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2009年08月07日

【期刊论文】Lubeluzole对大鼠脑缺血再灌流时神经元的保护作用

金连弘, 吴树亮*, 金连弘*, 孟祥和**, 姜哲***, 郑沿*

中国局解手术学杂志,2002,11(3):227~229,-0001,():

摘要

目的 为了观察lubeluzole对大鼠脑缺血再灌流时神经元的保护作用。方法 本实验采用阻塞SD大鼠大脑中动脉2h,再灌流1、3、6、12、24、48h制成局灶性脑缺血动物模型,用免疫组化方法观察给药前后神经生长因子、脑源性神经营养因子在神经元的表达特点。结果 神经生长因子、脑源性神经营养因子在脑组织的分布相似。正常组和假手术组的皮质、丘脑等处的神经元为阴性;缺血模型组的缺血区皮质、丘脑的神经元为阴性或弱阳性,阳性神经元主要位于非大脑中动脉血区各缺血周边区;治疗组缺血区的皮质、丘脑等处的神经元为弱阳性至中等阳性,缺血周边区位强阳性。结论 在缺血后6h内使用lubeluzole能降低神经元受损伤的程度,促进神经元的生长。

关键词: lubeluzole, 神经元, 缺血再灌流, 神经生长因子, 脑源性神经营养因子 大鼠

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2007年11月26日

【期刊论文】羊膜上皮细胞移植治疗帕金森病大鼠的实验研究

陈东, 朱梅, 孟晓婷, 陈爱军

中国老年学杂志2006年2月第26卷,-0001,():

摘要

目的 探讨羊膜上皮细胞纹状内移植对帕金森病(PD)大鼠的治疗作用。方法 采用RT-PCR方法检测人羊膜上皮细胞株FL表达脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养因子-3(NT-3)mRNA;Hoechest33342标记后微移植方法将其移入PD大鼠模型纹状体内,免疫荧光技术检测移植细胞表达BDNF、NT-3状况。结果 羊膜上皮细胞能够表达BDNF、NT-3,植入纹状体内能够存活,并在第2周内明显改善PD大鼠的行为学症状。结论 羊膜上皮细胞可作为表达神经营养因子治疗PD的移植细胞。

关键词: 细胞移植, 神经营养因子 帕金森病, 羊膜上皮细胞

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2006年05月26日

【期刊论文】胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的雪旺氏细胞修复大鼠周围神经缺损的实验研究

李青峰, PING Ping, LI Qing-feng, ZHANG Di-sheng

中华整形外科杂志,2003,19(5):369~372,-0001,():

摘要

目的 从转基因角度探讨治疗周围神经损伤的有效方法。方法 成年Wiste,大鼠48只,平均分为3组。切断大鼠坐骨神经并形成10mm长缺损,用硅胶管桥接两侧断端,管腔内植入胶质细胞源性神经营养因子(glial cell-line derived ncurotrophic facbr, GDNF)修饰的雪旺氏细胞(schwann cells, SCs),正常SCs修复组和单纯硅胶管修复组作为对照,分别于术后4、8、12和16周对各组动物进行大体观察,肌电图测量,组织学切片观察,再生神经的神经电生理检测,GDNF免疫组化检测,组织学切片,观察和图像分析。结果:GDNF-SCs组动物的神经传导速度、有髓神经纤维密度、神经组织面积、髓鞘厚度均显著优于SCs组和硅胶管组。结论 将GDNF基因修饰的雪旺氏细胞移植修复周围神经缺损,使局部释放的GDNF维持神经元存活,加快轴突再生速度以促进周围神经再生,此方法为将来治疗周围神经损伤提供了线索。

关键词: 周围神经损伤, 胶质细胞源性神经营养因子 雪旺氏细胞, 再生神经

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2006年05月26日

【期刊论文】重组逆转录病毒pLNCX2-GDNF转染许旺细胞及其表达

李青峰, PING Ping, LI Qing-feng, ZHANG Di-sheng

中华显微外科杂志,20003,26(2):123~126,-0001,():

摘要

目的 利用基因转染技术将胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因转入许旺细胞(SC)以提高其分泌该因子的水平。方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法合成GDNFcD-NA片段,以逆转录病毒pLNCX2为载体导入许旺细胞内,并运用RT-PCR、免疫细胞化学染色、ELISA及运动神经元联合培养法检测外源性基因在mRNA和蛋白水平的表达及其产物的活性。结果:RT-PCR检测结果示GDNF-SCs表达GDNFmRNA的水平明显优于SCs;免疫细胞化学检测发现CDNF-SCs抗GDNF蛋白的水平升至正常SCs呈弱阳性;ELISA法检测结果示转染后4周CDNF-SCs分泌GD-NF蛋白的水平升至正常SCs的5.1倍;运动神经元联合培养法结果显示GDNF-SCs分泌的外源生基因产物具有生物学活性。结论 GDNF基因转染SC在mRNA和蛋白水平表达GDNF明显优于正常SCs,外源性基因表达产物具有神经生物学活性。

