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2009年11月08日

【期刊论文】反义技术及其在G蛋白研究中的应用

周元国, 余方圆)

生物化学与生物物理进展,1999,26(4):312~315,-0001,():

摘要

反义技术至少包括反义寡核苷酸技术、反义RNA技术和核酶技术。在G蛋白研究中,反义技术在G蛋白受体及受体亚型研究、G蛋白转导信号特异性研究方面及对G蛋耦联信号传导途径与其他信号传导途径之间“crocc talk”认识方面的研究中,有着广泛的应用。

关键词: 反义技术, 反义寡核苷酸, 反义RNA, 核酶, G蛋白

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2009年11月08日

【期刊论文】反义cubilin RNA对白蛋白刺激肾小管上皮细胞分泌趋化因子的影响

何娅妮, 杨聚荣, 周萍, 刘大维, 张建国, 陈晶

中华肾脏病杂志,2004,20(4):250~254,-0001,():

摘要

目的观察反义cubilin RNA对白蛋白刺激人近端肾小管上皮细胞(HK-2)表达单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、RANTES的影响。方法应用基因克隆技术构建反义及正义cubilin真核表达载体(pcDNA-ACUB、pcDNA-CUB),酶切鉴定及序列测定证实插入序列是否正确。脂质体DOTAP将其转染至HK-2细胞,流式细胞仪(FCM)检测反义cubilin RNA对HK-2细胞重吸收白蛋白的抑制作用。细胞转染72h后给予高浓度白蛋白(10g/L)刺激24h,细胞ELISA、Western印迹法检测HK-2细胞表达MCP-1、RANTES的变化。结果pcDNA-ACUB转染组白蛋白摄取率较DOTAP组显著降低(P<0.01)。与DOTAP组比较,pcDNA-ACUB转染组HK-2细胞MCP-1、RANTES的表达显著降低(P<0.001)。结论反义cubilin RNA可抑制肾小管上皮细胞对白蛋白的摄取,并能拮抗白蛋白刺激肾小管上皮细胞趋化因子的表达,提示cubilin在白蛋白介导的肾小管上皮细胞分泌趋化因子中起重要作用。

关键词: 反义RNA, 趋化因子, 白蛋白, cubilin, 肾小管上皮细胞

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2009年10月24日

【期刊论文】c-raf-1反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞放射敏感性的影响

李少林, 任庆兰

实用肿瘤杂志,2003,18(1):27~29,-0001,():

摘要

目的 探讨癌基因c-raf-1的反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞放射敏感性的影响。方法 设立c-raf-1正义寡核苷酸组和非处理组(仅加入等量的脂质体,作对照,用RT-PCR检测卵巢癌细胞处理前后c-raf-1表达水平的变化。用平板克隆形成试验检测人卵巢癌细胞株SKOV3在脂质体c-raf-1反义寡核苷酸作用前后受60C0γ射线不同剂量照射后的集落形成率。结果 c-raf-1反义寡核苷酸能抑制c-raf-1癌基因的表达,经脂质体介导的c-raf-1反义寡核苷酸作用的卵巢癌细胞经γ射线照射后其集落形成率较转染正义寡核苷酸组及单纯照射组明显下降(P<O.01),而转染c-raf-l正义寡核苷酸组的集落形成率与单纯照射组相比无明显差异(P>0.05)。结论 c-raf-l反义寡核苷酸通过抑制c-raf-1的表达降低人卵巢癌细胞株SKOV3放射抗拒性。该作用可能与c-raf-1反义寡核苷酸抑制了引起细胞辐射抗拒的细胞信号转导途径有关。

关键词: 卵巢肿瘤, 脂质体, 寡核苷酸类,, 反义 辐射耐受性

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2009年10月24日

【期刊论文】C-erbB-2与c-raf-l基因反义寡核苷酸联合对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用

李少林, 吴永忠, 任庆兰

《癌症》,2003,22(8):836~839,-0001,():

