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2010年11月30日

【期刊论文】应用RT-PCR从蝙蝠和野鼠分离出狂犬病病毒

罗廷荣, 李开鹏, 刘芳, 冯励, 潘艳, 莫全记, 李松, 罗永莉, 魏勇, 余克伦

广西农业生物科学,2005,24(4):287~290,298,-0001,():

摘要

从广西南宁、百色、柳州市采集了犬脑组织268份,从南宁市、博白县捕获蝙蝠320只,以及从南宁市郊捕获野鼠65只。应用RT-PCR技术对犬脑、蝙蝠和野鼠脑组织进行狂犬病病毒检测,并将阳性材料进行小白鼠脑内接种试验。检测结果表明,犬脑的狂犬病病毒阳性率为1.12%,蝙蝠阳性率为0.94%,野鼠阳性率为3.1%。本调查证明了广西除犬之外,野鼠和蝙蝠等野生动物也携带有狂犬病病毒。

关键词: 反转录聚合酶链反应 狂犬病病毒, 犬, 蝙蝠, 野鼠

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2010年11月30日

【期刊论文】RT-PCR检测猪瘟病毒初探

罗廷荣, 波丹, 黄宪高, 梁家权, 刘芳, 黄伟坚, 秦爱珍, 温荣辉, 陆芹章, 余克伦

广西农业生物科学,2001,24(1):17~20,-0001,():

摘要

本研究建立了反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测猪瘟病毒(HogCholeraVirus,HCV)方法。合成的二对引物HCV-1/HCV-2和HCV-A1/HCV-A2成功地扩增兔化弱毒株、法国株和石门株的核酸,并对采自博白县3个、贵港市1个和武宣县1个猪场共13份病料进行检测。结果从博白县和贵港市的11份材料中检测到HCV的核酸。

关键词: 反转录, 聚合酶链反应 猪瘟病毒

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2009年11月19日

【期刊论文】肝癌患者围手术期外周血黑色素瘤抗原-1mRNA和甲胎蛋白mRNA检测与术后复发的关系

董家鸿, 杨世忠, 朱瑾, 李昆, 张雨

中华医学杂志,2005,85(96):595~598,-0001,():

摘要

目的探讨肝细胞癌患者围手术期外周血MAGE-ImRNA和甲胎蛋白(AFP) mRNA表达水平其与术后转移复发的关系。方法通过巢式RT-PCR,在围手术期检测了45例肝细胞癌患者外周血MAGE-ImRNA和AFPmRNA,并进行平均11个月的随访。同时以22例肝炎后肝硬化、11例肝血管瘤、12例肝转移癌患者和20例健康志愿者外周血标本作为对照组进行了MAGE-I mRNA和AFP mRNA的对比检测。结果 MAGE-ImRNA在12例肝转移癌患者外周血中的检出率为33.3%(4/12);肝炎后肝硬化、肝血管瘤患者和健康志愿者中均未检出。AFP mRNA在肝炎后肝硬化患者外周血中的检出率为13.6%(3/22),在肝转移癌、肝血管瘤患者和健康志愿者巾均未检出。45例肝细胞癌患者外周血中,MAGE-I mRNA/AFP mRNA的检出率分别是术前42.20-/0(19/45)151.1%(23/45),术后7d 20%(9/45)/24.4%(11/45),术后28d 15.6%(7/45)/22.2%(10/45)。统计分析提示,术后28d肝细胞癌患者外周血检出MAGE-I mRNA/AFP mRNA顸示患者近期复发。并且双标志物联合检测较单标志物检测对预测复发具有更高的敏感性。结论采用巢式RT-PCR的方法联合检测肝细胞癌患者术后28d外周血中癌特异性的MAGE-I mRNA和肝细胞特异性的AFPmRNA有助下预测肝细胞癌患者术后的转移复发。

关键词: 癌,, 肝细胞, 黑色素瘤抗原-1, 甲胎蛋白, 巢式逆转录聚合酶链反应

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2009年11月03日

【期刊论文】含人过氧化物酶体增殖物激活受体δ基因高效真核表达载体的构建及其意义

周岐新, 章涛, 杨贵忠, 袁野, 万敬员, 杨俊卿, 蒋建新, 周岐新*

解剖学报, 2007, 38(2):173~177,-0001,():

