库

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2009年11月02日

【期刊论文】CD40L单克隆抗体对HSP患儿PBMC及单核细胞株THP一1产生炎症因子的影日

杨锡强, 李秋, 王利佳

中华微生塑堂塑免疫学杂志,2003,11(23):891~894,-0001,():

摘要

目的观察CINO配体单克隆抗体(CINOL McAb)对HsP(亨诺一许兰紫癜)患儿PBMC及单核细胞株THP-1产生炎症因子的影响。方法采用细胞培养、流式细胞技术及ElJSA法分别检测正常对照、过敏性紫癜患儿的PBMc及单核细胞株THP-1表达膜蛋白分子CINOL、CINO的阳性率、产生炎症因子IL-1、 TNF-α、IL-6水平以及CINOL McAb加入细胞培养体系后上述指标的变化。结果与正常比较,脚患儿的PBMc表达CD40L[(8.26±4.15)%,对照(0.54±0.58)%]显著增高、CINO表达无差异;PBMc培养上清中炎症因子IL广1[(1000.4±574.5)pg/ml,对照(246.8±207.1) ]、 INF-α[(978.7±205.8)pg/ml,对照(452.4±248.5)pg/m1]的水平也显著高于对照,CD40L McAb可使增高的IL-1[(164.7±127.9)pg/ml]、 TNF-α[(674.7±269.2)pg/m1]降至正常水平。THP-1自发表达CINO,低浓度产生IL-1、TNF-α。与正常比较,HSP患儿的PBNC培养上清诱导其表达CD40,产生IL-1,TNF-α增高,CI40L McAb同样具有抑制THP-1表达CD40、分泌IL-1、 TNF-α的作用。结论 CINOL McAb能抑制炎症因子的产生。

关键词: 过敏性紫癜, CD40配体单克隆抗体, CINO配体

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2009年10月30日

【期刊论文】McAb 共刺激PBLs介导肝癌细胞凋亡①

黄树林, 罗利琼, 肖兰凤, 崔徐江②, 伍思琪

中国免疫学杂志,1998,14:154~156,-0001,():

摘要

用McAb,抗CD3,CD3+CD28和CD28+CD80激活健康人PBLs,作用于肝癌细咆(BEL-7402),透射电镜观察其超微结构,发现除抗CD3可引起部分淋巴细咆诱导性凋亡外,其他组都可介导肝癌细胞凋亡。结果提示McAb共刺激能促进肿瘤免疫治疗的研究。

关键词: 单克隆抗体共刺激 肝癌细胞 透射电镜 凋亡

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2009年09月05日

【期刊论文】用于肿瘤治疗的90Y标记单克隆抗体和受体

范我

同位素,2002,15(3):168~174,-0001,():

摘要

简述了90Y标记McAb和肽-受体的标记方法、动物实验、临床应用以及剂量估算等方面的研究概况。

关键词: 90Y, 单克隆抗体和受体, 肿瘤治疗

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2009年09月05日

【期刊论文】188Re 标记抗CEA单克隆抗体及荷瘤裸鼠治疗实验研究

范我, 吾为一, 鲍君杰, 吴锦昌

核技术,2002,25(11):952~956,-0001,():

摘要

为建立188Re标记抗癌胚抗原(CEA)单克隆抗体(McAb)C50的直接标记方法,探讨其标记条件,用抗坏血酸还原McAb,并以葡萄糖酸钠为中间螯合剂,以氧化亚锡作还原剂,用188Re标记C50。观察188Re标记McAb的体外稳定性,探讨还原剂SnCl2深度、螯合剂葡萄糖酸钠深度、抗体深度、加人抗体间隔的时间对标记物放化纯度的影响。SPECT显像观察荷瘤裸鼠瘤内注射188Re-C50后放射性分布,对治疗后的瘤体行病理观察。实验结果显示,188Re标记C50的合适条件为:2.2-4.0g/LSnCl2、0.3mol/L葡萄糖酸钠溶液、2.5×105mol/LMcAb,反应2h后放化纯度可达90%。荷瘤裸鼠瘤内注射188Re-C50后,放射性集中在瘤内,2周后瘤体明显缩小,镜下观察至肿瘤破裂,坏死。

