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2011年05月03日

【期刊论文】2, 5-己二酮对大鼠脊髓组织蛋白激酶含量的影响

谢克勤, 王青山, 侯丽艳, 张翠丽, 宋福永, 朱振平

环境与健康杂志,2008,25(5):391~395,-0001,():

摘要

目的探讨蛋白激酶A(PKA)、蛋白激酶C(PKC)和细胞周期依赖性蛋白激酶5(CDK5)对2,5-己二酮(HD)中毒性周围神经病神经丝(NF)变化的作用。方法将30只体重为200~240g的SPF级雄性Wistar大鼠随机分为3组(1个对照组、2个染毒组),每组10只。经腹腔染毒HD,剂量分别为200和400mg/kg,每周染毒5d,每日1次,连续8周,建立HD中毒性神经病模型。对照组给予相同体积的生理盐水。利用SDS.PAGE和WesternBlotting方法检测脊髓胞浆蛋白和膜蛋白组分中PKA、PKC、P35前体和CDK5的相对含量。结果在脊髓胞浆蛋白组分中,与对照组比较,PKA和PKC含量在400mg/kg染毒组大鼠分别升高了46.1%和23.0%(P<0.01),而在200mg/kg染毒组均无明显改变(P>0.05);p35前体和CDK5在200mg/kg染毒组分别升高了56.8%(P<0.01)和78.2%(P<0.01),而在400mg/kg染毒组,仅CDK5升高了21.9%(P<0.01),p35前体含量无明显改变。在脊髓膜蛋白组分中,PKA和CDK5含量在200、400mg/kg染毒组大鼠分别升高了19.3%(P<0.01),25.5%(P<0.01)和26.3%(P<0.01),12.7%(P<0.01);PKC含量仅在400mg/kg染毒组升高了13.9%(P<0.01),而在200mg/kg染毒组无明显改变(P>0.05);染毒组p35前体与对照组比较,变化不明显(P>0.05)。结论HD使脊髓组织中PKA、PKC和CDK5含量明显升高,提示相关蛋白激酶含量的升高可能是HD中毒性周围神经病的发病机

关键词: 环境污染物, 2,, 5-己二酮, 中毒性神经病, 蛋白激酶 磷酸化

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2011年03月28日

【期刊论文】水稻LRR型类受体蛋白激酶胞外区的原核表达及多克隆抗体制备*

张炜, 程彦伟**, 李亮**, 沈嵘, 齐耀程, 刘晓宇, 王宁, 张炜***

生物化学与生物物理进展,2008,35(9):1077~1083,-0001,():

摘要

前期研究表明,水稻根尖细胞质膜类受体蛋白激酶OsRLK的表达受盐胁迫诱导。为了进一步研究该激酶的生理功能,通过反转录PCR得到OsRLK胞外区cDNA片段,将其亚克隆至pET29a原核表达载体并在大肠杆菌中实现了高表达,表达量约为细胞总蛋白的30%。重组蛋白经SDS-PAGE分离,染色切胶收集后,作为抗原免疫新西兰家兔,分离抗血清,经纯化得到1:20000效价的多克隆抗体。Western blot结果显示,该抗体能特异识别在原核表达系统内表达的抗原,以及水稻根尖细胞质膜组分中的LRR型类受体蛋白激酶,并且在蛋白质水平证实该激酶为盐胁迫响应蛋白。

关键词: LRR型类受体蛋白激酶,, 水稻,, 原核表达,, 多克隆抗体

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2009年10月19日

【期刊论文】心脏缺血性预适应与蛋白激酶C作用

敖杰男, 孙洪涛, 包吉日木图

内蒙古民族大学学报(自然科学版),2002,17(3):242~246,-0001,():

摘要

缺血性预适应对心脏起着有效的保护作用,而蛋白激酶C参与了保护过程

关键词: 缺血性预适应, 蛋白激酶C

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2009年10月10日

【期刊论文】调节免疫耐受的新靶点-蛋白激酶Cθ

孙晗笑, 杨清玲

细胞与分子免疫学杂志,2002,18(6):113~115,-0001,():

摘要

暂无

关键词: 蛋白激酶C, 共刺激信号, 免疫耐受

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2009年08月31日

【期刊论文】细胞信号转导介导与日本血吸虫特异性Th1/Th2免疫偏移

夏超明, 龚唯, 骆伟, 周卫芳, 李允鹤, 查锡良, 熊思东

上海免疫学杂志,2002,22(1):19~22,-0001,():

