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2010年12月07日

【期刊论文】微卫星标记对高原蕨麻猪的遗传多样性研究

余四九 李军成, 景志忠, 路彩霞

中国实验动物学报,2007,15(5):355~360,-0001,():

摘要

目的探讨蕨麻猪的亲缘关系,遗传多样性,是否受外来血缘的影响。方法用9个微卫星DNA标记对5群猪进行等位基因频率、遗传距离、系统发生树构建和主成分等分折。结果微卫星标记在125个个体中。共检测出148十等位基因。蕨麻猪最少(55个)。蕨麻猪与兰州猪的遗传距离D。和标准遗传距离D暑最大,分别为0.6781和1.3312,DA、DS暑分别用upGMA和NJ构建了四种系统发生树,都是蕨麻猪聚为一类,其余4种猪聚为一类。主成分l(PCI)为62.174%,看作是蕨麻猪的代表,与其他4群猪差异较大。结论蕨麻猪与兰州、武威、临洮和青海四群猪相比,遗传距离大,主成分差异大,亲缘关系较远。蕨麻猪比较纯,投有受到这4群猪血缘的影响。

关键词: 蕨麻猪, 微卫星DNA, 遗传距离, 亲缘关系, 主成分

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2010年12月07日

【期刊论文】FAAS法测定骆驼奶中矿物元素的含量

余四九 邵伍军, 梁剑平, 魏恒, 王曙阳, 李军, 华兰英, 周为君

中兽医医药杂志,2007(3):42~43,-0001,():

摘要

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2010年12月07日

【期刊论文】幼年牦牛松果体的光镜和电镜观察

余四九 王正波, 谭娟, 崔燕

中国兽医科学,2007,37(9):802~806,-0001,():

摘要

利用光镜和电镜技术时幼年牦牛松果体的组织形态结构特征进行了研究。结果表明,光镜下,幼年牦牛松果体由松果体细胞、少量的神经胶质细胞、毛细血管和神经等组成。电镜下,松果体细胞的电子致密度低,细胞质内舍有丰富的线粒体、粗面内质网、滑面内质网、高尔基复合体、微管、微丝和核耱体,典型异质细胞器突触带呈球形,多位于质膜附近。神经胶质细胞内的线粒体丰富,胞体突起呈球形膨大伸入到松果体细胞之间。松果体细胞以及神经胶质细胞间均存在突触和连接复合体。牦牛松果体内的毛细血管为连续型。远腹侧血管周围可见色素细胞。

关键词: 幼年牦牛, 松果体, 组织结构, 脑砂, 超微结构

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2010年12月07日

【期刊论文】缩短牦母牛产犊问隔的研究

余四九 张君, 刘书杰

畜牧与兽医,2007,39(8):34~36,-0001,():

摘要

牦母牛产后不发情是影响其繁殖性能的主要原因。采用围产期补饲、发情季节生殖激素处理等措施以提高产后牦母牛发情和产犊。结果围产期补饲组、生殖激素处理组和补饲加激素处理组的产后当年发情率分别达到40.54%、255和45.45%,而对照组为3.03%,试验组比对照组分别提高37.51、21.97和42.42个百分点;各试验组的繁殖率分别为21.62%、20%和45.45%,对照组为1.52%,比对照组分别提高20.1,18.48和43.93个百分点。通过对产犊间隔的计算。242头自然生产的牦母牛的产犊间隔为758.7d,各处理试验组分别比自然生产母牛群缩短产犊间隔106.9d,101.7d和194.6d。

关键词: 牦牛, 发情率, 繁殖率, 产犊间隔

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2010年12月07日

【期刊论文】水牛卵泡GCs体外培养发生凋亡的生物学特征

余四九 何宝祥, 杜玉兰, 冯贵雪, 郑喜邦, 余四九*, 李恭贺

中国兽医学报,2007,27(5):747~751,-0001,():

摘要

为了解水牛卵巢卵泡中颗粒细胞(GCs)和卵母细胞在体外培养过程中发生凋亡的变化特征,通过体外培养、血清撤除法诱导水牛卵泡GCs凋亡,并应用苏木精伊红(腿)染色和DNA原位末端标记的TUNEL方法观察其病理特征;通过水牛腔前卵泡体外培养、诱导或等待其中的卵母细胞及卵泡细胞发生凋亡,然后应用透射电镜技术检查其超微结构改变。结果显示:凋亡卵泡Gc8的眦染色特征包括细胞体积缩小,染色较深呈紫黑色,且多成簇分布。DNA原位末端标记检查的特征是DNA发生降解,其降解碎片呈,TUNEL阳性。原始卵泡体外培养中调亡卵母细胞的超微结构表现为胞核碎裂成电子密度高的大碎片,或出现形态奇特的凋亡小体;初级卵泡中的调亡GCs,细胞内外均出现凋亡小体,细胞内还见有典型的螺层状内质网结构,其中包涵部分核质。