关键词: CEA,, 单克隆抗体, 放射性同位素,, 188Re

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2009年07月14日

【期刊论文】抗膀胱癌J82及丝裂霉素C单链抗体基因的研究

朱理玮, 梁晓宇, 王炜, 何强, 何向辉, 邱宇杰, 王鹏志

中华实验外科杂志,2001,18(4):361~363,-0001,():

摘要

目的 研制单链抗体,以减少鼠源抗体的异源性,为寻找合理的导向治疗方案提供工具。方法 将经抗原刺激的BALB/C小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤,用多聚酶链反应(PCR)方法克隆其抗体可变区基因,并用重叠延伸拼接法(SOE)构建相应的单链可变区抗体片段(SeFv)基因。结果 获得杂交瘤细胞株D10及1C8,酶联免疫吸附法及免疫组织化学法证实所分泌的抗体可分别与人膀胱癌细胞及丝裂霉素C特异性结合。获得两种抗体的可变区基因(320bp及340bp片段)及SeFv基因(75Obp片段)。结论 应用PCR-SOE方法可快速便捷地获得目的抗体的SeFv基因,为进一步研制双特异性SeFv提供了实验基础。

关键词: 单克隆抗体, 基因,, 合成, 丝裂霉素类

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2007年05月28日

【期刊论文】猪伪狂犬病病毒单抗双夹心ELISA的构建

崔保安, 祁小乐, 牛春玲, 王莉娟, 刘占通

河南农业大学学报2004年12月第38卷第4期/Journal of Henan Agricultural University Dec., 2004, Vol. 38, No. 4,-0001,():

摘要

建立了检测猪伪狂犬病痛毒(Pseudo rabies virus,PRV)的单克隆抗体双夹心酶联免疫吸附试验(Enzyme-Iinked immunosor-bent assay,ELISA)方法,为该病的快速诊断奠定了基础,作者对其组装条件进行了筛选,认为兔抗PRV IgG最佳包被质量浓度为4.59mg·L-1;抗PRV的单克隆抗体(Monoclonal antibodies,McAb)的最佳质量浓度为6.45mg·L-1;最佳封闭剂为10gL-1BSA(牛血清白蛋白),封闭时问为60min,制定了科学的结果判定标准,最低病毒检出量为200µg·L-1.与病毒分离、动物试验和中和试验相比较,该方法特异、灵敏、可靠、方便。

关键词: 猪伪狂犬病病毒, 单克隆抗体, 双夹心ELISA

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2007年03月22日

【期刊论文】抗胶质瘤免疫放疗制剂35S标记单抗SZ39细胞毒效应

兰青, 黄强, 庄道玲, 吴元芳, 孙志方

中华微生物学和免疫学杂志1998年5月第18卷第3期,-0001,():

摘要

目的 证实新制各的纯β射线免疫放疗制剂35S-McAb SZ39对胶质瘤的特异性杀伤作用。方法采用MTT法。以人脑胶质瘤细胞系SHG-44为靶细胞。检梗35S-McAb SZ39及其对照组35S-nIgG;35S+McAb SZ39;35S持续作用组的细胞杀伤率,求取50细胞抑制谁度。结果 S-McAb SZ39的细胞杀伤力与 S持续作用相近,较35S-nIgG强4.2倍.较35S +McAb SZ39强4.0倍(P<0.05)。结论5S -McAb SZ39具有高效的靶选择性细胞毒效应。作为一种免疫放疗制剂具有良好的应用前景。

关键词: 单克隆抗体, 胶质瘤, 细胞毒作用, 免疫放疗制剂35S

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2007年03月22日

【期刊论文】35S标记SZ39导向治疗胶质瘤的实验研究

兰青, 黄强, 庄道玲, 吴元芳, 孙志方

中华核医学杂志1999年2月第19卷第1期/Chin J Nucl Med, Feb 1999, Vol. 19, No. 1,-0001,():

