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2011年04月21日

【期刊论文】人卵巢癌细胞特异CTL系的免疫学特性初步研究

葛海良, 马安伦, 王颖, 张惠珍, 王树军

上海医学,2002,25(10):639~641,-0001,():

摘要

目的探讨人卵巢癌细胞体外刺激、诱导的肿瘤特异细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对靶细胞的杀伤活性。方法应用建株的人卵巢癌细胞(OVA 319),在体外定期刺激、诱导肿瘤患者外周血淋巴细胞,经微量淋巴细胞毒试验和流式细胞术分别测定扩增的淋巴细胞组织相容性白细胞抗原(HLA)I娄分子表型和膜表面免疫标志物,并通过4-甲基偶氯唑盐(MTT)法分析其对肿瘤细胞的杀伤活性。结果经卵巢癌细胞刺激、诱导3周后扩增的淋巴细胞主要为T细胞抗原受体(TCR)α、β及CDB阳性的CTL,具有明显特异性杀伤肿瘤细胞的作用,并发现经OVA-319细胞刺激、诱导后不同个体的卵巢癌患者CTL的杀伤活性与教靶细胞的HLA A、B位点机同数成正比。结论肿瘤细胞体外激活的CTL具有特异系伤靶细咆作用,提不CTL特异杀伤作用与刺激细胞、靶细胞及本身CTL表现的HLA-A、B位点密切联系。

关键词: 卵巢癌, 特异性细胞毒性丁淋巴细胞系, 组织相容性白细胞抗原表型

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2011年04月21日

【期刊论文】肾透明细胞癌与HLA抗原关系的初步研究

葛海良, 徐龙, 郑志强, 马安伦, 王文

中国实验诊断学,2002,6(1):24~25,-0001,():

摘要

目的探索肾透明细胞癌与HLA-A,B抗原之问的关联。方法HLA-A,B抗原分型采用常规NIH标准微量淋巴细胞毒方法。结果11例肾透明细胞癌患者A2,A9和B40等位基因的表达高于正常人。结论提示肾透明细胞癌患者可能与某些HLA等位基因存在着一定的疾病关联。

关键词: HLA 等位基因, 肾癌

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2011年04月21日

【期刊论文】TIL识别的HLA-A2限制性人黑色素瘤特异抗原肽的研究①

葛海良, 李美星, 金姝, 陈影, 张勇

中国免疫学杂志,2005,21(12):924~927,-0001,():

摘要

目的:探讨TIL识别的人黑色素瘤HLA-A2限制性的肿瘤抗原肽特性。方法:通过亲和层析柱从三种肿瘤细胞-系(624-Mel、chaD-Mel和JY)中纯化HLA-A2蛋白和结合的多肽分子,经弱酸高温处理和离心超滤后,应用反相一高效液相色谱层析(RE-HPLG)分离各多肽组份,并将其各组份与T2细胞共同孵育、进行重建TIL识别的人黑色素瘤特异表位试验,鉴定肽分子生物活性,通过质谱分析所获活性肽分子特性,参照活性肽序列,制备人工合成肽加以进一步证实。结果:RT-HPLG层析的624-Mel的肽组份,经特异表位鉴定发现3个活性峰(P1EI,P25 和P31)。其中P31,TIL杀伤率达67%,质谱分析表明肽分子量为948,氨基酸序列为H+ Ala Lue TrD Lue Phe Phe Glv val Lue 0H的9肽分子。经特异表位测定表明人工合成肽具有纯化活性肽的生物活性特征。结论:分离鉴定的这-9肽分子是一种TIL识别的HLA-A2限制性肿瘤抗原肽,为肿瘤防治、合成肽疫苗的研究奠定了可靠的实验基础。

关键词: TIL, HLA-A2限制性, 肿瘤抗原肽, 疫苗

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2011年04月21日

【期刊论文】肾透明细胞癌和卵巢癌与HLAI类抗原关联性研究

葛海良, 王颖, 王树军, 王文, 富赛里, 王福庆, 周光炎

Shanghai Med J, 2004, Vol.24, No.4, 230~232,-0001,():