摘要

目的构建高效表达人过氧化物酶体增殖物激活受体δ(hPPARδ)的真核表达载体,为hPPARδ受体功能和基于hPPARδ受体靶点的药物筛选提供分子研究平台。方法 采用逆转录一聚合酶链式反应(RT-PCR),从HepG2细胞总RNA克隆hPPARδ全长基因,与经BamHI、Sa/I相同双酶切的pIRES2-EGFP载体连接,构建重组质粒phPPARδ-IRES2-EGFP,经酶切及基因测序鉴定重组质粒中hPPARδ基因的完整性和忠实性;荧光显微镜观察重组质粒转染的293细胞GFP报告基因表达强度,并对转染细胞hPPARδ的表达进行荧光定量PCR和免疫细胞化学检测。结果 经酶切和测序证实重组赝粒构建正确,并在转染的293细胞巾获得hPPAR6的高效表达。结论 成功构建phPPARδ-IRES2-EGFP重组质粒。

关键词: 过氧化物酶体增殖物激活受体δ, 基因克隆, 真核表达, 逆转录-聚合酶链反应

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2009年11月01日

【期刊论文】人胚胎生殖细胞在人胚胎成纤维细胞饲养层上的生长

王亚平, 刘永刚, 韩兵, 陈地龙, 李芳菲, 王亚平*, 王莎莉

解剖学报,2005,36(3):716~719,-0001,():

摘要

目的探讨以人胚胎成纤维细胞为饲养层分离、培养人胚胎生殖细胞的方法和条件。方法分离、培养3-4月胚胎成纤维细胞,取3~15代细胞经丝裂酶素处理后铺板备用;分离6~11周胚胎原始生殖细胞,将其置于人胚胎成纤维细胞饲养层上,在含生长因子、分化抑制因子的培养体系中培养胚胎生殖细胞;用免疫细胞化学方法检测胚胎生殖细胞表面标志SSEA-1和SSEA-4;钙,钴法检测碱性磷酸酶活性;RT-PCR检测转录因子Oct-4的表达。结果人胚胎成纤维细胞可连续传代25代以上(6月),3~15代细胞可以用作饲养层细胞。分离的胚胎生殖细胞在饲养层上可增殖形成典型胚胎生殖细胞集落,并能连续在体外培养超过8代。集落未分化标志检测显示SSEA-1、SSEA-4呈阳性,碱性磷酸酶活性呈强阳性,Oct-4表达阳性。结论用人胚胎成纤维细胞作为饲养层能获得可连续增殖的胚胎生殖细胞。

关键词: 胚胎生殖细胞, 胚胎成纤维细胞, 细胞培养, 免疫细胞化学, 逆转录聚合酶链反应 人胚

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2009年11月01日

【期刊论文】Klinefelter综合征X染色体着丝粒区α-卫星DNA变异

翁亚光, 李恬, 王应雄, 何俊琳, 刘学庆, 陈雪梅

ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE Vol.27 No.16(2005)1678-1680,-0001,():

摘要

目的 从DNA分子水平建立研究X染色体着丝粒区域的α-卫星DNA变异的方法,发现Klinefelt综合征患者的X染色体着丝粒区域的。卫星DNA串联重复序列结构变化与染色体不分离的关系。方法采用(representative sampling of multiple repetitive units,rep)PCR方法,通过设计适当的引物,对α-卫星DNA多个单拷贝串联重复序列同时进行扩增,检测重复序列中结构变化的种类、频率及重组位点.结果首次发现由缺失产生的562 bp和220 bp变异片段和重组位点,异常组的570、562、220 bp构成显著高于正常组(P<0.05)。Logistic回归分析显示:570、562 bp和220 bp 3个短片段同时出现和任两个短片段同时出现均是疾病相关的危险因素。结论 Klinefelt综合征的X染色体着丝粒区α-卫星DNA过多的重组可能是造成X染色体不分离的重要原因之一。

