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2011年03月28日
【期刊论文】水稻LRR型类受体蛋白激酶胞外区的原核表达及多克隆抗体制备*
张炜， 程彦伟**， 李亮**， 沈嵘， 齐耀程， 刘晓宇， 王宁， 张炜***
生物化学与生物物理进展，2008，35（9）：1077～1083，-0001，（）：
前期研究表明，水稻根尖细胞质膜类受体蛋白激酶OsRLK的表达受盐胁迫诱导。为了进一步研究该激酶的生理功能，通过反转录PCR得到OsRLK胞外区cDNA片段，将其亚克隆至pET29a原核表达载体并在大肠杆菌中实现了高表达，表达量约为细胞总蛋白的30%。重组蛋白经SDS-PAGE分离，染色切胶收集后，作为抗原免疫新西兰家兔，分离抗血清，经纯化得到1：20000效价的多克隆抗体。Western blot结果显示，该抗体能特异识别在原核表达系统内表达的抗原，以及水稻根尖细胞质膜组分中的LRR型类受体蛋白激酶，并且在蛋白质水平证实该激酶为盐胁迫响应蛋白。
关键词： LRR型类受体蛋白激酶,， 水稻,， 原核表达,， 多克隆抗体
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