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2011年06月21日

【期刊论文】再生障碍性贫血患儿骨髓间充质干细胞分离及培养

谢晓恬, 周吉吉, 蒋莎义, 石苇, 邵越霞, 周晓迅, 张毓文

临床儿科杂志,2008,26(8):676~679,-0001,():

摘要

目的分离再生障碍性贫血(再障)患儿骨髓间充质干细胞,进行体外培养,为进一步研究打下实验基础。方法从再障患儿及正常志愿者骨髓中分离骨髓间充质干细胞,进行体外培养,诱导向成骨细胞、成脂细胞分化和流式细胞仪检测表面标志CD34、CD45、CD73和CD90。绘制生长曲线描述原代和传代细胞生长情况。结果分离的贴壁细胞经向成骨细胞和脂肪细胞分化诱导培养,分别显示茜素红染色和油红染色阳性;CD73和CD90阳性。生长曲线显示,与正常志愿者相比再障患儿体外培养的骨髓问充质干细胞传代培养中生长能力减低。结论再障患儿骨髓间充质干细胞存在异常,可能在再障发病机制中起着重要作用。

关键词: 再生障碍性贫血, 骨髓, 间充质干细胞 生长曲线, 儿童

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2011年02月14日

【期刊论文】胚胎干细胞分离培养研究进展

李玉谷, 刘健红, 周俊强

动物医学进展,2007,28(11):95~99,-0001,():

摘要

胚胎干细胞(ESCs)是一种高度未分化,能自我复制、自我更新,在体外连续传代井保持未分化状态和具有发育全能性的细胞。文章从研究概况,体外分离培养、生物学特性、鉴定方法,影响ESCs分离培养的因素、存在问题以及应用前景等方面对胚胎干细胞进行了概速。

关键词: 胚胎干细胞 士物学特性, 分离培养

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2011年02月14日

【期刊论文】脂肪间质干细胞研究进展*

李玉谷, 马勇江**李玉谷, 窦忠英

中国生物工程杂志,2006,26(5):89~92,-0001,():

摘要

脂肪间质干细胞,是脂肪组织中一类多能性干细胞。在体内、体外条件下,可诱导分化形成脂肪、骨、软骨、肌肉等组织类型细胞。人体脂肪组织十分丰富,用其分离脂肪间质干细胞可避免分离胚胎干细胞所面临的道德伦理问题和获取极少量骨髓分离骨髓间质干细胞时给供者带来极大痛苦等。因此脂肪间质干细胞可作为组织再生工程的干细胞理想的替代资源。重点论述脂肪间质干细胞的研究进展,并探讨其临床应用前景。

关键词: 脂肪组织, 间质干细胞 组织工程

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2011年01月24日

【期刊论文】神经干细胞增殖、迁移及分化调控机制的研究

周亦武, 贾冬梅, 何光龙, 徐小虎

中国法医学杂志,2006,21(1):39~41,-0001,():

摘要

神经干细胞能够不断增殖、迁移,并具有分化成神经元、星型胶质细胞和少突胶质细胞的能力,神经干细胞的这种特性为研究中枢神经系统退行性疾病及损伤后功能恢复奠定了基础,也为法医病理学死后时间和尸体损伤推断的研究提供了新的机遇。本文对神经干细胞的分布、生物学特性、鉴定、增殖、分化与迁移的影响因素,及其在治疗中枢神经系统疾病和法医病理学中的应用前景作一综述。

关键词: 法医病理学, 神经干细胞 巢蛋白, 迁移, 移植

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2010年12月07日

【期刊论文】猪胚胎干细胞培养和建系的影响因素及对策

余四九, 况玲, 冯书堂, 牟玉莲

中国兽医科技,2004,34(10):76~78,-0001,():

摘要

为解决胚胎干细胞的培养和建系受血清、饲养层、细胞因子、传代时机以及其他一些不明因素影响而很不稳定的问题,在总结猪胚胎干细胞(EG)培养和建系的经验教训的基础上,对一些常规的实验方法进行了改进,提出了消除上述影响因素的对策。

关键词: 胚胎干细胞 饲养层, 传代, 血清, 培养基

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2010年12月07日

【期刊论文】猪胚胎多能性干细胞的分离培养

余四九, 况玲, 冯书堂, 牟玉莲, 张勇

中国兽医科技,2004,34(7):55~59,-0001,():