关键词: 聚合酶链反应 Klinefeh综合征, α-卫星DNA, 不等交换

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2009年10月19日

【期刊论文】癌与高危型人乳头状瘤病毒基因的相关性研究

苏泽轩, 王栋, 李颖, 李文

中华实验外科杂志,2002,19(6):524~526,-0001,():

摘要

目的 探讨肾癌与高危型人乳头状瘤病毒基因(HPV16,18DNA)的相关性。方法 采用聚合酶链反应( PCR)和DNA限制性内切酶酶切技术(DNA RET)对90例成人肾恶性肿瘤组织(其中肾透明细胞癌、肾乳头状癌、肾颗粒细胞癌各30例)的HPV16、18E7基因进行实验研究,20例正常肾脏组织为正常对照,HPV16、18阳性克隆作为阳性对照,去离子三蒸水做实验体系阴性对照。对每一阳性标本行限制性内切酶技术。结果 肾透明细胞癌、肾乳头状癌、肾颗粒细胞癌中HPV16基因表达率分别为60.0%、86.7%、63.3%。总的基因表达率为70.0%。HPV18的基因阳性率分别为46.7%、66.7%、44.3%。总的基因表达率为52.2%。结论 高危型HPV16、18DNA与肾恶性肿瘤有一定的关系,尤其是HPV16基因表达率明显高于HPV18型(P<0.05),其中肾乳头状癌的HPV16、18基因阳性率明显高于肾透明细胞癌和肾颗粒癌(P<0.05),证实了高危型人乳头状瘤病毒感染是肾癌的重要致癌因素之一。

关键词: 肿瘤,, 肾, 基因, 乳头状瘤病毒,, 人, 聚合酶链反应

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2009年09月05日

【期刊论文】凋亡相关基因在肝癌及正常肝组织表达概况

刘连新, 周津, 王秀琴, 朱安龙, 姜洪池, 昊曼

中华肿瘤杂志,2001,23(4):273,-0001,():

摘要

目的 了解凋亡相关基因在肝癌中的表达概况,探寻在肝癌及正常肝组织中的表达差异:方法 以肝癌及癌旁正常肝组织的总RNA反转录合成含有a-32P dATP的cDNA为探针,与Atlas微阵列表达分析膜进行差异杂交,并应用平定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)验证。结果 放射自显影结果经AtlasLmageTM软件分析显示,在所分析的与凋亡相关的69个基因中,Akt1等4个基因在肝癌组织中表达上调,BAK、Caspase-3等19个基因表达下调。RT-PCR结果证实了Atlas微阵列差异杂交的准确性。结论 通过Atlas微阵列系统分析发现的这些基因的表达改变,组成了一个肝癌特异的与凋亡相关的基因表达谱,全面系统地研究肝癌中与凋亡相关的基因表达改变,为探讨肝癌的发病机制提供了有益的线索。

关键词: 肝肿瘤, 癌、肝细胞, 基因表达, 细胞凋亡, 聚合酶链反应

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2009年04月06日

【期刊论文】光动力疗法对鼻咽癌细胞Bax mRNA表达和凋亡的影响

田勇泉, 王承龙, 鞍垒平, 王行炜, 肖健云, 赵素萍

中华特理医学与康复杂志,2001,23(3):144~146,-0001,():

摘要

目的 探讨光动力疗法(PDT)对鼻咽癌细胞(NPC)Bax mRNA表达和凋亡的影响。方法 体外培养的NPC细胞。分别在PDT作用12、24.36和48h后用电镜动态观察分析细胞凋亡现象和凋亡指数,同时采用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测Bax mRNA的表达情况。结果 PDT作用12、24、36和48 h后NPC细胞凋亡指数分别为6.7%、71.6%、86.4%和98.3%,同时BaxmRNA表达检测发现。各对照组NPC细胞仅可见BaxmRNA扩增产物,实验组NPC细胞BoxmRNA表达均呈阳性,随PDT作用时间延长而逐渐增强,两者结果呈现一致。结论 PDT体外可诱导鼻咽癌细胞凋亡,细胞凋亡指数上升与凋亡相关基因Bax mRNA表达上调有关。

