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2011年05月27日

【期刊论文】重型病毒性肝炎患者预后模型的临床应用分析

丁惠国, 单晶, 徐瑞平, 丁小君, 王慧芬, 林伟, 马兵, 董培玲, 张斌丁, 惠国

中国危重病急救医学,2005,17(10):586~588,-0001,():

摘要

目的评价重型肝炎患者预后评分模型(MSLD)的临床应用价值。方法应用我们已建立的MSLD,采用队列研究方法前瞻性分析103例重型肝炎患者的生存时间,其中慢性者85例,亚急性者8例,急性者10例,随访终点为6个月。根据受试者工作特征曲线(ROC)确定MSLD最佳危险值;应用Kaplan-Meier进行统计分析,预测患者2周、4周、3个月和6个月的生存率。结果MSLD分数值-5为最佳危险值;MSLD总分≤4分(A组)和MSLD总分≥5分B组)两组患者的生存曲线有明显差异(近期及远期危险性差异均有显著性(P均<0.000)。经内科治疗2周后,总分无变化或增加者的2周和4周生存率分别为37.9%和3.5%;总分降低1分者的2周、4周和3个月生存率分别为61.5%、15.4%和5.8%;总分降低2分以上者的2周、4周、3个月和6个月的生存率分别为95.0%、90.0%、63.9%和52.4%P<0.001)。结论MSLD对预测重型肝炎患者近期预后(6个月内)具有重要意义,并可作为预测内科治疗重型肝炎疗效的指标之一。

关键词: 病毒性肝炎,, 重型, 生存分析, 评分模型

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2010年12月16日

【期刊论文】丙型肝炎病毒重组蛋白的免疫保护性

魏林, 李广学, 曾瑞红, 凌世淦, 张贺秋, 姚智燕魏林

中华传染病杂志,2010,28(1):19~23,-0001,():

摘要

目的 研究两种HCV重组蛋白联合免疫小鼠所诱导的免疫应答及免疫保护作用。方法 用两种重组蛋白HCV-T和HCV-第一高变区多片段重组融合蛋白(F4HVR1)分别与联合免疫BALB/e小鼠,共免疫3次,用ELISA方法测定血清特异性抗体;末次免疫后14 d处死5只小鼠,分离小鼠脾细胞。体外检测IFN-7、IL-4和行CTL杀伤实验;剩余的小鼠背部皮下注射1.0×10。个SP2/0-NS3细胞,观察其保护作用。组间均数差异采用LSD-t检验。结果 与PBS组相比,用HCV-T和HCV-F4HVRl联合免疫诱导了针对HCV-F4HVRl的特异性的IgG(t-3.815,3.762,P<0.05)、高水平的HCV-NS3特异性的CTL效应(t=3.971,P<0.05)和高水平的IL-4(t=3.813,3.426,3.671,P<O.05)和IFN-7(t-3.512,3.417,P<0.05)的分泌。结论 用HCv.T和HCV-F4HVRl联合免疫小鼠可诱导出高水平的特异性体液免疫和细胞免疫,能有效地预防SP2/O-NS3细胞的攻击。

关键词: 肝炎病毒属, 肝炎,, 丙型, 病毒性肝炎疫苗, 抗体生成, 免疫。细胞, 重组蛋白质类

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2010年12月16日

【期刊论文】丙型肝炎病毒重组联合疫苗的实验研究①

魏林, 曾瑞红, 李广学③, 张贺秋⑦, 凌世淦②, 姚智燕, 修冰水②, 贺峰②, 杨建岭

中国免疫学杂志,2009,25(8):687~691,-0001,():

