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2010年12月15日

【期刊论文】胶质瘤细胞端粒酶活性依赖细胞周期的调控

蒋传路, 赵岩 杨立庄 蒋传路 杨春晓 曹阳

中华神经外科杂志,2003,19(4):281~284,-0001,():

摘要

目的研究胶质瘤细胞的端粒酶表达是否与细胞周期相关。方法利用血清饥饿法和特异的细胞周期抑制剂,使细胞同步化于Go、G 、S、G2、M期,采用PCR-ELISA试剂盒对处于不同周期时相的胶质瘤细胞端粒酶活性进行检测。结果不同周期时相胶质瘤细胞的端粒酶活性不同,去除血清不能影响活性,G0期细胞与非同步化细胞的活性相同;G 期较非同步化细胞的活性为高;S期活性最高;G2期活性比s期明显降低;M期则几乎无活性。结论端粒酶活性与细胞周期明显相关,胶质瘤形成可能是由于细胞周期的异常调节使端粒酶活性增高,细胞获得不死性所致。

关键词: 端粒酶 胶质瘤, 细胞周期

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2009年08月07日

【期刊论文】雌、孕激素对子宫内膜癌细胞端粒酶活性及细胞周期的影响

倪江, 崔玉兰, 倪江, 刘国艺

肿瘤防治研究,2004,31(7):403~405,-0001,():

摘要

目的研究雌、孕激素对子宫内膜癌HH+I细胞端粒酶活性及细胞周期的影响。方法用:LIN$F6,OI法和实时荧光定量N*L技术检测雌、孕激素作用前后HH+I子宫内膜腺癌细胞系端粒酶活性及:FLL2I的表达,流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡的变化。结果雌激素对HH+I细胞端粒酶活性和>:FL:的表达有明显增强作用,而孕激素对其影响不显著。孕激素作用下,7期细胞比例明显增高,O期及R期细胞比例明显降低:细胞的分裂、增殖受到明显抑制:凋亡细胞比例明显增加。雌激素的作用则相反。结论雌激素能增强子宫内膜癌细胞端粒酶活性和的表达,促进其分裂和增殖,降低凋亡细胞比例,孕激素的作用相反。

关键词: 雌、孕激素, 子宫内膜癌, 端粒酶

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2009年07月14日

【期刊论文】内源性端粒酶抑制基因在大肠癌中的表达及临床研究

朱理玮, 付强, 王鹏志

中华普通外科杂志,2004,19(3):157~159,-0001,():

摘要

目的 分析内源性端粒酶抑制基因PinX1与端粒酶、端粒相关蛋白在大肠癌中的表达,探讨PinX1在大肠癌演进过程中的作用及临床意义。方法 应用半定量逆转录-聚合酶链反应(SQRT-PCR)检测66例大肠癌组织中内源性端粒酶抑制基因PinX1、端粒酶逆转录酶hTERT和端粒结合蛋白TRF1的mRNA表达水平。结果 PinX1表达与大肠癌组织分化、临床分期和淋巴转移之间有显著相关性(F分化=11.40;F分期=4.22;t=-2.81,P≤0.05),与hTERT表达呈负相关(r=-0.553,P<0.01),与TRF1的表达无显著相关。PinX1高表达(B=-8.02,P<0.05)和(或)不伴淋巴结转移(B=-1.69,P<0.05)的患者预后较好。结论 PinX1的下调可能与大肠癌形成、转移过程中端粒酶激活及维持机制有关,但对TRF1的调节还有赖于其他因素。检测PinX1的表达水平对评价大肠癌恶性程度、转移潜能和预后评估均有重要的临床价值。

关键词: 结直肠肿瘤, 端粒酶 抑制基因

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2009年06月10日

【期刊论文】甲状腺癌组织端粒酶逆转录酶和P53基因表达及其临床意义

马清涌, 霍雄伟, 许康铃, 孙学军, 刘浩, 车向明, 盛薇

西安交通大学学报(医学版),2004,25(5):453~455、474,-0001,():