关键词: 许旺细胞, 胶质细胞源性神经营养因子 基因转染, 逆转录病毒

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2006年01月12日

【期刊论文】Persephin的研究进展

邢诒刚

国外医学内科学分册,2004,31(8):362-365,-0001,():

摘要

Persephin是转化生长因子2β家族中的一个新亚族,该亚族还有新发现的三个成员:胶质细胞源性神经营养因子、neurturin(NRTN/NTN)、enovin/artemin(EVN/ART)。它们均不同程度地对多巴胺神经元、脊髓前角运动神经元、后根神经节、颈上神经等有生长促进作用。Persephin与其他三种胶质细胞源性神经营养因子具有许多共同点,但Persephin的基因结构、分布、对多巴胺能神经元的生理作用及信号转导途径且有其独特的一面,提示其在治疗帕金森病与运动神经疾病的临床应用中可能较其他几个营养因子具有更好的应用前景。

关键词: Persephin, 神经营养因子 神经元

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2005年08月19日

【期刊论文】重度颅脑损伤后GDNF表达的实验研究

廖志钢, 王欣, 刘敏, 张林, 易旭夫, 胡华子

法医学杂志,2003,19(1):1~3,-0001,():

摘要

目的 观察重度颅脑损伤后GDNF的表达变化规律,方法 应用免疫组织化学方法和图像分析技术,对大鼠重度颅脑损估后不同时间大脑皮层、丘脑和脑干等几个脑区内GDNF的表达变化进行研究,结果 GDNF在脑损伤后1d表达开始增高,3d达表达最高峰,5d时回落不明显,7d有所回落,但仍高于正常水平,结论 GDNF在脑损伤后的时序性变化规律使其有可能成为一种脑损伤时间推断的客观指标。

关键词: 胶质细胞源性神经营养因子(, GDNF), 免疫组织化学, 颅脑损伤

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2009年05月31日

【期刊论文】重组腺伴随病毒载体表达hBDNF对大鼠基底前脑胆碱能神经元损伤的保护作用

胡海涛, 马东亮, 杨蓬勃, 靳辉, 任惠民, 刘勇

西安交通大学学报(医学版),2004,2(1):1-4,-0001,():

摘要

目的 探讨重组腺伴随病毒载体表达人脑源性神经营养因子(hBDNF)对大鼠基底前脑胆碱能神经元损伤的保护作用。方法 用β淀粉样肽(Aβ25-35)注入大鼠Meynert核损伤胆碱能神经元。损伤后8-10d行hBDNF重组腺伴随病毒脑内注射。经避暗回避试验测试大鼠学习记忆能力#组织学及免疫组织化学观察hBDNF表达以及胆碱能神经元数量变化。结果 避暗回避试验结果显示,应用hBDNF重组腺伴随病毒4周后,实验组动物的学习记忆能力增强,行为明显改善。胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫组织化学染色显示,注射点附近免疫反应阳性神经元散在或成群分布,数目明显增多,经与模型组比较,胆碱能神经元数量增高约37%。结论 hBDNF重组腺伴随病毒可在脑内表达hBDNF表达的hBDNF对损伤的胆碱能神经元具有营养和保护作用。

关键词: β淀粉样肽, 人脑源性神经营养因子重组腺伴随病毒, 避暗回避试验, 胆碱能神经元, 大鼠

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2009年05月31日

【期刊论文】人脑源性神经营养因子基因修饰神经干细胞移植对痴呆大鼠学习记忆的改善

胡海涛, 赵志英, 冯改丰, 许杰华, 张海英

中国修复重建外科杂志,2005(5):331-334,-0001,():

