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2009年09月05日

【期刊论文】三氧化二砷诱导膀胱癌BIU-87细胞凋亡作用的研究

安瑞华, 王岩, 宋云飞, 顾冰, 关照杰

哈尔滨医科大学学报,2002,36(4):287~289,-0001,():

摘要

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)诱导膀胱癌BIU-87细胞凋亡作用。方法 应用倒置相差显微镜、透射电子显微镜、自动酶标仪、细胞免疫组化法,分别对不同浓度加药组及对照组BIU-87细胞的形态学改变,细胞的存活及Bcl-2、Bax蛋白的表达进行观察和测定。结果 生长曲线显示,18.8μg/ml,37.6μg/ml和99.0μg/ml As2O3能抑制膀胱癌BIU-87殖。透射电镜观察,膀胱癌细胞表面的突起减少或脱失;部分细胞核染色质聚集,边移;线粒体膜结构模糊不清。细胞免疫组化法测定Bcl-2、Bax蛋白的表达均有变化,与对照组细胞相比,18.8μg/ml,37.6μg/ml As2O3组Bcl-2和Bax蛋白表达率均升高。结论 三氧化二砷不仅抑制膀胱癌BIU-87细胞增殖,而且诱导细胞凋亡。诱导细胞凋亡与Bax蛋白的表达升高有关。

关键词: 三氧化二砷 膀胱肿瘤, 细胞凋亡, 基因表达

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2009年08月17日

【期刊论文】As2O3对不同p53 表型的人胶质瘤细胞系细胞周期蛋白B1、D1表达的影响

赵世光, 李力仙, 张建华, 叶远柱, 甄云波, 滕雷, 邹慧超, 刘恩重, 河本圭司

中华神经外科杂志2004,20,(3):202~206,-0001,():

摘要

目的 研究三氧化二砷(As2O3)对两种不同p53表型的人胶质瘤细胞系(U87MG和T98G)胞周期蛋白B1、D1表达及细胞周期的影响。方法 应用激光扫描细胞计数分析仪(LSC),共聚焦显微镜以及Westem印迹分析等方法检测As2O3对细胞周期蛋白B1、D1和p53 及细胞周期的作用。结果 As2O3能使两个胶质瘤细胞系的p53 蛋白水平升高,细胞周期蛋白B1表达降低及G2/M期俘获,但仅U87MG细胞的细胞周期蛋白D1表达下降。As2O3还能诱导U87MG细胞凋亡。结论 体外低浓度的As2O3能有效地抑制U87MG和T98G 细胞增殖,提示As2O3有希望用于神经胶质瘤患者的治疗。

关键词: 三氧化二砷 胶质瘤, 细胞周期, 细胞周期蛋白, p53

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2007年05月14日

【期刊论文】三氧化二砷对人卵巢癌细胞株体外作用的研究

郑建华, 刘彬, 方冲, 刘亚星

哈尔滨医科大学学报2002年10月第36卷第5期/JOURNAL OF HARBIN MEDICAL UNIVERSITY Oct., 2002, Vol. 36, No. 5,-0001,():

摘要

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对卵巢癌细胞株体外生长的影响。方法 以As2O3处理卵巢癌细胞株SKOV3,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,测定As2O3 对SKOV3生长的抑制作用,并绘制剂量—效应曲线;通过透射电镜观察细胞超微结构的变化;应用流式细胞仪分析DNA 含量和细胞周期并测定凋亡特征酶caspase23的活性变化。结果 015~4.0molPL三氧化二砷明显抑制SKOV3细胞的增殖,并呈剂量和时间依赖性;透射电镜观察可看到较为典型的细胞凋亡的形态学改变:细胞核固缩,染色质凝集,呈新月状紧贴于核膜周边,凋亡小体形成等;流式细胞仪检测出现DNA含量小于G1峰的亚二倍体凋亡峰,同时出现G2PM期阻滞;SKOV3在As2O3作用下,caspase23是实现凋亡的效应因子,它的激活必然导致凋亡细胞最终的各种表型变化。结论 As2O3 对卵巢癌细胞株SKOV3的生长有明显的抑制作用,诱导凋亡是其主要作用机制之一。

关键词: 三氧化二砷 卵巢肿瘤, 生长抑制, 细胞凋亡

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2009年06月17日

【期刊论文】钾通道阻断剂部分抑制三氧化二砷诱导的HeLa细胞死亡

董德利, 宋维华, 马培林, 杨宝峰*

药学学报,2005(7):644-648,-0001,():

摘要

目的 研究钾通道阻滞剂对三氧化二砷诱导的HeLa细胞死亡的作用。方法 采用M盯法评价HeLa细胞的存活情况,采用膜片钳技术记录HeLa细胞的电压依赖性钾电流。结果 As2O3(5μmol•L-1)孵育24h引起显著的HeLa细胞死亡,As2O3(5μmol•L-1)孵育24h后存活的细胞表现明显的电压依赖性钾电流密度增加。+80mV电压下,As2O3(5μmol•L-1)孵育组电流密度(61±18)pA/10pF(n=8)明显高于对照组(38±10)pA/10pF(n=8,P<0.05)。As2O3诱导的HeLa细胞死亡可被共同孵育钾通道阻滞剂四氨基吡啶(3mmol•L-1)或四乙基铵(5mmol•L-1)所部分抑制。3mmol•L-1四氨基吡啶或5mmol•L-1四乙基铵对HeLa细胞无明显细胞毒作用。结论 As2O3长期处理增加HeLa细胞的电压依赖性钾电流。As2O3诱导的HeLa细胞死亡可被钾通道阻滞剂四氨基吡啶或四乙基铵部分抑制。