摘要

目的 探讨端粒酶逆转录酶(hTERT)和P53基因与甲状腺癌的发生、发展及预后的关系以及它们的相互关系。方法 应用免疫组织化学sP法检测60例甲状腺癌、10例正常甲状腺组织、10例结节性甲状腺肿及10例甲状腺腺瘤组织中hTERT和P53的表达。结果 hTERT和P53阳性率在甲状腺癌中增高(P<0.05);hTERT与P53日性率在未分化癌、有淋巴结转移或Ⅲ、Ⅳ期病例中增高(P<0.05):hTERT表达与P53表达具有相关性(P<0.05)。结论 hTERTgn P53的过度表达在甲状腺癌的发生发展过程中具有重要作用,P53突变在转录水平上调控hTERT基因的表达,激活端粒酶可能是甲状腺癌发生发展的重要阶段;hTERT和P53在甲状腺癌中表达的变化可用于评估其生物学行为和判断预后。

关键词: 端粒酶逆转录酶(, hTERT), P53, 甲状腺癌, 免疫组织化学

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2009年05月31日

【期刊论文】外源性端粒酶基因对人脐静脉内皮细胞的影响

李旭, 杨玉琮, 陈葳, 程小丽

细胞生物学杂志,2003(6):365-369,-0001,():

摘要

为了观察外源性端粒酶逆转录酶基因(hTERT)在人脐静脉血管内皮细胞(HIJVEc)的表达及对细胞功能和生长的影响。采用逆转录病毒载体转导的方法,将hTERT基因转入HU-VEC。检测基因转导后内皮细胞端粒酶的活性和生物学特性。结果发现hTERT转导后细胞端粒酶表达阳性,未转导的亲代细胞为阴性;转导细胞的体外生存时间延长但未永生化,而内皮细胞黏附分子表达的功能未受影响。

关键词: 端粒酶 血管内皮细胞, 基因转导, 细胞培养

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2009年04月06日

【期刊论文】端粒、端粒酶及其亚单位在鼻咽癌中相互作用的研究

田勇泉, 文忠, 肖健云, 赵素萍, 郭梦和

肿瘤防治研究,2002,29(4):298~300,-0001,():

摘要

目的 探讨端粒、端粒酶及其亚单位在鼻咽癌发病中的作用。方法 采用Southern杂交等分子生物学方法对鼻咽癌端粒、端粒酶及其亚单位进行检测。结果 鼻咽癌平均端粒长度(MTL)为4.5±2.3kb,端粒酶阳性表达为88.0%100%。对照组MTL分别为14.6±2.8Kh和15.8±3.8Kh,癌旁组织端粒酶阳性表达为64.7%,对照组为08.7%。此外,端粒酶活性增高与晚期鼻咽癌及其颈淋巴结转移也有密切关系。结论 端粒及端粒酶与鼻咽癌的发生、发展及转移可能有密切关系。

关键词: 癌, 鼻咽的, 端粒, 端粒酶 端粒酶亚单位

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2009年04月06日

【期刊论文】鼻咽癌HNE1细胞株端粒酶的表达

田勇泉, 文忠, 肖健云, 唐发清, 赵素萍, 李远斌

中国耳鼻咽喉颅底外科杂志,2000,6(2):76~79,-0001,():

摘要

目的 探讨鼻咽癌HNEl1细胞株端粒酶的表达。方法 采用TRAP PCR ELISA法检测人HNEI、白血病HL60、肺癌TUL1、正常骨髓细胞2例、培养的补周血单个棱细胞及人血管平滑肌细胞株中端粒酶的表达。结果 人HNEI,HL60及TUL1细胞株中端粒酶均为阳性表达;其余3种正常对照组细胞全部为阴性。HNEI细胞株热灭活后的端粒酶活性均为阴性,而在100个HNE1细胞中亦能检测到端粒酶活性。结论 端粒酶在鼻咽癌HNE1细株中具有高表达。端粒酶活性测定具有较高的特异性及灵敏度。

关键词: 鼻咽肿瘤/, 酶学端粒酶 HNE1细胞株

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2009年04月06日

【期刊论文】鼻咽癌端粒酶各组分基因表达与端粒酶活性的关系

田勇泉, 王行炜, 肖健云, 赵素萍, 王光平

中华医学杂志,2001,81(9):553~556,-0001,():