摘要

目的:研究一种基于丙型肝炎病毒(HCV)多个抗原的重组联合疫苗。方法:将三种Hcv重组抗原F4HVRI、HCV-T和HCV-E1混合,联合免疫BALB/c小鼠,用ELISA检测血清抗体滴度;第三次免疫后10天杀死一半小鼠,取脾细胞,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测细胞毒性T淋巴细胞(CIL)活性;用EHSPOT法检测分泌IFN-y和IL-4的细胞;用流式细胞仪检测CD4+T和CD8+T细胞;最后一次免疫后2周,在免疫小鼠的背部皮下注射1.0×106个SP2/0-NS3细胞,考察联合免疫对小鼠的保护作用。结果:F4HVRI+HcV-T+HCV-E1联合免疫诱导了高滴度的HCV-E1和F4HVRI特异性的IgG抗体以及高水平的CTL活性;与单独免疫相比。联合免疫诱导了平衡的Th1/Th2免疫应答;而且联合免疫后能显著预防SP2/0-NS3对小鼠的攻击。结论:F4HVRI+HCV-T+HCV-E1诱导了保护性的体液免疫和细胞免疫应答,有望开发为一种有效的重组HCV联合疫苗。

关键词: 丙型肝炎病毒, 联合疫苗, 体液免疫, 细胞免疫, 保护作用

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2010年12月16日

【期刊论文】丙型肝炎病毒重组蛋白抗原联合免疫的免疫原性和保护性研究

魏林, 曾瑞红, 李广学, 凌世淦, 张贺秋, 姚智燕, 杨建岭, 贺峰, 黄睿, 刘艳坤

中华微生物学和免疫学杂志,2009,29(7):642~645,-0001,():

摘要

目的 研究两个丙型肝炎病毒(HCV)多表位重组抗原联合免疫后诱导的细胞免疫和体液免疫应答,以及对小鼠的保护作用。方法 用两个多表位抗原HCV-T和HCV-E1联合免疫BALB/e小鼠3次,ELISA检测血清中抗体IgG、IgCl和IgG2a滴度;最后一次免疫后10d杀死一半小鼠,取脾细胞,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性;ELISPOT法检测分泌IFN-y和IL-4的细胞;最后一次免疫后2周,在免疫小鼠的背部皮下注射106个SP2/0-NS3细胞,考察联合免疫对小鼠的保护作用;另取BALII/e小鼠,先在背部皮下注射106个SP2/0-NS3细胞,7d后开始联合免疫,免疫3次,考察免疫治疗作用。结果 用HCV-T+HCV-E1联合免疫诱导了高滴度的HCV-E1特异性的IgG、IgG1和IgG2a抗体以及高水平的CTL活性;与单独免疫相比,联合免疫产生的分泌IFN-y和IL-4的细胞数量有协同作用;而且联合免疫能有效预防和治疗SP2/0-NS3对小鼠的攻击。结论 HCV-T+I-ICV—E1联合免疫诱导了保护性的体液免疫和细胞免疫应答,有望进一步开发为一种有效的重组IICV疫苗。

关键词: 丙型肝炎病毒, 多表位抗原, 联合免疫, 免疫原性

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2010年12月15日

【期刊论文】决策树模型在慢性乙型肝炎临床诊断中的应用

刘殿武, 王剑, 孔繁增

中华流行病杂志,2008,29(3):309~310,-0001,():

摘要

暂无

关键词: 乙型肝炎 决策树模型, 临床诊断

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2010年12月15日

【期刊论文】树模型在慢性乙肝与肝硬化和肝癌临床诊断中的应用

刘殿武, 王剑, 曹国玉, 李伟勇, 李金奎

第四军医大学学报,2008,29(12):1135~1137,-0001,():

摘要

目的:利用决策树模型挖掘常见的临床检验资料信息,进一步提高慢性乙型肝炎及相关疾病的确诊率。方法:将临床收集的102例慢性乙肝患者和80例肝癌及肝硬化患者常见的17种信息和临床检测结果综合分析,利用决策树卡方自动交互探测(CHAID)和分类与回归树(CRT)两种算法构建预测模型,并采用正确预测率和交互印证对其进行风险评估。结果:进入CHAID和CRT两种算法模型的主要变量是年龄和胆红素指标及职业等,两模型预测慢性乙型和肝炎肝硬化及肝癌的总体准确率分别为71.4%和74.2%。结论:决策树模型在数据挖掘,资料再利用方面效果良好。

关键词: 肝炎,, 乙型, 决策树, 诊断

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2010年12月08日

【期刊论文】乙型肝炎病毒聚合酶在重组腺病毒系统中的表达

钟江

,-0001,():

