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2009年11月20日

【期刊论文】人脑胶质母细胞瘤细胞系SHG-44中血管生成因子和细胞周期调控因子的表达

卞修武, 陈自强, 郭德玉, 杜林林, 辛榕, 史景泉

中华病理学杂志,1999,28(3):178~179,-0001,():

摘要

目的探讨人脑胶质母细胞瘤细胞系SHG-44长期传代后的某些生物学特性和免疫表型特征。方法采用免疫组织化学和原位杂交技术对SHC-44细胞增殖活性。中间丝蛋白共存、肿瘤蛋白、血管生成因子和细胞周期调控相关蛋白表达水平进行检测。结果传代l30-150代的SHC-44细胞呈腔质纤维酸性蛋白弱阳性而波形蛋白强阳性:Ki-67、增殖细胞核抗原平均标记指数分别为83.5%±10.2%、70.0%±18.7%. p21 ras、c-erb B-2、表皮生长因子及其受体、碱性成纤维细胞生长因子受其受体FGFR均显过度表达。血管内皮生长因子(VEGF)厦VEGF mR\A的表达情况亦相似。该细胞还具有诱导型一氧化氮合酶表达和p16. p53、周期素依赖性激酶4、cyclin D1蛋白积聚(平均标记指数分别为43.1%±11.2%、30.7%±6.6%、33.1%±11.4%和29.8%±4.7%)。结论SHC-44细胞存在上述生长因子、肿瘤蛋白表达异常和细胞周期的失控。使SHC-44细胞生长旺盛。增殖活性高,并且血管生成能力强,具有很高的恶性表型。

关键词: 神经胶质瘤 肿瘤细胞培养的 虚构生成因子 细胞周期蛋白质类

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2009年11月02日

【期刊论文】荷瘤小鼠多柔比星化疗后表皮生长因子(EGF)表达的检测

金先庆, 郭春宝, 陈峰

《中国癌症杂志》,2004,14(3):251~257,-0001,():

摘要

目的 探讨多柔比星(阿霉素)治疗实验性肿瘤对表皮生长因子(EGF)表达的影响。方法 制备H22腹水型肝癌肿瘤动物模型,分四组:正常组,Balb/c小鼠用阿霉素5mg/kg;对照组单纯肿瘤模型小鼠;1X组荷瘤小鼠注阿霉素5mg/kg;3X组荷瘤小鼠注阿霉素15mg/kg。采用阿霉素进行化疗,第六周酶联免疫吸附法检测血清中EGF及荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肿瘤组织EGFR mRNA的表达。并对这些指标进行相关分析。结果:各实验组血清中EGF浓度分别为3X组1.19±0.42pg/ml,1X组1.61±0.51pg/ml,对照组2.13±0.68pg/ml,正常组0.91±0.33pg/ml,统计学采用方差分析两两比较q检验。EGFR mRNA水平中位数分别为3X组1.6×103拷贝/毫升,1X组8.5×10 4拷贝/毫升,对照组4×105拷贝/毫升,正常组2.5×102拷贝/毫升,采用多样本间两两比较秩和检验,发现对照组血清EGF浓度及EGFR mRNA水平高于阿霉素化疗组,3X组低于1X组,但均高于正常组(P0.01)。阿霉素可以以剂量依赖性的方式降低肿瘤细胞中EGF的表达。EGFR mRNA水平与EGF蛋白量呈正相关关系。结论:荷瘤小鼠阿霉素化疗可作用于EGF信号途径。

关键词: 肿瘤模型, 表皮生长因子, 多柔比星, RT-PCR, 酶联免疫吸附法, 培养的肿瘤细胞

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2009年09月05日

【期刊论文】125I-脱氧尿嘧啶核苷对胰腺癌细胞Bax-Pc的杀伤作用

范我, 杨辰, 何扬, 申咏梅, 劳勤华, 朱然, 李金泉, 吴锦昌

中华核医学杂志,2004,24(3):136~138,-0001,():

摘要

目的 探讨125I-脱氧尿嘧啶核苷(UdR)在胰腺癌细胞Bax-Pc的特异性摄取及其杀伤细胞的能力,分析其作用条件和影响因素。方法 测量Bax-Pc细胞和细胞核在含不同放射性浓度125I-UdR的培养液中培养不同时间后的活度,评价其时间-效应和剂量-效应关系;用细胞克隆形成法评价125I-UdR对Bax-Pc细胞的杀伤作用。结果 ①Bax-Pc细胞摄取125I-UdR的量明显高于Na125I对照组(P<0O1)。②细胞和细胞核中125I-UdR的量随培养基中125I-UdR放射性浓度增加而增加(r=0.984~0.999)。③Bax-Pc细胞和细胞核中125I-Udlt的量随培养时间增加而增加(r=0.867~0.978)。④125I-UdB组的存活分数明显低于Na125I对照组(P<0.01),细胞存活分数有随培养基中放射性浓度和培养时问增加而降低的趋势。结论 125I-UdR可被Bax-Pc细胞特异性摄取并进入细胞核中,进而杀死细胞,其作用具有明显的时间-效应和剂量-效应关系。

