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谢克勤, Qing-Shan Wang a, , Li-Yan Hou b, c, Cui-Li Zhang a, Xiu-Lan Zhao a, Su-Fang Yu a, Ke-Qin Xie a, *
Toxicology and Applied Pharmacology 232(2008)60-68,-0001,():
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冉丕鑫, 彭公永#, 何志义, 刘启才, 李冰, 钟南山, 冉丕鑫△
Chinese Journal of Pathophysiology 2004, 20(9): 1597-1600,-0001,():
目的:探讨尾加压素11(urotermin 11,U一11)对兔肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的作用及机理。方法: 采用植块法培养家兔PASMCs,以MTI"测定和[ H]一胸腺嘧啶核苷([H]一TaR)掺入法观察u一Ⅱ对PASMCs增殖的 影响,加入不同浓度的几种细胞内信号转导阻断剂,观察对U一Ⅱ效应的影响。结果:U一Ⅱ(10-mol/L-10。 moL/L)浓度依赖地促进PASMCs的A值增加及[ H]一TdR掺入,以10-moVL U-Ⅱ的作用最明显,A值和[H]一 TdR掺入量分别较对照组高42.9%和68.5%(P<0.05)。101。mol/L U一Ⅱ对PASMCs增殖无作用。尼卡地平、W7、 I-I7、PD,m在一定浓度范围内(10~mol/L一10I5ol/L)均可以浓度依赖地抑制U一Ⅱ诱导的PASMCs的A值增加及 [sH]一TdR掺入增加。在浓度为10I5 mol/L时,其抑制作用最明显,A值的抑制率分别为42.3% 、19.6% 、23.2% 和10.5%(P<0.05),[H]一TdR掺入量的抑制率分别为46.6%、9.8%、21.7%和14.7%(P<0.05)。结论:U一Ⅱ具有较强的促PASMCs增殖的作用,其诱导PASMCs增殖是通过 、CaM、PKC、MAPK来介导的。
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【期刊论文】细胞信号转导介导与日本血吸虫特异性Th1/Th2免疫偏移
夏超明, 龚唯, 骆伟, 周卫芳, 李允鹤, 查锡良, 熊思东
上海免疫学杂志,2002,22(1):19~22,-0001,():
分别于小鼠感染日本血吸虫后0、4、6、8 和12周,取脾淋巴细胞体外培养,进行细胞信号转导抑制试验,观察酪氨酸蛋白激酶(TPK)、蛋白激酶C(PKC)和磷酯酰肌醇-3-激酶(PI3-K)特异性抑制剂(Tyrphostin-25、D-sphingosine 和Wortmannin)分别特异性抑制和不同组合抑制TPK、PKC 和PI-3K后,对小鼠脾淋巴细胞经虫卵可溶性抗原(SEA)诱生IL-2、IFN-γ和IL-4 的表达水平及对Th1/Th2免疫偏移的影响。结果发现Tyrphostin-25 对IL-2、IFN-γ和IL-4 水平的抑制作用均非常显著P<0.01),D-sphingosine主要影响IL-4的表达(P<0-01),而Wortmannin 则主要影响IFN-γ的表达(P<0-01),Tyrphostin-25和Wortmannin 联合应用可完全阻断IL-2 的表达及增强对IFN-γ的抑制作用,Tyrphostin-25 和D-sphingosine 联合应用可完全阻断IL-4 的表达。对反映Th1/Th2 免疫平衡的Th2 分化指数分析表明,D-sphingosine 可使Th2 免疫应答优势减弱,而Wortmannin 则可使Th2免疫应答优势增强。研究结果表明,干预细胞信号转导可调节日本血吸虫特异性Th1/Th2 细胞因子表达水平及Th1/Th2 免疫偏移,为探索控制日本血吸虫卵肉芽肿病变的潜在新途径,提供了实验依据。
关键词: 日本血吸虫, Th1/, Th2细胞因子, 酪氨酸蛋白激酶(, TPK), , 蛋白激酶C(, PKC), , 磷酯酰肌醇-3-激酶(, PI3-K),
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【期刊论文】蛋白激酶Cγ和蛋白磷酸酯酶Aα在慢性复合应激性学习记忆增强大鼠海马中表达的变化
刘能保, 李辉, 刘少纯, 程少容, 孙臣友, 张敏海, 汪薇曦, 刘能保*
中国组织化学与细胞化学杂志,2004,13(2)158~163,-0001,():
目的探讨蛋白激酶Cγ(PKCγ)和蛋白磷酸酯酶Aα(PP2B2Aα)在慢性复合应激性学习记忆增强大鼠海马中的表达及其意义。方法 将成年雄性Wistar大鼠随机分为应激组和对照组,对应激组实行慢性复合应激42d后,用Morris水迷宫,Y2迷宫对2组大鼠进行学习和记忆能力测试,然后用免疫组织化学方法,观察2组大鼠PKCγ和PP2B2Aα的表达,并用计算机图像分析系统对免疫阳性反应结果进行处理。结果应激组比对照组学习记忆能力明显增强;在海马CA3区PKCγ的免疫反应阳性明显增强;PP2B2Aα在海马CA1和CA3区的免疫反应阳性明显减弱。结论 海马内PKCγ和PP2B2Aα表达的变化可能参与了慢性复合应激致大鼠学习记忆增强的机制。
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李俊发, Chenchen Niu, Junfa Li*, Xiuyu Cui, Song Han, Penyu Zu, Hua Li, Qunyuan Xu*
,-0001,():
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关键词: cPKC isoforms, Hypoxic preconditioning, Membrane translocation, Protein expression, Brain
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李俊发, 韩松, 祖鹏宇, 杨彩莲, 李洪燕, 吕国蔚