摘要

乙型肝炎是一个世蚧范围的传染病,在我国为害尤其严重。乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)作为引起人类急性、慢性肝炎的主要病原体之一,属嗜肝DNA病毒科。虽然其基因组仅有3.2kb,但基复制和致病机理过程复杂,突变众多,目前还没有根治的方法。因此,发展抗乙肝药物的研究显得尤为必要。乙肝病毒聚合酶(HBV polymerase)是病毒复制的关键酶,具有TP(蛋白引物)、间隔区(删除大部分后不影响功能)、RT(逆转录酶)、RnaseH等多个功能区域,是抗乙肝药物作用的理想位点。乙肝聚合酶很难在感染细胞中分离纯化,也一直很难在哺乳动物细胞中大量重组表达,严重阻碍了抗乙肝药物和乙肝疫苗的研究。本研究选取高复制型的临床分离株HBV-56,克隆拼接了全长的多聚酶基因,并将基插入穿梭质粒,通过重组穿梭质粒在细菌细胞内与带有腺病毒基因组的质粒发生同源重组,得到带有HBV多聚酶的重组腺病毒质粒。该质粒线性化后转染人胚肾细胞转化细胞系293,成功地得了重组病毒。用该重组病毒感染293细胞系,SDS-PAGE检测,发现了新的蛋白的合成,该蛋白质的分子量与文献报道的乙肝聚合酶的分子量一致,用PCR的方法,初步证明了所表达的乙肝聚合酶具有逆转录酶的活性,合成了对应于HBV聚合酶基因的DNA分子。这一结果将促进对于抗乙肝药物研究和对乙肝病毒复制机制的认识。

关键词: 乙型肝炎病毒聚合酶, 重组腺病毒, 半定量PCR, 逆转录酶

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2009年11月20日

【期刊论文】肝衰竭/重型肝炎的研究进展

王宇明, 陈耀凯

临床内科杂志,2002,19(4):247~250,-0001,():

摘要

本文对肝衰竭/重型肝炎的新进展进行综述。在定义上倾向于将急性肝衰竭与慢性肝衰竭及脑病型与非脑病型分开;对新近提出的终末期肝病模型(MELD)预后判断公式进行评价;应用拉米夫定(LAM)治疗伴乙型肝炎病毒(HBV)复制的肝衰竭有效,但肝炎肝硬化患者因不当停药所致肝功能不全患者有所增多;LAM加乙型肝炎病毒免疫球蛋白(HBIg)预防肝移植后HBV感染有效,但其逃逸株有增多趋势;当前国际上将肝性脑病(HE)分为三种类型,A型为急性肝衰竭相关(HEALFA-HE),B型为不伴有内在肝病的门体分流,C型指在慢性肝病/肝硬化基础上发生的HE。

关键词: 肝衰竭, 重型肝炎 肝性脑病

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2009年11月03日

【期刊论文】RNA干扰介导对乙型肝炎病毒复制的抑制作用

黄爱龙, 唐霓①, 张秉强①, 闰歌①, 蒲丹①, 高小玲①, Tong-Chuan He②, 黄爱龙①*

科学通报,2004,49(12):1145~1150,-0001,():

摘要

构建针对乙型肝炎病毒(HBV)核心区或表面抗原编码区的siRNA表达载体pSI-C和pSI-S,在体外HBV复制细胞模型中观察对HBV复制和表达的影响。将pSI-C,pSI-S与1.3倍HBV真核表达质粒pHBV共转染HepG2细胞,分别在转染后24,48和72 h,观察pSI-C和pSI-S对细胞上清和胞内病毒抗原表达的影响,并用分子杂交方法从病毒复制、转录和翻译水平检测目的基因的表达情况,实验结果表明,pSI-C及pSI-S能明显抑制细胞内HBsAg和HBcAg的合成,呈序列特异性和剂量依赖性的特点,而对照组siRNA无抑制作用。pSI-C比pSI-S抑制作用更强,转染后第2天对HBsAg和HBeAg押制率达高峰,分别为92%和85%。Southern和Northern杂交结果表明,HBV siRNA能降低目的基因转录和病毒复制中间体的表达水平,提示针对乙型肝炎病毒核心区和表面抗原编码区的siRNA能有效抑制HBVRNA分子转录和病毒复制,最终降低病毒抗原表达,这为运用RNAi技术进行HBV基因治疗提供了新的思路。