关键词: 光化学疗法, 鼻咽肿瘤, RNA信使, 逆转录聚合酶链反应

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2009年04月06日

【期刊论文】膀胱移行细胞癌中MT-3的表达及其临床意义

赵晓昆, 朱斌, 杨罗艳

中国现代医学杂志,2004,14(23):63~65,-0001,():

摘要

目的 探讨膀胱移行细胞癌中金属硫蛋白(MT-3mRNA)的表达与早期诊断、临床分级和预后的相关性。方法 采用逆转录多聚酶链反应(RT-PcR)技术,对12例正常膀胱黏膜和23例膀胱肿瘤MT-3mR.NA的表迭进行了检测。结果 12例正常膀胱黏膜中MT-3mRNA表达为0%,18例膀胱癌MT-3mR-NA有表达为78.3%,并对其进行了临床生物学行为的观察和比较。结论 MT-3的表达与膀胱移行细胞癌的早期诊断相关,可能成为一种新的肿瘤标志物。RT-PCR方法检测膀胱肿瘤时具有相对敏感、特异和结果可靠等优点。

关键词: 膀胱肿瘤, 金属硫蛋白, 逆转录多聚合酶链反应

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2009年01月19日

【期刊论文】重组载体pLNCX/iNOS的构建及其在NIH3T3细胞中滴度的测定

陈宝安, 朱梁军, 朱敏生, 潘英, 杜娟, 陈苏宁, 王骏, 邵泽叶

东南大学学报(医学版),2002,21(2):28~30,-0001,():

摘要

目的:构建重组质粒pLNCX/iNOS。方法:用PCR技术从pCMV/iNOS质粒中扩增出iNOS全长eDNA,与逆转录病毒pLNCX构建重组质粒pLNCX/iNOS;通过脂质体介导把重组质粒转染入包装细胞PA317中,经G418筛选出抗性克隆。通过NIH3T3细胞测定病毒滴度。结果:经过酶切分析和核苷酸序列分析鉴定重组质粒构建正确。G418筛选出16个抗性克隆,能稳定合成并分泌重组逆转录病毒颗粒。NIH3rI3细胞测定病毒滴度为2.1×l04CFU•ml。结论:逆转录病毒载体pLNCX可有效地介导iNOS的转染。

关键词: 一氧化氮合酶, 逆转录病毒, 基因转染, 聚合酶链反应

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2007年11月15日

【期刊论文】应用逆转录—聚合酶链反应方法检测孕妇外周血中胎儿ε/γ血红蛋白基因

王滨有, 许锬, 陈飞, 张琳, 段稳铭

中华流行病学杂志2003年2月第24卷第2期/Chin J Epidemiol, February 2003, Vol. 24, No. 2,-0001,():

摘要

目的 探索检测孕妇外周血中胎儿特异血红蛋白基因表达的方法。方法 提取孕妇全血mRNA,经体外逆转录后,用逆转录—聚合酶链反应(RT2PCR)方法,应用ε/γ特异引物引导扩增胎儿特异血红蛋白基因片段,经琼脂糖凝胶电泳后,在凝胶成像系统下观察。结果 在7名妊娠妇女中,6名扩增出ε/γ基因片段,1名为阴性。结论 应用RT-PCR方法可直接从孕妇全血中扩增出胎儿特异血红蛋白基因片段,孕妇全血中微量的胎儿mRNA已基本满足体外逆转录及扩增的要求。利用孕妇外周血进行的无创伤性产前诊断具有可行性。

关键词: 逆转录—聚合酶链反应 ε/γ血红蛋白基因, 孕妇

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2007年11月15日

【期刊论文】应用逆转录—聚合酶链反应方法检测孕妇外周血中胎儿ε/γ血红蛋白基因

王滨有, 许锬, 陈飞, 张琳, 段稳铭

中华流行病学杂志2003年2月第24卷第2期/Chin J Epidemiol, February 2003, Vol. 24, No. 2,-0001,():