摘要

目的 明确鼻咽癌组织端粒酶各组分(hTR、TP1、hTERT)基因表达及其与端粒酶活性关系。方法 采用R%PCR和PCR-ELISA方法分别检测同一标本,包括鼻咽癌(NPC)组织、慢性鼻咽炎(CINE)组织端粒酶各组分基因表达和端粒酶活性。结果 (1)43例NPC组织中,38例(88%)可检测到hTERT mRNA表达;16例CINE组织中均未能检测到hTERT mRNA表达,hTERT mRNA在NPC组织中表达显著高于CINE组织中hTERTmRNA的表达(P<0.05)。(2)43例NPC组织中,39例(90.7%)表达hTR,38例(88%)表达Tn mRNA;16例ONE组织中,14例(87.5%)分别表达hTR和TP1m-V,NA。hTR或tTR mRNA在NPC和CINE组织中表达比较差异无显著意义(P>0.05)。(3)NPC组织端粒酶活性(86%)显著高于CINE组织端粒酶的活性(0%)(P<0.05)。(4)hTERTmRNA表达与端粒酶活性显著相关(P<0.05);而hTR或Pl mRNA的表达与端粒酶活性无关(P>0.05)。(5)端粒酶各组分基因表达均与NPC临床分期和有无颈淋巴结转移无关(P>0.05)。结论 hTR和TPl mRNA在NPC和CINE组织中均高阳性率表达,并与端粒酶活性无关,hTERTmPdNA仅在NPC组织中表达,与端粒酶恬性呈高度一致性,提示hERr在端粒酶活性调节中可能起决定性作用,对hTEti'rmRNA检测可以作为NPC临床诊断指标之一。

关键词: 鼻咽肿瘤, 端粒酶 基因表达

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2009年03月18日

【期刊论文】两种端粒酶逆转录酶启动子真核表达载体的构建

马春红, 刘华, 刘素侠, 王晓燕, 高立芬, 韩丽辉, 朱法良, 张艳, 杨咏梅, 吴伟芳

,-0001,():

摘要

目的:构建hTERT启动子和保留HBV同源序列的缺失点变hTERT启动子(pGL3del445)的真核表达载体,为进一步研究HBV与hTERT启动子的关系奠定实验基础。方法:通过双酶切及PCR方法从pCRTRTP载体上将全长及含有HBV同源序列的hTERT启动子的基因序列克隆到pPLbasic多克隆位点上,构建真核表达载体pGL3TRTP与pGL3Bdel445,将该两质粒与pRLtk共转染不同细胞系,评估其端粒酶启动子活性。结果:经测序证明成功构建了全长及含有HBV同源序列的hTERT启动子的真核表达载体pGL3TRTP和pGL3Bdel445,共转染实验中,证实在永生细胞系中重组子高效表达,在非永生正常细胞中重组子不表达。结论:构建的两种重组表达载体具有端粒酶启动子活性,在不同端粒酶表型的细胞系中其表达具有选择性。

关键词: 端粒酶逆转录酶・启动子・基因表达・基因融合・肝炎病毒, 乙型

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2007年05月14日

【期刊论文】组蛋白去乙酰基酶抑制剂对卵巢癌生长的抑制作用

郑建华, 曲丹妮, 刘斌, 韩旭, 深泽一雄, 稻叶宪之

哈尔滨医科大学学报2005年6月第39卷第3期/JOURNAL OF HARBIN MEDICAL UNIVERSITY Jun., 2005, Vol. 39, No. 3,-0001,():

摘要

目的 探讨组蛋白去乙酰基酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)和丁酸钠(NaB)对卵巢癌细胞株SK-OV-3的抑制作用。方法 分别用ELISA法、流式细胞仪及PT-PCR方法测定分析不同浓度TSA和NaB处理的卵巢癌SK-OV-3细胞的增殖、凋亡、端粒酶活性和人端粒酶RNA(hTERC)及人端粒酶逆转录酶(hTERT)的水平。结果 TSA和NaB对SK-OV-3细胞的增殖均具有抑制作用,并呈剂量依赖性。TSA及NaB诱导SK-OV-3细胞凋亡,凋亡随药物剂量加大而增强。TSA及NaB不抑制端粒酶活性和hTERC及hTERT。结论 TSA及NaB 通过诱导SK-OV-3细胞凋亡,抑制SK-OV-3细胞生长。

