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2009年10月21日

【期刊论文】碱性成纤维细胞生长因子在低氧大鼠肺动脉的表达及其对肺动脉张力的影响*

冉丕鑫, 聂胜型, 陈颜芳, 陈顺存

中国病理生理杂志,2000,16(6):549~551,-0001,():

摘要

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子( bFCF)在低氧性肺动脉高压发病中的可能作用。方法:应用逆转最多聚酶联反应(RT - PCR}技术观察低氧犬鼠肺动脉bFCF的表达水平,并理察bFCF对高体大鼠肺动脉环收缩功能的影响。结果:①低氧时,肺动脉bFCF mRNA表达明显增加,bFCF与B- actin的RT - PCR反应产物的放射强度(coums- min -1)之比由对照的0. 5074上升到0.9182(低氧1周)和0.7812(低氧2周)(P均<0.05).②hFCF能收缩离体大鼠呻血管环,收缩强度与剂量相关(r =0.695.P<0.05),其ECso为2.62×10 -7mol/L,结论:提示bFCF可能参与低氧性肺动脉高压的发病过程。

关键词: 维细胞生长因子 碱性, 肺动脉, 大鼠, 低氧

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2009年10月21日

【期刊论文】碱性成纤维细胞生长因子对小鼠脾脏细胞凋亡的抑制作用*

洪岸, 许艳丽, 李校坤, 林剑, 刘树铮

中国病理生理杂志,2000,16(2):131~134,-0001,():

摘要

目的和方法:X射线照射结合无血清培养诱导小鼠脾细胞凋亡,采用流式细胞术定量分析碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对睥细胞凋亡的抑制作用,井采用淋巴细胞转化试验[3H]-TdR掺人法检测bFGF对脾细胞的增殖效应。结果:小鼠经过不同剂量X射线照射、脾细胞再经过不同时程无血清培养,都出现了典型的亚二倍体Ap峰,1μg/mL和2μg/mL的bFCF均可降低Ap峰中的细胞数(细胞凋亡率)。并能显著增强睥细胞的增殖反应能力。结论:bFCF可抑制外周免疫器官脾细胞的凋亡、井促进其增殖。增强机体免疫力。

关键词: 成纤维细胞生长因子、碱性, 脾, 细胞, 小鼠

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2009年10月21日

【期刊论文】大肠杆菌可溶性表达人碱性纤维细胞生长因子的研究

洪岸, 孙晋华, 洪岸*, 张玲, 孙奋勇, 宋照熙

微生物学报,2003,43(4):448~452,-0001,():

摘要

包涵体的形成与外源基因在大肠杆菌中的表达量高度相关,在适当的范围内,降低hbFCF在表达宿主BL21(DE3)plysS中的表达,成为实现高可溶性表达的关键。在不改变氨基酸序列的条件下,对hbFCF高表达菌株突变重组子起始密码ATC下游前3个密码子的摇摆碱基进行随机回复突变,共有7种组合,合成引物PCR扩增后,克隆至表达载体pET-3e,将重组子转导BL21(DE3)plysS后,IPTC诱导表达,发现其中1株有较高可溶性和活性的菌株。可见部分降低外源蛋白的表达量可以避免与减少包涵体的形成。

关键词: 可溶性表达,, 包涵体,, 人碱性成纤维细胞生长因子,, 大肠杆菌,, 回复突变

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2009年07月14日

【期刊论文】大鼠血管平滑肌细胞中bFGF及其受体FGFR-1的基因表达

陈剑秋, 孙晋津

天津医科大学学报, 2005,11(1):8~10(下转第l4页),-0001,():

摘要

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其受体FGFR-1在大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)的表达情况。方法:建立大鼠血管平滑肌细胞原代培养并鉴定;使用原位杂交检测VSMCs中bFGF及其受体FGFR-l的mRNA表达;用免疫组织化学和Western Blot技术鉴定bFGF蛋白表达情况。结果:通过光镜和免疫组织化学技术从细胞形态和结构上使VSMCs得到鉴定;原位杂交证实大鼠VSMCs表达bFGF及其受体FGFR-l的mRNA;免疫组织化学表明VSMCs的胞核和胞浆中有bFGF蛋白表达,Western Blot显示bFGF有18KDa、22KDa、22.5KDa 3种异构体形式。结论:大鼠血管平滑肌细胞表达bFGF及其受体FGFR-1 mRNA,bFGF有多种异构体形式并分布在VSMCs的胞核和胞浆中。

关键词: 碱性成纤维细胞生长因子 受体, 血管平滑肌细胞, 大鼠

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2009年03月27日

【期刊论文】外源性碱性成纤维细胞生长因子对缺血大鼠脑内源性碱性成纤维细胞生长因子表达的影响

叶诸榕, 陆锦标, 刘颖, 施建英

中国神经科学杂志,2004,20(4):290~294,-0001,():