摘要

背景与目的:针对c-erbB2与c-raf-1单基因的反义寡脱氧核苷酸(antisense oligodexynucleotide,ASODN)治疗肿瘤的研究报道很多,这些研究往往局限单个基因或细胞水平,从肿瘤发生的多基因学说上是不恰当的。本研究旨在探讨c-erbB-2与c-raf-1基因联事ASODN对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用,方法:在BALB/c裸鼠上建立卵巢上皮癌模型,然后随机分成阴性对照组和6个实验组(分别为脂质体c-erbB-2 SODN组、脂质体c-raf-1 SODN组、脂质体c-erbB-2 ASODN组、脂质体c-raf-1 ASODN组、全剂量联合反义给药组、半剂量联合反义给药组)。检测裸鼠体重及肿瘤体积变化、计算抑瘤率及肿瘤缩小率。结果:给药后,全剂量联合反义给义给药组与半剂量联合反义给药组的肿瘤体积抑瘤率分别为72.5%和78.4%,肿瘤重量抑瘤率分别为70.7%和75.3%,肿瘤缩小率分别为29.7%和41.6%。在给药后,各组裸鼠体重变化无明显统计学差别。结论:C-erbB2与c-raf-1基因联合ASOD在体内能明显地抑制肿瘤生长。

关键词: 反义寡脱氧核苷酸, C-erbB-2, C-raf-1, 卵巢上皮癌, 移植瘤

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2009年10月24日

【期刊论文】c-raf-1反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞受照后Ki-67表达的影响

李少林, 任庆兰, 吴永忠

中国肿瘤,2003,12(5):286~288,-0001,():

摘要

[目的]探讨癌基因e-raf-1的反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞受照后Ki-67表达的影响。[方法]设立e-raf-1正义寡核苷酸组和非处理组(仅加入等量的脂质体)作对照,用RT-PCR检测卵巢癌细胞处理前后e-raf-1表达水平的变化,用免疫组化技术检测人卵巢癌细胞株SKOV3在脂质体-e-raf-1反义寡核苷酸作用前后受60COγ射线照射后细胞Ki-67的表达情况。[结果]e-raf-1反义寡核苷酸能抑制e-raf-1癌基因的表达,经脂质体介导的e-raf-1反义寡核苷酸作用的卵巢癌细胞经γ射线照射后其Ki-67表达较转染正义寡核苷酸组及单纯照射组明显下调,而转染e-raf-1正义寡核苷酸组和单纯照射组相比无明显差异。[结论]e-raf-1反义寡核苷酸通过抑制e-raf-1的表达降低人卵癌细胞株SKOV3受照射后的增殖能力。该作用可能与e-raf-1反义寡核苷酸抑制了引起肿瘤细胞辐射抗拒的细胞信号传导途径有关。

关键词: 卵巢肿瘤, 细胞株, c-raf-1反义寡核苷酸, 辐射, Ki-67, 肿瘤,, 实验性

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2009年10月24日

【期刊论文】99Tcm-EC-ASODN 反义探针的合成和标记

李少林, 谢娟, 刘方欣, 王颖

核技术,2005,28(6):449~453,-0001,():

摘要

报道反义探针99Tcm -EC-ASODN 的合成和标记。将次乙酰双半胱氨酸(L,L-ethylene dicysteine,EC)与反义寡脱氧核苷酸(Antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)进行偶联,形成复合物EC-ASODN,通过核磁共振图谱(1H-NMR)、红外图谱(IR)、紫外(A260)吸收和电泳,鉴定EC-ASODN 复合物的结构。用锝(99Tcm)标记EC-ASODN,通过薄层层析评价99Tcm-EC-ASODN 的标记率、放化纯和稳定性。结果显示,1H-NMR、IR 谱图、紫外吸收和电泳都证实EC 与ASODN 联结形成EC-ASODN,99Tcm -EC-ASODN 的标记率为77.28%,放化纯为97.52%,Rf=0.95-1,4h 内具有很好的稳定性。结论:EC 与ASODN 能形成稳定的复合物EC-ASODN,用99Tcm 标记,方法简便,能得到标记率高和稳定性好的反义探针。

关键词: 99Tcm-EC-ASODN,, 反义探针,, 核磁共振光谱,, 红外光谱

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2009年10月21日

【期刊论文】VEGFR-3反义多肽的原核表达及其意义

张雅洁, 李书华, 王燕菲, 李杰荣

广州医学院学报,2004,32(2):10~13,-0001,():

摘要

目的:将血管内皮生长因子受体3胞外第二免疫球蛋白区(VEC.FR-3 2-lg)的反义基因在体外进行原核表达,并将产物进行生物活性鉴定。方法:构建VECFR-3 2-lg反叉基因的原核表达载体,经过原核表达、亲和层析及蛋白酶切后获得VEGFR-3 2-lg的反义多肽,用MrIT法进行活性鉴定、结果:获得VEGFR-3 2-lg的反义多肽,MrIT法证明VECFR-3 2-lg的反义多肽具有较强生物学活性(细胞增殖抑制率可达68.7%)。结论:通过原核表达成功获得VECFR-3的反义多肽,为研究和利用反义多肽提供了实验理论依据。