关键词: 水牛, 卵泡, 颗粒细胞, 细胞凋亡, 体外培养

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2010年12月07日

【期刊论文】牦牛胎儿成纤维细胞的分离培养

余四九 屠迪, 崔燕

中国兽医科学,2006,36(7):573~577,-0001,():

摘要

采用30d胚龄左右的牦牛胚胎,用2种不同的消化液消化后,将所得的牦牛胎儿成纤维细胞(vakembrvonlcflbrflblasts,YEF)培养于不同血清含量的RPMIl640培养液中,并接种于2种不同材质的培养瓶表面,对YEF的分离方法、培养所需胎牛血清(FBs)添加量和不同基质表面对YEF生长的影响进行了研究。结果表明,含150mL/LFBs的RPMIl640培养基最适合YEF生长,可传代27次以上;经用RPMIl640和D-Hank's液配制的2.5g/L胰蛋白酶消化,所得的YEF的细胞活率差异不显著(P>0.05),其原代细胞在含100mL/L胎牛血清的RPMll640培养液中的贴壁率差异极显著(P<0.01);不同生长基质对YEF的形态没有显著影响。

关键词: 牦牛, 胎儿成纤维细胞, 体外培养

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2010年12月07日

【期刊论文】喹胺醇对大鼠的促生长及生殖内分泌作用的研究

余四九 车业贵, 杨志强, 粱剑平, 李建喜, 王学智

中兽医医药杂志,2006(3):19~21,-0001,():

摘要

对8周龄雌性Wistar大鼠连续灌服不同剂量喹胺醇40d,以探讨喹胺醇不同灌服量的促生长作用及对生殖内分泌机能的影响。结果表明,喹胺醇具有显著促进雌性大鼠增重的作用。药物剂量在10mg/kg(相当于150mg/kg饲料添加剂量)时,其促生长效果较为显著;喹胺醇对大鼠血清中P4和E2的告量均无明显影响。

关键词: 喹胺醇, 促生长, 生殖内分泌, 大鼠

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2010年12月07日

【期刊论文】小尾寒羊人工授精影响因素的研究

余四九 霍生东, 樊江峰, 巨向红, 王正波

经验交流,2006,26(3):25~26,-0001,():

摘要

应用氯前列醇(PG),采用不同的注射程序,对小尾寒羊进行同期发情处理;用不同的配方稀释精液。结果表明:①采用方法1的同期发情率为81.1%,采用方法2的同期发情率为64%,采用方法3的同期发情率为93.2%,差异显著(P<005)。②用精液稀释液1做4倍稀释后,精子活力0.91±0.07,精子活率0.95%±0.055,精子浓度为14.29±1.62(亿个/ml),用精液稀释液2做4倍稀释后,精子活力0.92±0.05,精子活率945±0.065,精子浓度为13.53±1.45(亿个/m1),两种精液稀释液后的精液主要品质,差异不显著(P>0.05)。对同期发情处理后发情的小尾寒羊进行授配试验,连续两个情期的不返情率为86.18%。

关键词: 同期发情, 精液品质, 稀释液配方, 小尾寒羊

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2010年12月07日

【期刊论文】几种冷冻保存方法对奶牛胚胎保护效果的研究

余四九 巨向红, 雍艳红, 余四九*

家畜生态学报,2006,27(1):29~32,-0001,():

摘要

选取奶牛体内生产胚胎93枚(其中囊胚54枚,桑椹胚39枚),比较研究了不同冷冻方法和保护剂对其的保护效果。结果表明:乙二醇处理组对奶牛囊胚的保护效果优于One-Step-Freezing组、甘油组和玻璃化组(回收率、形体正常率和继续发育率四组分别为91.0%、82.0%、66.6%;91.0%、91.0%、88.8%;86.6%、85.0%、83.3%和80.0%、66.7%、50.0%),其中继续发育率在乙二醇组、甘油组和玻璃化组间差异显著(P<0.05);而桑椹胚的各项指标以乙二醇处理组最高,玻璃化组最低,但各组间差异不显著。结果说明乙二醇处理组对胚胎的保护效果优于其它几个处理组。

关键词: 奶牛, 胚胎冷冻, 玻璃化, 乙二醇

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2010年12月07日

【期刊论文】牦牛发情周期中卵巢卵泡发育状况的组织学观察

余四九 蒙学莲, 崔燕, 刘学荣

中国兽医科学,2006,36(1):57~61,-0001,():

