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2010年12月07日

【期刊论文】猪大肠杆菌耐热肠毒素和热敏肠毒素基因的融合及表达*

王嘉福, 陆承平

Vil.43 No.1 February 2003,-0001,():

摘要

用聚合酶链反应扩增出猪源大肠杆菌编码ST前体(pro-ST)和Lt的B亚单位(LTB)成熟多肽的序列,再通过套式PcR将pro-ST编码序列3'端和LTB编码序列5’端融合,并置于同一词读框内,得到SL和LTB的融合基因,将此序列克隆到pGEM-T质粒中,序列分析后,亚克隆到表达载体pOE30中,在大肠杆菌细胞中得到表达,表达的融合蛋白同时具有田和LTB的抗原性,且无ST和LT的生物毒性。

关键词: 猪大肠杆菌,, 肠毒素,, 基因融合

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2009年03月18日

【期刊论文】两种端粒酶逆转录酶启动子真核表达载体的构建

马春红, 刘华, 刘素侠, 王晓燕, 高立芬, 韩丽辉, 朱法良, 张艳, 杨咏梅, 吴伟芳

,-0001,():

摘要

目的:构建hTERT启动子和保留HBV同源序列的缺失点变hTERT启动子(pGL3del445)的真核表达载体,为进一步研究HBV与hTERT启动子的关系奠定实验基础。方法:通过双酶切及PCR方法从pCRTRTP载体上将全长及含有HBV同源序列的hTERT启动子的基因序列克隆到pPLbasic多克隆位点上,构建真核表达载体pGL3TRTP与pGL3Bdel445,将该两质粒与pRLtk共转染不同细胞系,评估其端粒酶启动子活性。结果:经测序证明成功构建了全长及含有HBV同源序列的hTERT启动子的真核表达载体pGL3TRTP和pGL3Bdel445,共转染实验中,证实在永生细胞系中重组子高效表达,在非永生正常细胞中重组子不表达。结论:构建的两种重组表达载体具有端粒酶启动子活性,在不同端粒酶表型的细胞系中其表达具有选择性。

关键词: 端粒酶逆转录酶・启动子・基因表达・基因融合・肝炎病毒, 乙型

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2005年05月11日

【期刊论文】应用逆转录2聚合酶链反应检测石蜡包埋腺泡状软组织肉瘤中ASPL2TFE3 融合基因的表达

李锋, 庞丽娟, 常彬, 胡文浩, 陆天才, 李新霞, 李洪安.蒋金芳

中华病理学杂志,2004,33(6):2087~512,-0001,():

摘要

目的探讨石蜡包埋腺泡状软组织肉瘤中t(X; 17)(p1112; q25)染色体易位融合基因ASPL2TFE3 mRNA表达的意义。方法收集以4%甲醛固定、石蜡包埋腺泡状软组织肉瘤标本8例,运用逆转录2聚合酶链反应(RT2PCR)方法检测ASPL2TFE3融合基因mRNA表达,以管家基因β-肌动蛋白(actin)作为内对照检测mRNA质量。另以腺泡状横纹肌肉瘤6例,肾细胞癌6例,副神经节瘤2例,颗粒细胞瘤1例作为对照。结果8例腺泡状软组织肉瘤中4例检测到ASPL2TFE32型融合基因mRNA的表达,2例检测出ASPL2TFE31型融合基因mRNA的表达,余2例β2actin和ASPL2TFE3的检测均为阴性。对照组未检出ASPL2TFE3融合基因,其中6例腺泡型横纹肌肉瘤中4例有PAX3/72FKHR融合基因的表达。结论石蜡包埋组织中ASPL2TFE3融合基因表达可作为腺泡状软组织肉瘤诊断和鉴别诊断的分子指标,并有助于其分子发生机制的回顾性研究。

关键词: 肉瘤, 软组织腺泡状, 基因融合 逆转录聚合酶链反应

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2005年04月29日

【期刊论文】应用逆转录2聚合酶链反应检测石蜡包埋腺泡状软组织肉瘤中ASPL2TFE3融合基因的表达

李锋, 庞丽娟, 常彬, 胡文浩, 陆天才, 李新霞, 李洪安, 蒋金芳

中华病理学杂志,2004,33(6):508~512,-0001,():

摘要

目的 探讨石蜡包埋腺泡状软组织肉瘤中t(X;17)(p1112;q25)染色体易位融合基因ASPL2TFE3 mRNA表达的意义。方法 收集以4%甲醛固定、石蜡包埋腺泡状软组织肉瘤标本8例,运用逆转录2聚合酶链反应(RT2PCR)方法检测ASPL2TFE3融合基因mRNA表达,以管家基因β2肌动蛋白(actin)作为内对照检测mRNA质量。另以腺泡状横纹肌肉瘤6例,肾细胞癌6例,副神经节瘤2例,颗粒细胞瘤1例作为对照。结果 8例腺泡状软组织肉瘤中4例检测到ASPL2TFE3 2型融合基因mRNA的表达,2例检测出ASPL2TFE3 1型融合基因mRNA的表达,余2例β2actin和ASPL2TFE3的检测均为阴性。对照组未检出ASPL2TFE3融合基因,其中6例腺泡型横纹肌肉瘤中4例有PAX3/72FKHR融合基因的表达。结论 石蜡包埋组织中ASPL2TFE3融合基因表达可作为腺泡状软组织肉瘤诊断和鉴别诊断的分子指标,并有助于其分子发生机制的回顾性研究。

关键词: 肉瘤,, 软组织腺泡状, 基因融合 逆转录聚合酶链反应

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2005年04月29日

【期刊论文】横纹肌肉瘤中PAX32FKHR和PAX72FKHR融合基因的表达

李锋, 常彬, 尹保民, 李新霞, 陆天才, 胡文浩, 蒋金芳, 施达仁

中华医学杂志,2003,83(15):1336~1338,-0001,():

摘要

目的 不暇接运用逆转录聚合酶链反应(RT2PCR)技术检测石蜡包埋横纹肌肉瘤中PAX32FKHR和PAX72FKHR融合基因mRNA的表达并探讨其在横纹肌肉瘤病理诊断中的价值。方法 用一步法RT2PCR 技术对15例石蜡包埋横纹肌肉瘤和15 例非横纹肌源性小圆细胞肿瘤(对照组)的PAX32FKHR和PAX72FKHR融合基因mRNA的表达进行了检测。结果 6例腺泡型横纹肌肉瘤中4例有PAX32FKHR或PAX72FKHR融合基因mRNA的表达(3例表达PAX32FKHR融合基因,1例表达PAX72FKHR融合基因),8例胚胎型横纹肌肉瘤、1例多形型横纹肌肉瘤及15例对照组肿瘤组织中无PAX32FKHR和PAX72FKHR融合基因表达。结论 检测横纹肌肉瘤组织中PAX32FKHR和PAX72FKHR融合基因mRNA的表达有助于横纹肌肉瘤的诊断和分型。

关键词: 横纹肌肉瘤, 基因融合 逆转录聚合酶链反应

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