关键词: VECFR-3 2-lg, 反义多肽, 原核表达

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2009年10月21日

【期刊论文】VEGFR-3 2-Ig反义多肽的原核表达及生物活性鉴定

张雅洁, 玉梅, 李书华, 李冰, 张惠球

Journal of Modern Clinical Medical Bilengineering2003,9(3):228~239,-0001,():

摘要

目的将VEGFR -3 2-Ig的反义基因在体外进行原核表达,并将产物进行生物活性鉴定。方法构建VEGFR-3 2-Ig反义基因的原核表达载体,经过原核表达、亲和层析及蛋白酶切后获得将VEGFR -3 2-Ig的反义多肽,用MTI'法进行活性鉴定。结果获得VEGFR -3 2-Ig的反义多肽,MTI'法证明VEGFR -3 2-Ig的反义多肽具有较强生物学活性。结论成功获得VEGFR -3 2-Ig的反义多肽,为研究和利用反义多肽提供了实验理论依据。

关键词: 反义多肽 原核表达 活性鉴定

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2009年09月05日

【期刊论文】PAI-1反义RNA对人主动脉平滑肌细胞中血管内皮生长因子的影响

李晖, 富路, 梅宇

,-0001,():

摘要

目的探讨纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogenactivatorinhibitor-1,pai-1)反义RNA对离体培养的主动脉平滑肌细胞(smoothmusclecell,SMC)PAI-1表达的作用及对血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的影响。方法PCR扩增PAI-1第2外显子,将PCR产物纯化克隆后连入真核细胞表达载体pcDNA3。1,构建PAI-1反义RNA重组质粒。将pcDNA3。1-反义PAI-1重组质粒转染SMC中。通过免疫组化。Western印迹,ELISA检测细胞中PAI-1表达的改变;通过免疫荧光技术观察细胞中PAI-1表达量的变化对VEGF的影响。结果转染后第3天,细胞中PAI-1含量最低,VEGF也相应增加。第7天,PAI-1含量接近于正常,CEGF也增加至正常水平。结论反义PAI-1RNA能有效阻断SMC中PAI-1的蛋白合成,同时抑制细胞中VEGFDE的表达。

关键词: 纤溶酶原激活物抑制剂-1, 反义RNA, 血管内皮生长因子, 平滑肌细胞

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2009年07月14日

【期刊论文】c-myc反义寡核苷酸对人肝癌细胞SMMC-7721端粒酶活性的影响

陈剑秋, 陈传贵, 吴义生, 沈洪

天津医药,2003,3(19): 593~595,-0001,():

摘要

目的:探讨c~myc反义基因治疗肿瘤的机制。方法:将正义(sense)、反义(antisense)、错配(mismatch)的c-myc寡核苷酸作用于体外培养的人肝癌细胞SMMC-7721,分别应用免疫组化、RT-PCR、PCR-ELISA等方法,观察对c-myc蛋白表达、端粒酶亚单位及活性表达的影响。结果:10μmol/L浓度的反义c-myc寡核苷酸作用于SMMC-772l 24h、48h后,相应的c-myc蛋白、端粒酶催化亚单位hTERT mRNA及其端粒酶活性与空白对照组相比,差别有统计学意义(P<O.O1);而正义组和错配组与空白对照组相比,差别无统计学意义(P>O.O5)。结论:c-myc反义寡核苷酸可能通过抑制端粒酶活性而抑制肿瘤细胞增殖。

关键词: 寡核苷酸类,, 反义 端粒, 末端转移酶, 转录因子

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2009年07月14日

【期刊论文】反义碱性成纤维细胞生长因子对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

陈剑秋, 孙晋津

中华实验外科杂志,2004,21(9):1123~1125,-0001,():

