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2011年05月05日

【期刊论文】EB病毒对脐带血单核细胞来源树突状细胞凋亡的影响

陈同辛, 金莹莹, 王玺,

上海交通大学学报(医学版),2010,30(2):121~124,-0001,():

摘要

目的观察EB病毒(EBV)感染对新生儿脐带血单核细胞来源的树突状细胞(DC)凋亡的影响。方法用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)(50ng/mL)和重组人白细胞介素-4(rhlL-4)(10ng/mL)诱导脐带血单核细胞向DC分化,将DC分为3组:①4G组:细胞分离当天单独加入rhGM-CSF和rhlL-4;②4G+0d EBV组:细胞分离当天同时加入rhGM-CSF、rhlL-4和B95.8细胞上清;③4G+5d EBV组:细胞分离当天加入rhGM-CSF和rhIL-4,培养至第5天后加入B95.8细胞上清。Annexin V-FITC和PI染色流式细胞术检测DC的凋亡百分比;Western Blot检测X-连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的表达。结果培养至第6-14天,4G+0d EBV组DC凋亡百分比明显高于4G组(P<0.05);第7-14天,4G+5d EBV组DC凋亡百分比明显高于4G组(P<0.05)。EBV在不同感染时间点感染DC,对DC凋亡百分比的影响不同。经EBV感染的DC,XIAP的表达明显降低。结论EBV感染促进了脐带血单核细胞来源DC的凋亡,这种促进作用与DC的分化成熟状态有关。

关键词: 新生儿, 脐带血 EB病毒, 树突状细胞, 凋亡

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2011年05月05日

【期刊论文】EB病毒对新生儿脐带血单核细胞来源的树突状细胞表型的影响

陈同辛, 王玺, 罗嘉慧, 曹睿明, 朱亚忠, 刘宇隆

《现代免疫学》,2007,27(4):300~305,-0001,():

摘要

从脐带血单核细胞来源树突状细胞(DC)表型变化的角度来探讨EB病毒对DC表型的影响,以阐明其逃逸宿主免疫的机制。将GM CsF和IL-4、EB病毒和LPS不同组合对单核细胞来源DC进行刺激培养,利用单染色和三染色免疫荧光抗体标记-流式细胞术检测单核细胞来源DC表面CDl4、CDlc、CDla、HLA-DR、CD86、MR和MHC I类分子。加人EB病毒后,Dc表面CDl4分子表达的下调不明显,CDla的表达则随病毒加入时细胞的分化阶段有关;同时EB病毒还影响了加入LPS后HLA-DR和CD86的升高和MR的降低;EB病毒还影响了细胞表面MHC I类分子的表达。因此EB病毒可抑制单核细胞来源DC的分化和成熟,这可能是其逃逸宿主免疫的机制之一。

关键词: 新生儿, 脐带血 EB病毒, 单核细胞来源的树突状细胞, 表型

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2006年10月10日

【期刊论文】人脐带血淋巴管内皮祖细胞的分化及其生物学特征

谭玉珍, 张美华, 王海杰*, 刘锐

解剖学报,2006,37(4)473~478,-0001,():

摘要

目的 研究脐带血中CD34+/CDl33+/VEGFR-3+淋巴管内皮祖细胞经VEGF-C诱导向内皮细胞分化过程中生物学特征的变化,并探讨其分化的机制。方法 取脐带血,用Percoll密度梯度离心法分离单形核细胞,再用流式细胞仪分选CD34+/CDl33+/VEGFR.3+细胞,然后用VEGF-C诱导分化。在扫描电镜和透射电镜下观察细胞表面形态和细胞内结构的变化,并在激光扫描共焦显微镜下观察特征性标志物的表达变化。结果 脐带血中的淋巴管内皮祖细胞表达CD34、CDl33和VEGFR-3。CD34+/CDl33+/VEGFR.3+细胞经VEGF-C诱导后7d,呈长梭形,细胞伸出板状伪足和丝状伪足,出现较多短的微绒毛,表面可见细胞小凹,细胞质中含有丰富的线粒体和粗面内质网。诱导后14d,细胞已具有内皮细胞的特征,表达淋巴管内皮特异性标志物LYVE-1和5-核苷酸酶,CDl33表达消失,细胞质中可见weibel-Palade小体。结论 脐带血中存在CD34+/CDl33+/vEGFR.3+淋巴管内皮祖细胞,这些细胞在VEGF-C诱导作用下可能通过VEGF-C/VEGFR-3信号途径分化为淋巴管内皮细胞。