关键词: 组蛋白去乙酰基酶抑制剂, 卵巢癌, 凋亡, 端粒酶

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2006年12月13日

【期刊论文】端粒及端粒酶对细胞衰老的影响

李明远, 杨帆

医学综述,2005,11(3):197~199,-0001,():

摘要

暂无

关键词: 端粒, 端粒酶 细胞衰老, 结构, 功能

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2007年05月10日

【期刊论文】胃癌组织中端粒酶活性的研究及其临床意义

王锡山, 王宽, 张岂凡, 陈峰, 张殿忠, 傅松滨

中国肿瘤临床2001年第28卷第6期,-0001,():

摘要

目的:检测胃癌组织及癌旁非癌组织中端粒酶活性的表达,探讨端粒酶活性与各临床病理因素之间的关系。方法:采用PCR-ELISA聚合酶链反应-酶联免疫反应)方法,定量检测68例胃癌组织及40例癌旁非癌组织中端粒酶活性表达。分别按计数和计量资料统计。结果:68例胃癌组织中,60例端粒酶活性表达68.24%),而40例癌旁非癌组织中,6例端粒酶低活性表达(5%),两组差异极显著(P0.01)。胃癌组织中端粒酶活性表达与淋巴结的转移呈正相关(X2=4.87 u=2.01 P<0.05);与组织分化呈负相关女(X2=4.34 u=2.17 P<0.05);与其他临床病理因素统计学无明显相关性。结论:端粒酶的激活与胃癌的发生发展关系密切,端粒酶活性的检测有可能成为临床胃癌诊断的辅助方法,且可能具有一定的指导术式及预后评估的意义。定量检测端粒酶活性可能更有利于揭示其在恶性肿瘤中的角色。

关键词: 胃肿瘤, 端粒酶活性, 聚合酶链反应/酶联免疫反应

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2006年12月13日

【期刊论文】NDGA对HT-29结肠癌细胞生长抑制及对端粒酶表达影响的研究

张源潮, 夏光涛, 武森森, 张尚忠

中国肿瘤生物治疗杂志,2005 Dec;12 (4):262~265,-0001,():

摘要

目的:探讨脂氧合酶抑制剂NDGA在体外对结肠癌HT-29细胞株生长抑制、诱导凋亡,并对端粒酶表达的影响进行研究。方法:应用M,ITr法绘制生长曲线,倒置相差显微镜观察细胞形态变化;扫描电镜观察细胞超微结构变化,观察凋亡小体;RT。PCR检测端粒酶催化活性亚单位(hTERT)表达水平变化。结果:不同浓度NDGA处理HT-29结肠癌细胞,随着药物浓度加大,细胞形态变圆,体积缩小,从瓶壁上逐步脱落,肿瘤细胞生长抑制。应用扫描电镜可见凋亡小体形成。对照组结肠癌HT-29细胞hTERT mRNA呈阳性表达,随着药物浓度上升,hTERT mRNA表达水平逐步下降。结论:NDGA对结肠癌HT-29细胞具有抑制生长、诱导凋亡作用,并且具有剂量依赖效应。端粒酶参与其诱导凋亡的过程。

关键词: 脂氧合酶, NDGA, 结肠癌, 生长抑制, 凋亡, 端粒酶

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2006年08月16日

【期刊论文】反义端粒酶催化亚单位抑制喉癌细胞生长的离体实验研究*

陶泽璋, 陈始明, 肖伯奎, 刘剑锋, 侯炜, 杨占秋

J Clin Otorhinolaryngol (China), Apr 2003, Vol 17, No4,-0001,():

摘要

目的:探讨人端粒酶催化亚单位(hTERT)反义寡核苷酸对人喉癌细胞株Hep-2的生长抑制作用。方法:用脂质体包裹hTERT反义寡核苷酸转染体外培养的Hep-2细胞,分别于转染后24、48、72h用MTT法检测细胞增殖活性、转染后72 h行HE染色及端粒酶活性测定。结果:转染后细胞增殖活性降低;细胞生长密度下降;端粒酶活性受到抑制。结论:hTERT反义寡核苷酸短期内可以降低端粒酶活性、抑制喉癌细胞的生长。