摘要

目的 探索检测孕妇外周血中胎儿特异血红蛋白基因表达的方法。方法 提取孕妇全血mRNA,经体外逆转录后,用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)方法,应用ε/γ特异引物引导扩增胎儿特异血红蛋白基因片段,经琼脂糖凝胶电泳后,在凝胶成像系统下观察。结果 在7名妊娠妇女中,6名扩增出ε/γ基因片段,1名为阴性。结论 应用RT-PCR方法可直接从孕妇全血中扩增出胎儿特异血红蛋白基因片段,孕妇全血中微量的胎儿mRNA已基本满足体外逆转录及扩增的要求。利用孕妇外周血进行的无创伤性产前诊断具有可行性。

关键词: 逆转录—聚合酶链反应 ε/γ血红蛋白基因, 孕妇

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2007年09月28日

【期刊论文】荧光实时定量PCR检测肺癌组织表皮生长因子受体基因突变的临床应用价值-附71例分析

邵建永, 张海芳, 邓玲, 黄马燕

新医学2006年9月第37卷第9期,-0001,():

摘要

目的:建立1种检测表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变的荧光实时定量PCR的新方法,并探讨应用这种方法检测肺癌组织EGFR基因突变的临床应用价值。方法:通过自行设计探针及引物,应用荧光实时定量PCR方法,检测71例女性非小细胞肺癌患者的肺癌组织中EGFR基因的第19号和第21号外显子上的突变情况,并与直接测序法比较。结果:中国女性非小细胞肺癌的病人中EGFR基因的突变率为30%(21/71);荧光实时定量PCR与直接测序法的特异度符合率是95%(20/21),敏感度符合率是100% ,检测时间为直接测序法的1/12,而且结果判读直观。结论:应用荧光实时定量PCR检测肺癌组织中的EGFR基因特定位点的突变是一种快速、可靠的方法,具有较高的临床应用价值。

关键词: 聚合酶链反应 肺肿瘤, 表皮生长因子受体, 基因突变

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2007年05月10日

【期刊论文】反义纤溶酶原激活物抑制剂1 RNA 对家兔动脉粥样硬化形成的影响

富路, 李佳, 李晖, 梅雨, 尹申, 孔一慧

中国动脉硬化杂志2003年第11卷第3期/Chin J Arterioscler, Vol. 11, No. 3,-0001,():

摘要

为探讨纤溶酶原激活物抑制剂1 反义RNA 对家兔血浆纤溶活性及纤溶酶原激活物抑制剂1 的表达、血脂及对动脉粥样硬化斑块形成的影响,通过聚合酶链反应扩增纤溶酶原激活物抑制剂1 第二外显子,将聚合酶链反应产物纯化克隆后连入真核细胞表达载体pcDNA3. 1 ,构建纤溶酶原激活物抑制剂1 反义RNA 重组质粒。将pcDNA3. 1-反义纤溶酶原激活物抑制剂1 重组质粒注射到哈尔滨大白兔腹部皮下组织。通过发色底物法测定家兔血浆组织型纤溶酶原激活物及纤溶酶原激活物抑制剂1 活性变化,通过免疫组织化学方法检测组织中纤溶酶原激活物抑制剂1 表达的改变。测定家兔血脂变化,病理检测其动脉粥样硬化程度。结果显示,应用反义纤溶酶原激活物抑制剂1 RNA 重组质粒的家兔血浆纤溶酶原激活物抑制剂1 活性降低,组织型纤溶酶原激活物活性升高, 纤溶酶原激活物抑制剂1 蛋白表达于内皮细胞,而在平滑肌细胞中未表达(动脉粥样硬化对照组中内皮细胞、平滑肌细胞和泡沫细胞内均有表达);应用反义纤溶酶原激活物抑制剂1 RNA 重组质粒的家兔胆固醇和甘油三酯明显低于动脉粥样硬化对照组(96±42 mg/L 比123±12 mgPL , 15±10 mgPL 比46±29 mg/L) ,且动脉粥样硬化程度亦轻于后者。以上提示,反义纤溶酶原激活物抑制剂1 RNA 重组质粒的皮下注射能有效阻断家兔体内纤溶酶原激活物抑制剂1 蛋白的合成,减轻动脉粥样硬化程度。