摘要

目的 研究外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)缩小局灶性脑缺血梗死灶的机制。方法 用免疫组化ABC法检测在局灶性脑缺血模型上给予生理盐水或bFGF后早期生长反应蛋白-1(Egr-1),bFGF,碱性成纤维细胞生长因子受体(bFGFR)的动态表达。结果给药组在3h-3d各时间段梗死灶均有不同程度的缩小。对照组和给药组Egr-1表达均表现为3~6h的增强过程,但给药组更强于对照组。对照组12h见有bFGF表达增强,而bFGFR表达3h到达高峰,6h起下降,12h时bFGFR的表达已恢复至正常水平(出现了配体和受体表达时相上不匹配)。给药组bFGF表达提前且增强,3h即见有bFGF表达增强,6h时出现第一峰,从而与bFGFR 3~6h的表达增强过程相吻合。结论 外源性bFGF能缩小梗死灶,该神经保护作用是通过Egr-1蛋白高表达使内源性bFGF的表达增高且提前,从而与bFCFR的表达增强过程重叠而实现的。

关键词: 脑缺血, 碱性成纤维细胞生长因子 碱性成纤维细胞生长因子受体

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2009年03月27日

【期刊论文】bFGF, bFGFR及Egr-1基因蛋白在大鼠局灶性脑缺血后的表达

叶诸榕, 刘颖, 陆锦标, 朱建辉, 张秀荣, 赵仲华

中国神经科学杂志,2002,18(3):602~606,-0001,():

摘要

观察持续性局灶性脑缺血(permanent middle cerebral artery oeellasion, pMCAO)损伤后表达碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblas growth factor, bFGF)的细胞种类、时相与不同细胞之间的相互影响,并探讨Egr-1基因蛋白对bFGF表达的影响。结果表明:在持续性局灶性脑缺血后,缺血梗死灶周边区免疫组化结果显示bFGF表达出现双相增强。缺血1h缺血边缘区主要在星形胶质细胞(Astrocyte, As)中bFcF出现一过性增强,并见细胞外基质中出现bFGF点状着色。缺血6h~1d时bFCF染色再次增强,神经元及各类胶质细胞中的表达均有增强。但是经Western-blot定量测定发现脑组织bFGF含量仅在缺血后6h~1d时出现增强。缺血1h时,bFGF可能经缺血细胞受损的细胞膜到达细胞外,与细胞外硫酸肝素或相关分子结合,内化进入缺血边缘区细胞,从而造成bFGF免疫组化染色一过性增强。第二次增强可能是缺血损伤刺激及内化的bFGF诱导的蛋白合成的增加。缺血2~6h bFGFR在神经元及各类胶质细胞中的表达均增强,主要位于缺血区的边缘。由于bFGFR表达时程早于bFGF转录合成增加,因此限制了内源性bFGF发挥保护缺血损伤神经元的作用,这使得外源应用bFGF成为必要。Egr-1基因蛋白的表达在缺血损伤后1~6h增强,其表达增高的时相早于bFGF蛋白转录合成的增加,并且因为其能够促进bWGF启动子的活性,因而可能在bFGF自分泌机制中发挥重要作用。

关键词: 碱性成纤维细胞生长因子(, bFGF), 碱性成纤维细胞生长因子受体(, bFCFR), 早期生长反应蛋白-1(, Egr-1), 脑缺血

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2009年03月27日

【期刊论文】大鼠持续性灶性脑梗死区血脑屏障改变对125I-碱性成纤维细胞生长因子通透的影响*

叶诸榕, 刘颖, 陆锦标

复旦学报(医学版),2002,29(2):79~83,-0001,():

摘要

目的 系统观察大鼠持续性局灶性脑缺血(permanent oriddle cerebral artery occlusion, pMCAO)后0.5h到14d血脑屏障(blood-brain bamier, BBB)的损伤及对碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)通透的影响。方法 采用抗BBB抗体的免疫组化方法显示pMCAO后不同时间BBB结构的改变。采用125I标记bFGF示踪法显示静脉注射125I-bFGF后脑组织7射线计数变化表示bFGF通透性的变化。结果 在动脉桂塞后O.5h抗BBB免疫组化染色显示毛细血管壁的结构已发生改变,即使到了14d时大量新生毛细血管出现在梗死区周围,但是抗BBB抗体免疫组化仍为阴性,表明此时血管壁尚未达到完全修复。从梗死后2h开始125I-bFGF通透有明显的增加,持续到梗死后14d,125I-bFGF主要出现在基底节及梗死累及的岛叶和顶叶皮层。结论脑缺血后外周静脉应用bFGF是可行的,尽早应用bFGF对保护神经元是至关重要的。

