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2010年12月07日

【期刊论文】水牛卵泡GCs体外培养发生凋亡的生物学特征

余四九, 何宝祥, 杜玉兰, 冯贵雪, 郑喜邦, 余四九*, 李恭贺

中国兽医学报,2007,27(5):747~751,-0001,():

摘要

为了解水牛卵巢卵泡中颗粒细胞(GCs)和卵母细胞在体外培养过程中发生凋亡的变化特征,通过体外培养、血清撤除法诱导水牛卵泡GCs凋亡,并应用苏木精伊红(腿)染色和DNA原位末端标记的TUNEL方法观察其病理特征;通过水牛腔前卵泡体外培养、诱导或等待其中的卵母细胞及卵泡细胞发生凋亡,然后应用透射电镜技术检查其超微结构改变。结果显示:凋亡卵泡Gc8的眦染色特征包括细胞体积缩小,染色较深呈紫黑色,且多成簇分布。DNA原位末端标记检查的特征是DNA发生降解,其降解碎片呈,TUNEL阳性。原始卵泡体外培养中调亡卵母细胞的超微结构表现为胞核碎裂成电子密度高的大碎片,或出现形态奇特的凋亡小体;初级卵泡中的调亡GCs,细胞内外均出现凋亡小体,细胞内还见有典型的螺层状内质网结构,其中包涵部分核质。

关键词: 水牛 卵泡, 颗粒细胞, 细胞凋亡, 体外培养

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2010年12月07日

【期刊论文】水牛胎儿卵泡细胞和卵母细胞凋亡的特征

余四九, 何宝祥, 郑喜邦, 杜玉兰, 李彩萍, 李恭贺, 余四九*

畜牧兽医学报,2006,37(1):23~27,-0001,():

摘要

选择5月龄胎儿水牛的卵巢,采用石蜡切片、HE染色的光镜观察和DNA末端原位标记技术(TUNEL)进行了研究。结果表明:5月龄胎儿卵巢上分布着大量的凋亡细胞;在皮质部存在的大量腔前卵泡中,均匀分布有单个凋亡的卵泡细胞和卵母细胞,凋亡细胞的主要组织学变化是细胞缩小,核浓缩;DNA末端标记变化主要显示出TuNEL阳性。上述结果提示:水牛卵泡细胞和卵母细胞凋亡在胎儿时期已经存在,细胞凋亡是启动水牛腔前卵泡闭锁的潜在机理。

关键词: 水牛胎儿, 卵巢, 细胞凋亡, 卵母细胞, 卵泡细胞

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2010年12月07日

【期刊论文】水牛健康与闭锁优势卵泡中颗粒细胞凋亡的生物学特征

余四九, 何宝祥, 杜玉兰, 郑喜邦, 余四九*

中国兽医学报,2007,27(6):950~954,958,-0001,():

摘要

采用组织学苏木精伊红(HE)染色与光镜检查、荧光显微镜检查和DNA电泳技术,检查了水牛健康优势卵泡(HDF)和闭锁优势卵泡(ADF)中颗粒细胞(GCs)调亡的生物学特征。此外还应用孕酮处理早期的ADF。应用流式细胞术(FCM)方法检查该激素诱发CCs凋亡的情况。HE染色和荧光显微镜检查结果显示,HDF和ADF都含有凋亡的GCs,只是ADF中凋亡的GCs较多。凋亡GCs的HE染色表现细胞体积缩小,染色浓黑,荧光原位检测发现核浓缩。DNA电泳分析表明,在HDF中未发现GCs的DNA降解。而在ADF中因闱锁程度不同而表现不同程度的DNA降解,出现典型的“拖尾”带,但均未出现具有细胞凋亡特征的DNA“Ladder”。FCM检查结果见到早期的ADF存在着DNA的降解。孕酮处理使DNA降解碎片显著增加。上述结果提示。在水牛的HDF中,GCs的凋亡很少。在ADF中GCs的凋亡较多。水牛ADF中GCs的死亡。少量是以凋亡方式发生的。而坏死是主要方式。