关键词: 抗病毒治疗 乙型肝炎病毒 RNA干扰 病毒复制 基因治疗

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2009年11月03日

【期刊论文】应用RNA干扰治疗小鼠急性乙型肝炎病毒感染

黄爱龙, 吴莹, 唐霓, 张秉强, 卢年芳

中华医学杂志,2005,85(9):630~634,-0001,():

摘要

目的建立小鼠急性乙型肝炎病毒感染的动物模型,在此基础上观察小干扰RNA(siRNA)对HBV复制和表达的影响。方法通过尾静脉注射1.3倍的HBV真核表达质粒pHBVl.3建立小鼠急性乙型肝炎感染模型,再将其与针对乙型肝炎病毒核心区的siRNA表达载体(pSI-C)共注射,于注射后第6天取血测血清HBsAg(ELISA),做肝组织HBcAg免疫组化,通过RT-PCR检测肝组织HBV C区mRNA转录子的水平。同时设立PBS对照组、无关干扰组与突变干扰组。结果转染后第6天血清HBSAg在pHBVl.3感染组中高表达(A值为4.08~9.04,平均值为5.07±1.07,A值≥2.1为阳性),肝内HBcAg阳性率为5%~10%:pSI-C干扰组HBSAg,HBcAg的表达均受到抑制,血清HBsAg阴性,A值为0.04~1.5,平均值为0.62±0.59,与感染组相比有显著性差异(P<0.01),肝内HBcAg几乎无表达,RT-PCR示肝内HBV C mRNA水平明显降低。而无关干扰pGFP及突变的干扰序列pSI-C mut则无此作用。结论RNAi技术能特异,高效地抑制小鼠体内HBV的复制和表达,提示siRNA作为一种新型抗病毒药物的巨大潜能,而通过水动力法建立的小鼠急性乙型肝炎病毒感染的动物模型,一定程度上解决了长期以来缺乏合适的HBV感染动物模型的问题,为今后进行药物筛选及抗病毒治疗的研究拓展了新的思路。

关键词: 肝炎病毒,, 乙型, 模型,, 动物, 基因疗法, RNA干扰

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2009年11月01日

【期刊论文】乙型肝炎病毒表面抗原免疫逃逸突变基在人肝癌细胞的表达

任红, T. Harrison A. J. Zuckerman

中华医学杂志,1995,75(7):396~398,-0001,():

摘要

为了进一步研究乙型肝炎病毒(HBV)的s基因变异在免疫逃逸中的作用,我们通过酶消化质粒载体pEcob(含双拷贝HBVDNA),得到约900bp的HBV-s基因片断。将其插入到噬菌载体pBluescriptSK+的 Smal位点上。然后通过体外寡棱苷酸介导的人工定点突变获得一系列(共种)s基 因“免疫逃逸”突变型。再通过 EB病毒真棱表达载体pMEP4将s基因突变型片断定向克隆pMEP4上,从而构建了含HBVs基因突变型的重组质粒pMEP4HBSM。用其转染人肝癌传代细系HepG2,经潮霉素选择,3周后获得抗性细胞克隆经用HBV-s单克隆抗体检测发现除含变异145(gp145位上甘氨酸为精氨酸替代)外,其余变异体HBsAg均为阳性。经 Western blot杂交证实异体145在分子量约为24000处也存有一特异性HBsAg蛋白带。这一表达细胞系的成功建立HBV免疫逃逸的诊断和治疗提供了基础。

关键词: 乙型肝炎 乙型肝炎病毒 基因突变

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2009年11月01日

【期刊论文】重组乙型肝炎表面抗原插入突变体的真核表达及其抗原性的分析

任红, 古柏燕, 张定凤

中华医学杂志,1999,79(2):139~142,-0001,():

