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2009年11月01日

【期刊论文】肺癌转移相关蛋白的比较蛋白质组分析与鉴定*

邱宗荫, 蒋代凤, ), 应万涛), 万晶宏), 邱宗荫), 钱小红), 贺福初)

生物化学与生物物理进展,2003,30(4):586~593,-0001,():

摘要

采用比较蛋白质组技术对肺巨细胞癌高、低转移株的蛋白质表达谱进行双向电泳分离和MALDI-TOF分析,并在蛋白质和mRNA水平进行进一步验证,成功鉴定了11个肺癌转移相关蛋白。其中,候选蛋白膜联蛋白1(ANXI)、细胞骨架蛋白(CK18)、Rho-GDP解离抑制剂1(GDIR)、原肌球蛋白3(TPMF)、蛋白谷氨酰胺γ-谷氨酰转移酶(TCJLC)和白介素18(IL-18)在肺巨细胞癌高转移株显著高表达,而候选蛋白核氯离子通道蛋白1(CLIl)、蛋白质二硫键异构酶(ER60)、肌酸激酶、硫氧还蛋白过氧化物酶1(PDXI)和热休克蛋白60(CH60)在肺巨细胞癌高转移株显著低表达.大多数的候选蛋白可通过调控肿瘤细胞的生长、迁移、粘附、凋亡和肿瘤免疫等环节来影响肿瘤细胞的侵袭和转移能力。迄今为止,还未见候选蛋白CLII和IL-18与肺癌转移相关的报道,提示这两种蛋白质可能为新的肺癌转移相关蛋白。

关键词: 肺癌,, 转移,, 蛋白质组,, 核氯离子通道蛋白1,, 白介素18

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2009年11月01日

【期刊论文】肝癌细胞亚细胞组分的双向凝胶电泳分析

邱宗荫, 李兴, 潘卫, 邱峰, 田昆仑

中华肝脏病杂志,2005,13(4):271~273,-0001,():

摘要

目的建立超速离心方法分离亚细胞组分的技术路线,以提高肝癌细胞蛋白质组的双向凝胶电泳分离效率。方法体外培养的肝癌细胞QGY-7703匀浆破碎后,经差速离心分离成细胞核、20000×g沉淀,100000×P沉淀和细胞浆4个亚细胞组分,分别进行双向凝胶电泳,然后用Image Master软件分析电泳图谱。结果亚细胞组分分离后,电泳分辨率明显提高,特别是细胞核和细胞浆蛋白质的检出效率得到很大提高。不同亚细胞蛋白质组电泳图谱的差异显示了其蛋白质组构成的不同。结论超速离心是一种有效的亚细胞组分分离手段,蛋白质组技术与超速离心技术的结合能克服全细胞双向凝胶电泳的一些缺陷,并可将蛋白质组研究引向亚细胞水平。

关键词: 癌,, 肝细胞, 蛋白质组,, 亚细胞部分,, 电泳,, 凝胶,, 双向

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2009年09月12日

【期刊论文】激素型肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组与能量代谢相关性

沃兴德, 卢德赵, 施孟如, 李毅, 唐利华

中国生物化学与分子生物学报,2005,21(6):807~814,-0001,():

摘要

应用凝胶内差异显示电泳技术研究肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组,并从肝线粒体蛋白质组角度阐述肾阳虚与能量代谢的关系.8个分别来自于肾阳虚大鼠和正常大鼠的肝线粒体蛋白质样品(各4个)分别用荧光染料Cy3、Cy5标记,以及8个样品等量混合物用Cy2标记作为内标,每-Cy3、Cv5标记样品与Cy2标记的内标等量混合后在同一胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱.经DeCyder软件结合内标分析,以肾阳虚组动物与正常组动物肝线粒体蛋白质相差1.2倍以上的蛋白作为差异蛋白,实验共获得16个差异蛋白质,经质谱测定和与蛋白质文库比对,鉴定11个蛋白质,其中,肾阳虚动物热休克蛋白60和70、肌氨酸脱氢酶、氨甲酰磷酸合成酶、亚硫酸盐氧化酶、ATP合酶、醛脱氢酶和NADH脱氢酶表达量增加,而丙酮酸脱氢酶、a-酮戊二酸脱氢酶、脂酰辅酶A脱氢酶和鸟氨酸氨基转移酶表达量降低,实验表明,肾阳虚动物能量代谢相关酶的变化与肾阳虚的临床虚寒症状有关.

关键词: 蛋白质组,, 肾阳虚,, 肝线粒体,, 能量代谢

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2005年08月09日

【期刊论文】吲哚美辛抗人结肠癌HCT116细胞双向电泳蛋白质表达谱的差异分析

张桂英, 程艳丽, 张桂英*, 肖志强

,-0001,():

摘要

目的 分析吲哚美辛(Indomethacin,IN)对人结肠癌细胞系HCT116蛋白质表达谱的影响,为研究IN抗结肠癌作用的相关蛋白提供新的方法。方法 应用固相pH梯度(Immobilized pH gradient,IPG)双向凝胶电泳技术(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)分离IN-处理组和未处理组HCT116细胞的总蛋白,银染显色,ImageMaster 2D图像分析软件比较分析IN-处理组和未处理组HCT116细胞系的双向凝胶电泳图谱并识别差异表达的蛋白质。结果 获得了背景清晰、分辨率高、重复性好的HCT116细胞系的双向凝胶电泳图谱,IN-未处理组与处理组蛋白质点数为:1256±50,1169±36;匹配率为:93.0%,90.6%。IN-未处理组的3块胶在蛋白质点位置上有较好的重复性,不同胶间蛋白质点在等电聚焦(Isoelectric focusing,IEF)方向的偏差是0.896±0.177mm,在十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodiumdo-decylsufate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)方向的偏差为1.106±0.289mm。比较分析IN-处理组和未处理组HCT116细胞的双向凝胶电泳图谱,发现IN-处理组和未处理组共有45个差异点,IN-处理组有9个蛋白质点表达上调,34个蛋白质点表达下调,2个蛋白质点仅在IN-未处理组表达。结论 首次建立了IN-处理和未处理HCT116细胞的双向凝胶电泳图谱,识别了45个差异表达的蛋白质点,对这些差异蛋白质点的鉴定将为揭示IN抗结肠癌作用的机理提供实验依据。

关键词: 双向凝胶电泳,, 吲哚美辛,, 蛋白质组,, 结肠癌

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