关键词: 分子生物学, 纤溶酶原激活物抑制剂1对动脉粥样硬化形成的影响, 聚合酶链反应 反义RNA, 组织型纤溶酶原激活物, 血脂, 动脉粥样硬化

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2007年05月10日

【期刊论文】胃癌组织中端粒酶活性的研究及其临床意义

王锡山, 王宽, 张岂凡, 陈峰, 张殿忠, 傅松滨

中国肿瘤临床2001年第28卷第6期,-0001,():

摘要

目的:检测胃癌组织及癌旁非癌组织中端粒酶活性的表达,探讨端粒酶活性与各临床病理因素之间的关系。方法:采用PCR-ELISA聚合酶链反应-酶联免疫反应)方法,定量检测68例胃癌组织及40例癌旁非癌组织中端粒酶活性表达。分别按计数和计量资料统计。结果:68例胃癌组织中,60例端粒酶活性表达68.24%),而40例癌旁非癌组织中,6例端粒酶低活性表达(5%),两组差异极显著(P0.01)。胃癌组织中端粒酶活性表达与淋巴结的转移呈正相关(X2=4.87 u=2.01 P<0.05);与组织分化呈负相关女(X2=4.34 u=2.17 P<0.05);与其他临床病理因素统计学无明显相关性。结论:端粒酶的激活与胃癌的发生发展关系密切,端粒酶活性的检测有可能成为临床胃癌诊断的辅助方法,且可能具有一定的指导术式及预后评估的意义。定量检测端粒酶活性可能更有利于揭示其在恶性肿瘤中的角色。

关键词: 胃肿瘤, 端粒酶活性, 聚合酶链反应/酶联免疫反应

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2007年05月29日

【期刊论文】结直肠癌缺陷基因201密码子点突变与大肠癌生物学特性研究

吴文溪, 马利民

中华普通外科杂志2000年3月第15卷第3期/Chin J Gen Surg, March 2000, Vol. 15, No. 3,-0001,():

摘要

目的:探讨结直肠癌缺陷(deleted in colorectal carcinoma,DCC) 基因201 密码子(codon 201) 点突变与大肠癌生物学特性的关系。方法 采用等位基因特异性(allele-specific) PCR 扩增技术结合限制性片段长度多态性(restricted fragment length polymorphism,RFLP) 检测40 例正常人大肠粘膜、35 例大肠癌组织及相应癌旁正常粘膜的201 密码子突变情况。结果 大肠癌组织及癌旁正常粘膜201 密码子突变率分别为71 %(25/ 35) 和60 %(21/ 35),两者差异无显著意义。但与正常对照组33 %(13/ 40) 相比,显著增高(χ2 = 5.6963,P < 0.025)。伴淋巴结转移组和Ducks C、D 群明显高于无淋巴结转移组和Dukes A、B 期,而与患者性别、年龄、癌的分级、分型等因素无关。结论 DCC 基因201密码子突变是大肠癌发生中的早期基因事件,且与其转移能力的加强密切相关。

关键词: 结肠肿瘤, 基因, 突变, 聚合酶链反应

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2006年11月02日

【期刊论文】Survivin在多发性骨髓瘤患者骨髓细胞中的表达及其临床意义

李娟, 赵莹, 张殿宝, 黄蓓晖

Chinese Journal of Cancer, 2005, 24 (12): 1522-1526,-0001,():