关键词: 三氧化二砷 HeLa细胞, 电压依赖性钾电流, 四氨基吡啶, 四乙基铵

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2005年11月09日

【期刊论文】As2O3对KM3细胞端粒酶及其逆转录酶作用的研究

金洁, GUO Zhen-Xing, JIN Jie

中国实验血液学杂志,2004,12(3):346~349,-0001,():

摘要

为了探讨三氧化二砷(As2O3)对多发性骨髓瘤(MM)细胞株KM3的作用及其可能机制,用台盼蓝拒染法检测细胞生长抑制率,用光镜、透射电镜观察形态变化,用DNA电泳观察As2O3诱导KM3细胞凋亡,用流式细胞仪检测细胞周期的变化,用TRAP-PCR-ELISA法检测As2O3作用KM3细胞后的端粒酶活性变化,并用半定量RT-PCR法检测端粒酶逆转录酶(hTERT mRNA)的表达水平。结果表明:As2O3抑制KM3细胞的生长,具有诱导细胞凋亡的作用;As2O3阻滞细胞于G2期;As2O3可抑制KM3细胞的端粒酶活性和hTERT mRNA的表达。且hTERTmRNA下降趋势与端粒酶活性相一致。结论:端粒酶及其逆转录酶活性的下调可能在As2O3诱导KM3细胞凋亡的过程中起了重要作用。

关键词: 三氧化二砷 多发性骨髓瘤, KM3细胞, 端粒酶, 端粒酶逆转录酶

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2007年11月21日

【期刊论文】三氧化二砷反式激活基因1的克隆化

吴顺华, 郑玉建, 成军, 张跃新, 刘妍, 王国荃

中国公共卫生2005年8月第21卷第8期/Chin J Public Health Aug., 2005, Vol. 21, No. 8,-0001,():

摘要

目的 克隆三氧化二砷反式激活靶基因1 (AsTP1)。方法 从构建的三氧化二砷差异表达的肝Hep G2细胞、T淋巴细胞cDNA消减文库筛选,利用RT-PCR和生物信息学分析相结合的方法获得新基因AsTP1 的编码序列,对其氨基酸序列进行分析比较,并对其进行克隆化研究。结果 AsTP1 基因编码区为243个核苷酸(nt),编码产物为80个氨基酸残基(aa)。经核苷酸序列数据库( GenBank) 和蛋白质一级结构序列数据库(SwissProt) 同源序列的搜寻,与已知基因序列之间没有显著同源性,说明克隆的AsTP1 基因属于未知功能新基因。结论 发现三氧化二砷反式激活靶基因AsTP1,为进一步研究三氧化二砷的反式激活作用和揭示慢性砷中毒的分子机制提供新线索。

关键词: 三氧化二砷 反式激活基因, 克隆化

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2007年11月21日

【期刊论文】三氧化二砷体外诱导人HepG2 细胞铁蛋白基因表达的研究

吴顺华, 郑玉建, 成 军, 张跃新, 刘 妍, 刘开泰

解放军医学杂志2005年7月第30卷第7期/Med J Chin PLA Vol. 30, No. 7, July 2005,-0001,():

摘要

目的 了解低剂量三氧化二砷诱导的HepG2 细胞的差异表达基因,揭示慢性砷中毒对肝细胞损伤的作用机制。方法 在体外用三氧化二砷(5μmol/ L)处理HepG2 细胞,同时以PBS处理的相同细胞系作为对照;24h后制备细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经Rsa酶切后,将实验组cDNA分成2组,分别与2 种不同的接头衔接,再与对照组cDNA 进行2次消减杂交及2次抑制性聚合酶链反应(PCR) ,将产物与T/ A 载体连接,构建cDNA 消减文库,并转染大肠杆菌JM109 进行文库扩增,随机挑选克隆PCR 扩增后进行测序及同源性分析。结果 成功构建三氧化二砷处理HepG2细胞差异表达基因的cDNA消减文库。文库扩增后得到109 个白色克隆,进行菌落PCR 分析,均得到200~1000bp 插入片段。挑取含有插入片段的36个克隆进行测序,通过生物信息学分析发现铁蛋白重链和轻链在三氧化二砷诱导的肝HepG2细胞正向消减cDNA文库中显著上调,共有8个阳性克隆子。结论 低剂量三氧化二砷刺激细胞后可诱导铁蛋白的表达上调,暗示铁蛋白在砷诱导的肝细胞损伤中起作用。

关键词: 三氧化二砷 HepG2 细胞, 铁蛋白, 抑制性消减杂交

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