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2011年04月06日

【期刊论文】慢性丙型肝炎患者CD4+CD25+调节性T细胞表达增加

苏川, 杨江华, 张永祥, 孙南雄

世界华人消化杂志,2005,13(18):2201~2204,-0001,():

摘要

目的:探讨CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞在慢性丙型肝炎患者免疫下调中的意义。方法:流式细胞仪检测慢性丙型肝炎患者外周血中CD4+CD25+Treg细胞的数量;与CD4+CD25-T细胞共同培养,检测其抑制功能;流式细胞仪检测其对CD4+CD25-T细胞合成IFN-γ和IL-4的影响;RTPCR检测CD4+CD25+Treg细胞中Foxp3的mRNA表达。结果:CD4+CD25+Treg细胞约占慢性丙型肝炎患者外周血中CD4+T细胞的14.1±1.6%,显著高于正常对照5.3±0.8%(P<0.01),显著抑制CD4+T细胞的增殖(P=0.002),以及合成IFN-γ。CD4+CD25+Treg细胞高表达Foxp3。结论:持续性HCV感染患者CD4+CD25+Treg细胞表达增加,特异性抑制Th1细胞反应。

关键词: HCV CD4+, CD25+, Treg细胞, CD4+, T细胞, Foxp3

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2010年12月16日

【期刊论文】丙型肝炎病毒重组联合疫苗的实验研究①

魏林, 曾瑞红, 李广学③, 张贺秋⑦, 凌世淦②, 姚智燕, 修冰水②, 贺峰②, 杨建岭

中国免疫学杂志,2009,25(8):687~691,-0001,():

摘要

目的:研究一种基于丙型肝炎病毒(HCV)多个抗原的重组联合疫苗。方法:将三种Hcv重组抗原F4HVRI、HCV-T和HCV-E1混合,联合免疫BALB/c小鼠,用ELISA检测血清抗体滴度;第三次免疫后10天杀死一半小鼠,取脾细胞,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测细胞毒性T淋巴细胞(CIL)活性;用EHSPOT法检测分泌IFN-y和IL-4的细胞;用流式细胞仪检测CD4+T和CD8+T细胞;最后一次免疫后2周,在免疫小鼠的背部皮下注射1.0×106个SP2/0-NS3细胞,考察联合免疫对小鼠的保护作用。结果:F4HVRI+HcV-T+HCV-E1联合免疫诱导了高滴度的HCV-E1和F4HVRI特异性的IgG抗体以及高水平的CTL活性;与单独免疫相比。联合免疫诱导了平衡的Th1/Th2免疫应答;而且联合免疫后能显著预防SP2/0-NS3对小鼠的攻击。结论:F4HVRI+HCV-T+HCV-E1诱导了保护性的体液免疫和细胞免疫应答,有望开发为一种有效的重组HCV联合疫苗。

关键词: 丙型肝炎病毒, 联合疫苗, 体液免疫, 细胞免疫, 保护作用

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2010年12月16日

【期刊论文】丙型肝炎病毒重组蛋白抗原联合免疫的免疫原性和保护性研究

魏林, 曾瑞红, 李广学, 凌世淦, 张贺秋, 姚智燕, 杨建岭, 贺峰, 黄睿, 刘艳坤

中华微生物学和免疫学杂志,2009,29(7):642~645,-0001,():

摘要

目的 研究两个丙型肝炎病毒(HCV)多表位重组抗原联合免疫后诱导的细胞免疫和体液免疫应答,以及对小鼠的保护作用。方法 用两个多表位抗原HCV-T和HCV-E1联合免疫BALB/e小鼠3次,ELISA检测血清中抗体IgG、IgCl和IgG2a滴度;最后一次免疫后10d杀死一半小鼠,取脾细胞,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性;ELISPOT法检测分泌IFN-y和IL-4的细胞;最后一次免疫后2周,在免疫小鼠的背部皮下注射106个SP2/0-NS3细胞,考察联合免疫对小鼠的保护作用;另取BALII/e小鼠,先在背部皮下注射106个SP2/0-NS3细胞,7d后开始联合免疫,免疫3次,考察免疫治疗作用。结果 用HCV-T+HCV-E1联合免疫诱导了高滴度的HCV-E1特异性的IgG、IgG1和IgG2a抗体以及高水平的CTL活性;与单独免疫相比,联合免疫产生的分泌IFN-y和IL-4的细胞数量有协同作用;而且联合免疫能有效预防和治疗SP2/0-NS3对小鼠的攻击。结论 HCV-T+I-ICV—E1联合免疫诱导了保护性的体液免疫和细胞免疫应答,有望进一步开发为一种有效的重组IICV疫苗。

关键词: 丙型肝炎病毒, 多表位抗原, 联合免疫, 免疫原性

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2010年11月30日

【期刊论文】RT-PCR检测猪瘟病毒初探

罗廷荣, 波丹, 黄宪高, 梁家权, 刘芳, 黄伟坚, 秦爱珍, 温荣辉, 陆芹章, 余克伦

广西农业生物科学,2001,24(1):17~20,-0001,():

摘要

本研究建立了反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测猪瘟病毒(HogCholeraVirus,HCV)方法。合成的二对引物HCV-1/HCV-2和HCV-A1/HCV-A2成功地扩增兔化弱毒株、法国株和石门株的核酸,并对采自博白县3个、贵港市1个和武宣县1个猪场共13份病料进行检测。结果从博白县和贵港市的11份材料中检测到HCV的核酸。

关键词: 反转录, 聚合酶链反应, 猪瘟病毒

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2009年06月09日

【期刊论文】表达丙型肝炎病毒NS3抗原的重组腺病毒构建及体外表达

赵连三, 李卫华, 赵连三**, 周陶友, 何芳, 刘丽, 刘聪

中国病毒学,2005,4(2):101-104,-0001,():