关键词: 淋巴管内皮祖细胞, VEGFR-3, VEGF-C, 淋巴管内皮细胞, 脐带血

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2006年01月11日

【期刊论文】脐血干细胞移植治疗假肥大型肌营养不良症

黄绍良, ZHANG Cheng, FENG Hui-yu, HUANG Shao-liang, FANG Jian-pei, XIAO Lu-lu, YAO Xiao-li, CHENG Chun, YE Xin, ZENG Yin, LU Xi-lin, WEN Jian-ming, ZHANG Wei-xi, LI Zhong, FENG Shan-wei, XU Hong-gui, HUANG Ke, ZHOU Dun-hua, CHEN Wei, XIE You-mei, XI Jing, ZHANG Meng, LI Yang, LIU Ying.

中华医学遗传学杂志,2005,22(4):399-405,-0001,():

摘要

目的 比较假肥大型肌营养不良症(Duchenne muscular dystrophy, DMD)患者经脐血干细胞移植治疗前后其肌肉再生、抗肌萎缩蛋白表达和运动功能的改变;以及评价治疗的安全性。方法 对1例经基因分析和肌肉活检及抗肌萎缩蛋白检测确诊的、已丧失行走能力的DMD患儿,经HLA配型,在脐血库中寻找到一个全相合的脐血供体。采用白消安+环磷酰胺+兔抗胸腺淋巴细胞球蛋白预处理后进行异基因脐血干细胞移植;术后采用环孢素A和骁悉方案预防移植物抗宿主反应(graft wersus host reaction, GVHD)。同时定期检测原发病的生化指标如血清肌酸激酶(creatine kinase, CK)、造血重建的植入证据(血型转变、肌肉和血液系统的聚合酶反应短串联重复序列分析)、缺陷基因是否纠正、新生肌肉是否出现、肌肉中抗肌萎宿蛋白是否表达和运动功能是否改善。结果 (1)中性粒细胞在脐血干细胞移植后第15天(+15天)达到0.5×109/L,白细胞在+25天达正常水平;血小板于+22天达到20×109/L;血红蛋白维持于85-100g/L。术后140天骨髓穿刺提示三系生长旺盛;(2)移植后140天血型转为供体AB型。至今没有出现移植物抗宿主反应。(3)术后18天、30天、42天、55天、74天、233天患者外周血DNA和术后140天、183天、235天骨髓细胞DNA经PCR-STR检测为供者独立植入;(4)患儿术后60天取外周血做基因分析,显示19号缺失的外显子得到完全纠正,患儿转变为正常基因型;(5)患儿在移植75一的肌肉活检可见新生肌管形成,抗肌萎宿蛋白免疫组化呈弱阳性,少数为强阳性反应,DNA分析:供者基因DNA占1%~25%;(6)患儿血清CK从移植治疗前的5735U/L降至274U/L;(7)术后100天体检发现患儿肌力略有改善,肢端温暖。结论 异基因脐血干细胞移植治疗DMD,可在移植后短期内重建造血功能、血清CK显著下降、肌肉抗肌萎缩蛋白表达,患儿运动有所改善,提示造血干细胞移植将有益于DMD的治疗。

关键词: 假肥大型肌营养不良症, 脐带血造血干细胞移植, 抗肌萎缩蛋白

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