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2009年04月20日

【期刊论文】γ-干扰素对免疫低下小鼠结核分支杆菌感染的影响

张天托, 周宇麒, 毕筱刚, 张扣兴, 张贤兰, 唐英春

中国防痨杂志,2003,6(3):132~135,-0001,():

摘要

目的 观察、评价γ-干扰素(IFN-γ)对免疫功能低下小鼠结核分支杆菌感染的影响和疗效。方法 将DBA/2小鼠90只按免疫功能正常和免疫功能低下2种状态分别制成小鼠结核分支杆菌感染模型。随机分组给予IFN-γ或IFN-γ单克隆抗体治疗,检测肺组织菌落计数,观察治疗后生存率。结果 免疫正常组小鼠无死亡,第2周、第4周菌落数分别为(51.5±17.5)×103cfu/mL、(106.3±41.0)×103cfu/mL。免疫低下组8只死亡,菌落数分别为(163.7±61.7)×103cfu/mL、(768.3±206.5)×103cfu/mL,免疫低下+IFN-γ组3只死亡,菌落数分别为(54.2±21.3)×103cfu/mL、(212.7±80.7)×103cfu/mL,免疫低下组与免疫低下+IFN-γ组比较有显著性差异。免疫正常小鼠给予IFN-γ抗体后肺组织菌落数增多,与对照组比较有显著性差异。结论 IFN-γ增强宿主免疫功能,对结核分支杆菌感染小鼠产生保护效应,适用于免疫功能低下宿主合并结核感染的辅助治疗。

关键词: 分支杆菌,, 结核, γ-干扰素, 免疫低下

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2009年04月20日

【期刊论文】白细胞介素12调节小鼠Th1/Th2的抗结核分支杆菌感染研究

张天托, 川上和义, 唐英春, 张扣兴, 饶宪, 斋藤厚

中华结核和呼吸杂志,2000,6(6):358~360,-0001,():

摘要

目的 观察、评价白细胞介素12(IL-12)对结核分支杆菌感染小鼠细胞因子的影响和疗效。方法 将BALB/c小鼠42只,制成小鼠结核分支杆菌感染模型,随机分为对照组(PBS)和IL-12共两组(每组21只)。给予PBs或IL-12治疗,检测血清γ干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-10水平(ELISA法)和器官菌落计数,观察治疗后生存率。结果 IL-12组小鼠无一死亡,肺、肝、脾菌落数分别为(227±107)×105cfu/ml,(4±3)×105cfu/ml和(1.5±0.5)×105cfu/ml,INF-γ(1090±406)pg/ml。PBS组8只死亡,肺、肝、脾菌落数分别为(659±405)×105cfu/ml、(23±19)×105cfu/ml和(10.8±3.5)×105cfu/ml,IFN-γ(548±214)pg/ml,两组比较差异有显著性。而血清IL-4水平变化不大,两组比较差异无显著性。结论 IL-12诱导IFN-γ产生,促进Thl细胞反应,改变了Thl/Th2平衡,对结核分支杆菌感染小鼠产生保护效应。

关键词: 分支杆菌, 结核; 白细胞介素12; 佐剂, 免疫; 治疗结果

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2006年11月29日

【期刊论文】结核分枝杆菌链霉素耐药性的噬菌体检测技术研究

胡忠义, 李建农, 靳安佳, 张莹蓉, 王洁, 崔振玲, 翁心华

Chin J Lab Med, August 2005, Vol 28, No.8,-0001,():