摘要

目的制备纯β射线放射免疫治疗制剂35S标记单克隆抗体(MAb)SZ39,并证实其对胶质瘤的特异杀伤作用。方法35s以碳二亚胺法标记SZ39。采用MTT法,以人脑脏质瘤细胞系SHG-44为靶细胞,检襁35S SZ39及其对照组335S -nlgG、35S加SZ39、35S持续作用组的细胞杀伤率,求得50%细胞抑制浓度;以荷瘤鼠为对象,以35s - nlgG及PBS为对照组,根据公式求得35s -SZ39肿瘤抑制率;并以流式细胞计数仪分析35s -SZ39的抑瘤效应。结果35s -SZ39细胞杀伤力与35s持续作用相近,较35S -nlgG强4.2倍,较35s加SZ39强4.0倍:103.6 MBq35S -SZ39对肿瘤可产生抑制作用,阻滞肿瘤生长1周左右.给药后26 d,抑制率达50%。经35s -SZ39治疗后肿瘤细胞DNA台成受抑,35s期细胞蓄积,G1期细胞受阻,有细胞周期同步化趋势。35S -SZ39有抑瘤作用,但对骨髓无明显毒副作用。结论35S-SZ39能选择性杀伤腔质瘤细胞,作为一种放射免疫治疗剂具有良好的应用前景。

关键词: 神经驳质瘤;抗体, 单克隆;抗体, 肿瘤;硫放射性同位素

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2007年03月22日

【期刊论文】免疫放疗制剂35S.MAb SZ39在荷瘤鼠体内药代动力学研究

兰青, 黄强, 庄道玲, 吴元芳, 孙志芳

中国药学杂志1999年10月第34卷第10期/Chin Parm J, 1999 October, Vol. 34, No. 10,-0001,():

摘要

建立35S-MAbSZ39药代动力学模型,求取药代动力学参数,设计合理用药方案。方法:以药代动力学程序包处理35S-MAb SZ39给药后荷瘸鼠各时间点的血药浓度,进行药代动力学研究;以35S-nIgG厦”S为对照组,了解35S-MabSZ39的荷瘤鼠体内分布特点。结果:35S-MAb SZ39在荷^脑胶质瘸裸小最体内药代动力学符合三室线性模型,总药时方程为ct=1.764e-349t +1.106e-0.5r+0.025e-0.017t, 1/2n为0.23h,为1.46h,t1/2γ为42.9h。体内分布研究表明,35S -MA BSZ39可特异性浓聚于胶质瘤,在正常组织中无明显蓄积,发挥了单抗导向的高选择r陛作用,在培药后第5天,与35S相比,特异指数分别为4.1和4.87,具有显著优越性(P<0.05)。结论35S-MAb SZ39有望作为一种高效低毒的导向放疗制荆应用于胶质瘤治疗,以一周问隔多疗程治疗方案为佳。

关键词: 35S, 胶质瘤, 单克隆抗体, 裸小鼠, 药代动力学

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2006年12月15日

【期刊论文】131I标记抗CEA单抗预防人结肠癌肝转移的实验研究

葛海燕, 左国华, 高明发

第三军医大学学报,2000,22(5):430~432,-0001,():

摘要

目的 探索早期应用131I标记抗CEA单抗预防结肠腺癌肝转移的可行性。方法 在建立人结肠腺癌裸鼠肝转移后,于15min,、10、20d经尾静脉注射131I标记抗CEA单抗;于放射免疫疗法后4周和裸鼠死亡时,检查肝转移癌的数目、大小、瘤重、组织学和生存期。结果 早期冶疗组的肝转移癌数目、大小和瘤重均明显减小,瘤结节内有明显坏死,生存期延长。结论 早期应用131I标记抗CEA单抗能有效地抑制肝转癌的形成。

关键词: 结肠癌, 单克隆抗体, 放射性同位素

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2006年07月27日

【期刊论文】免疫聚合酶链反应新技术在胃癌血清诊断中的应用

任军, 樊代明, 张学庸, 周绍娟, 杨安钢, 胡家露, 陈峥

中华消化杂志,1996(16)14-16,-0001,():

摘要

应用本所建立的免疫聚合酶链反应技术(IMMUNO-PCR)检测胃癌患者血清中的肿瘤相关抗原MG7Ag,以探讨其在胃癌诊断中的价值。结果发现,在198例胃癌患者血清中MG7Ag阳性者164例,阳性率为82.8%,其他肿瘤患者的阳性结果分别为:食管癌(15/86),结肠病(40/90),肝癌(o/84),卵巢癌(1/45),子宫癌(0/27),肺癌(4/66),在非癌患者的检测结果:溃疡病(6/78),慢性胃炎(7/118),慢性肠炎(2/60),正常献血员(2/236)。结粜提示,免疫PCR技术对于胃癌包括部分早期胃癌的论断具有重要价值,同时也可能成为胖瘤音查时筛选高危人群的一种有用的工具。