关键词: 125-I碱性成纤维细胞生长因子 持续性局灶性脑缺血, 血脑屏障

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2006年11月02日

【期刊论文】沙利度胺对难治、复发多发性骨髓瘤患者骨髓微环境的影响

李娟, 罗绍凯, 洪文德, 周振海, 邹外一

Chinese Journal of Cancer, 2003, 22 (4): 346-349,-0001,():

摘要

背景与目的:越来越多的研究表明,骨髓瘤细胞的生长、生存以及耐药的产生与骨髓微环境密切相关。沙利度胺(thalidomide,Thai)是作用于骨髓微环境的药物之一,我们通过观察沙利度胺对难治、复发多发眭骨髓瘤(mulnDleⅡⅣe10ma.MM)患者骨髓微环境的影响,进一步了解Thai的作用机制。方法:用流式细胞仪检测沙利度胺治疗前后难治、复发的MM患者骨髓基质细胞膜表面的细胞间粘附分子fcAM-1)和血管细胞粘附分子(vcAM-1)的表达强度,半定量RT-PCR法检测骨髓基质细胞IL-1BmRNA、IL-6mRNA、TNF-dmRNA的表达,采用酶联免疫吸附法ELISAj删定其血清VEGF、bFGF水平。结果:难治、复发MM患者骨髓基质细胞(BMSC)膜表面ICAM-1、VCAM-1平均荧光强度分别为13.28±4.26、10.35±2.47,用Thai治疗有效的难治、复发MM患者BMsc膜表面ICAM-1、VCAM-1平均荧光强度分别为4.29±0.98、3.54±0.62,明显受抑制妒<0.05)。难治、复发MM患者BMSCIL-1BmRNA、IL-6mRNA、TNF-dmRNA与B-actin的比值分别为1.83±0.64、24.52±11.46、3.42±1.83,用Thal后有效的难治、复发MM患者BMSCIL-1Bn,RNA、IL-6mRNA、TNF-dmRNA与13-actin的比值分别为0.58±0.11、13.47±14.31、1.25±0.76,明显受抑制。P<0.05。而治疗无效的难治、复发MM患者BMSC膜表面ICAM-1、VCAM-1平均荧光强度和IL-1BmRNA、IL-6mRNA、TNF-dmRNA与13-actin的比值同治疗前的比较,其差异无显著眭妒均>0.05)。难治、复发MM患者血清VEGF、bFGF水平分别为150.26±19.33)ng/L、Q3.78±13.63)ng/L,用Thai治疗后有效及无效者血清VEGF、bFGF水平均低于治疗前妒<0.005)。结论:沙利度胺能抑制新生血管的形成,并可阻断骨髓瘤细胞与骨髓基质细胞的结合。

关键词: 多发眭骨髓瘤, 沙利度胺, 骨髓基质细胞, 细胞间粘附分子, 血管细胞粘附分子, 血管内皮生长因子, 碱眭成纤维细胞生长因子

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2006年09月09日

【期刊论文】肺栓塞后栓塞区肺组织病理学和碱性成纤维细胞生长因子水平的变化及意义

郭佑民, 朱力, 杨健, 王建国, 汪军峰, 陈敏

中华结核和呼吸杂志,2004,27(11):723~726,-0001,():

摘要

目的 了解肺动脉栓塞后机体修复过程中肺组织内小血管密度及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的变化情况。方法 选取8只健康犬,通过向肺动脉内注射明胶海绵建立周围性肺栓塞模型。模型建立后第1、7、14和28天分别处死2只犬,取栓塞侧肺组织和非栓塞侧肺组织进行苏木精2伊红(HE)染色和免疫组化染色,观察上述不同时间栓塞侧肺组织的病理学变化、bFGF的表达情况以及小血管密度的改变,并与非栓塞侧肺组织进行对比。结果 (1)肺栓塞后第1天,栓塞区肺泡腔和肺泡间隔可见液体和细胞渗出;栓塞后第7天,渗出的液体和细胞进一步增加;栓塞后第14天渗出的液体和细胞大部分已被吸收;栓塞后第28天,渗出的液体和细胞完全被吸收,组织恢复正常。(2)栓塞后第1、7、14天,栓塞区bFGF的表达水平与对侧非栓塞区相比显著提高(χ2分别为441335、71.91、84.460, P 均<0.01),栓塞后第28天两者相比差异无显著性(χ2=2.961,P>0.05)。(3)栓塞后第1天,栓塞区肺组织内小血管密度为(4156±0150)根/视野,与对侧非栓塞区的(4.11±0.76)相比差异无显著性(P>0.05);栓塞后第7、14、28 天,栓塞区肺组织内小血管密度[分别为(10117±1.08)、(10.54±0.93)、(1.147±1.11) 根/ 视野]较对侧非栓塞区[分别为(6.17±0.90)、(7.55±1.19)、(7.03±1.24)根/视野]显著增加(P<0.05)。结论 外周肺动脉栓塞后,其栓塞区的组织病理学、bFGF的表达水平和小血管密度随着时间的推移而改变。bFGF 表达水平早期升高,但随着时间延长呈现下降趋势;小血管密度于栓塞后第7 天开始显著增加;肺内渗出性改变于栓塞后第14天大部分被吸收。这些改变有利于肺内侧支循环的形成和液体、细胞成分的吸收,对防止肺梗死的发生有积极作用。

