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2009年09月13日

【期刊论文】三七皂苷对造血细胞AP-1家族转录调控蛋白NF-E2,c-jun和c-fos的诱导作用

高瑞兰, 徐卫红, 陈小红, 钱煦岱, 吴超群

中国实验血液学杂志,2004,12(1):16~19,-0001,():

摘要

为了进一步研究三七总皂苷(PNS)对转录调控蛋白AP-1家族的主要成员NF-E2、c-jun和c-fos转录因子的诱导作用,探讨PNS在造血细胞内的信号传递途径,选用人粒系HL-60、红系K562、巨核系CHRF-288和Meg-014个细胞株作靶细胞,经PNS刺激处理后提取细胞核蛋白,分别用人抗NF-E2、c-jun和c-fos抗体与核蛋白作Westernblot杂交实验,并用32P标记的具有与NF-E2、c-jun和c-fos转录因子共同结合位点的AP-1双链寡核苷酸探针作电泳带移动阻滞实验(EMSA)。结果表明:①Westernblot显示PNS诱导HL-60,K562,CHRF-288和Meg-014株细胞的NF-E2和c-jun转录因子蛋白水平分别是未经处理细胞的1.5-2.5倍和2.0-3.0倍。诱导的c-fos蛋白在K562,CHRF-288和Meg-013株细胞分别提高2.0-3.0倍,但HL-60细胞的c-fos在PNS处理后无明显变化;②EMSA显示AP-1转录调控蛋白与DNA结合复合物的特异性条带,经PNS诱导后4株细胞的AP-1蛋白与DNA复合物条带密度明显高于未经处理的细胞。结论:PNS在造血细胞内对基因的转录调控涉及到AP-1家族转录因子成员NF-E2、c-jun和c-fos,通过诱导这些转录因子量的增加,与特异性DNA促进子结合的活性增高而调控与细胞增殖分化相关的基因的表达。

关键词: 三七皂苷 造血细胞, AP-1家族转录因子, NF-E2, c-jun, c-fos

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2009年09月13日

【期刊论文】三七皂苷对人骨髓CD34+造血干/祖细胞的增殖分化作用

高瑞兰, 钱煦岱, 马珂, 金锦梅

,-0001,():

摘要

为了探讨三七皂苷(PNS)对人骨髓CD34+造血干/祖细胞的刺激增殖和诱导分化的作用,用DynalM-450CD34+免疫磁珠阳性选择法获取高纯度的人骨髓CD34+细胞,采用多向祖细胞(CFU-Mix)体外集落培养和流式细胞术检测细胞增殖与分化。结果显示:经免疫磁珠阳性选择,从骨髓细胞收获的CD34+细胞获得率为(1.30±0.74)%,流式细胞术分析纯度达到86%-93%.PNS10mg/L和25mg/L能刺激CD34+细胞增殖,使CFU-Mix集落生成增加,25mg/L的PNS对CFU-Mix产率提高(34.7±16.0)%(P<0.01),是促进造血的最适浓度;PNS25,50和100mg/L时,能诱导CD34+细胞向粒系细胞分化,粒系表面标记CD33+和CD15+的细胞百分比均明显高于无345的对照组,而红系细胞表面标记CD71+和G-A+细胞百分比则无明显变化。结论:345对CD34+造血干/祖细胞不但具有显著的刺激增殖作用,而且能够诱导其向粒系细胞定向分化的效应。

关键词: 三七皂苷 CD34+, 细胞, 造血干细胞, 细胞增殖, 细胞分化

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