摘要

为探索研制丙型肝炎疫苗的新途径,以期获得防治丙型肝炎的重组腺病毒减毒活疫苗,我们构建了表达丙型肝炎病毒(Hepatitis Cvirus, HCV)非结构蛋白3(non-structural protein3, NS3)抗原的重组腺病毒Rad-NS3,并检测其在体外表达。应用PCR从真核表达质粒pRC/NS3中扩增编码HCVNS3蛋白(329-935aa)的基因片段,定向克隆到重组腺病毒AdEasy-1系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV上,采用细菌内同源重组”两步转化法”构建携带HCVNS3基因的重组腺病毒基因组质粒pAd-HCVNS3,转染293细胞,成功包装出重组腺病毒Rad-NS3,利用它有效地感染人肝癌细胞株HepG2,经RT-PCR及免疫印迹等不同方法检测表明,被感染细胞能表达HCVNS3蛋白,为后续进行重组腺病毒在动物体内诱导抗HCV免疫应答能力的研究奠定了基础。

关键词: 腺病毒, 丙型肝炎病毒, NS3, 同源重组, 表达

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2009年04月03日

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2009年03月17日

【期刊论文】丙肝病毒全基因组cDNA克隆侵染细胞培养体系的建立

郑从义, 姚相杰①, 郭佳①, 郑从义①*, 方呈祥①, 屈三甫①, 陈震球②, 李中红②, 李信墙②*, 李卫云②

科学通报,2004,49(10):965~970,-0001,():

摘要

以含有丙肝病毒全基因组 cDNA的重组质粒(pHCV)为材料, 通过基因转染、重组痘病毒辅助使之在HeLa细胞中表达HCV病毒体,建立了一种新的HCV体外细胞培养系统。采用RT-PCR,荧光定量RT-PCR,链特异性RT-PCR,免疫印迹,免疫电子显微镜和电子显微镜负染技术跟踪检测HCV的增殖效率,结果显示,该培养体系中有HCV正链RNA的合成和HCV结构蛋白、非结构蛋白的表达,并组装成直径约47nm的HCV病毒体,病毒体可被偶联有胶体金的抗HCV结构蛋白E2的单抗标记;该体系产生的HCV病毒体滴度达107基因拷贝/mL,远远高于病人血清中的HCV基因拷贝数,也高于迄今报道的任何一种HCV细胞培养体系的病毒滴度,检测结果证明,转染细胞裂解上清中的HCV病毒体可以感染肝癌细胞系Huh7,并在感染细胞中增殖和合成负链RNA中间体,病毒滴度达106基因拷贝/mL。

关键词: 丙型肝炎病毒(, HCV), 全基因组, 侵染性cDNA, 克隆, 重组痘病毒, 细胞培养体系

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2006年10月25日

【期刊论文】Hepatitis C Virus Non-structural Protein NS4B Can Modulate an Unfolded Protein Response

叶林柏, Yi Zheng, Bo Gao, Li Ye, Lingbao Kong, Wei Jing, Xiaojun Yang, Zhenghui Wu and Linbai Ye*

The Journal of Microbiology, December 2005, p.529-536,-0001,():

摘要

暂无

关键词: hepatitis C virus (, HCV), non-structural protein NS4B, unfolded protein response (, UPR),

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2005年05月26日

【期刊论文】H与HBV、HBA重叠感染病例的研究

张树林, 柴宁莉

西安医科大学学报,2000,21(4):321~331,-0001,():

摘要

目的 探讨庚肝病毒HGV与HBV、HCV重叠感染状况。方法 采用套式逆转录聚合酶链反应(RT—NPCR)技术检测了22例乙肝病毒感染者及48例丙肝病毒感染者血清HGVRNA。结果 HGV与HBV、HCV重叠感染率分别为31.8%(7/22)、31.3%(15/48),重叠感染病例与单纯HBV、HCV感染者在ALT、SBIL水平及疾病的临床分型上无统计学差异。结论HGV与HBV、HCV重叠感染的几率均等,HGV似不加重乙肝及丙肝患者的病情。

关键词: 套式逆转录聚合酶链反应(, RT—nPCR), 庚肝病毒, 乙肝病毒, 丙肝病毒, 重叠感染

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2005年05月26日

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2005年03月04日

【期刊论文】丙型肝炎病毒(HCV)广东株包膜蛋白区cDNA的序列测定*

李刚, 姚集鲁, 彭文伟

病毒学报,1997,13(1):24~32,-0001,():

摘要

采用微粒吸附法从广东省一慢性丙型肝炎病人血清中提取丙型肝炎病毒(HCV)RNA,经随机引物逆转录为cDNA,再经聚合酶链反应(PCR),获得包膜蛋白区(E1,E2/NS1)两个部分重叠的产物片段,分别为489bp和806bp。其中,489bp片段主要位于E1区,小部分位于C区;806bp片段位于E2/ NS1区。将489bp片段插入pUC19载体,再亚克隆进pUC18质粒载体。806bp片段则插入到pBV220质粒及M13mp18、M13mp19噬菌体。将所测定的序列(共为1246bp)与多个已知分离株相应序列比较后发现,核苷酸同源性介乎61.00%-89.41%,与Ⅱ(1b)型同源性最大,超过86%;推导的氨基酸同源性为60.24%-87.23%。与其它株比较,HCV广东株(HCV-GD)较大变异区包括251-258、383-406、434-446及475-480位氨基酸。其中两个与公认的高变异区(383-408、475-480)相对应。

关键词: 丙型肝炎病毒(, HCV), ,, 分子克隆,, 核苷酸序列

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