摘要

分别于小鼠感染日本血吸虫后0、4、6、8 和12周,取脾淋巴细胞体外培养,进行细胞信号转导抑制试验,观察酪氨酸蛋白激酶(TPK)、蛋白激酶C(PKC)和磷酯酰肌醇-3-激酶(PI3-K)特异性抑制剂(Tyrphostin-25、D-sphingosine 和Wortmannin)分别特异性抑制和不同组合抑制TPK、PKC 和PI-3K后,对小鼠脾淋巴细胞经虫卵可溶性抗原(SEA)诱生IL-2、IFN-γ和IL-4 的表达水平及对Th1/Th2免疫偏移的影响。结果发现Tyrphostin-25 对IL-2、IFN-γ和IL-4 水平的抑制作用均非常显著P<0.01),D-sphingosine主要影响IL-4的表达(P<0-01),而Wortmannin 则主要影响IFN-γ的表达(P<0-01),Tyrphostin-25和Wortmannin 联合应用可完全阻断IL-2 的表达及增强对IFN-γ的抑制作用,Tyrphostin-25 和D-sphingosine 联合应用可完全阻断IL-4 的表达。对反映Th1/Th2 免疫平衡的Th2 分化指数分析表明,D-sphingosine 可使Th2 免疫应答优势减弱,而Wortmannin 则可使Th2免疫应答优势增强。研究结果表明,干预细胞信号转导可调节日本血吸虫特异性Th1/Th2 细胞因子表达水平及Th1/Th2 免疫偏移,为探索控制日本血吸虫卵肉芽肿病变的潜在新途径,提供了实验依据。

关键词: 日本血吸虫, Th1/, Th2细胞因子, 酪氨酸蛋白激酶(, TPK), 蛋白激酶C(, PKC), 磷酯酰肌醇-3-激酶(, PI3-K),

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2009年04月20日

【期刊论文】一氧化氮抑制AngⅡ介导的心肌肥大反应的信号机制

刘培庆, 鲁伟, 潘敬运*

生理学报,54(3):213~218,-0001,():

摘要

本文主要利用培养的新生大鼠心肌细胞,从细胞学及分子生物学角度研究一氧化氮(NO)信号系统在AngⅡ介导的心肌肥大反应中的作用及机制。实验以心肌细胞蛋白合成速率、心房钠尿肽(ANP)的表达作为心肌肥大反应的指标,以硝酸盐及亚硝酸盐含量反映心肌细胞NO水平,以免疫印迹法测定MKP-1蛋白表达,以RT-PCR测定eNOSInRNA水平。结果发现:(1)L-精氨酸(L-Arg)10、100μmol/L分别增加心肌细胞NO水平16%及31%,L-Arg(100μmmoL)还可增加心肌细胞eNOS InRNA表达,其作用可被NOS抑制剂L-NAME所抑制;(2)L-Arg(100μmoL)可降低Angll(0.1μmoL/L)诱导的心肌细胞ANPInRNA表达水平和蛋白合成速率,而在L-Arg处理之前用针对MKP-1的反义寡核苷酸转染心肌细胞,蛋白合成速率明显增加,可取消L-Arg的抑制作用,甚至超过AngⅡ组;(3)L-Arg(100μmoL/L)明显增加MKP-1蛋白表达,比对照组增加225%,NOS抑制剂L-NAME及蛋白激酶dPKG)抑制剂KT-5823皆可抑制L-Arg诱导的MKP-1蛋白表达,分别抑制88%、83%,而A11gll能增加L-Arg诱导的MKP-1的表达,较对照组增加365%,增强了L-Arg的作用。以上结果表明,N0抑制AngⅡ介导心肌肥大反应的机制可能是通过激活PKG,促进MKP-1的表达,从而增加MAPK去磷酸化实现的。

关键词: 丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1, 蛋白激酶K, 心肌细胞, 肥大反应, 血管紧张素Ⅱ, 一氧化氮, 精氨酸

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2009年02月16日

【期刊论文】磷酸化的丝裂原活化蛋白激酶在大鼠睾丸的表达

许增禄, 钱晓菁, 常青, 许增禄*, 徐园园, 仇文颖

解剖学报,2008,39(2):214~218,-0001,():