摘要

目的研究与乙型肝炎病毒感染的临床进程相关的两种乙型肝炎表面抗原(HBsAg)插入变异体的免疫学性状,以阐明在HBsAg阴性的慢性乙型肝炎病毒感染中所起的作用。方法利用体外PCR诱变方法.构建重组HBsAg的插人突变体;借助EB病毒载体pCEP4和逆转录病毒载体PXT1将重组插入变异S基因转染哺乳动物细胞;利用EHSA及Western blot方法,探讨变异抗原与抗HBs的结合力。结果(1)构建了HBsAg的插A突变体(分别在 HBsAg的第122位与123位氨基酸间插入Arg, Ala和第123位与124位氨基酸问插入Arg,Glv,Ala)的真核表达载体;(2)将其转染哺乳动物细胞,最终建立了能表达野生型和变异型 HBsAg的HepG2细胞系;(3)这些细胞系能在体外稳定地连续传代培养;(4)野生型HBsAg可与抗HBs结合,变异型HBsAg不能与抗HBsAg结合。结论研究表明这两种插人变异体影响了HBsAg的空间结构.从而使其失去与乙型肝炎病毒表面抗体的结合力,因而可能逃避机体的免疫清除而持续存在于体内形成慢性感染。

关键词: 肝炎表面抗原,, 乙型,, 突变,, 插入,, 基因表达

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2009年11月01日

【期刊论文】树突状细胞HBsAg疫苗抗乙型肝炎病毒免疫的体外研究

任红, 李用国, 罗云萍, 兰英华, 梁增伟, 许红梅

中华传染病杂志,2002,20(6):333~336,-0001,():

摘要

目的研究人单核细胞来源的树突状细胞(DC)激活的HBsAg特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对表达HBsAg的HepG2/S靶细胞的杀伤的效应,以探索DC-HBsAg疫苗在抗乙型肝炎病毒(HBV)中的作用方法从健康外间血中分离出单核细胞,在粒细胞巨噬细胞集落刺激因了(GMCSF)和白细胞介素4(11.4)的作用下培养7D诱导出DC,然后以DC为刺激细胞在体外诱导出HBsAg特异性CTL,将携有HBV-S基因的Plxsn/s重组质粒电击导入肝癌细胞系(HepG2),建立表达HBsAg的靶细胞模型HepG2/S;用染色法检测HBsAg特异性CTL寻HepG2/S靶细胞的杀伤效应。结果DC激活的HBsAg特异性CTL对HepG2/S靶细胞具有较强的杀伤效应,不同浓度HBsAg(0μg/L, 50μg/L和100μg/L)诱导的CTL的杀伤率分别为3.8%、69.5%和85.1%,而CTL对HepG2细胞无明显杀伤效应,结论由DC激活HBsAg特异性CTL具有较强的特异性抗HBV作用。

关键词: 树突细胞, 抗病毒免疫, 肝炎病毒, 乙型, 肝炎疫苗、乙型

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2009年11月01日

【期刊论文】母婴传播后母子体内乙型肝炎病毒前S/S基因变异研究

任红, 许红梅, 明利, 凌宁, 卿玉玲

中华肝脏病杂志,2003,11(7):398~401,-0001,():

摘要

目的通过经母婴传播获得乙肝炎病毒(HBV)感染的慢性无症状乙型肝炎表面抗原携带者(ASC)母子体内HBvpreS/S基因序列研究,了解来源相同的HBV在不同程度病毒血症情况下PreS/S基因变异的特点。方法选择15对母孕前为HBV感染、未接种过乙型肝炎疫苗日均未使用过抗HBV药物的Asc母子。应用T-A克隆技术构建重组质粒PGEMPreS/S、双酶切进行鉴定,每个患肯选2个酶切鉴定正确的克隆测序并进行分析。结果选择15对ASC母子,根据HBV病毒血症高低分为3组,每组5对,A组母子均为高病毒血症,B组子女为高病毒血症、母亲为低病毒血症,c组子女为低病毒血症、母亲为高病毒血症。高病毒血症患者均为乙型肝炎e抗原(+),低病毒血症均为抗HBe(+)。母子HBV亚型相同,各组中有4/5对母子为B/adw2、1/5对母子为C/adrq+亚。对每组中B/adw2亚型HBV患者的PreS/S基因进行分析显示:高病毒血症组间或低病毒血症组间HBVPreS/S基因变异数目及位点差异均无显著性,变异与年龄无关,低病毒血症患者变异数目及位点明显高于高病毒血症患者。两个低病毒血症组PreS/S基因绝大多数变异位点相同(113个),其中变异热点85个、可引起37个氨基酸变异,这些变异的氨基酸大多位于免疫表位内或(和)其附近。结论HBV变异可能与感染的时间长短无关;在发生乙型肝炎e抗原血清转换后的低病毒血症患者体内,HBVPreS/S基因出现较多的变异,且有规律,可能与病毒逃避免疫攻击有关。