摘要

目的 观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)反义脱氧寡核苷酸(A0DN)对血管平滑肌细胞(vSMCS)增殖的影响,并探讨其作用机制。方法 利用脂质体分别将浓度为5μmol/L的bFGF反义、正义及随机寡核苷酸(ODN)导入体外培养的VSMCs;应用逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)和westem blot半定量测定方法,观测ODN对bFGF基因表达的影响;通过细胞活性测定观察ODN对VSMCs增殖的抑制作用。结果 bFGF AODN作用于VSMCs后1~5d,其相应的mR-NA表达和蛋白表达均明显减弱,细胞增殖活性受到抑制。反义组与对照组相比,mRNA在第1~4天表达差异有非常显著性(P<0.01),第5天有显著性(P<0.05);蛋白表达在1~5d差异有显著性(P<0.05);细胞增殖率在1~4d差异有非常显著性(P<0.01),第5天差异无显著性(P>0.05)。而正义、随机组无此效应,同单纯脂质体和空白对照组相比差异无显著性(P>0.05)。结论 反义bFGF ODN可通过特异性抑制其相应基因表达来实现阻遏血管平滑肌细胞增殖。

关键词: 寡核苷酸类,, 反义 成纤维细胞生化因子,, 碱性, 平滑肌细胞, 增殖

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2009年07月14日

【期刊论文】IL-2受体反义核酸抗排斥反应作用的初步研究

朱理玮, 逯宁, 王鹏志

天津医科大学学报,2002,8(2):184~186,-0001,():

摘要

目的:研究IL-2受体反义核酸对排斥反应的作用。方法:化学合成含20碱基的针对IL-2 Rα的mRNA翻译起始序列的反义寡聚核苷酸,检测其对CTLL-Ⅱ细胞增殖的影响,并进一步检测其对小鼠混合淋巴细胞反应的作用。结果:IL-2R反义核酸可抑制CTLL-Ⅱ增殖,并能抑制MLR反应强度。结论:IL-2R反义核酸具有潜在的免疫抑制作用。

关键词: IL-2受体, 反义核酸, 排斥反应

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2009年03月18日

【期刊论文】HBVPreS2反义寡核苷酸对HepG2.2.15细胞系HLA-I类抗原表达及生物活性的影响*

马春红, 丁培芳, 孙汶生, 王勤友, 蒋保云, 曹英林

山东大学学报(医学版),2002,40(3):202~204,-0001,():

摘要

目的:观察针对乙型肝炎病毒(HBV)PreS2基因特异性反义寡核苷酸(asON)对转基因细胞HepG2.2.15表面的人类白细胞Ⅰ类抗原(HLA2I)基因表达的影响。方法:设计合成互补于HBV PreS2翻译起始区的反义寡核苷酸即序列Ⅰ,并设非互补序列作对照即序列Ⅱ,免疫细胞化学染色观察asON对HepG2.2.15表面表达的HLA-I类抗原的影响,用ELISA法动态检测细胞上清液中HBsAg和HBeAg的变化,放射免疫测定法检测asON对宿主细胞自身分泌蛋白2血清铁蛋白的影响。结果:HepG2.2.15细胞表面HLA-I类抗原表达降低,用药组和对照组相比有统计学意义(P<0.05)。asON能够抑制HBV表达HBsAg和HBeAg,对HBsAg和HBeAg的抑制率分别为66%和91%,而序列Ⅱ对HBsAg和HBeAg的抑制率均为11%。asON对宿主细胞自身分泌蛋白无影响,即对宿主细胞无毒性作用。结论:asON以序列特异性方式抑制HBV基因表达而对宿主细胞无毒性作用,HLA-I类抗原表达降低,这对减轻过度炎症反应,阻止慢性肝炎至重症肝炎的发生具有重要意义。

关键词: 寡核苷酸类,, 反义 肝炎病毒,, 乙型, HLA抗原

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2009年03月18日

【期刊论文】抗HBV最佳反义寡核苷酸片段的体外筛选

马春红, 孙汶生, 刘素侠, 丁培芳, 张利宁, 曹英林, 宋静

中华微生物学和免疫学杂志,2000,20(1):012~014,-0001,():

