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2011年02月14日

【期刊论文】脂肪间质干细胞研究进展*

李玉谷, 马勇江**李玉谷, 窦忠英

中国生物工程杂志,2006,26(5):89~92,-0001,():

摘要

脂肪间质干细胞,是脂肪组织中一类多能性干细胞。在体内、体外条件下,可诱导分化形成脂肪、骨、软骨、肌肉等组织类型细胞。人体脂肪组织十分丰富,用其分离脂肪间质干细胞可避免分离胚胎干细胞所面临的道德伦理问题和获取极少量骨髓分离骨髓间质干细胞时给供者带来极大痛苦等。因此脂肪间质干细胞可作为组织再生工程的干细胞理想的替代资源。重点论述脂肪间质干细胞的研究进展,并探讨其临床应用前景。

关键词: 脂肪组织, 间质干细胞 组织工程

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2009年04月28日

【期刊论文】腺病毒介导CTLA4Ig基因修饰骨髓间质干细胞体外抑制免疫应答的研究*

邓宇斌, 郭小荑, 梁海翔, 原清涛

中国病理生理杂志,2004,20(3):300~305,-0001,():

摘要

目的:通过腺病毒载体介导CTLA4Ig在大鼠骨髓间质干细胞(MSC)中的表达,探讨MSC作为基因转移靶细胞的可行性和转染效率,研究其在体外对免疫应答的抑制作用。方法:构建含有CTL4Ig基因的重组腺病毒载体pad-CTLA4Ig,按照不同的感染倍率(MOI)转染大鼠MSC,用荧光显微镜和流式细胞仪分析转染效率,流式细胞术、Westernblotang等方法检测目的蛋白CTLA4Ig在MSC中的表达。将转基因MSC加入混合淋巴细胞反应(MLR)体系,观察其抑制淋巴细胞增殖的生物学效应。结果:重组腺病毒载体pAd-CTLA4Ig对MSC的最大转染率为80.7%±4.7%,转基因MSC可检测到目的蛋白的表达。基因修饰的MSC能有效抑制MLR体系中淋巴细胞的增殖,4d达到最大抑制效率51.46%;再次MLR证实这种抑制作用是供者特异性的。结论:MSC是一种较理想的基因转移靶细胞,其表达的转基因产物CTLA4Ig可在体外特异性地抑制免疫应答。

关键词: 基因, CTLA4Ig, 腺病毒载体, 间质干细胞 免疫应答

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2009年04月23日

【期刊论文】骨髓间质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞的实验研究*

伍卫, 韦育林, 王景峰, 傅玉如, 魏菁, 邓义军

,-0001,():

摘要

目的:体外培养并诱导大鼠骨髓间质干细胞(ABCD)分化为心肌细胞。方法:采用密度梯度离心法和贴壁培养法分离、纯化大鼠骨髓ABCD,在第3代细胞以5-氮杂胞苷进行诱导,用免疫细胞化学和RT-PCR方法对诱导细胞进行鉴定。结果:诱导后细胞体积较诱导前增大,而且更加细长,呈长梭形。14d后细胞之间出现连接,排列方向渐趋一致。免疫细胞化学染色显示诱导后部分细胞结蛋白(G.D139)、横纹肌肌动蛋白(α-sarcomeric actin)和心肌特异性肌钙蛋白(troponin I)呈阳性反应。PT-PCR结果表明诱导细胞有心肌β肌球蛋白重链表达。结论:5-氮杂胞苷能在体外诱导ASCs向心肌细胞分化。

关键词: 骨髓, 间质干细胞 阿扎胞苷, 心肌细胞

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2006年11月17日

【期刊论文】张应力对骨髓间充质干细胞骨向分化来源成骨细胞ICAM-1基因表达的影响*

赵志河, 江凌勇, 王军Δ, 樊瑜波

四川大学学报(医学报)2006,37(3):438~441,-0001,():