关键词: 胰腺肿瘤, 细胞,, 培养的 脱氧尿苷核苷酸类, 放射疗法, 碘放射性同位素

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2009年09月05日

【期刊论文】125I-[Tyr3]-octreotide内化及杀伤NCI-H446细胞的研究

范我, 孙俊杰, 许玉杰, 张友九, 朱然, 胡明江

中华核医学杂志,2004,24(3):144~146,-0001,():

摘要

目的 探讨小细胞肺癌NCI-H446细胞株内化[Tyr3]-奥曲肽([Tyr3]-octreotide,TOC)的能力及125I-TOC杀伤NCI-H446细胞的效应。方法 以125I-TOC为放射配基,生长抑素受体(SSTR)阳性细胞NCI-H446于37℃与125I-TOC共同保温不同时间后,分别检测细胞的总结合、内化及结合到核上的125I-TOC;采用噻唑蓝(MTT)法检测不同剂量125I-TOC、游离125I及TOC在不同时间对细胞存活率的影响。结果 NCI-H446细胞内化125I-TOC和细胞核结合125I-TOC呈时间依赖性,至24h最高,结合到核上125I-TOC的量为0.5h的7倍;125I-TOC对SSTR阳性的NCI-H446细胞的杀伤作用呈剂量-效应、时间-效应关系,以74kBq125I-TOC作用96h的杀伤效应最大,细胞存活率降至(44.8±7.2)%。结论 125I-TOC可在SSTR介导下内化进入细胞并可杀伤细胞,呈时间-效应和剂量-效应关系。

关键词: 癌,, 小细胞肺, 细胞,, 培养的 放射疗法, [Tyr3 ]-octreotide

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2009年05月31日

【期刊论文】人宫颈癌细胞株CS1213的建立及其生物学特性

李旭, 陈葳, 杨玉琮, 司履生

中华妇产科杂志,2003,10(10):1-5,-0001,():

摘要

目的 建立人宫颈癌细胞株并观察其生物学特性。方法 从宫颈鳞癌组织取材,体外培养,建株后进行细胞形态学观察,分析其生物学特性和细胞遗传学变化,检测裸鼠接种CS1213后的成瘤性和p53、bcl-2、Ki67基因表达。结果 新建的CS1213细胞株在体外已传代170次。细胞呈圆形,悬浮生长,胞浆内有大量的张力原纤维,群体倍增时间为25h,集落形成率为19%,具有超二倍体核型,染色体主干系为80~88。细胞无支原体污染,有特异性的乳酸脱氢酶同工酶谱,p53、bcl-2和Ki67基因高表达,CS1213细胞接种Balb/c裸鼠,可形成移植瘤,并具有原发宫颈癌的组织学特性。结论 新建立的CS1213细胞具有人宫颈鳞状上皮细胞癌的特点,是研究肿瘤细胞浸润和转移的理想细胞模型。

关键词: 宫颈肿瘤; 肿瘤细胞, 培养的

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2006年01月11日

【期刊论文】人脐血间充质干细胞对脐血CD34+细胞体外扩增作用的研究

黄绍良, ZHOU Dun-hua, HUANG Shao-liang, ZHANG Xu-chao, WEI Jing, WU Yan-feng, HUANG De, LI Yang, FANG Jian-pei

中华儿科杂志,2005,43(7):194-498,-0001,():