摘要

目的 寻找抗HBV 最佳反义寡核苷酸区段。方法 合成4种互补于HBV不同区段的反义硫代寡核苷酸(asON),加入HBV基因转染的肝癌细胞模型HepG22.2.15,以ELISA法测定HBsAg、HBeAg含量。结果 互补于pre2S2翻译起始区的asON(序列Ⅰ)抗HBV基因表达作用最强(P<0.02),对HBsAg、HBeAg的最高表达抑制率分别为66%和91%,针对增强子Ⅱ(ENⅡ)的序列Ⅲ也有较强的抑制作用(52%、56%)。asON抗HBV作用具有明显时相性,其抑制作用随时间延长而有反跳,且针对增强子Ⅱ的反义序列Ⅲ和针对S基因起始区的反义序列Ⅱ的抑制作用规律相似,并在时相上与序列Ⅰ互补。结论 4种asON中,序列Ⅰ抗HBV基因表达作用最强,而且序列Ⅰ与Ⅲ或Ⅱ配伍有望成为理想的抗HBV基因药物。

关键词: 乙型肝炎病毒, 反义寡核苷酸, 基因表达

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2009年03月18日

【期刊论文】反义寡核苷酸抗HBV作用的双峰现象

马春红, 孙汶生, 张利宁, 曹英林, 宋静, 刘素侠, 丁培芳

世界华人消化杂志,1999,7(8):708-709,-0001,():

摘要

HBV基因组含3.2kbDNA,有至少4个ORF,其中S区包含S基因,pre-S1基因和pre-S2基因,编码形成大、中、小3种蛋白,构成HBV的包膜蛋白(HBsAg, preS1Ag, preS2Ag)。其中HBsAg在体内引起的免疫病理反应是HBV感染中的重要致病机制,preS2Ag较HBsAg有更强的抗原性,并具有反式激活作用,在HBV感染及肝癌发生中关系密切。因而如何从基因水平抑制HBsAg和preS2Ag的表达,对抗HBV治疗有重要意义。我们设计了针对S基因翻译起始区和preS2基因翻译起始区的反义寡核苷酸(asON)作为基因封条,作用于HepG2.2215细胞,对其抑制作用进行研究,并首次报道了asON抑制作用的双峰现象,为开发新型抗HBV基因药物奠定基础

关键词: 乙型肝炎病毒, 寡核苷酸类,, 反义 乙型肝炎表面抗原, 乙型肝炎核心抗原

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2009年02月18日

【期刊论文】反义乙烯受体LeETR-基因对番茄的转化和功能分析*

张明方, 向庆宁, 应铁进**, 杨虎清, 郑铁松, 杜荣茂

农业生物技术学报,2003,11(2):144~147,-0001,():

摘要

采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法将LeERT-的部分反义序列导入番茄(Lycopersiconesculentum)子叶外植体,经抗性筛选和组织培养获得再生植株。通过对转基因植株中插入序列的PcR检测和southern杂交,证明转化番茄成功。通过对LeERT2的功能的初步研究结果表明。转基因植株顶端优势丧失、极端矮化和番茄果实的内源乙烯合成量增加。这提示此基因在植物乙烯信号感受与转导系统中起着负调控的作用。

关键词: 番茄, 乙烯受体, LeETR-基因, 反义转化, 功能

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2007年05月10日

【期刊论文】PA I-1反义RNA 对人主动脉平滑肌细胞中血管内皮生长因子的影响

富路, 梅宇, 李晖

,-0001,():

摘要

目的探讨纤溶酶原激活物抑制剂-1 (plasminogen activator inhibitor-1, PA I-1) 反义RNA对离体培养的主动脉平滑肌细胞(smooth muscle cell, SMC) PA I-1 表达的作用及对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, V EGF) 表达的影响。方法PCR 扩增PA I-1 第2 外显子, 将PCR 产物纯化克隆后连入真核细胞表达载体pcDNA 311, 构建PA I-1 反义RNA 重组质粒。将pcDNA 3.1-反义PA I-1 重组质粒转染SMC 中。通过免疫组化、Western 印迹、EL ISA 检测细胞中PA I-1 表达的改变; 通过免疫荧光技术观察细胞中PA I-1 表达量的变化对V EGF 的影响。结果转染后第3 天, 细胞中PA I-1 含量最低,V EGF 的表达也减少。第5 天, PA I-1 含量逐渐升高,V EGF 也相应增加。第7 天, PA I-1 含量接近于正常,V EGF 也增至正常水平。结论反义PA I-1 RNA 能有效阻断SMC 中PA I-1 的蛋白合成, 同时抑制细胞中V EGF 的表达。

关键词: 纤溶酶原激活物抑制剂-1, 反义RNA, 血管内皮生长因子, 平滑肌细胞

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2007年05月10日

【期刊论文】反义纤溶酶原激活物抑制剂1 RNA 对家兔动脉粥样硬化形成的影响

富路, 李佳, 李晖, 梅雨, 尹申, 孔一慧

中国动脉硬化杂志2003年第11卷第3期/Chin J Arterioscler, Vol. 11, No. 3,-0001,():