摘要

目的探讨正畸牙移动骨改建过程中成骨细胞调控破骨细胞分化成熟的机制。方法分离培养大鼠股骨骨髓间充质干细胞来源的成骨细胞,采用膜式动态张应力加载体系进行体外细胞加力,RT-PCR技术检测不同强度、不同性质、不同作用时间张应力对成骨细胞ICAM-1mRNA表达的影响。结果张应力刺激对成骨细胞ICAM-1mRNA的表达有明显抑制作用,强度越大抑制作用越强,(依次为静、动态5kPa组,静、动态3kPa组,静态1kPa组,对照组);静态张应力抑制效应明显弱于动态张应力(静态3kPa、5kPa组分别弱于动态3kPa、5kPa组);ICAM-1mRNA的表达在动态张应力作用后3h即显著降低,12h最低(降至未加力时的23%),后有所回升但仍维持在一较低水平,具有时效性。结论机械张应力刺激通过抑制成骨细胞ICAM-1mRNA的表达限制破骨细胞的分化成熟。

关键词: 张应力, 骨髓间质干细胞 成骨细胞, ICAM-1 RT-PCR

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2006年01月11日

【期刊论文】人脐血间充质干细胞对脐血CD34+细胞体外扩增作用的研究

黄绍良, ZHOU Dun-hua, HUANG Shao-liang, ZHANG Xu-chao, WEI Jing, WU Yan-feng, HUANG De, LI Yang, FANG Jian-pei

中华儿科杂志,2005,43(7):194-498,-0001,():

摘要

目的 折探讨含人脐血来源的间充质干细胞(MSCs)体系在体外对脐血造血干细胞(HSCs)扩增作用。方法 (1)用含人脐血MSCs及不同造造血生长因子(HGFs)组合的无血清扩增体系对人脐血CD34+细胞进行体外扩增。(2)于扩增前及增后笫6、12天分别用双色流式细胞仪动态检测HSCs表面抗原标记:CD34+、CD34+、CD38-、CD34+CD3+、CD34+CD19+、CD34+CD33+和CD34+CD41a+细胞的含量。(3)按本实验室方法行体外半固体培养,观察扩增前后脐血细胞粒-单核细胞集落形成单位(CFU-GM)、爆式红系集落形成单位(BFU-E)、混合集落形成单位(CFU-Mix)及高增殖集落形成单位(CFU-HPP)集落形成情况。结果 (1)含人脐血MSCs体系对脐血CD34+;CD38-细胞的扩增倍数在笫6天和第12天分别为159和437倍。该亚群百分比在单纯因子组增第12天时为1.98%,而在含脐血MSCs组为9.98%,明显高增前。(2)集落培养表明,含脐血MSCs组增第12天与增第6天相比,其CFU-Mix和CFU-HPP的扩增倍数增加,而单纯因子组这两种集落的增数下降。(3)随增天数的增加,两组相比,含脐血MSCs组差异更显著。结论 (1)含脐血MSCs体系不仅能扩增更原始的造血干/祖细胞(HSPC),且具有在短期内(12d)保持HSCs不耗竭。(2)含脐血MSCs体系对脐血CD34+细胞向定向祖细胞的扩增,主要为髓系及巨核系祖细胞,而对其向淋巴系祖细胞的扩增具有抑制作用。

关键词: 间质干细胞 细胞,, 培养的, 抗原,, SD34+, ,, 流式细胞术, 胎血

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2005年07月20日

【期刊论文】钛颗粒负荷对切应力作用下骨髓间质干细胞F-actin表达和DNA含量的影响3

陈槐卿, 吴江, △, 曹慧, 周江, 张立, K-L Pau, Sung

生物医学工程学杂志,21(1):1~7,-0001,():