关键词: 肝炎病毒,, 乙型, 变异, PreS/, S, 母婴传播

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2009年10月30日

【期刊论文】HBsAg HBeAg 作用 PBLs 对 TCR Vβ基因表达的影响*

黄树林, 陈红清, 李菁华, 李依娜, 罗利琼

世界华人消化杂志,1999,7(1):25~27,-0001,():

摘要

目的 探讨乙肝病毒(HBV)与肝癌的相关性。方法 取用乙肝疫苗注射3次前后外周血淋巴细胞(PBL):HBV DNA转染的HepG2 2215株培养上清(HBsAg,HBeAg阳性)感染健康人PBL后进行TCR Bβ基因1-20亚家族表达水平的分析。结果 乙肝疫苗注射后及HepG2 2215株培养上清感染健康人PBL后TCR Vβ6、14,Vβ6.15特异性扩增而表达水平显著增高。结论 vβ6可能为识别HBV抗原或引发免疫应苔的基因片段,但Vβ14,15各自在限制和杀伤功能方面起着重要的作用,这从分子水平上又证明了HBV与肝癌的关系。

关键词: 乙型肝炎病毒, 肝肿瘤, 乙型肝炎表面抗原, 乙型肝炎e抗原, TCR Vβ基因, 基因表达

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2009年08月07日

【期刊论文】血清HBsAg阳性IgA肾病肾组织HBV抗原蛋白及血清和肾组织HBV-DNA检测分析

金晓明, 张磊, 贺岩, 迟继铭, 班翔, 黄淇

中华实验和临床病毒学杂志,2006,20(3):247~249,-0001,():

摘要

目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染与IgA肾病发病的关系。方法 32例肾活检冰冻切片组织HBsAg和HBcAg蛋白和42例HBsAg阳性的肾活检石蜡切片组织及其部分血清HBV-DNA的检测。结果 HBsAg和HBcAg在IgA肾病肾活检组织的总阳性率为59.1%,在非IgA肾病中的总阳性率为63.6%,二者差异无统计学意义。42例肾活检组织中,仅发现有5例(n.9%)在肾活检组织中有HBV-DNA的存在。且5例均为大三阳患者,其病理诊断为系膜增生性肾小球肾炎2例,轻微肾小球病变l例,基底膜病变l例,IgA肾病仅l例。血清HBsAf;阳性的患者,同时进行了42例肾活检组织的血清HBV-DNA检测,其中大三阳患者为12例,其血清HBV-DNA均为阳性,而这12例血清阳性的肾活检组织中仅有5例HBV-DNA为阳性,其余30例血清及肾活检组织中HBV-DNA为阴性。结论 HBsAg和HBcAg蛋白在IgA肾病肾活检组织和非IgA肾病肾活检组织表达差异无统计学意义,表明HBV感染与IgA骨病并无直接关系。

关键词: 肾小球肾炎, IgA肾病, 肝炎病毒,, 乙型, 肝炎表面抗原, 乙型, 肝炎核心抗原, 乙型, 肾组织穿刺活检

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2009年06月09日

【期刊论文】丙型肝炎病毒核酸疫苗NV-HC/NS的免疫预防和治疗效应研究

赵连三, 周陶友, 秦山, 刘荫, 刘聪, 唐红, 雷秉钧

中华肝脏病杂志,2001,8(4):203-205,-0001,():