摘要

收集妊娠26.0~29.0d的猪胚胎,分离培养原始生殖细胞(PGCs),在STO细胞饲养层上生长,形成了多能性干细胞(EG)。发现其具有干细胞的显著特性,并能在体外定向分化为神经细胞、上皮细胞和胚泡细胞。试验使用A、B、c3种不同的培养基培养PGCs,结果在形成EG细胞集落的数量和EG细胞分化上有着明显的差距,说明血清的质量和浓度以及细胞因子对干细胞的生成和增殖有着重要的影响。

关键词: 胚胎干细胞 原始生殖细胞, 胎牛血清, 细胞因子

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2009年11月20日

【期刊论文】大鼠肝卵圆细胞的分离培养及脾内移植研究

王宇明, 陈耀凯, 郎松, 李俊刚, 刘国栋

中华肝脏病杂志,2003,11(6):328~330,-0001,():

摘要

目的观察肝卵圆细胞在同种异体大鼠脾内移植的演变结果,为肝干细胞移植治疗临床肝功能衰竭提供实验依据。方法 采用改进的梯度离心法分离肝卵圆细胞,体外培养举定后移植人2/3肝切除的同种异体大鼠脾脏内。结果每只模型大鼠肝脏中可分离获得约1.69×10/ml肝卵圆细胞。体外培养的肝卵圆细胞呈现上皮细胞的生长特点,对OV6、细胞角蛋白19及甲胎蛋白染色呈阳性反应,对白细胞共同抗原染色呈阴性反应。肝卵圆细胞植入异体大鼠脾脏内可形成岛屿状肝组织结构,形成“肝化脾”。结论大鼠肝卵圆细胞具有肝干细胞的生物学特征,在一定条件下可分化为肝细胞及胆管上皮细胞。

关键词: 肝, 干细胞 肝移植, 大鼠, 肝卵圆细胞

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2009年11月20日

【期刊论文】肝干细胞与肝病

王宇明, 陈耀凯

中华肝脏病杂志,2002,10(3):235~237,-0001,():

摘要

暂无

关键词: 肝疾病, 干细胞

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2009年11月09日

【期刊论文】羊膜负载骨髓间充质干细胞与表皮细胞对放创性皮肤损伤促愈合研究

粟永萍, 闫国和, 艾国平, 屈纪富, 冉新泽, 程天民, 庞学利, 肖红

中国修复重建外科杂志,2004,29(6):497~501,-0001,():

摘要

肤缺损圆形创面(3.67cm)各3个,共48个创面。将经处理的人羊膜(human amniotic mambrane, HAM)分别负载自体骨髓间充质干细胞(mesenchvmal stem cells,MSCs)和表皮细胞,移植到其左侧24个创面作为实验组(A组);以单纯无种植细胞的HAM敷盖其右侧前16个创面(B组);以单纯油纱布敷盖其右侧后8个创面(C组)。B、C作为对照组。观察移植后1~3周内各组创面愈合、肉芽组织生长及上皮化等情况,并进行创面组织HE染色及vWF免疫组织化学检测。用图像分析法测算各组各时间点创面平均面积(CIT12),并计算其愈合百分率。结果C组于伤后99--23天愈合,B组于伤后19~21天愈合;A组于伤后15~17天愈合,较B、C组分别提前6~7天和5~6天,愈合质量好。移植15—17天,A组与B、C组创面平均残留面积及愈合面积百分率比较,差异有统计学意义(P<0.01)。A组创面的新生上皮已完全覆盖整个创面,肉芽组织生长旺盛,肉芽组织中vWF、成纤维细胞相毛细血管含量丰富,可见胶原沉积;B、C组创面仍见许多炎性细胞浸润,肉芽组织中vWF、成纤维细胞和毛细血管含量少,胶原沉积不明显。 结论HAM负载自体MSCs和表皮细胞植入对放创性全厚皮肤缺损创面有较好的促愈合作用,愈合质量较高。

关键词: 骨髓间充质干细胞 表皮细胞 人羊膜 放创性皮肤损伤 创面愈合

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2009年11月02日

【期刊论文】脑缺血损伤和神经干细胞的增殖、迁移、分化

罗勇, 赵振强

中国康复理论与实践,2003,9(11):654~658,-0001,():