摘要

目的 研究丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)的3个亚家族成员细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun N-端激酶(JNK)和p38 MAPK的活化形式在睾丸中的定位,了解MAPKs在生精过程中所起的作用。方法 免疫组织化学方法检测正常大鼠睾丸中磷酸化的p-ERK、JNK、p38MAPK的表达情况。结果 正常大鼠睾丸中p-ERK主要分布于精原细胞、细线前期到粗线期的初级精母细胞以及9~12期长形精子细胞的细胞核,p-JNK则主要位于支持细胞与支持细胞、支持细胞与生精细胞(尤其是19期精子细胞)之间,而p-p38 MAPK除了在生精小管的部分细胞胞质中有分布外,其表达最明显的部位是在间质细胞的细胞质。结论 ERK、JNK和p-38 MAPK分别定位于正常大鼠睾丸内的不同部位,提示MAPKs不同的亚家族成员分别在精子发生的不同环节中发挥主要作用。ERK可能参与生精细胞增殖、分化的信号转导,JNK则可能通过调节细胞的黏附而最终影响生精细胞的迁移与精子释放过程,而p38MAPK除了可能与JNK一起参与精子释放的调节外,最主要的作用可能是睾酮合成分泌的调节。

关键词: 睾丸, 丝裂原活化蛋白激酶 免疫组织化学, 大鼠

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2009年01月19日

【期刊论文】蛋白激酶C与K562/A02细胞多药耐药相关性的研究

陈宝安, 周云, 程坚, 董颖, 钱习军, 盛茗, 王婷, 高峰

白血病·淋巴瘤,2005,14(1):7~9,-0001,():

摘要

目的探讨蛋白激酶C(protein kirmse C,PKC)在K562/A02细胞多药耐药的产生及其逆转中的作用。方法用放射免疫法检测了耐药细胞株K562/A02及其敏感株K562的静息PKC活性水平,并观察了柔红霉素(daunomycin. DNR)以及耐药调节剂粉防己碱(tetrandrine. Tet)、屈洛昔芬(droloxifene,Dro1)单独或联合应用后细胞PKC活性的变化。结果静息状态下耐药细胞株K562/A02的PKC活性显著高于敏感株K562,有效调节浓度的Tet、Drol单独作用于K562、K562/A02细胞均可显著下调其PKC活性,联合应用有显著协同性。1g/mL DNR可显著下调K562细胞的PKC活性,部分下调K562/A02细胞的PKC活性,有效调节浓度的Tet、Drol单独或联合应用均可加强其作用。结论PKC参与K562/A02细胞多药耐药(nmlfidrug resistance. MDR)的形成,Tct、Drol逆转K562/A02细胞的MDR 可能与下调其PKC活性有关。

关键词: 蛋白激酶C, 多药耐药, 粉防己碱, 屈洛昔芬, 细胞系, K562

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2007年05月30日

【期刊论文】蛋白激酶与植物逆境信号传递途径

杨洪强, 梁小娥

植物生理学通讯第37卷第3期, 2001年6月,-0001,():

摘要

蛋白质的可逆磷酸化是细胞信号识别与转导的重要环节,蛋白激酶主要催化蛋白质的磷酸化作用。植物中已发现并分离了大量蛋白激酶及其基因,它们介导了植物激素和胞外环境信号等引起的多种生理生化反应。文章着重介绍分裂原激活蛋白激酶(MAPK) 、钙依赖而钙调素不依赖的蛋白激酶(CDPK) 、受体蛋白激酶(RPK) 、核糖体蛋白激酶和转录调控蛋白激酶等多种蛋白激酶在植物逆境信号识别与转导中的作用。

关键词: 蛋白激酶 环境胁迫, 信号转导

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2007年05月30日

【期刊论文】失水对苹果新根ABA 含量和蛋白激酶活性的影响

杨洪强, 贾文锁, 张大鹏

园艺学报 Acta Horticulturae Sinica 2000, 27 (2): 79-84,-0001,():