关键词: 端粒酶催化亚单位, 反义寡核苷酸, 喉肿瘤, 基因治疗

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2006年08月16日

【期刊论文】小干扰RNA对喉鳞状细胞癌裸鼠移植瘤增殖细胞核抗原及p53蛋白表达的影响

陶泽璋, 周俊旭△, 周绪红, 肖伯奎, 陈始明, 刘丹

J Clin Otorhinolaryngol (China), Mar 2006, Vol 20, No6,-0001,():

摘要

目的:应用小干扰RNA(siRNA)技术抑制裸鼠喉癌皮下移植瘤人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达,探讨移植瘤中增殖细胞核抗原(PCNA)及p53蛋白表达的变化。方法:根据hTERTcDNA序列构建表达短发夹RNA(shRNA)的、靶向hTERTmRNA的真核表达质粒pshRNA,其载体质粒含荧光素报告基因。建立人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株裸鼠皮下接种模型,将pshRNA转染入荷瘤裸鼠瘤体内,观察肿瘤生长情况。以激光共聚焦显微镜观察质粒在瘤体内的表达;以免疫组织化学SP法检测PCNA及p53蛋白在肿瘤内的表达。结果:所有裸鼠均接种成功,5d后可见皮下肿瘤形成,14d 左右肿瘤直径达5~7mm。pshRNA及空质粒载体转染入瘤体后,共聚焦显微镜下见癌组织中有绿色荧光表达。病理学检查发现:pshRNA组肿瘤生长受到抑制,细胞分裂少见,可见大量癌细胞坏死。与注射生理盐水的对照组比较,转染质粒完毕后7d抑瘤率为76.50%,P<0.01。pshRNA治疗后瘤体内PCNA蛋白表达显著下调(P<0.05),p53蛋白表达显著上调(P<0.05)。结论:靶向hTERTmRNA的shRNA可显著抑制人喉癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能是诱导PCNA 下调,促进p53蛋白表达所致。

关键词: 喉肿瘤, 癌,, 鳞状细胞, 小干扰RNA, 端粒酶逆转录酶, 增殖细胞核抗原, p53蛋白

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2006年08月16日

【期刊论文】抑制端粒酶逆转录酶基因表达对C-myc蛋白表达的影响*

陶泽璋, 池花明, 陈始明, 肖伯奎, 詹汉章

J Clin Otorhinolaryngol (China), Nov 2005, Vol 19, No21,-0001,():

摘要

目的:探讨应用RNA干扰技术抑制Hep-2细胞人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因对C-myc蛋白表达的影响。方法:根据hTERT eDNA序列构建表达hTERT mRNA特异的、含荧光素基因的shRNA真核表达质粒pshRNA1,随机选取一段与人类基因无同源性的碱基序列构建表达shRNA 的含荧光素基因的对照质粒pshRNA2,采用METAFECTENE作为转染试剂。分别以质粒pshRNA1、pshRNA2及空白培养液处理喉癌Hew2细胞。应用RT-PCR法检测hTERT基因的表达,Western Blot法检测hTERT和C-myc蛋白表达水平。结果:质粒pshRNA1转染组hTERT mRNA及蛋白表达水平显著低于其他处理组及空白对照组(P<O.05);质粒pshRNA1转染组C-myc蛋白表达水平显著高于其他处理组及空白对照组(P<O.01)。结论:RNA 干扰抑制人端粒酶逆转录酶活性使喉癌Hep-2细胞C-myc蛋白表达升高,其确切的机制有待进一步研究。

关键词: 端粒酶逆转录酶, 基因表达, 喉肿瘤, C-myc蛋白

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2005年01月17日

【期刊论文】端粒酶检测应用于乳腺癌术前诊断的价值

孙靖中, 李鹏宇, 马榕, 高海东

中华外科杂志,2001,39(7)517~519,-0001,():