摘要

暂无

关键词: 脑缺血, 损伤, 神经干细胞 综述

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2009年10月19日

【期刊论文】基因外周血造血干细胞移植马利兰和环磷酰胺预处理的不良反应研究

朱康儿, 徐旸, 吴东, 许晓华, 黄连生

中华血液学杂志,2000,21(8):403~405,-0001,():

摘要

目的 分析马利兰和环磷酰胺(BU-CY)作为异基因外周血干细胞移植(allo-PBSCT)预处理方案的治疗相关并发症。方法 分析1997年6月至1999年5月我院40例allo-PBSCT患者的临床资料。结果 中性粒细胞和血小板植活中位数时间分别为移植后13(9-28)天和12(7-60)天;40例中17例(42.5%)发生急性移植物抗宿主病(aGVHD),其中Ⅱ~Ⅳ度aGVHD 10例(25%);在可评价的30例中21例(70%)发生cGVHD;发生轻至重度口腔枯膜炎30例,其中4例发生严重食管炎伴出血:发生出血性膀胱炎8例(20%).中位数时间为+100(+7-+165)天;发生间质性肺炎6例(20%),其中5例巨细胞病毒感染,1例卡氏肺囊虫感染;无一例发生肝静脉闭塞病和癫痫样发作。随访中位数时间480(300-1000)d,复发4例(10%),死于移植相关并发症8例(20%),3年无白血病生存28例(70%)。结论 以国产马利兰组成的BU-CY预处理方案易于实施,患者耐受好,髓外毒性低。

关键词: 白消安, 环磷酰胺, 不良反应, 造血干细胞移植,, 异基因

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2009年10月19日

【期刊论文】异基因外周血干细胞移植治疗白血病的临床研究

朱康儿, 徐旸, 吴东, 许晓华, 黄连生

中华内科杂志,2001,40(2):117~119,-0001,():

摘要

目的 探讨异基因外周血干细胞移植(allo-PBSCT)的植活情况.移植物抗宿主病(GVHD)的发生率和临床结果。方法 回顾性分析1997年6月至1999年5月在我院实行的40例allo-PBSCT的临床资料。以粒细胞集落刺激因子(G-CSF)5μg/kg.12hl次,皮下注射动员外周血造血干细胞:输入CD34+细胞中位数(ANC)为7.7(2.0~l6.8)×106/kg;马利兰和环礴酰胺为预处理方案;环孢素A +甲氨蝶呤(34例)或甲基泼尼松龙(6例)预防GVHD。结果 40例患者均植活:ANC>0.5×109/L,中位数l3d:血小板(BPC)>20×109/L.中位数l2d;输人CD34+细胞≥4×106/kg或移植后给予G-CSF者中性粒细胞和血小板植活显著加速;40例中l7例(42.5%)发生急性GVHD,其中Ⅱ一Ⅳ度急性GVHD25.0%:中位数随访480d(300~1000),在可评价的30例中21例(70.0%)发生慢性GVHD;4例复发死亡(10.0%).8例死于移植相关并发症(20.0%)。3年无白血病生存概率为70.0%。结论allo-PBSCT能快速重建造血,急性GVHD发生率并不增高.而慢性GVHD则增高。

关键词: 白血病, 造血干细胞移植, 移植物抗宿主病

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2009年10月19日

【期刊论文】BU-CTX2预处理方案异基因造血干细胞移植治疗白血病6O例

朱康儿, 徐扬, 钟隽, 陈盛亭, 曾慧兰

中华血液学杂志,2002,23(7):349~352,-0001,():