摘要

目的分析HLAI类抗原与肾透明细胞癌和卵巢癌的关联性,为确定与这些肿瘤的易感性和抵抗性有关的基因,并为寻找肿瘤特异性的抗原肽,开展肿瘤免疫诊断和治疗奠定基础。方法实验采用微量淋巴细胞毒试验,分析82例肾透明细胞癌和2I例卵巢癌患者外周血HLA-A抗原和-B抗原的抗原频率。结果与肾透明细胞癌和卵巢癌关联的HLA I类完全不同,其中与肾透明细胞癌关联的位点大大多于卵巢癌的位点。有A9、A11、A28、B15、B22、B27和B40;而与卵巢癌关联的HLAl类抗原位点只有A10、A36和B12,且卵巢癌关联位点的尸值大于与肾透明细胞癌关联的HLA I类抗原的P值。经过校正P值计算后只有卵巢癌中的HLAIA10抗原保持显著关联。结论HLAI类抗原关联性研究显示,HLA-A10可能为卵巢癌提供抵抗性。

关键词: HLAI类抗原, 肾透明细胞癌, 卵巢癌

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2010年12月15日

【期刊论文】沙眼衣原体CT-249 基因编码蛋白为一包涵体膜蛋白

刘殿武, 贾天军, 刘殿武*, 罗建华, 钟光明

微生物学报,2007,47(4):645~658,-0001,():

摘要

使用融合蛋白GST-CT249的抗体对假想蛋白CT249的特性进行研究。使用RCR方法从L2型沙眼衣原体的基因组中扩增编码CT249蛋白的开放读码区基因,限制性内切酶BamHI和NotI消化、T4连接酶连接导入pGEX-6p2载体,进一步把重组质粒pGEX-6p2-CT249转化到XLI-hlue细菌,并诱导表达融合蛋白GSF-CT249。在融合蛋白GST-CT249免疫小鼠制各抗体后,应用直接免疫荧光技术对衣原体感染细胞内的CT249基因表达的内源性蛋白进行初步定位。成功克隆出沙眼衣原体基因CT249,全长为35lbp,并表达了融合蛋白GSF-CT249,分子量为38.2kDa。制各了融合蛋白GSFCT249的抗体并初步定位假想蛋白CT249于沙眼衣原体包涵体膜蛋白上。总之。使用融合蛋白GSF-CT249的抗体,鉴定假想蛋白CT249为一种新的沙眼衣原体包涵体膜蛋白。该发现将为进一步深入研究衣原体与宿主细胞间某些机制提供了有用的途径。

关键词: 沙眼衣原体, 融合蛋白, 克隆, 表达, 包涵体膜蛋白

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2010年12月15日

【期刊论文】肺炎衣原体CPn0308 的基因克隆及其内源性蛋白定位的研究

刘殿武, 贾天军, 罗建华, 张庶民, 钟光明

卫生研究,2008,37(2):219~222,-0001,():

摘要

目的 克隆肺炎衣原体基因CPn0308,表达融合蛋白,并制备抗体对其表达的内源性蛋白进行初步定位。方法 根据STD基因库提供的信息设计引物,聚合酶链反应(PCR)克隆目的基因,用BamHI/NotI对克隆的目的基因和pGEX-6P2 载体进行酶切,T4 连接酶连接后,重组质粒经42℃转化XL1-blue 细菌:用PCR进行初步筛选,交叉PCR对提取质粒进一步确定,最后对插入片断进行序列分析:用IPTG诱导阳性克隆的细菌使其表达GST融合蛋白,纯化后免疫小鼠制备抗体,使用IFA 对内源性蛋白进行定位分析。结果 克隆出肺炎衣原体基因CPn0308,全长为366bp,编码121个氨基酸;并表达了融合蛋白GST-CPn0308,分子量约为39kD;制备了抗体,IFA实验发现该蛋白初步定位于肺炎衣原体包涵体膜蛋白上。结论 成功克隆肺炎衣原体基因CPn0308,其内源性蛋白初步定位于肺炎衣原体包涵体膜上。

关键词: 肺炎衣原体, 基因克隆, 内源性蛋白

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2010年09月28日

【期刊论文】谷氨酸废液培养莱茵衣藻的产氢研究

冯嵬, 贾立娜, 张栩, 谭天伟, 施定基*

生物加工过程,2005,3(1):45~48,-0001,():

摘要

通过在一般培养基中添加尿素、谷氨酸、葡萄糖等有机物,考察了莱茵衣藻混合营养培养的产氢效果。结果表明,含尿素混合营养培养莱茵衣藻产氢是含铵氮的培养基培养的6倍,无硫含尿素的混合营养培养具有最佳的产氢效果,是有硫含铵氮的培养基的10倍。谷氨酸及葡萄糖的添加对其生长和产氢也有促进作用,对莱茵衣藻生长和产氢促进作用的尿素的最佳添加量为0125gPL,谷氨酸的最佳添加量为017gPL,葡萄糖的添加量为012gPL。