关键词: 胃癌, 单克隆抗体, 聚合酶链反应, 诊断

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2006年01月10日

【期刊论文】抗人胰腺癌单克隆抗体介导LAK细胞体外体内抗胰腺癌作用的研究

陈其奎, Chen Qi-kui, Yuan Shi-zhen

中华肿瘤杂志,1994,16(5):3543-355,-0001,():

摘要

体外4小时51Cr释放试验表明,抗人胰腺癌单克隆抗体 (YPC3 McAb)能增强LAK细胞对Capan-2人胰腺癌细胞的杀伤作用,这种LAK细胞的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC),随YPC3 McAb的浓度增加而加强,50μg/ml的YPC3,McAb增加LAK细胞的杀伤率约60%。而对照抗体无此作用。裸鼠体内实验表明,YPC3 McAb和LAK细胞同时使用,能完全阻止Capan-2细胞的生长,优于LAK细胞、脾细胞和YPC3 McAb的分别作用。结果提示,YPC3 McAb和LAK细胞的联合应用,对胰腺癌治疗有一定价值。

关键词: 胰腺肿瘤/, 治疗, 抗体,, 单克隆 LAK细胞, 细胞毒性,, 免疫

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2006年01月10日

【期刊论文】单克隆抗体对活化腹腔巨噬细胞抗胰腺癌作用的影响①

陈其奎, Chen Qikui, Yuan Shizhen

中山医科大学学报,1997,18:73~75,-0001,():

摘要

观察重组人白细胞介素2(γ-IL2)体外诱导的腹腔巨噬细胞,在YPC3抗人胰腺癌单克隆抗体(YPC3mAb)介导下,通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)机制对胰腺癌细胞的杀伤作用。4h51Cr释放实验表明,在YPC3mAb作用下,活化腹腔巨噬细胞对Capan-2人胰腺癌细胞的杀伤活力明显增强,比单用巨噬细胞杀伤活力约提高70.0%,而对照1-F/7抗登革热病毒单抗无明显影响。γ-IL2作用的腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞具有类似的ADCC杀伤效应。结果提示,γ-IL2和YPC3mAb联合腹腔注射,可能为胰腺癌的局部治疗提供一个新方法。

关键词: 胰腺肿瘤/, 治疗, 抗体,, 单克隆/, 治疗应用, 巨噬细胞,, 淋巴因子活化, 细胞毒性,, 免疫

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2005年11月10日

【期刊论文】稻瘟病菌单克隆抗体的研制及其对稻瘟病菌附着胞形成的影响*

林福呈, Wu Jianxiang, Liu Fucheng, Li Debao, Chen Zhengxian, Lou Yichun

,-0001,():

摘要

Selecting by indirect ELISA eleven hybridoma cell lines, secreting monoclonal antibodies (McAbs) against Magnaporthe grisea were produced by fusing mouse myeloma cells (SP2/0) with spleen cells from BALB/c mice immunized with the mixture of conidia、germ tubes and appressoria of M. grisea using 50% PEG. The result of IFTC test showed that four McAbs, named as 2B4、4A1、1D1、and 2H4 specificlly bound to the cell wall surface of the fungus; Western blotting revealed that 2B4、4A1、1D1 were recognized different protein antigens from the surface of conidia and germ tubes; These four McAbs could effectively interfere with the appressorium formation both on cellophane membrance and the surface of onion epidermis and inhibit the disease leaf lesions development in vitro test.

