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2009年11月02日

【期刊论文】肺炎链球茵感受态的形成影响毒力因子mRNA的表达

尹一兵, 王娥, 猪川嗣朗, 罗进勇, 张雪梅

中华微生物学和免疫学杂志,2003,23(3):165~168,-0001,():

摘要

目的通过体外实验诱导的转化过程,探讨肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)毒力因子的表达是否与环境诱导细菌感受态形成与转化有关。方法采用插入失活的方式断裂S.pn感受态形成的关键基因comE,获得感受态缺陷菌株。以实时定量RT-PCR测定毒力因子在感受态缺陷菌与野生菌的表达是否存在差异。所测毒力因子有自溶酶、溶血素、胆碱结合蛋白、S-IgA、神经氨酸酶、透明质酸酶。结果 S.pn在540nm处吸光度(A)值=0.044 -0.127之间产生感受态。自溶酶、神经氨酸酶、透明质酸酶3种毒力因子的表达,野生菌组表达高丁缺陷菌组,两均数间比较的t值分别为2.96(P<0.05)、2.8(P<0.05)、4.56(P<0.05)。结论 细菌感受态能启动自溶酶、神经氨酸酶、透明质酸酶3种毒力因子的表达,提示S.pn的感受态能影响其毒力因子的表达。

关键词: 肺炎链球菌, 感受态, 毒力因子, 实时荧光定量PCR

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2009年10月21日

【期刊论文】益骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织TGF-β1mRNA表达的影响

张荣华, 杨丽, 朱晓峰, 蔡宇, 黄丰

中药材,2005,28(4):312~315,-0001,():

摘要

目的:观察益骨胶囊预防和治疗用药对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织TGF-βmRNA基凶表达的影响,在分子水平上阐明益骨胶囊防治骨质疏松症的可能作用机制。方法:从72只l0月龄SD雌性大鼠中随机抽取24只为假手术A和B组,余48只待手术造模后随机分为4组:模型A组、模型B组、预防组、治疗组,每组l2只;以双侧卵巢切除法复制骨质疏松模型;预防各组均在手术后3天即开始灌胃,假A组、模A组灌胃NS 3ml、预防组灌胃益骨胶囊水溶液3 ml,每天1次,共24周;治疗各组均在手术后第13周即开始灌胃,假B组模B组灌胃NS3ml、治疗组灌胃益骨胶囊水溶液3 ml,每天1次,共l2周。VQ-PCR方法检测骨组织TGF-βmRNA基因表达。结果:大鼠造模24周时,益骨胶囊预防组和治疗组骨组织TGF-βmRNA基因表达均明显高于模型组,与假手术组相近。结论:益骨胶囊能促进骨组织TGF-βmRNA基因表达

关键词: 益骨胶囊; 骨质疏松症; 大鼠; 转化生长因子一p, ; 实时荧光定量PCR

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2011年04月06日

【期刊论文】水稻低丰度表达基因OSAMT1; 3实时荧光定量PCR方法的建立及其应用

孙淑斌, 李宝珍, 胡江, 徐国华*

中国水稻科学,2006,20(1):8~12,-0001,():

摘要

采用实时荧光定量PCR技术,通过使用特异引物,对水稻中的低丰度表达基因Osamt1;3进行了转录水平上的定量分析,成功建立了可检测低丰度表达基因的SYBRGreen实时荧光定量PCR技术平台。该方法具有很好的准确性和实用性。获得的荧光定量PCR扩增曲线,基线平整,指数区明显,斜率大且固定;线性范围广,17~36个循环都能测出;稳定性、重复性好,变异系数仅为0.47%;标准曲线表明,循环闽值与PCR体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系,可对基因表达进行相对定量;缺氯条件下OSAMTI;3与纯NH4+处理相比表达量增加4倍以上。

关键词: 实时荧光定量PCR 扩增曲线, 标准曲线, 铵转运蛋白基因, 基因表达, 研究方法

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2007年09月28日

【期刊论文】鼻咽癌患者血浆游离EBV/DNA的定量检测及其临床意义

邵建永, 李宇红, 冯惠霞, 郜红艺, 张力, 管忠震, 曾益新

中国肿瘤临床2004年第31卷第8期,-0001,():

摘要

目的:探讨血浆EBV/DNA定量分析,在鼻咽癌早期诊断、临床分期、预后判断和监测放疗后转移复发中的临床意义。方法:采用荧光定量PCR方法定量检测经病理确诊为鼻咽癌的120例初治、90例放疗后随诊患者,其中包括60例放疗后持续缓解,30例远处转移和局部复发患者的血浆EBV/DNA含量。结果:初治、远处转移和局部复发的鼻咽癌患者血浆中游离的EBV/DNA检出率分别为96.0%、95.0%和100%,显著高于治疗后持续缓解鼻咽癌患者、健康时照者和非鼻咽癌的肿瘤患者;初治鼻咽癌患者各TNM 分期之间血浆EBV/DNA拷贝教有显著统计学差异,晚期患者(Ⅲ+IV)期血浆EBV/DNA 中位拷贝教显著高于早期患者(I+Ⅱ)期;初治患者治疗后已出现局部和远处转移者,治疗前血浆EBV/DNA 中位数显著高于尚未出现复发转移患者;初治患者治疗前血浆EBV/DNA≥40000 拷贝/ml与<40000拷贝/ml两个水平,患者22个月无复发生存率分别为46.1%和92.9%,有显著统计学差异;放疗后复发、转移鼻咽癌患者血浆EBV/DNA的中位拷贝数显著高于治疗后持续缓解患者。结论:采用荧光定量PCR方法检测鼻咽癌患者血浆中游离的EBV/DNA是一种敏感可靠的方法,对于鼻咽癌早期诊断、鉴别诊断、分期、判断预后、监剃治疗后复发和远处转移具有重要的临床意叉,有可能成为鼻咽癌的血清肿瘤标记物。

关键词: 鼻咽肿瘤, 荧光定量PCR EB病毒, DNA

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