关键词: 莱因衣藻, 混合营养培养, 产氢, 发酵废水

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2010年03月07日

【期刊论文】Research paper Improved preparation of class I HLA tetramers and their use in detecting CMV-specific CTL

马骊, Guang-Ping Ruan a, Li Ma a, *, Min-Jie Meng a, Yong Zhu c, Ze-Hong Chen c, Ying Lin b, Zheng-Qiang Wu b, Xiao-Wei He b, Ju-Fang Wang b, Xiao-Ning Wang b

Journal of Immunological Methods 312(2006)148-156,-0001,():

摘要

暂无

关键词: Class I HLA tetramers, CMV-specific CTL, Preparation, Detection

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2010年03月07日

【期刊论文】EYcient production, puriWcation, and application of egg yolk antibodies against human HLA-A*0201 heavy chain and light chain (β2m)

马骊, Guang-Ping Ruan a, Li Ma a, Xiao-Wei He b, Min-Jie Meng a, Yong Zhu c, Ming-Qian Zhou a, Zhi-Ming Hu a, Xiao-Ning Wang a, b, *

Protein Expression and PuriWcation 44(2005)45-51,-0001,():

摘要

暂无

关键词: Egg yolk, IgY, Immunoglobulin extraction, Caprylic acid, HLA-A*, 0201 heavy chain, β2-Microglobulin, IgY-FITC

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2009年11月02日

【期刊论文】下呼吸道感染患儿沙眼衣原体检测与初步基因分型

余加林, 吴仕孝, 刘官信

中国人兽共患病杂志,2001,17(4):54~56,-0001,():

摘要

研究下呼吸道感染患儿沙眼衣原体(Ct)的检刹情况、Ct分离株的初步基四分型及方法学评价。采曰McCoy细胞培养、聚合酶链反应(PCR)对下呼吸道感染患儿248例鼻咽拭子(其中110例加下眙结膜刮取标本)进行捡璎:8份怠儿C本本经赢链DNA直接刹序法以及裂解酶片段长度多态性(CFLP)基因分型。下呼吸道感染患儿鼻咽标本C检出率为25%(62/248),其中110例新生儿鼻咽和结膜标本Ct总检出率为40.9%(45/110),基因分型:E型4株。F、D扣H型分别为2、l和1株,6椿成人性病株中E型3株。F、D和I1型各1株。取E型3份。F垄2份作CFLP,呈两类CFLP谱。提示司时取崽儿鼻咽孝结膜标本可提高Ct检出率,下呼吸道感染晏儿的Ct型别与成人性痛Ct型别关系密切,双链DNA直接删户圣及CFLP均可用于Ct基因分型。

关键词: 沙眼衣原体, 基因分型, 测序

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2009年09月13日

【期刊论文】封洲禁牧对鄱阳湖疫区血吸虫病水体感染性影响的研究

万金保, 王小红

江西科学,2004,22(3)176~180,-0001,():

摘要

简介了鄱阳湖血吸虫病的流行概况,巧妙地设计出不灭钉螺、采取封洲禁牧等综合措施,从而做到有螺无害、净化草洲,有效地降低鄱阳湖疫区血吸虫病水体的感染性指数。

关键词: 封洲禁牧, 鄱阳湖, 水体感染性

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2009年08月31日

【期刊论文】脐血嗜碱粒细胞经激活后对HLAII类分子表达的影响

谢梅林, 吴银根

上海免疫学杂志,2003,23(2):126~127,-0001,():

摘要

采用密度梯度离心和免疫磁珠分离方法,纯化脐血嗜碱粒细胞,通过体外培养并用粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(CM-CSF)、γ-干扰紊(IFN-γ)、尘螨提取液和高渗甘露醇刺激后观察嗜碱粒细胞膜表面HIAII类分子的表达情况。结果显示,嗜碱粒细胞经CM-CSF和IFN-γ刺激20h后,其膜表面HLA-DR,DP,DQ的表达的细胞百分率比对照组明显增加。当选用尘螨或1.5%甘露醇刺激20h。嗜碱粒细胞表达HLA-DR。DP和DQ的细胞百分率分别为9.42%±8.65%和4.55%±2.79%。提示嗜碱粒细胞具有表达HLAⅡ类分子的潜能。

关键词: 嗜碱牲细胞, HLA 粒细胞, 巨噬细胞集落刺激因子, γ-干扰索, 尘螨

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2009年08月30日

【期刊论文】反义c-jun寡核苷酸对成纤维细胞中波紫外线辐射损伤的抑制作用

毕志刚, 宋秀祖, 夏济平

中华皮肤科杂志,2004,37(10):581~583,-0001,():