摘要

目的 折探讨含人脐血来源的间充质干细胞(MSCs)体系在体外对脐血造血干细胞(HSCs)扩增作用。方法 (1)用含人脐血MSCs及不同造造血生长因子(HGFs)组合的无血清扩增体系对人脐血CD34+细胞进行体外扩增。(2)于扩增前及增后笫6、12天分别用双色流式细胞仪动态检测HSCs表面抗原标记:CD34+、CD34+、CD38-、CD34+CD3+、CD34+CD19+、CD34+CD33+和CD34+CD41a+细胞的含量。(3)按本实验室方法行体外半固体培养,观察扩增前后脐血细胞粒-单核细胞集落形成单位(CFU-GM)、爆式红系集落形成单位(BFU-E)、混合集落形成单位(CFU-Mix)及高增殖集落形成单位(CFU-HPP)集落形成情况。结果 (1)含人脐血MSCs体系对脐血CD34+;CD38-细胞的扩增倍数在笫6天和第12天分别为159和437倍。该亚群百分比在单纯因子组增第12天时为1.98%,而在含脐血MSCs组为9.98%,明显高增前。(2)集落培养表明,含脐血MSCs组增第12天与增第6天相比,其CFU-Mix和CFU-HPP的扩增倍数增加,而单纯因子组这两种集落的增数下降。(3)随增天数的增加,两组相比,含脐血MSCs组差异更显著。结论 (1)含脐血MSCs体系不仅能扩增更原始的造血干/祖细胞(HSPC),且具有在短期内(12d)保持HSCs不耗竭。(2)含脐血MSCs体系对脐血CD34+细胞向定向祖细胞的扩增,主要为髓系及巨核系祖细胞,而对其向淋巴系祖细胞的扩增具有抑制作用。

关键词: 间质干细胞, 细胞,, 培养的 抗原,, SD34+, ,, 流式细胞术, 胎血

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2006年08月23日

【期刊论文】拉坦前列素滴眼液对人眼球筋膜囊成纤维细胞增殖的影响

孙兴怀, 陈宇虹

中华眼科杂志,2005,41(7):620~624,-0001,():

摘要

目的研究拉坦前列素滴眼液对体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞的增殖有无促进作用。方法体外培养人眼球筋膜囊成纤维细胞。按1:10比例逐级稀释拉坦前列素滴眼液(0.005%),使药物浓度依次为5.O0、0.50、0.05g/ml直至5×10/ml。采用噻唑蓝比色法检测在不同浓度药物作用下的细胞增殖情况,并在光学显微镜下观察细胞的形态变化。结果较高浓度组(5.00g/m1)拉坦前列素滴眼液对人眼球筋膜囊成纤维细胞存在明显的杀伤作用,细胞几乎全部死亡,吸光度(A)值与对照组相比明显下降(P<0.01);低浓度组(<0.05g/m1)A值较对照组无明显变化(P>0.05)。比较拉坦前列素滴眼液在不同作用时间下的剂量效应曲线,24、48及72h差异均无统计学意义(P>0.05)。结论拉坦前列素滴眼液不能促进体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞的增殖,在较高浓度时具有细胞毒性,在较低浓度时则对细胞增殖无明显影响

关键词: 前列腺素类, 合成, 筋膜, 成纤维细胞, 细胞, 培养的

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2004年12月29日

【期刊论文】外生型肝癌细胞系的建立及生物学特性研究

王占民, 吴小鹏, 刘博, 刘军, 高英茂, 李兆亭, 刘春生

中华外科杂志,2002,40(8):616~618,-0001,():

摘要

目的 介绍外生型肝癌细胞系的建立及对其生物学特性进行研究。方法 将手术切除的肿瘤标本进行体外培养,观察肝癌细胞形态学改变、核型分析、增殖动力学、流式细胞计数、裸鼠成瘤情况及AFP测定。结果 外生型肝癌细胞系(EGCH-9901)无论形态学观察,还是功能学测定,均符合肝癌细胞的特征,染色体众数76~104条,并具有体外高分泌AFP功能。 其特有表现为:呈克隆样生长,高密度时细胞呈重迭生长,肝癌细胞之间形成完整毛细胆管,内有明显微绒毛,细胞倍增时间较长。结论 EGHC-9901细胞系符合外生型肝癌细胞系的特征。

关键词: 癌,, 肝细胞, 肿瘤细胞,, 培养的

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2004年12月29日

【期刊论文】人肝细胞癌细胞系HCC-9903的建立及其生物学特性研究

王占民, 刘军, 刘博, 吴小鹏, 高英茂, 刘春生

中华外科杂志,2001,39(11):872~875,-0001,():

摘要

目的 新建1株人体肝细胞肝癌细胞系,为肝癌研究提供新的、理想的实验模型,方法 以手术切除肝癌标本作原代培养,建立细胞系。通过光镜、电镜、倍增时间、生长曲线、双层软琼脂培养、流式细胞仪、染色体分析、刀豆球蛋白凝集试验、裸鼠接种、AFP、HBV及端粒酶检测

关键词: 肝肿瘤,, 实验性, 肿瘤细胞,, 培养的 组织培养

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2005年01月25日

【期刊论文】改良法大鼠肝星状细胞的分离培养及鉴定

冷希圣, 翁山耕, 魏玉华, 彭吉润, 郑恩涛, 程继华, 张佑彬, 吕建锋, 杜如昱

北京大学学报(医学版),2001,33(1):83~86,-0001,():