摘要

目的 研究丙型肝炎病毒(HCV)棱酸疫苗NV-HCNS;接种I3ALB/C小鼠后。对相应靶抗攻击的特异性免疫预防和治疗敬应。方法 以IICV棱酸疫苗KV-HCNS;接种BALB/c小鼠,分别在疫苗接种前后种植能表达靶抗原的BALB/c小鼠骨髓瘤细胞株SP2.O观察碴苗接种对肿瘤生长及小鼠寿命的影响。结果 种植肿滴前先接种NV-HCNS3的小鼠,荷瘤阻抑率达40%长出肿瘤的小鼠与束接种疫苗的对照组小鼠相比、生存时延长。生存率提高先荷瘤后免疫的小鼠,核酸疫苗的接种刚能提高小鼠的生存率。结论 NV-HC/NS3能诱导小鼠产牛针对靶抗原的特异性免疫脏苔,发挥预防甚至治疗效应。

关键词: 肝炎 丙型; 核酸疫苗; 免疫预防; 免疫治疗

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2009年06月09日

【期刊论文】乙型肝炎病毒感染患者肝移植术后再感染及其机制

赵连三, 方清, 周陶友, 刘隽, 刘丽, 唐红, 卢实春

中华肝脏病杂志,2005,3(3):225-227,-0001,():

摘要

暂无

关键词: 肝移植; 肝炎病毒, 乙型; 单核细胞

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2009年06月09日

【期刊论文】表达丙型肝炎病毒NS3抗原的重组腺病毒构建及体外表达

赵连三, 李卫华, 赵连三**, 周陶友, 何芳, 刘丽, 刘聪

中国病毒学,2005,4(2):101-104,-0001,():

摘要

为探索研制丙型肝炎疫苗的新途径,以期获得防治丙型肝炎的重组腺病毒减毒活疫苗,我们构建了表达丙型肝炎病毒(Hepatitis Cvirus, HCV)非结构蛋白3(non-structural protein3, NS3)抗原的重组腺病毒Rad-NS3,并检测其在体外表达。应用PCR从真核表达质粒pRC/NS3中扩增编码HCVNS3蛋白(329-935aa)的基因片段,定向克隆到重组腺病毒AdEasy-1系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV上,采用细菌内同源重组”两步转化法”构建携带HCVNS3基因的重组腺病毒基因组质粒pAd-HCVNS3,转染293细胞,成功包装出重组腺病毒Rad-NS3,利用它有效地感染人肝癌细胞株HepG2,经RT-PCR及免疫印迹等不同方法检测表明,被感染细胞能表达HCVNS3蛋白,为后续进行重组腺病毒在动物体内诱导抗HCV免疫应答能力的研究奠定了基础。

关键词: 腺病毒, 丙型肝炎病毒, NS3, 同源重组, 表达

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2009年03月30日

【期刊论文】IFN-γ基因对表达DHBVpreS/S蛋白质的DNA疫苗诱生免疫应答的影响

瞿涤, 龙健儿, 黄莉娜, 秦智强, 王文逸

中华微生物学和免疫学杂志,2003,7(7):529-533,-0001,():

摘要

目的 利用DHBV感染鸭模型,研究鸭IFN-γ真核表达质粒作为免疫佐剂对DNA疫苗诱导免疫应答的影响和预防DHBV感染的作用。方法 用DuIFN-γ真核表达质粒与DHBpreS/SDNA疫苗共免疫,或用DHBpreS/SDNA疫苗单独免疫正常幼鸭,检测经免疫前后鸭PBMC表达DuIFN-γ的mRNA水平(半定量竞争性RT-PCR)、诱生的抗体水平(ELISA)、病毒攻击免疫鸭后血清和肝脏中的病毒DNA变化(斑点和Southern印迹核酸杂交)。结果 IFN-γ表达质粒作为免疫佐剂,可以增强DNA疫苗诱导的鸭PBMCIFN-γ的mRNA表达水平。用大剂量病毒攻击免疫鸭的结果显示,用DuIFN-γ表达质粒和DHBpreS/SDNA疫苗共免疫鸭清除DHBV的速度,明显比仅用DHBpreS/SDNA疫苗免疫鸭清除病毒的速度快,肝脏中DHBV总DNA和共价闭环DNA(cccDNA)的量也低于DHBpreS/SDNA单独免疫组。结论 IFN-γ真核表达质粒作为免疫调节佐剂在DNA免疫中具有潜在的应用价值。

关键词: 鸭IFN-γ, 竞争性RT-PCR, 鸭乙型肝炎病毒, DNA免疫

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