基础医学与临床,2003,23(4):399~402,-0001,():
初步探讨蛋白激酶C(PKC)在脑低氧预适应发生机制中的作用,以我室建立的小鼠低氧预适应模型,结合SDS2聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS2PAGE)、蛋白印迹(Western bolt)等生化技术,观察了低氧预适应对小鼠大脑皮层及海马组织内PKC膜转位的影响。结果表明,1在小鼠大脑皮层和海马组织内的PKC膜转位均随着低氧次数(小鼠低氧耐受时间) 的增加而增高。特别是低氧3次的海马组织和低氧4次的大脑皮层和海马组织内,PKC膜转位的增加有统计学显著意义。结果提示,PKC的激活可能在脑低氧预适应发生机制中具有重要的作用。
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【期刊论文】重复性低氧对小鼠脑内cPKCα和γ膜转位及蛋白表达量的影响
李俊发, 牛晨晨, 李俊发*, 徐群渊
基础医学与临床,2005,25(1):30~34,-0001,():
探讨cPKCs特定亚型在脑低氧预适应形成过程中的作用,借助已建立的小鼠整体低氧预适应模型,应用SDS-PAGE和Western bolt等生化技术,并结合Gel Doc成像系统,半定量检测脑组织内cPKCα和γ的膜转位水平和蛋白表达量。结果发现,随低氧暴露次数(低氧2-4次)增加,在小鼠海马和皮层组织内cPKCγ膜转位水平增高显著(p<0.05,n=6);然而,cPKCα的膜转位水平和cPKCα及γ的蛋白表达量的变化均不显著。提示,cPKCγ的激活可能参与了脑低氧预适应的形成过程。
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李俊发, 曲彦明, , 张晓东
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL ANATOMY, 2004, 22 (3): 290~293,-0001,():
目的:通过观察低氧刺激对培养SY5Y神经母细胞瘤细胞内nPKCε和nPKCθ膜转位激活的影响,以探讨两者是否参与细胞低氧预适应的发生。方法:利用本室建立的体外培养SY5Y细胞低氧刺激模型,并应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白印记(Western-Blot)等方法,半定量分析SY5Y细胞内nPKCε、nPKCθ的膜转位水平。结果:SY5Y细胞经低氧刺激后,随刺激时间(0.5、2、4、6、8、12和24h)的延长,nPKCε在胞浆内的含量逐渐减少,而胞膜成分中的含量则明显增加,且于低氧刺激2h后的增高水平具有统计学显著意义(P<0.001);然而nPKCθ在正常情况下只存在于胞膜成分内,且其含量不随低氧刺激时间的增加而改变(P>0.01)结论:nPKCε可能参与了细胞低氧耐受的发生。
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【期刊论文】低氧预适应增高小鼠脑组织的cPKCγ的膜转位水平
李俊发, 崔秀玉, 李俊发*, 祖鹏宇
生物学报,2004,56(4):461~465,-0001,():
本实验拟通过观察重复性低氧对经典型蛋白激本酶C(Cpkc)膜转位水平激活程度的影响。初步探讨cPKC特定亚型在脑低氧预适应发生发展过程中的作用。按我室已建立的小鼠低氧预适应模型方法,制备重复性低氧1~4次的小鼠(H1~H4)。应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白印迹(Western holt)等生化技术,并结合Gel Doc 凝胶成像系统,半定时量检测小鼠海马和大脑皮层组织内cPKCα和γ的膜转位水平。实验结果表明,随低氧次数(H1~H4)的增加,小鼠海马组织内cPKCγ的膜转位水平明显增高,且在H2、H3和H4组的变化具有统计学显示著意义(P<0.05,n=6);而cPKCα亚型无论在大脑皮层还在海马组织内的膜转位比均无统计学意义:上述观察结果显示,cPKCγ膜转位可能在脑低氧适应的发生发展过程中发挥着重要作用;但cPKCβ1、β且以及其它新奇型和非典型PCK特定亚型的变化还有待于进一步的研究和探讨。
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李俊发, 王雪梅, 李俊发△, 祖鹏宇, 韩松, 吕国蔚
中国应用生理学杂志,2004,20(2):105~109,-0001,():
目的:初步探讨新奇型蛋白激酶C(novel protein kinases C,nPKCs)在脑低氧预适应发生发展过程中的作用。 方法:利用蛋白电泳(SDS2PAGE)和蛋白印迹(Western blot)等生化技术,并结合本室已建立的小鼠低氧预适应模型,观察低氧预适应对小鼠海马和大脑皮层组织内nPKCs(nPKCε、δ、η、μ和θ亚型)膜转位(激活)的影响。结果:随低氧次数(H02H4)或低氧耐受时间的增加,小鼠海马(H0:41.6% ± 1.4% vs H1-H4:46.9% ±4.5%,52. 7 ± 3.9%,58.8% ± 2.7%,61.3% ± 3.7%)和大脑皮层(H0:38. 4% ± 4.5% vs H1-H4:42.4% ± 5.0%,48.7% ± 6.5%,55.3% ± 8.9%,61.2% ± 10.2%)组织内nPKCε膜转位明显增加,且海马和大脑皮层分别在H2 、H3 、H4 和H3 、H4具有统计学的显著意义(P < 0.01)而nPKCδ、η、μ和θ亚型在海马和大脑皮层组织内的膜转位变化均无统计学意义。结论:nPKCε可能在脑低氧预适应的发生发展过程中发挥着重要作用,但需进一步的研究证实。
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吴建国, Fubin Wanga, Xiao-Lian Zhanga, b, *, Yan Zhouc, Linbai Yeb, Zhongtian Qid, Jianguo Wub
Immunobiology 210(2005)283-293,-0001,():
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