摘要

目的 探讨反义c-jun寡核苷酸(ODN)转染体外培养成纤维细胞后,对中波紫外线(U-VB)辐射诱导基质金属蛋白酶(MMP)表达的抑制作用。方法 用蛋白印迹法测定UVB辐射后,成纤维细胞原癌基因c-jun和c-fos的蛋白c-jun和c-fos的表达变化;用RT-PCR方法测定c-jun反义ODN转染后,其mRNA的表达变化。用ELlSA方法测定c-jun反义ODN转染后,对UVB辐射诱导的pro-MMP-1和MMP-3的合成变化。结果 不同剂量UVB(IO、20、30 mJ/cm2)辐射成纤维细胞,均可诱导c-jun蛋白表达显著增加,分别为未辐射对照组的1.8、2.6、3.3倍;而c-fos的表达未见显著变化。UVB辐射还可以显著增加pro-MMP-1和MMP-3的合成。不同浓度c-jun反义ODN转染成纤维细胞后,均可以抑制UVB诱导的c-jun mRNA表达;对UVB诱导的pro-MMP-I和MMP-3合成具有显著抑制作用。经统计学分析,差异有显著性(P<0.01)。结论 UVB辐射诱导的pro-MMP-1和MMP-3表达可以由c-jun介导;c-jun反义ODN可以抑制pro-MMP-1和MMP-3的合成。

关键词: 紫外线, 成纤维细胞, 基因, jun, 基因, fos, 基质金属蛋白酶

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2009年07月14日

【期刊论文】Clinical Study of Continuous Infection in the Urogenital System of Chlamydiae trachomatis

刘全忠, LIU Quanzhong, JIAO Wenlin, FU Zhiyi

Chin J Sex Transm Infect 2005; 5 (1): 40-42,-0001,():

摘要

暂无

关键词: Chlamydiae Trachomatis infection, treatment, continuance

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2009年05月31日

【期刊论文】应用PCR-SSOP技术对陕西克山病人HLA-DRB1基因分型的研究

牛小麟, 牛小膦, 王亚萍, 张洪波, 朱建宏, 魏瑾, 董新

中国地方病防治杂志,2003,18(6):327~328,-0001,():

摘要

目的 了解陕西克山病人HLA-DRB1基因多态性的特征。方法 应用PCR-SSOP技术对118例克山病人进行HLA-DRB1基因分型。结果 鉴定了克山病人HLA-DRB1位点的10种等位基因,其中高频率分布的有DR15、DR4、DR9。结论 提供了一套比较完整准确的陕西克山病人DRB1等位基因的基因频率,对群体遗传和疾病关联研究具有参考意义。

关键词: 克山病, HLA-DRB1, 基因多态性

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2009年05月31日

【期刊论文】HLA-DRB1基因多态性与克山病核心家系的关联和连锁分析

牛小麟, 王亚萍, 董新, 魏瑾

西安交通大学学报(医学版),2003,24(4):321~347,-0001,():

摘要

目的 探讨克山病与HLA-DRB1基因的遗传关系。方法 采用基于单体型相对风险(HHRR)和传递不平衡检验(TDT)的方法,在18个克山病患者及36个双亲中进行DRB1基因多态性的关联和连锁分析。结果 经HHRR和TDT分析,克山病患者与DRB1位点DR15相关联和连锁(X2分别为7.40和12.25,P<0.01)。结论 克山病与HLA-DRB1*15基因相关联和连锁。

关键词: 克山病, HLA-DRB1, 关联, 连锁

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2009年03月18日

【期刊论文】HBVPreS2反义寡核苷酸对HepG2.2.15细胞系HLA-I类抗原表达及生物活性的影响*

马春红, 丁培芳, 孙汶生, 王勤友, 蒋保云, 曹英林

山东大学学报(医学版),2002,40(3):202~204,-0001,():