摘要

为探讨纤溶酶原激活物抑制剂1 反义RNA 对家兔血浆纤溶活性及纤溶酶原激活物抑制剂1 的表达、血脂及对动脉粥样硬化斑块形成的影响,通过聚合酶链反应扩增纤溶酶原激活物抑制剂1 第二外显子,将聚合酶链反应产物纯化克隆后连入真核细胞表达载体pcDNA3. 1 ,构建纤溶酶原激活物抑制剂1 反义RNA 重组质粒。将pcDNA3. 1-反义纤溶酶原激活物抑制剂1 重组质粒注射到哈尔滨大白兔腹部皮下组织。通过发色底物法测定家兔血浆组织型纤溶酶原激活物及纤溶酶原激活物抑制剂1 活性变化,通过免疫组织化学方法检测组织中纤溶酶原激活物抑制剂1 表达的改变。测定家兔血脂变化,病理检测其动脉粥样硬化程度。结果显示,应用反义纤溶酶原激活物抑制剂1 RNA 重组质粒的家兔血浆纤溶酶原激活物抑制剂1 活性降低,组织型纤溶酶原激活物活性升高, 纤溶酶原激活物抑制剂1 蛋白表达于内皮细胞,而在平滑肌细胞中未表达(动脉粥样硬化对照组中内皮细胞、平滑肌细胞和泡沫细胞内均有表达);应用反义纤溶酶原激活物抑制剂1 RNA 重组质粒的家兔胆固醇和甘油三酯明显低于动脉粥样硬化对照组(96±42 mg/L 比123±12 mgPL , 15±10 mgPL 比46±29 mg/L) ,且动脉粥样硬化程度亦轻于后者。以上提示,反义纤溶酶原激活物抑制剂1 RNA 重组质粒的皮下注射能有效阻断家兔体内纤溶酶原激活物抑制剂1 蛋白的合成,减轻动脉粥样硬化程度。

关键词: 分子生物学, 纤溶酶原激活物抑制剂1对动脉粥样硬化形成的影响, 聚合酶链反应, 反义RNA, 组织型纤溶酶原激活物, 血脂, 动脉粥样硬化

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2007年05月10日

【期刊论文】纤溶酶原激活物抑制剂-1反义RNA对主动脉内皮细胞部分功能的影响

富路, 梅宇, 李晖

中华老年医学杂志2001年10月第20卷第5期/Chin J Geriatr, Oct., 2001, Vol. 20, No. 5,-0001,():

摘要

目的探讨纤溶酶原激活物抑制剂-1 (plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)反义RNA对离体培养的主动脉内皮细胞(endothelial cell,EC) PA-I表达的作用及对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响。 方法 聚合酶链反应(PCR)扩增PAI-第2外显子,将PCR产物纯化克隆后连入真核细胞表达载体pcDNA3.1(一),构建PAI-反义RNA重组质粒。将pcDNA3.1-反义PAI-1重组质粒转染EC中。通过免疫组化、免疫印迹法(Westemblot)、双抗体夹心法(ELISA)检测细胞中PAI-1表达的改变,通过免疫荧光技术观察细胞中PAI-1表达量的变化对VEGF的影响。结果转染后第3天,细胞中PAI-l含量为0.017 ng/ml,细胞浆内代表VEGF的绿色荧光最弱,表明VEGF的表达也减少;第5天,PAI-含量为0.093 ng/ ml,细胞浆内绿色荧光物质略增加;第7天,PAI-1含量为0. 143 ng/ ml,接近正常值,VECF的荧光染色接近于正常水平。 结论反义PAI-l RNA能有效阻断EC中PAI-1的蛋白合成,同时抑制细胞中VEGF的表达。

关键词: 纤溶酶原激活物抑制剂, 反义RNA, 内皮细胞生长因子

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2006年10月14日

【期刊论文】聚氰基丙烯酸烷酯纳米粒的研究进展

张阳德, 刘金波

China Journal of Modern Medicine Vol.13 No.4 Feb. 2003,-0001,():

摘要

暂无

关键词: 聚氰基丙烯酸烷酯纳米粒, 控缓释, 靶向制剂, 反义治疗

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