摘要

以2年生苹果砧木——平邑甜茶(Mulus henpenensis Rehd. ) 根系为试材,通过自然失水和PEG (聚乙二醇) 6000 处理,研究了失水过程中吸收根和延长根内源 ABA 和蛋白激酶活性的变化。结果表明,吸收根内源ABA 浓度及水分胁迫下ABA 积累量均高于延长根;失水过程中,延长根根系活力先升后降;蛋白激酶活性高峰在吸收根和延长根中均出现于 ABA 浓度快速增加之前,两种蛋白激酶抑制剂均抑制了水分胁迫下两类根中ABA 的积累。

关键词: 苹果, 根系, 水分胁迫, ABA, 蛋白激酶

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2009年08月07日

【期刊论文】共轭亚油酸抑制苯并(a)芘诱导小鼠前胃癌的研究

陈炳卿, 薛英本, 刘家仁, 郑玉梅, 刘瑞海

中华预防医学杂志,2001,35(3):163~166,-0001,():

摘要

目的 探讨不同构成的共轭亚油酸(CLA)对苯并(a)芘[B(a)P]诱导的小鼠前胃癌的抑制作用及可能机制。方法 用B(a)P 在昆明种小鼠体内建立前胃癌模型,观察不同构成的CLA 对小鼠前胃癌形成的抑制作用,同时采用蛋白印迹法分析小鼠前胃组织中的蛋白表达情况。结果 B(a)P组、75%纯度c9,t11-CLA 组、98%纯度c9,t11-CLA 组、98%纯度t10,c12-CLA 组的前胃肿瘤发生率分别为100.0%、75.0%、69.2%、53.8%;蛋白印迹法分析结果表明,CLA 抑制ERK-1 的表达,促进MKP-1 的表达,而对MEK-1 的表达无明显影响。结论 不同构成的CLA 对B(a)P 诱导小鼠前胃癌均具有抑制作用;CLA 影响MAPKs 级联反应ERKs 及此途径负调控子MKP-1 蛋白的表达可能是其抑制肿瘤作用的机制之一。

关键词: 亚油酸, 胃肿瘤, 有丝分裂原激活蛋白激酶类, 癌前状态

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2011年04月06日

【期刊论文】植物中丛枝菌根形成的信号途径研究进展

孙淑斌, 胡江, 徐国华*

植物学通报,2007,24(6):703~713,-0001,():

摘要

丛枝菌根(arbuscularmycorrhizal,AM)共生是丛枝菌根真菌与大多数陆地植物的根系之间形成的一种互利共生关系。植物给菌根真菌提供碳水化合物;作为回报,菌根真菌能够增强植物对矿质营养元素(尤其是磷)的吸收。菌根的形成过程是一系列信号交换和转导的结果,具有严格并且一致的顺序。本文以植物中菌根形成的信号途径为主线,对菌根真菌的形成过程和信号转导途径及其方式进行了分析和讨论。高等植物中菌根形成的信号途径与豆科植物的结瘤信号途径部分共享,并且与钙离子信号途径相关,但前者更为广泛。尽管该途径中很多过程目前还不十分清楚,但是相信在不久的将来就可以揭开菌根形成过程中的众多谜团。

关键词: 丛枝菌根,, 钙离子和钙调蛋白依赖蛋白激酶,, 结瘤,, 信号转导

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2007年05月24日

【期刊论文】电针胃经穴后胃溃疡大鼠胃黏膜细胞蛋白激酶C活性的变化

严洁, 杨宗保, 邹晓平, 易受乡, 常小荣, 林亚萍

中国临床康复2006-05-20出版第10卷第19期/Chinese Journal of Clinical Rehabilitation, May 20, 2006, Vol. 10, No. 19,-0001,():