关键词: 肺栓塞, 模型,, 动物, 成纤维细胞生长因子,, 碱性, 修复An

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2005年09月28日

【期刊论文】基因治疗促进移植气管血运重建的实验研究

周刚, 张启旭, 王春梅, 周爱儒

中华外科杂志,2004,42(10):622~626,-0001,():

摘要

目的了解基因治疗对移植气管早期血运重建及延长移植气管长度的作用。方法直流电脉冲介导重组质粒pcDNA311Pmyc2His(2)C2bFGF 和pCD22VEGF121分别转染兔胸骨乳突肌肉瓣,于术后3、7、14、21、28d应用组织化学和免疫组织化学检查碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血管内皮生长因子(VEGF121)外源基因蛋白在该肌肉瓣的表达及其促血管生成的生物学效应;分别以bFGF基因和VEGF121基因转染单侧胸骨乳突肌肉瓣和双侧胸骨舌骨肌肉瓣,用转基因肌肉瓣包裹并结合基因缝线方法对兔颈部10个环自体移植气管进行基因治疗,观察对其成活的影响。结果pcDNA3-1/myc-His(-)C-bFGF 和pCD2-VEGF121重组质粒分别转染在体肌瓣,获得bFGF和VEGF121外源基因蛋白高水平表达。转基因肌肉产生血管增生,血流增强的生物学效应。转基因肌肉瓣包裹并结合基因缝线方法对移植气管进行基因治疗,使兔颈部10个环移植气管血运建立并长期存活,与对照组相比差异有显著性意义(P<0101)。bFGF,VEGF121两基因治疗组差异无显著性意义。结论颈部肌肉瓣包裹结合一次性基因治疗能够促进移植气管早期血运建立,延长移植气管长度。

关键词: 基因, 治疗, 气管, 组织移植, 成纤维细胞生长因子 碱性, 内皮生长因子

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2005年09月28日

【期刊论文】碱性成纤维细胞生长因子真核表达载体的构建及表达

周刚, 张启旭, 陆佳韵, 刘芝华

中国修复重建外科杂志,2004,18(5):435~439,-0001,():

摘要

目的构建人碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast grow th facto r,bFGF)真核表达质粒,研究其在体内外的表达。方法通过基因克隆技术,构建并大量制备pcDNA 3.1/myc-His(-)C-bFGF真核表达体系,RT-PCR和细胞免疫组织化学方法检测体外瞬时表达情况;直流电脉冲介导重组质粒pcDNA 3.1/myc-His(-)C-bFGF和pCD2-血管内皮细胞生长因子121(vascularendo thelial growth factor, VEGF121)在兔颈部肌肉瓣内转移并表达, 测定其促血管生成的生物学效应。结果构建的pcDNA3.1/myc-His(-)C-bFGF真核表达体系成功转染体外培养HeLa细胞,目的基因在mRNA水平和蛋白水平均有表达。pcDNA3.1/myc-His(-)C-bFGF和pCD2-VEGF121重组质粒分别转染在体肌瓣,获得外源基因高水平表达。转基因肌肉发生血管增生、血流增强的生物学效应。结论构建了人bFGF真核表达质粒,并可在体内外顺利表达,为进一步组织移植或组织工程基因治疗研究奠定了基础。

关键词: 碱性成纤维细胞生长因子 基因克隆, 基因表达

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2005年03月08日

【期刊论文】酸性成纤维细胞生长因子研究进展*

夏玉先, 余瑛, 蔡绍皙, Weririch HG

中国药理学通报,2002,18(2):125~128,-0001,():

摘要

酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)是一种重要的生长因子,其生物学效应广泛,具有潜在的临床应用价值。文章概述了aFGF及其受体的结构与功能关系的研究进展,提出了aFGF临床使用时可能存在的问题。

关键词: 酸性成纤维细胞生长因子 受体, 结构与功能

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