摘要

目的 观察神经干细胞(neuralstemcell,NSC)和人脑源性神经营养因子(human brainderive dneurotro phicfactor,hBDNF)基因修饰NSC移植对阿尔茨海默病(Alzheimer diseasem AD)模型鼠的学习记忆改善作用。方法 SD大鼠40只随机分为4组,每组10只。l组为正常对照组;其余3组进行单侧切断大鼠穹窿海马伞(fibria fornix,FF)制备AD模型,Ⅱ组为损伤组;Ⅲ、Ⅳ组于术后10~12d,侧脑室移植hBDNF基因修饰及未修饰的NSC分别为NSC组和BDNF组。移植后2周进行Morris水迷宫定位航行及空间探索行为学检测。结果 Ⅲ组和Ⅳ组的平均逃避潜伏期为41.84±21.76s和25.23±17.06s,较Ⅱ组潜伏期70.91±23.67s明显缩短,差异有统计学意义(P<0.01);平台象限游泳距离占总游泳距离的百分比:Ⅲ组和Ⅳ组分别为36.9%和42.0%,较Ⅱ组26.0%明显增高,差异有统计学意义(P<0.01);Ⅱ组大鼠采取边缘式和随机式搜索模式显著多于其它各组,差异有统计学意义(P<0.01)。其中Ⅳ组大鼠的平均逃避潜伏期和平台象限游泳距离百分比及搜索策略接近l组(P>0.05),采取直线式和趋向式的搜索策略显著多于其它各组(P<0.01)。结论 NsC和hBDNF基因修饰NsC移植对AD模型鼠的行为学有不同程度的改善,hBDNF基因修饰NSC移植较单独NSC移植疗效好。

关键词: 人脑源性神经营养因子 神经干细胞, 基因修饰, 阿尔茨海默病, 大鼠

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2005年03月08日

【期刊论文】逆转录病毒载体ex vivo途径表达TH和GDNF基因①

杨慧, 段德义, 吴杰军, 赵春礼, 蔡青, 徐群渊

神经解剖学杂志,2004,20(3):215~219,-0001,():

摘要

为了通过逆转录病毒载体ex vivo途径高效表达TH和GDNF基因。本实验构建有TH和GDNF基因的重组逆转录病毒载体pLHCX/TH和pLNCX2/GDN F,分别转染包装细胞PA317和PT67中;经筛选、RT-PCR、免疫组化等鉴定得到产毒细胞PA 317/TH和PT67/GDNF。培养COS-7细胞,以两种产毒细胞的上清分别感染COS-7细胞,筛选后,免疫组化、原位杂交检 测基因的表达量,将基因改造的细胞移植到大鼠纹状体内,免疫组化检测体内移植的TH、GDNF基因的表达。结果表明:TH和GDNF基因可在靶细胞表达,且筛选后基因表达阳性细胞显著增加;TH阳性率达50%,GDNF阳性率达70%。在体内实验中,可以观察到这两种外源基因可同时在大鼠脑内移植区表达。以上结果提示,TH和GDNF基因改造细胞,可通过ex vivo 途径在脑内移植区高效表达。这一实验结果将对Park inson病复合性基因治疗提供依据。

关键词: 基因治疗, 逆转录病毒, 酪氨酸羟化酶, 胶质源性神经营养因子

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2005年03月08日

【期刊论文】TH和GDNF基因工程细胞脑内移植治疗PD大鼠的实验研究

徐群渊, 张京钟, 杨慧, 段德义, 段春礼, 孙晓红, 赵春礼, 张进禄, 徐群渊*

解剖学报,2000,31:32~36,-0001,():

摘要

目的 观察酪氨酸羟化酶(TH)和胶质细胞系源性神经营养因子(GDNF)基因工程细胞联合移植到纹状体内对帕金森病(PD)大鼠的治疗作用。方法 重组携带TH基因的质粒表达载体pCMVTH及携带GDNF基因的质粒表达载体DCl。neo,分别转染原代培养的成纤维细胞。筛选阳性细胞植入大鼠帕金森病模型纹状体内,动态观察行为学变化,并用高效液相色谱于第4、8、12、16、20周测定多巴胺、3。4-二羟苯乙酸(DOPAc)及高香草酸(HVA)含量的变化。结果 联合移植TH及GDNF转基因细胞致PD大鼠纹状体内可明显减少模型单侧旋转行为,可降至移植前旋转圈数的44.3±5.2%(P<0.01),其效果优于单独移植TH(65.6±6.1%)或GDNF(64.8±5.8%)转基因细胞的PD模型(P<0.05);显著提高纹状体内多巴胺含量。恢复至移植前水平的21.4±3.47%(P<0.001),其程度高于单独移植TH(12.9=1.4%)或GDNF(14.5±2.2%)转基因细胞的PD模型(P<0.05)。结论 TH及GDNF联合基因治疗具有潜在的临床应用价值。

关键词: 帕金森病, 基因治疗, 酪氨酸羟化酶(, TH), 胶质细胞系源性神经营养因子(, GDNF)

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