摘要

目的探讨端粒酶活性检测在临床的应用价值。方法在118例乳腺肿块患者中,分别比较了术前细针穿刺端粒酶活性检测和细胞学检查两种检测方法在乳腺癌中的诊断率,以及两种方法联合诊断乳腺癌诊断率。并对乳腺肿瘤端粒酶活性表达与乳腺肿瘤生物学特性的相关性进行了研究。结果端粒酶检测同细胞学检查相比灵敏度显著高于后者(85.4%vs. 67.1%, P<0.05);而特异性(72.2%vs. 86.1%)约登指数(57.6%vs.53.2%)、阳性预测值87.5%vs. 91.7%)异均无显著性意义。两种方法联合诊断的阳性预测值为100%,著高于阳性预测值较高的细胞学检查(P<0.05)。在乳腺癌中,端粒酶活性表达与雌激素受体、孕激素受体表达显著相关(x2=5.03,P<0.05),与患者年龄(x2=0.65)、肿瘤直径(x2=0.65)、腋淋巴结转移情况(x2=0.16)无显著相关性(P<0.05),在乳腺良性病变中,乳腺纤维腺瘤和乳腺病的端粒酶活性表达率显著高于其他病变(x2=3.94,P<0.05)。结论细针穿刺端粒酶活性检测在乳腺癌术前诊断中具有较大应用价值。

关键词: 乳腺肿瘤, 活组织检查, 针吸, 细胞诊断学, 端粒酶

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2009年06月09日

【期刊论文】滋养细胞疾病和妊娠绒毛组织中端粒酶的表达

郑鹏生, 张忠明, 岩坂刚, 司履生, 杉森甫, 张蕴璟

西安医科大学学报,2000,4(2):1-3,-0001,():

摘要

目的 明确妊娠滋养细胞疾病和正常绒毛组织中的端粒酶表达状况,探索端粒酶活化在滋养细胞肿瘤形成中的作用。方法 应用以聚合酶链反应为基础的端粒酶测定方法(TRAP),对不同临床类型妊娠滋养细胞疾病及不同发育阶段正常妊娠绒毛组织共61例的端粒酶活性进行检测。结果 绒毛膜癌及侵蚀性葡萄胎36.4%(4/11)端粒酶阳性,葡萄胎26.3%(5/19)阳性;早孕60d以内绒毛全部(10/10)阳性,此期以后的胎盘组织(21/21)阴性。结论 端粒酶在妊娠早期以后表达受到抑制,其活化在滋养细胞肿瘤形成中可能起重要作用;其测定对此类疾病的诊断、预后和疗效评定有潜在价值。

关键词: 端粒酶 滋养细胞疾病, 妊娠绒毛, 肿瘤形成

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2005年01月19日

【期刊论文】大肠癌端粒酶测定及其临床生物学意义研究的初步报告

万德森, 刘宗石, 吴珊, 潘志忠, 周志伟, 张桥, 陈雯

《癌症》,1998,17(1):35~37,-0001,():

摘要

目的:为了探索端粒酶(TLMA)与大肠癌的关系。方法:采用Kim等建立的端粒重复序列扩增法(TRAP)测定32例大肠癌组织和正常大肠组织TLMA活性。结果:32例大肠癌组织TLMA强阳性11例,弱阳性6例,阴性15例,阳性率53.1%。32例正常大肠组织TLMA弱阳性2例(6.3%),余均为阴性。结论:大肠癌组织TLMA活性检测阳性率高,与性别、年龄、部位、病理分类、侵袭范围、分期等无明显关系,提示有可能成为早期发现指标之一。

关键词: 大肠肿瘤,, 端粒酶,, 大肠肿瘤/, 诊断

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2005年11月09日

【期刊论文】hTERT1658-2070在大肠杆菌中的克隆及表达

金洁, TONG Yin, JIN Jie, LOU Yinjun

肿瘤,2002,4(22):276~278,-0001,():

摘要

目的用基因工程的方法在大肠杆菌中表达人端粒酶逆转录酶(hTERT)部分活性片段。方法PCR扩增hTERT cD-NA 1658-2070片段,将其克隆至表达载体pGEX-5x-3上,转化大肠杆菌TGl,获得hTERT蛋白片段表达。并经DNA测序及Westem blot验证表达蛋白。结果表达出的蛋白为GST-hTERT融合蛋白,分子量为38.8kD。经DNA测序及Westem blot 证实表达蛋白即为所需蛋白。结论在大肠杆菌中克隆并表达了hTERT部分片段。

关键词: 端粒酶逆转录酶, 基因克隆, 蛋白表达

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