关键词: 稻瘟病菌附着胞,, 单克隆抗体,, 间接免疫荧光试验

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2006年07月07日

【期刊论文】基国工程改鼠源性搞人脑胶质瘤单克隆抗体的初步报告

黄强, 沈树泉, 许志元, 王爱东, 周丽英, 兰青, 杜子威

中华肿瘤杂志,1996,18(4):359-362,-0001,():

摘要

为了提高人脑胶质瘤导向诊治中单抗载体的临床实用价值,必须把鼠源性大分子单抗改造成人源化、小分子单抗。采用RT-PCR法,从人脑胶质瘤单抗杂交瘤细胞系szae中克隆出348bp的追链可变区(vH)和318bp的轻链可变区(VL)cDNA片断。又采用重组DNA技术,将VH和VL与人免疫球蛋白IzG1重链CH1和轻链k恒定区基园拼接,或将VH和VL以通用Linker直接连接,分别构建表达载体pHEN1-SZ Fab/Hu(嵌合抗体)和pHEN1-SZ。ScFv(单链抗体)而后特此二载体转染至非抑制性大肠杆菌HB2151中表达。结果表明,两者的表达产物均为可溶性。以ELISA和Western blot法捡测,均与人脑胶质宿体外细胞系SHG,细胞膜表面抗原发生特异结合,与亲本抗体sz39特异识别180000膜抗原的条带相一致,该结果显示,基因工程改造的人源化、小分子单抗为今后的临床应用展示了美好的前景。

关键词: 抗体,, 单克隆 神经胶质瘤, 重组,, 遗传

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2005年05月10日

【期刊论文】CD25单克隆抗体治疗皮质激素耐药的重度移植物抗宿主病

黄晓军, 路瑾, 许兰平, 陈欢, 张耀臣, 任汉云, 郭乃榄, 陆道培

Natl Med J China, February 10, 2003, Vol 83, No.3,-0001,():

摘要

目的 观察白细胞介素(IL)22受体α链(CD25)单克隆抗体治疗激素耐药重度移植物抗宿主病(GVHD)的疗效方法 对异基因造血干细胞移植后诊断皮质激素耐药重度GVHD体17例患者(18例次),在诊断确立后第1、4(3)、8、15、22天将CD25人源化单克隆抗体(赛尼派)50mg溶于100ml生理盐水中静脉点滴治疗观察治疗后GVHD缓解情况,副作用以及合并感染情况结果(1)18例次中11例GVHD完全缓解,5例GVHD部分缓解,2例无效(2)7例出现感染(3)完全缓解11例患者中GVHD复发4例(4)无输注相关毒副作用。结论IL22受体α链(CD25)单克隆抗体治疗重度皮质激素耐药GVHD疗效显著。

关键词: 抗体, 单克隆 移植物抗宿主病, 受体, 白细胞介素2

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2005年03月08日

【期刊论文】抗旋毛虫成虫单克隆抗体的制备和保护性免疫的初步研究

诸欣平, 高欣, 黄敏君, 郭增柱, 周蕾, 姜洪杰

中华传染病杂志,2002,5(20):297~300,-0001,():

摘要

目的 获得抗旋毛虫成虫的单克隆抗体(单抗)并初步研究其保护性免疫作用。方法 利用杂交瘤技术,用旋毛虫成虫抗原免疫的Balb/c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合。用免疫双扩散鉴定单抗亚类,免疫印迹鉴定单抗的特异性。小鼠尾静脉接种单抗进行被动免疫保护实验。结果 建立了1株稳定分泌抗旋毛虫成虫单抗的细胞株。杂交瘤细胞培养上清液效价为1:6400,诱生腹水ELISA效价达1:204800。经鉴定单克隆抗体类型为IgM,可以识别旋毛虫成虫、肌幼虫及新生幼虫,相对分子质量约为40000蛋白,并且不与猪蛔虫、血吸虫、包虫、囊虫抗原发生交叉反应。单抗被动免疫后的减虫率为55.63%。结论 获得1株具种特异性、保护性的单克隆抗体,为筛选能诱导保护性免疫功能的旋毛虫抗原分子提供了有力的工具。

关键词: 旋毛虫, 成虫, 抗体,, 单克隆

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2005年02月25日

【期刊论文】几种不同高分子生物材料吸附FG与单克隆抗体M1结合亲合力的研究

万昌秀, 李天全

,-0001,():

摘要

利用鼠抗人血纤维蛋白原(Fibrinogen, FG)单克隆抗体M1作为血小板替代物,以酶联免疫吸附测定(Enzyme Linkedlm musorbent Assay,ELISA)为手段,通过FG-M1复合物结合亲合力常数ka的测定,对几种高聚物材料血液相容性进行了评价。测定了不同材料表面的XPS谱,比较了不同组成的材料表面血液相容性的差异。

关键词: 单克隆抗体, 蛋白吸附, 结合亲合力

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