摘要

目的 评价BU-CIX2预处理方案异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗60例白血病的长期疗效。方法 1994年4月至2000年8月60例白血病患者接受了allo-HSCT,其中急性髓系白血病(AML)20例,急性淋巴细胞白血病(ALL)l5例,慢性髓系白血病(CML)25例。53名供者系HLA完全相合同胞,4名为HLA 1个主要位点不合同胞,3名为HLA完全相合无关供者。用BU-CTX2方案预处理,用环孢菌素A+甲氨蝶呤(54例)或甲泼尼龙(6例)预防移植物抗宿主病(GVHD)。结果60例均植活。22例(36.7%)发生急性GVHD,其中CML组为48.0%,AML组30.0%,AlJL组则为26.7%。中位随访时间24(9~24)个月,38例仍无白血病生存,22例(36.7%)死亡,其中1例死于肺部感染,3例死于急性GVHD,7例死于巨细胞病毒感染,11例死于白血病复发,其中AML 3例(15.0%),ALL8例(53.3%)。8例ALL均于移植早期复发死亡。4例AJ上长期生存者均发生慢性GVHD。3年无病生存(DFS)率为63.3%,其中CML组为80.0%, AML组70.0%,ALL组则为26.7%。结论 BU-CTX2为AML和CML的有效预处理方案,白血病复发率低,长期生存率高,而作为ALL的预处理方案则白血病复发率较高,提示BU-CTX2不适合作为AJ上首选预处理方案。

关键词: 白血病, 造血干细胞移植,, 异基因, 预处理方案, 无病生存

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2009年09月13日

【期刊论文】三七皂甙对造血细胞GATA-1和GATA-2转录调控蛋白的诱导作用

高瑞兰, 徐卫红, 林筱洁, 陈小红, 吴超群

中华血液杂志,2004,25(5):281~284,-0001,():

摘要

目的观察三七总皂甙(PNS)对锌指结构GATA族转录调控蛋白的诱导作用,探讨PNS在造血细胞内的信号传递途径。方法选择恰当浓度的PNS作用于正常人骨髓单个核细胞、HL-60、K562、CHRF-288和Meg-01细胞,2周后提取核蛋白,用GATA-1和GATA-2抗体行Western印迹杂交,检测GATA-1和GATA-2的表达情况。用32P标记的GATA双链寡核苷酸探针行电泳带移动阻滞试验(EMSA)和抗体胶移动实验,检测GATA-DNA复合物及亚型。结果PNS能够促进人骨髓红系、粒系祖细胞增殖。Western印迹杂交显示PNS诱导K562、CHRF-288和Meg-01细胞的GATA-1和GATA-2蛋白表达量增高,分别是未经处理细胞的1.5~2.8倍和2.0~3.1倍;EMSA结果表明PNS诱导三株细胞的GATA-DNA结合复合物条带密度明显增高;HL-60细胞在PNS处理前后均未显示GATA活性。抗体胶移动实验证明PNS诱导的GATA-DNA复合物的主要成分为GATA-1和GATA-2。免疫沉淀显示PNS诱导的GATA-1和GATA-2蛋白均处于磷酸化的功能激活状态。结论PNS可通过诱导GATA-1和GATA-2蛋白合成增加,与相关基因上游调控区的启动子和(或)增强子结合的活性增高,而调控与造血细胞增殖、分化相关基因的表达。

关键词: 造血干细胞 转录因子,, GATA, 转录调控, 三七皂甙

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2009年09月13日

【期刊论文】三七皂苷对人骨髓CD34+造血干/祖细胞的增殖分化作用

高瑞兰, 钱煦岱, 马珂, 金锦梅

,-0001,():

摘要

为了探讨三七皂苷(PNS)对人骨髓CD34+造血干/祖细胞的刺激增殖和诱导分化的作用,用DynalM-450CD34+免疫磁珠阳性选择法获取高纯度的人骨髓CD34+细胞,采用多向祖细胞(CFU-Mix)体外集落培养和流式细胞术检测细胞增殖与分化。结果显示:经免疫磁珠阳性选择,从骨髓细胞收获的CD34+细胞获得率为(1.30±0.74)%,流式细胞术分析纯度达到86%-93%.PNS10mg/L和25mg/L能刺激CD34+细胞增殖,使CFU-Mix集落生成增加,25mg/L的PNS对CFU-Mix产率提高(34.7±16.0)%(P<0.01),是促进造血的最适浓度;PNS25,50和100mg/L时,能诱导CD34+细胞向粒系细胞分化,粒系表面标记CD33+和CD15+的细胞百分比均明显高于无345的对照组,而红系细胞表面标记CD71+和G-A+细胞百分比则无明显变化。结论:345对CD34+造血干/祖细胞不但具有显著的刺激增殖作用,而且能够诱导其向粒系细胞定向分化的效应。