摘要

目的:观察针对乙型肝炎病毒(HBV)PreS2基因特异性反义寡核苷酸(asON)对转基因细胞HepG2.2.15表面的人类白细胞Ⅰ类抗原(HLA2I)基因表达的影响。方法:设计合成互补于HBV PreS2翻译起始区的反义寡核苷酸即序列Ⅰ,并设非互补序列作对照即序列Ⅱ,免疫细胞化学染色观察asON对HepG2.2.15表面表达的HLA-I类抗原的影响,用ELISA法动态检测细胞上清液中HBsAg和HBeAg的变化,放射免疫测定法检测asON对宿主细胞自身分泌蛋白2血清铁蛋白的影响。结果:HepG2.2.15细胞表面HLA-I类抗原表达降低,用药组和对照组相比有统计学意义(P<0.05)。asON能够抑制HBV表达HBsAg和HBeAg,对HBsAg和HBeAg的抑制率分别为66%和91%,而序列Ⅱ对HBsAg和HBeAg的抑制率均为11%。asON对宿主细胞自身分泌蛋白无影响,即对宿主细胞无毒性作用。结论:asON以序列特异性方式抑制HBV基因表达而对宿主细胞无毒性作用,HLA-I类抗原表达降低,这对减轻过度炎症反应,阻止慢性肝炎至重症肝炎的发生具有重要意义。

关键词: 寡核苷酸类,, 反义, 肝炎病毒,, 乙型, HLA抗原

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2009年01月21日

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2007年09月21日

【期刊论文】脂肪干细胞HLA分子表达与体外抑制淋巴细胞增殖的实验研究

崔磊, 尹烁, 杨平, 刘波, 张英, 刘伟, 曹谊林

中华医学杂志2005年7月20日第85卷第27期/Natl Med J China , July20, 2005. Vol. 85. No. 27,-0001,():

摘要

目的 研究脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)表面免疫分子的表达以及体外调节淋巴细胞反应的功能,以期为组织工程提供同种异体种子细胞来源。方法 从临床脂肪抽吸术丢弃脂肪组织中分离获取脂肪干细胞( 共3 例),体外培养至第2 代,流式细胞仪检测免疫分子HLAI、HLAII 的表达。1 × 105 个/ 孔ADSC 细胞刺激异体淋巴细胞,观察细胞增殖情况。以植物血凝素(PHA,2 μg / ml)刺激淋巴细胞后,分别以(1 × 102 、1 × 103、1 × 104、1 × 105 )细胞/ 孔数量的异体脂肪干细胞加入反应体系中,观察淋巴细胞增殖情况;另一组在刺激同时加入白介素-2( IL-2,0. 5 ng /ml),检测脂肪干细胞抑制作用的逆转。分别以1 × 102-5 细胞/ 孔数量的“ 第三者”脂肪干细胞或经IFN-γ 作用后脂肪干细胞加入混合双向淋巴细胞反应体系中,观察淋巴细胞增殖抑制情况。结果脂肪干细胞表达HLA I 类分子,但未检测到HLAII 类分子阳性表达。人IFN-γ 刺激48 h 后,HLA I 表达未见明显增高,HLAII 类分子表达明显增高。异体或经IFN-γ 作用的脂肪干细胞均未能刺激淋巴细胞体外增殖。脂肪干细胞可明显抑制PHA 刺激的淋巴细胞增殖,IL-2 可逆转脂肪干细胞的抑制作用。脂肪干细胞可明显抑制双相混合淋巴细胞反应,抑制作用呈脂肪干细胞细胞数量依赖性;经IFN-γ 作用后抑制作用未见明显减弱。结论 ADSC 可在体外抑制淋巴细胞增殖反应,具有一定的调节淋巴细胞反应的能力,有可能成为组织工程或细胞治疗中同种异体细胞来源。

关键词: 干细胞;HLA 抗原;淋巴细胞培养试验, 混合

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2006年12月13日

【期刊论文】中国内地人群类风湿关节炎与HLA-DRB1共同表位基因关联性的Meta分析

张源潮, 潘正论

中华风湿病学杂志,2004,8(11):662~668,-0001,():

摘要

目的 探讨中同内地人群类风湿关节炎(RA)与人类白细胞抗原(HLA)-DRB1共同表化(SE)基因的关联情况。方法 检索已发表的有天中罔内地人群RA和HLA-DRBI的文献,进行汇总分析分析。结果 14项研究共纳入1118例RA患者和1301名正常对照,中国内地人群RA的关联基 有HLA-DR4比值比(OR)_4.05,P<0.0001)、DRB1 0401(OR=2.66,P=0.004)、DRB1 0404(OR=2.10,P=0.02)、DRBI*0405(OR=3.98,P<0.0001)、DRBI"0410(OR=3.36,P=0.008)、SE(OR=2.75,P<0.000 01)。其中DRB1*0405是主要基因亚型。结论 汇总分析分析不仅证文了DRB1*0405与中同内地人群RA的关联。而且发现了相对少见基因亚型DRBI"0401、DRBI*0404、DRB1"0410与RA的关联,样本大小对基关联分析的结论有重要影响。

关键词: 天节炎,, 类风湿, HLA-DR抗原, Meta分析, 关联

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