摘要

假体磨损碎屑颗粒是引起假体-骨界面无菌性炎症和骨溶解而致全关节置换术失败的主要原因之一。磨屑颗粒所诱发的骨溶解须有周围骨组织中成骨细胞分泌足够的骨基质以弥补丢失的骨量,而成骨细胞正常的数量和质量有赖于其来源骨髓祖细胞-骨髓间质干细胞的正常增殖分化能力的维持。为了探讨磨屑钛颗粒对大鼠骨髓间质干细胞(RatM SCs, rM SCs)产生细胞毒性的可能细胞分子机制,选用健康3月龄SD雄性大鼠,采用Perco ll等密度梯度离心法分离获取rM SCs,经体外传代纯化培养后,与不同直径、不同负荷浓度、不同负荷作用时间的钛颗粒悬液共孵育,再采用精准的流室系统对钛颗粒负荷的rM SCs 施加一定的流体剪切应力(Fluid shear stress, FSS)后立刻固定细胞,经免疫荧光抗体染色,结合激光共聚焦显微镜技术和图像分析软件定性定量分析rM SCs F2act in 表达和DNA 含量的变化情况。同时设置相应的未经钛颗粒孵育的rM SCs 细胞为对照组细胞。结果显示,切应力作用可上调rM SCs 胞内F2act in 的表达。亚微(Subm icron)直径(0.9Lm)的钛颗粒负荷对rM SCs F2act in 表达和DNA 含量的抑制作用最为显著,并伴有凋亡小体出现;直径为2.7Lm 的钛颗粒负荷产生的抑制作用略为减弱,而较大直径(6. 9Lm)的抑制效应最弱。相同条件下,钛颗粒负荷对F2act in 的抑制效应有一定的时间和浓度依赖性:以0.1wt% 浓度对F2act in 表达和DNA 含量的抑制效应最为明显,亦有凋亡小体的出现;随着浓度的降低,抑制作用亦减弱,以0.01wt% 浓度最弱;随着作用时间的延长,F2act in 表达和DNA 含量逐渐降低,至实验中的32 h 达到最低值。提示:磨屑颗粒对rM SCs 活力的抑制作用是假体无菌性松动的可能分子机制,对其具体细胞分子机制进行深入研究,必将有助于有效防治假体松动药物的研发应用以及人工关节材料的优化设计,从而为全关节置换术患者真正带来福音。

关键词: 钛颗粒, 骨髓间质干细胞 流体剪切应力, 激光共聚焦显微镜, 无菌性松动

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2010年12月19日

【期刊论文】血液病患者骨髓间充质干细胞的增殖分化特点*

茹永新, 冯敏, 夏永辉, 崔雯, 林永敏, 杨晴英, 茹永新△

天津医药,2009,37(3):167~169,-0001,():

摘要

研究血液病患者骨髓间充质干细胞(MSC)的体外增殖分化特点。方法:用H4434 甲基纤维素半固体培养基培养168 例血液病患者骨髓单个核细胞14 d,分析贴壁梭形细胞形态和生长等级特点;CD29、CD44、α-SMA、α-醋酸奈酚酯酶和碱性磷酸酶组化染色鉴定MSC 特性和分化特点。结果:所有患者贴壁细胞为梭形,核圆或椭圆形,瑞氏染色胞浆淡蓝,核为紫红色;α-醋酸奈酚酯酶染色阳性。所有患者贴壁细胞的CD29 和CD44 阳性率在90%~95%之间,碱性磷酸酶和α-SMA 阳性率分别为25%和30%。再生障碍性贫血、急性白血病、骨髓异常增生综合征和骨髓增殖性疾病4组患者贴壁细胞生长等级不同,再生障碍性贫血组分别高于其他3组(P<0.05)。结论:血液病患者MSC 非诱导体外培养广泛表达骨和肌型细胞标志;再生障碍性贫血患者MSC 生长等级显著高于急性白血病、骨髓异常增生综合征和骨髓增殖性疾病。

关键词: 血液病 间质干细胞 骨髓细胞 细胞,, 培养的 细胞分化 细胞增殖

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