摘要

目的:观察电针胃经(穴)对应激性胃溃疡大鼠胃黏膜细胞蛋白激酶C活性的影响。方法:实验于2005-07/12在湖南中医药大学针灸基础实验室完成。选择健康SD大鼠60只,随机数字表法分为5组,胃溃血清组(12只)、胃经血清组(12只,取穴;四白、梁门、足三里)和胆经血清组(12只,取穴:阳白、日月、阳陵泉)、胃经血清+PD153035组(12只)和胆经血清+PD153035组(12只)。采用水浸束缚法制作胃溃疡动物模型。电针刺激用G6805型电针仪,疏密波,电针频率疏波4Hz,密波20Hz,强度以肌肉或针柄微颤为度,电针时间30min。利用链酶蛋白酶消化法分离胃黏膜细胞,分别用表皮生长因子受体抑制剂PD153035和血清孵育胃黏膜细胞,应用同位素掺人法检测蛋白激酶C活性。结果:纳入动物60只,均进入结果分析。溃疡血清大鼠胃黏膜细蛋白激酶C有少量表达[(29.16±30.94)nkat/g];胃经血清组和胆经血清组大鼠胃黏膜细胞蛋白激酶C呈现较强上增性表达,其中胃经血清组大鼠上增性表达特别明显,两组相比差异有显著性意义[分别为(114.92±65.61),(36.47±27.54)nkat/g,P<0.01];胃经血清+PD153035组和胆经血清+PD153035组大鼠胃黏膜细胞蛋白激酶C可见微弱表达[分别为(17.39±23.39),(23.44±14.42)nkat/g],胃经血清组胃经血清+PD153035组比较差异有显著性意义(p<0.01)。结论:针刺能刺激大鼠胃黏膜细胞信号转导通路中蛋白激酶C的活化,并且存在经脉-脏腑的特异性联系。

关键词: 胃溃疡, 电针, 血清, 胃黏膜细胞, 蛋白激酶C

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2006年07月21日

【期刊论文】MEK抑制剂阻断小鼠脑缺血后ERK通路的激活和IL-1βmRNA合成*

陈衔城, 王知秋, 杨国源△, 周良辅

复旦学报(医学版),2004,31(2):119-123,-0001,():

摘要

目的;研究细胞外信号调节激酶(ERKs)在脑缺血中的作用以及U0126对缺血脑组织保护作用的机制。方法:线栓法制作小鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,颈内静脉注射U0126;Western blot法和免疫组化法检测pMEK、pERKl/2和pElk-1;核糖核酸酶保护测定法检测IL-1βmRNA含量。结果:注射U0126后的MCAO小鼠pMEK活性降低,其降低幅度与U0126有剂量依赖的关系,并在缺血前给药有效;U0126注射后pERKl/2和pElk-1也表现出相似的下降变化。小鼠MCAO后1到2h IL-1βmRNA水平上升;而注射U0126后IL-1βmRNA在MCAO后1至4h内下降。结论:ERK在小鼠脑缺血中发挥重要作用。静脉注射MEK抑制剂U0126可阻断脑缺血引起的pMEK、pERKI/2和pElk-1的活性增加。U0126通过阻断ERK通路进而降低IL-1βmRNA而对缺血脑组织产生保护作用。

关键词: 脑, 缺血, 脑血流, 丝裂原活化蛋白激酶 U0126, 炎症反应, IL-1, 小鼠

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2006年11月02日

【期刊论文】蛋白激酶Cα 在小鼠胚胎干细胞定向分化中对发育基因表达的调控作用

葛坚, 高前应, 王智崇, 陈慧怡, 黄丹平, 袁钊辉

中华眼科杂志,2005,41(2):123~127,-0001,():

摘要

目的探讨蛋白激酶Cα(PKCα)对小鼠胚胎干细胞(ESCs)定向诱导分化中发育基因(pax26、slit22、netrin21)表达的影响。方法ES2BALB/c细胞株用无白血病抑制因子(mLIF)的ESCs培养液培养4d,形成胚胎体(EBs),再分别种植于预置有盖玻片的6孔板和直径100mm的培养皿,经5×10-7mol/L视黄酸(RA)诱导后,用神经细胞特异性抗原NSE和NF2200来鉴定分化细胞的类型,在诱导后1、3、5、7及14d用逆转录聚合酶链反应(RT2PCR)方法测定细胞的PKCα和发育基因的mRNA表达情况,并观察了PKC激活剂佛波酯(PMA)和PKC抑制剂D2鞘氨醇对它们表达的影响。结果 免疫组化发现在诱导后第3d大多数细胞NSE和NF2200染色阳性,RT2PCR证实诱导后1dPKCα、pax26和netrin21的mRNA表达急剧下降,3~7d逐渐升高,至14d恢复至正常水平,而slit22在诱导前后均无明显表达。PMA可使PKCα、pax26、netrin21的mRNA水平在诱导后细胞中的表达明显增强,而D2鞘氨醇的作用相反,使它们的表达显著降低,而对slit22无明显影响。结论发育基因pax26和netrin21在ESCs定向分化为神经样细胞中有重要的调控作用,可能是通过PKCα信号通路起作用。