关键词: 三七皂苷, CD34+, 细胞, 造血干细胞 细胞增殖, 细胞分化

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2009年09月06日

【期刊论文】海马干细胞分化的神经元电生理特征的初步探讨

林志国, 沈红, 马晓燕, 单宏丽, 王鹤, 冯建斌, 杨富明

中华神经外科杂志,2003,7(19):300~303,-0001,():

摘要

目的 探讨大鼠海马干细胞分化的神经元的电生理特征。方法 无血清方法分离、培养新生大鼠海马干细胞,诱导其分化为神经元,采用全细胞膜片钳技术记录分化的神经元的静息膜电位、动作电位及离子单通道等电生理指标。结果 海马干细胞分化的神经元具有一定的电生理特征,记录到静息膜电位发动作电位,其50%和90%复极化动作电位时程分别为69.75±4.57ms及79.75±6.45ms,并同时记录到三种外向钾电流。结论 在现有培养条件下海马中细胞可分化为具有一定电生理特征的神经元。

关键词: 海马干细胞 膜片钳, 电生理

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2009年09月06日

【期刊论文】癫痫的细胞移植现状

林志国, 沈红, 杨富明, 王德生

国外医学神经病学神经外科学分册,2003,30(4):389~392,-0001,():

摘要

癫痫,尤其是难治性癫痫的治疗一直是世界性难题之一。近年来,神经细胞移植为癫痫的治疗带来了新的希望。移植的释放抑制性神经递质的细胞、胚胎海马细胞及神经干细胞等可能与宿主形成了功能上的联系、整合,并在癫痫宿主体内建立新的神经环路,从而抑制癫痫的发生。这些证明神经细胞移植可能将在癫痫治疗的研究中发挥巨大的作用。

关键词: 癫痫, 胚胎细胞, 神经干细胞 移植

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2009年09月06日

【期刊论文】大鼠海马干细胞移植治疗颞叶癫痫的初步研究

林志国, 沈红, 王晓峰, 侯晓华, 刘利, 张晶, 杨富明

立体定向和功能性神经外科杂志,2004,17(1):39~43,-0001,():

摘要

目的 通过神经干细胞移植至癫痫鼠后与宿主细胞的整合及其对损伤宿主的修复作用,为神经干细胞移植治疗癫痫提供理论依据。方法 分离、培养新生鼠海马干细胞,移植至海人酸(KA)所致癫痫模型鼠的右侧海马内,应用Timm、NissJIE染色及动态脑电记录仪记录脑电图。在光镜及电镜下比较正常对照组、移植组及KA未移植组大鼠.在移植后的1周、4周、8周及24周苔状纤维发芽(MSF)、海马CA;区锥体神经元损伤情况及海马、杏仁核的脑电变化。结果 海马干细胞的移植可以显著抑制KA引起的MFS,其抑制作用从移植后第4周开始,第8周时最强,持续至第24周;同时亦明显的减轻了KA所致的CA,区锥体细胞缺失,其作用在第8周最强:KA所致CA,区锥体神经元超激结构的损伤亦得到一定程度的修复;但是,干细胞的移植并未使宿主恢复到损伤前的水平,海马干细胞移植可减少癫痫动物脑电的痫性发放,并降低其癫痫波的波幅约50%。结论 神经干细胞移植对于KA诱发癫痫鼠具有显著的修复作用,其具体怍用机制还有待于进一步的研究。

关键词: 干细胞移植, 癫痫, 修复作用

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2009年09月06日

【期刊论文】海马干细胞移植对癫痫鼠脑电影响的初步研究

林志国, 沈红, 张晶, 刘利, 王晓峰, 杨富明

中国微侵袭神经外科杂志,2004,9(9):402~404,-0001,():

摘要

目的 研究神经于细胞移植对癫痫鼠脑电的影响,为神经千细胞移植治疗癫痫提供理论依据。方法 分离、培养新生鼠海马干细胞,将其移植至海人酸(KA)所致癫痫模型鼠的右侧海马,比较移植组及未移植组大鼠在移植前和移植后1周、4周、8周及24周海马及杏仁核的脑电变化。结果 海马干细胞移植可减少癫痫动物脑电的痫性发放,并降低癫痂波幅约50%。结论 神经干细胞移植对于KA诱发癫痫鼠的癫痫具有一定的抑制作用,但其具体作用机制还有待于进一步的研究。

关键词: 干细胞移植, 癫痫, 脑电图, 海马, 海人酸

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