关键词: 水牛 卵泡颗粒细胞, 优势卵泡, 细胞凋亡

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2010年12月07日

【期刊论文】抗坏血酸和NAC对水牛卵泡颗粒细胞存活的影响

余四九, 何宝祥, 郑喜邦, 李彩萍, 杜玉兰, 房慧伶, 郭亚芬, 李恭贺

中国兽医科技,2004,35(7):542~546,-0001,():

摘要

体外培养水牛卵泡颗粒细胞(BFGCs),待一定阶段后撤除胎牛血清,在对照组培养基中不加任何抗氧化剂,在试验组培养基中分别加入不同浓度的抗坏血酸(AA)和N-乙酰L-半胱氨酸(NAC),培养6h后观察细胞生长变化,并用噻唑蓝比色法进行细胞计数,探讨了AA和NAC对撤除血清后BFGCs存活的影响。结果表明,对照组和试验组的BFGCs都有不同程度的体积变小、细胞浓缩、变圆、离壁等类似凋亡的特征。其中0.5和1.0mmol/LAA组凋亡细胞最少,150.0mmol/LAA组无存活细胞,0.5mmol/LAA组的细胞存活率显著高于对照组和除1mmol/LAA组以外的其他AA组(P<0.05)。5mmol/LNAC组凋亡的BFGCs最少,其余5个试验组随NAC浓度升高,凋亡细胞逐渐增多,5mmol/LNAC组BFGCs的存活数量显著高于对照组和其他各组(P<0.05)。说明抗氧化剂AA、NAC在低浓度时能抑制撤除血清后体外培养BFGCs的凋亡,而高浓度时可促进其凋亡,它们的作用都是双向的、剂量依赖性的。

关键词: 卵泡颗粒细胞, 抗坏血酸, N-乙酰L-半胱氨酸, 水牛 细胞凋亡

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2007年03月20日

【期刊论文】水牛乳中主要过敏原的分离纯化

陈红兵, 罗曾玲, 陈福

工艺技术 食品科学 2006, Vol. 27, No. 10,-0001,():

摘要

牛乳和水牛乳存在免疫交叉反应,牛乳过敏患者可能对水牛乳过敏。因此,分离纯化出水牛乳中各种过敏原将为进一步的工作奠定物质基础。实验中以摩拉水牛乳为原料,通过等电点沉淀、凝胶柱层析法和阴离子交换法分离纯化水牛乳的酪蛋白、β-乳球蛋白、α-乳白蛋白,得到了SDS-PAGE纯(纯度≥90%)的β-乳球蛋白、α-乳白蛋白。离子交换层析分离β-乳球蛋白、α-乳白蛋白的得率分别为50.26%、52.86%;凝胶层析分离β-乳球蛋白、α-乳白蛋白的得率分别为49.39%、84.19%实验结果表明,等电点沉淀、凝胶柱层和阴离子交换法适合于分离牛乳中主要过敏原成分。

关键词: 水牛乳, 酪蛋白, β-乳球蛋白, α-乳白蛋白

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2005年03月08日

【期刊论文】陕西水牛化石及中国化石水牛的地理分布和种系发生

薛祥煦, 李晓晨,

古脊椎动物学报,2000,38(3):218-231,-0001,():

摘要

描述并比较了在陕西大荔、咸阳发现的水牛化石,一为Bubalus teilhardi,与周口店第一地点的相近;另一为B. youngi,与河南盂县的相似。水牛化石在中国的分布至今仍集中在中-东部,南、北方都有,其栖息环境与现代水牛的基本一样,生活在温暖、湿润的环境中。用支序系统学方法分析了中国化石水牛的种系发生。

关键词: 中国陕西,, 水牛化石,, 地理分布,, 种系发生

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