关键词: 胚胎;  干细胞;  蛋白激酶C;  细胞分化;  基因表达调控, 发育期;  小鼠

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2006年07月24日

【期刊论文】肾上腺髓质素对内皮素促家兔气道平滑肌细胞增殖的抑制作用

赵鸣武, 方秋红, 刘秀华*, 唐朝枢*

基础医学与临床,1997,17(4):64~67,-0001,():

摘要

在体外培养的家兔气道平滑肌细胞(ASMC)上, 观察肾上腺髓质素(AM)对内皮素(ET)促A SMC 增殖的影响及丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)活性的变化。以探讨AM对ASMC增殖的调控。结果显示10-8mol/L ET-1显著刺激ASMC3H-TdR参入及MAPK激活(P<0.01)。AM(13-52)呈剂量依赖地抑制ET-1的上述作用(P<0.05, P<0.01)。单独应用AM(13-52)对ASMC3H-TdR参入及MAPK活性无明显影响。表明AM(13-52)可抑制ASMC对ET-1的增殖反应, 其机理可能涉及MAPK活性的抑制。

关键词: 肾上腺髓质素, 内皮素, 气道平滑肌细胞, 增殖, 丝裂素活化蛋白激酶

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2006年10月27日

【期刊论文】DAPK1基因开放读码序列的克隆、序列分析及诱导Raji细胞凋亡*

朱振宇, 张海涛, 朱振宇△, 吉琼梅, 李秀英, 李民友, 马涧泉, 梁念慈

中国病理生理杂志,2004,20(1):88~93,-0001,():

摘要

目的:探讨死亡相关蛋白激酶(DAPK1)在肿瘤的形成、转移中所起作用,克隆DAPK1基因的开放读码序列(ORF)。方法:根据GenBank提供的核苷酸序列,自行设计引物,用RT-PCR从K562细胞中扩增DAPK1基因的ORF;用质脂体将pcDNA311(+)-DAPK1转染到Raji细胞,Hoechst33258染色观察细胞凋亡,MTT法观察DAPK1基因对细胞生存的影响。结果:DAPK1基因的ORF克隆到质粒pMD18-T,测序鉴定;分析结果显示,从K562细胞成功扩增4300bp的DAPK1基因ORF有7处突变,其中6处是同义突变,1处是基因的单链核苷酸多态性;DAPK1基因的ORF克隆到真核表达载体pcDNA311(+),转化到Raji细胞;转染48h后,可以检测到DAPK1的表达,并可以观察到细胞发生凋亡。结论:大片段的基因可以采用RT-PCR法直接克隆,采用常规的转染技术可以将大片段基因转染到宿主细胞;成功克隆具有活性功能DAPK1基因ORF,过表达的DAPK1基因可以诱导Raji细胞凋亡。

关键词: 死亡相关蛋白激酶 细胞凋亡, 甲基化, Raji细胞, K562细胞

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2006年10月27日

【期刊论文】DAPKl基因转染对高转移性肺癌细胞PGCI3的基础影响

朱振宇, 张海涛, 冯哲玲, 李秀英, 李民友, 马涧泉, 梁念慈

《癌症》,2004,23(5):497~501,-0001,():

摘要

背景与目的:死亡相关蛋白激酶DAPKl失活是影响非小细胞肺癌患者生存的独立因子,过表达的DAPKl可以诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤转移,但抑制转移的机制尚未完全清楚。本文探讨DAPKl基因抑制高转移性肺癌PGCl3细胞生长及转移的可能机制。方法:利用基因重组技术构建含DAPKl基因开放读码框(ORF)的真核表达载体pcDNA3.1-DAPKl,用脂质体LipofectAMINE2000介导转染PGcL3细胞系。检测转染后PGCL3细胞的生长曲线、体外软琼脂克隆形成率、体外侵袭、运动和粘附能力的变化。同时检测了胶原酶活性,p53,bcl-2基因表达的变化。结果:转染DAPKl基因的细胞生长比空白组及pcDNA3.1转染组减缓;体外软琼脂克隆形成率下降P<0.05;pcrDNA3.1-DAPKl转染组体外侵袭能力是空白组的68.5%。而pcDNA3.1转染组是空白组的88.0%;pcDNA3.1-DAPKl转染组运动能力是空白组的87.3%。pcDNA3.1转染组是空白组的95.7%;pcDNA3.1-DAPKl转染组粘附能力是空白组的62.7%。pcDNA3.1转染组是空白组的91.2%;各组的胶原酶变化不明显;pcDNA3.1-DAPKl转染组p53基因表达升高。bcl-2基因下调。结论:DAPKl基因的过表达可以在-定程度上逆转PGCl3细胞的恶性表型。使PGCl3细胞生长受抑制。体外侵袭、运动和粘附能力下降。p53基因表达的上调及bcl-2基因表达下调。这些变化是DAPKl抑制非小细胞肺癌转移的可能原因。