摘要

目的:改良大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSC)的分离培养及鉴定方法,使之简便易行,高效可靠。方法:采用肝离体胶原酶灌注消化,低速离心去除肝细胞,密度梯度离心法分离HSC,采用台盼蓝染色排斥法鉴定细胞活率,desmin加GFAP免疫细胞化学双染色法鉴定HSC纯度。结果:采用改良法,每只大鼠的HSC得率为(2. 54±0.13)×107个,细胞活率为(98.8±0.7)%,高于旧方法的HSC得率[(2.18±0.18)×107个,P<0.01]和活率(94.3±0.6)%,P<0.01]。用desmin加GFAP免疫细胞化学双染色法鉴定,HSC纯度为(96.8±1.0)%,高于单用desmin鉴定的纯度(91.8±2.2)% (P<0.01)。结论:改良的大鼠HSC分离培养方法简便易行又经济,在保证纯度的同时,提高了得率和活率。采用desmin加GFAP免疫细胞化学双染色法鉴定细胞纯度,提高了鉴定的敏感性。

关键词: 肝星状细胞, 细胞,, 培养的 肝硬化/, 病因学

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2007年05月08日

【期刊论文】丹酚酸A对培养的大鼠肝星状细胞增殖与胶原生成的作用

刘成海, LIU Cheng-Hai, LIU Ping, HU Yi-Yang, XU Lie-Ming, WANG Zhen-Nan, LIU Cheng

中国药理学报2000Aug, 21 (8): 721-726,-0001,():

摘要

目的:研究丹酚酸A对培养的大鼠肝星状细胞增殖与胶原生成的影响。方法:用链酶蛋白酶与胶原酶对肝脏进行原位灌流消化,Nycodenz密度梯度离心分离大鼠肝星状细胞,传一代培养。MTT法与[3H]TdR掺入法测定细胞增殖。丽春红染色、图象分析法半定量细胞胶原沉积量,ELISA法测定细胞培养上清中I型胶原分泌量,检测细胞层总蛋白量校正细胞数。RT-PCR法分析前胶原α2(I)基因的表达。结果:丹酚酸A 100μmol/L引起部分细胞脱壁与死亡,有一定毒性反应。丹酚酸A 0.1-10μmol/L对细胞形态无明显影响。丹酚酸A1-100μmol/L浓度依赖性抑制细胞增殖,降低胶原沉积量与I型胶原分泌量。丹酚酸A1-10μmol/L对前胶原α2(I)mRNA表达均有明显抑制作用。结论:丹酚酸A抑制肝星状细胞增殖与胶原表达,是丹参抗肝纤维化的主要有效成分之一,抑制肝星状细胞活化是其抗肝纤维化的主要作用机制。

关键词: 丹参, 丹酚酸A, 肝硬化, 细胞分裂, 胶原, 培养的细胞, 基因表达, 大鼠, 肝星状细胞

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2010年12月19日

【期刊论文】血液病患者骨髓间充质干细胞的增殖分化特点*

茹永新, 冯敏, 夏永辉, 崔雯, 林永敏, 杨晴英, 茹永新△

天津医药,2009,37(3):167~169,-0001,():

摘要

研究血液病患者骨髓间充质干细胞(MSC)的体外增殖分化特点。方法:用H4434 甲基纤维素半固体培养基培养168 例血液病患者骨髓单个核细胞14 d,分析贴壁梭形细胞形态和生长等级特点;CD29、CD44、α-SMA、α-醋酸奈酚酯酶和碱性磷酸酶组化染色鉴定MSC 特性和分化特点。结果:所有患者贴壁细胞为梭形,核圆或椭圆形,瑞氏染色胞浆淡蓝,核为紫红色;α-醋酸奈酚酯酶染色阳性。所有患者贴壁细胞的CD29 和CD44 阳性率在90%~95%之间,碱性磷酸酶和α-SMA 阳性率分别为25%和30%。再生障碍性贫血、急性白血病、骨髓异常增生综合征和骨髓增殖性疾病4组患者贴壁细胞生长等级不同,再生障碍性贫血组分别高于其他3组(P<0.05)。结论:血液病患者MSC 非诱导体外培养广泛表达骨和肌型细胞标志;再生障碍性贫血患者MSC 生长等级显著高于急性白血病、骨髓异常增生综合征和骨髓增殖性疾病。

关键词: 血液病 间质干细胞 骨髓细胞 细胞,, 培养的 细胞分化 细胞增殖

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