摘要

背景与目的:Survivin是凋亡抑制蛋白家族成员之一,在多种恶性肿瘤中高表达,但在正常成人分化组织无表达。其表达与多种肿瘤的预后及肿瘤对放、化疗的耐受有关。本研究旨在通过检测Survivin在正常人、初治及复发/难治多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)患者骨髓细胞及骨髓瘤细胞系KM3中的表达,以揭示Survivin在骨髓瘤中的表达与耐药及疗效的关系。方法:RT-PCR和Westernblot法检测29例MM患者(其中初治17例,复发/难治12例)、9例正常人骨髓标本及KM3细胞系中SurvivinmRNA和蛋白质水平表达。结果:骨髓瘤细胞系KM3高表达Survivin。SurvivinmRNA在正常人、初治和难治/复发MM患者骨髓细胞中阳性率分别为22.2%、70.5%和83.3%,表达水平(Survivin/β-actin比值)分别为0.06±0.04、0.31±0.14和0.69±0.24,骨髓瘤患者表达率和表达水平显著高于正常人(P<0.01),而难治/复发MM组表达水平高于初治组(P<0.05)。所有的正常人标本中均未检测到Survivin蛋白,在初治和难治/复发MM组Survivin蛋白阳性率分别为41.1%和58.3%(P>0.05),表达水平(Survivin/α-tubulin半定量比值)分别为0.11±0.07和0.21±0.12,难治/复发MM组明显为高(P<0.05)。17例初治患者中,7例Survivin阳性者4例部分缓解(partialresponse,PR),1例微小反应(minorresponse,MR),2例无变化(nochange,NC),有效率[完全缓解(completeresponse,CR)+PR+MR]71.4%;10例Survivin阴性者中2例CR,4例PR,2例MR,2例NC,有效率80%,略高于阳性组。但统计学分析未发现两组有效率存在显著性差异。结论:Survivin在骨髓瘤患者中的高表达可能是部分患者对化疗不敏感的原因之一,由于Survivin仅特异性表达于骨髓瘤细胞,Survivin可作为逆转骨髓瘤细胞耐药治疗中的潜在靶点。

关键词: 骨髓瘤, 多发性, Survivin, KM3细胞, 耐药, 疗效, 逆转录-聚合酶链反应 免疫印迹

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2006年11月29日

【期刊论文】结核分枝杆菌耐多药的基因研究

胡忠义, 靳安佳, 景奉香, 王莉莉, 王芳

中华检验医学杂志,2001,24(2):73~75,-0001,():

摘要

目的探讨耐多药结核分枝杆菌耐药基因突变与耐药性的关系。方法用聚合酶链反应和聚合酶链反应单链构象多态性分析对128株结核分枝杆菌临床分离株耐利福平(moB)、链霉素(rpsL)和异烟肼(KatG)基因检测。结果38株敏感株中,各有1株(2.6%)测出rpoB、rpsL和KatG突变;90株耐多药株中,分别有8l株(90.0%)、71株(78.9%)和63株(70.0%)测出rDOB、rDsL和KatG突变;有77株(85.6%)同时测出2种以上耐药基因突变;10株耐其他药物株中,仅有1株测出KatG基因突变。结论85.6%的耐多药结核分枝杆菌存在2种以上耐药基因突变,且耐药基因突变率与耐药浓度有关。

关键词: 分枝杆菌,, 结核, 抗药性,, 微生物, 聚合酶链反应 多态现象,, 单链构象

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2006年07月10日

【期刊论文】环孢素A作用于人滋养层细胞差异表达的功能基因

李大金, 杜美蓉, 闫凤亭, 李大金*, 严缘昌, 李逸平, 金莉萍, 王明雁, 朱影, 袁敏敏, 孟毅

中国药学杂志,2006,41(3):189-192,-0001,():

摘要

目的:探讨环孢素A(cyclosporin A, CsA)作用于人滋养层细胞差异表达的功能基因。方法:应用抑制性消减杂交筛选110μmol·L-1 CsA作用于JAR细胞系前后差异表达的功能基因,经RT2PCR及蛋白质印迹进一步验证CsA作用前后原代分离的人早孕期滋养层细胞及JAR细胞株titin 表达的变化。结果:CsA作用于人JAR细胞系前后出现6个具有差异表达的基因,其中1 个为已知基因titin,2个为功能未知的mRNA,3个为位于16号染色体上的EST。RT2PCR显示,CsA作用于人滋养层细胞24h后出现titin mRNA的表达,72h达高峰,并呈现明显的剂量依赖性,110μmol·L-1 CsA作用最明显。蛋白质印迹显示,CsA可诱导titin的表达。结论:CsA可能通过诱导滋养层细胞titin的高表达,改变其生物学行为,从而有利于胚胎着床及早期发育。

关键词: 关键词:环孢素A, 滋养层细胞, 抑制性消减杂交, 反转录2聚合酶链反应 蛋白质印迹, 肌肉巨球蛋白

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