关键词: 死亡相关蛋白激酶 肿瘤转移, 非小细胞肺癌

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2005年11月16日

【期刊论文】糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶Cα亚型蛋白表达和转录水平的变化

马骥, ZHANG Li, MA Ji, CU Yong, et al

中华肾脏病杂志,2002,18(4):291~294,-0001,():

摘要

研究糖尿病大鼠肾肘蛋白激酶(PK)Cα亚型蛋白表达和mRNA水平均的变化。方法SD大鼠随机分为正常对照和糖尿病组,成模5周后分别采用PAS染色、免疫组化、PT-PCR、Westem blot方法检测单个肾小球面积,肾皮质PKCα的定位和定量以及PKCαmRNA的水平。结果同正常相比,糖尿病组大鼠单个肾小球面积增加,但细胞数并无明显变化;肾皮质PKCα的表达明显增强,并且有自胞浆向胞膜的转位;而肾质中PKCαmRNA的表达也增加了1.67倍。结论早期糖尿病大鼠肾脏中PKCα亚型表达和转录水平上调,提示PKCα可能与糖尿病肾病的发展有关。

关键词: 糖尿病肾病, 蛋白激酶G, 同菌酶

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2005年11月09日

【期刊论文】中药补肾益气活血作用对生长受限胎鼠脑及肝细胞外信号调节激酶-1与丝裂素活化蛋白激酶磷酸酶-1表达的影响

黄光英, WU Yunxia*, HUANG Guangying, LI Jing.

中华妇产科杂志,2002,37(11):672~675,-0001,():

摘要

目的 在地探讨补肾益气活血方剂对生长受限胎鼠脑及肝细胞外信号调节激酶-1(ERK-1)和丝裂素活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)表达的影响。方法 采用被动吸烟法建立孕鼠的生长受限模型,对48只孕鼠随机分成生长受限组(12只)、精氨酸治疗组(12只)、补肾益气活血方剂(简称中药)中药治疗组(12只),另选12只正常孕鼠组成正常组。运用Western2blot方法,分别检测各组孕鼠所生产胎鼠的脑组织及肝组织内ERK-1和MKP-1的表达。结果 (1)脑组织:生长受限组、精氨酸治疗组、中药治疗组和正常组ERK-1的表达分别为7.63±0.22、10.03±0.41、11.03±0.30、11.44±0.09;MKP-1的表达分别为7.41±0.38、10.35±0.60、10.60±0.14、11.60±0.62。(2)肝组织:生长受限组、精氨酸治疗组、中药治疗组和正常组ERK21的表达分别为4.73±0.54、5.83±0.17、11.37±0.12、12.34±0.14;MKP-1的表达分别为9.07±0.61、10.66±0.08、14.27±0.73、14.92±0.17。(3)在肝组织和脑组织中,生长受限组ERK-1和MKP-1的表达较正常组明显降低(P<0.01),中药治疗组较生长受限组明显升高(P<0.01),且接近于正常组的表达水平(P>0.05)。脑组织ERK-1的表达,中药治疗组较精氨酸治疗组明显升高(P<0.05);MKP-1的表达,两组比较,差异无显著性(P>0.05),肝组织ERK-1和MKP-1的表达中药治疗组较精氨酸治疗组都明显升高(P<0.01)。结论 补肾益气活血方剂通过影响ERK-1和MKP-1的表达,可引起生长相关基因表达增强和凋亡抑制,这可能是该方剂防治胎鼠生长受限的机制之一,且其作用优于精氨酸。

关键词: 胎儿生长迟缓, 补肾, 益气活血, 有丝分裂素激活蛋白激酶类, 蛋白质酪氨酸磷酸酶, 即早蛋白质类

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