摘要

目的建立结核分枝杆菌(结核菌)链霉素耐药性的噬菌体快速检测技术,并探讨其临床应用价值。方法应用分枝杆菌噬菌体感染结核菌建立链霉素耐药性的噬菌体检测技术,并对最佳测定条件进行探讨;将所建立的方法用于38株世界卫生组织药敏质控株和372株临床分离株链霉素耐药性测定,并与绝对浓度法和Bactec960药敏结果比较,对不符合菌株进行最低抑菌浓度(MIC)和rpsL耐药基因检测。结果链霉素终浓度5μg/ml作用24h、噬菌体108噬菌体形成单位/ml感染60min、杀毒剂5%室温作用5min为选择的检测条件。噬菌体法检测38株药敏质控株结果完全符合。372株临床分离株链霉素耐药性检测结果表明,如以绝对浓度法药敏结果为判断标准,则本法敏感性为97.4%、特异性为91.0%、阳性预测值为81.7%、阴性预测值为98.9%、准确性为92.9%;如以Bactec960药敏结果为判断标准,则本法敏感性为97.2%、特异性为97.1%、阳性预测值为94.6%、阴性预测值为98.5%、准确性为97.1%。有22株噬菌体法药敏结果与常规药敏试验结果不符,其中的11株噬菌体法检测结果与MIC和rpsL耐药基因检测结果相同。结论噬菌体法检测链霉素耐药性快速、简便,具有很高的敏感性和特异性,可作为结核菌链霉素耐药性的快速检测方法。

关键词: 分支杆菌,, 结核, 噬菌体, 微生物敏感性试验

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2006年11月29日

【期刊论文】上海市1985~1995年结核分支杆菌原发耐药性观察

胡忠义, 蔡慧梅, 李来娣, 屠梅欣

Chin J Tuberc Respir Dis, February 2000, Vol 23, No.2,-0001,():

摘要

目的了解上海市1985~1995年结核分支杆菌原发耐药性。方法采用绝对浓度的间接法进行6种抗结核药物的耐药性测定。结果耐SM、INH、RFP、PAS和KM率由1985~1986年的10.2%、5.2%、4.8%、5.6%和3.9%下降至1994~1995年的4.8%、4.8%、4.3%、3.6%和2.6%,耐EMB率由113%上升至313%;总耐药率由1985~1986年的1516%下降至1994~1995年的812%;耐1药、2药、3药、4药、5药和6药的耐药率分别由5.9%、4.6%、2.5%、1.5%、0.4%和0.8%降至1.9%、3.5%、1.2%、1.2%、0.1%和0.4%。耐INH、RFP率1992~1993年为1.9%,1994~1995年为2.4%。结论上海市结核分支杆菌原发耐药性10年来呈下降趋势,但耐多药菌株仍占一定比例。

关键词: 分支杆菌,, 结核, 药物耐受性, 监测

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2005年01月28日

【期刊论文】结核分支杆菌KatG蛋白的高表达与纯化

翁心华, 张文宏, 季朝能, 毛裕民, 陈一平, 陈澍, 邬祥惠

中华传染病杂志,2000,18(1):17~19,-0001,():

摘要

目的 表达与纯化结核分支杆菌katG蛋白,为深入研究异烟肼耐药机制奠定基础。方法将含有KatG基因的PEt24b-katG表达载体转化大肠杆菌BL21 (DE3) 菌株,在异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导下表达,分别对不同诱导时司的表达产物进行SDS-PAGE以及考马斯亮蓝染色。获得稳定的高表达菌株后采用Xpress TM蛋白纯化系统对超声破菌液进行纯化。最后对纯化产物进行过氧化氢酶活性的初步检测。结果 对诱导后的重组大肠杆菌菌液进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)以及考马斯亮蓝染色后发现相对分子质量约为80000。表达蛋白量约占总蛋白量的17.7%。对重组KatG基因表达产物进行纯化的结果发现,以350mmol/L咪唑洗联时的纯化效果最理想,蛋白纯度可达99%以上。对表达产物进行过氧化氢酶活性初步检测证明,重组的katG基因产物具有过氧化氢酶活性。结论通过PET24b-katG表达质粒转化大肠杆菌可获得基因重组的katG高表达菌株,表达产物具有一定酶活性,经纯化后可达到较高的纯度。

关键词: 分支杆菌,, 结核, katG, 基因表达, 蛋白纯化

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