摘要

运用组织学技术对36头处于发情周期的健康成年母牦牛卵巢卵泡的结构与发育状况进行了观察。结果表明,牦牛发情周期中卵巢卵泡发育的组织结构与其他牛基本相似。每对卵巢中原始卵泡数和生长卵泡数在发情前期、发情期、发情后期和发情间期之间差异不显著(P>0.05);发情前期的囊状卵泡数与发情期、发情后期和发情间期之间差异不显著(P>0.05),发情期和发情后期均与发情间期差异显著(P<0.05)。闭锁生长卵泡数在4个时期之间差异不显著(P>0.05);发情期的闭锁囊状卵泡数与其他3期之间差异极显著(P<0.01),发情前期和发情间期均与发情后期差异显著(P<0.05)。各级卵泡的闭锁形式各有特点。在生长卵泡、囊状卵泡及相应闭锁卵泡的卵泡膜中均见到了胶原纤维和网状纤维。

关键词: 牦牛, 发情周期, 卵泡, 组织结构

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2010年12月07日

【期刊论文】牦牛卵泡细胞及其卵母细胞不同发育时期的结构变化*

余四九 雍艳红, 巨向红, 崔燕**

动物学报,2005,51(6):1050~1057,-0001,():

摘要

采集成年母牦牛卵巢,通过光镜和电镜对牦牛卵泡及其卵母细胞不同发育时期的结构变化进行了观察。结果发现:当卵母细胞被单层立方卵泡细胞包围时,微绒毛开始出现,而皮质颗粒、透明带则在包被2-4层卵泡细胞时开始出现。随着卵母细胞的继续发育,透明带增厚,微绒毛由粗短变为细长,密度增加;皮质颗粒、线粒体、滑面内质网等细胞器的数目不断增加,并逐渐移行到质膜下;在移行的过程中,皮质颗粒成团存在。在囊状卵泡中,卵母细胞皮质颗粒呈线形分布于质膜下,线粒体、滑面内质网又移向胞质中央。卵母细胞借助微绒毛穿过透明带与卵泡细胞胞质突起相联系。结果证明牦牛卵泡和卵母细胞不同发育时期的结构变化与其它哺乳动物的基本相似。

关键词: 牦牛, 卵泡, 卵母细胞, 超微结构

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2010年12月07日

【期刊论文】γ-氨基丁酸对离体培养牦牛黄体细胞凋亡的影响

余四九 李晓明, 刘建英

中国兽医科技,2004,34(8):65~68,-0001,():

摘要

用离体培养方法观察了γ-氨基丁酸(GABA)对牦牛黄体细胞凋亡及羟自由基(OH)生成的影响。结果表明,GABA能促进黄体细胞OH的生成并诱导黄体细胞凋亡。

关键词: γ-氨基丁酸, 黄体细胞, 牦牛, 凋亡, 羟自由基

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2010年12月07日

【期刊论文】猪胚胎干细胞培养和建系的影响因素及对策

余四九 况玲, 冯书堂, 牟玉莲

中国兽医科技,2004,34(10):76~78,-0001,():

摘要

为解决胚胎干细胞的培养和建系受血清、饲养层、细胞因子、传代时机以及其他一些不明因素影响而很不稳定的问题,在总结猪胚胎干细胞(EG)培养和建系的经验教训的基础上,对一些常规的实验方法进行了改进,提出了消除上述影响因素的对策。

关键词: 胚胎干细胞, 饲养层, 传代, 血清, 培养基

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2010年12月07日

【期刊论文】猪胚胎多能性干细胞的分离培养

余四九 况玲, 冯书堂, 牟玉莲, 张勇

中国兽医科技,2004,34(7):55~59,-0001,():

摘要

收集妊娠26.0~29.0d的猪胚胎,分离培养原始生殖细胞(PGCs),在STO细胞饲养层上生长,形成了多能性干细胞(EG)。发现其具有干细胞的显著特性,并能在体外定向分化为神经细胞、上皮细胞和胚泡细胞。试验使用A、B、c3种不同的培养基培养PGCs,结果在形成EG细胞集落的数量和EG细胞分化上有着明显的差距,说明血清的质量和浓度以及细胞因子对干细胞的生成和增殖有着重要的影响。

关键词: 胚胎干细胞, 原始生殖细胞, 胎牛血清, 细胞因子

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2010年12月07日

【期刊论文】水牛胎儿卵泡细胞和卵母细胞凋亡的特征

余四九 何宝祥, 郑喜邦, 杜玉兰, 李彩萍, 李恭贺, 余四九*

畜牧兽医学报,2006,37(1):23~27,-0001,():

摘要

选择5月龄胎儿水牛的卵巢,采用石蜡切片、HE染色的光镜观察和DNA末端原位标记技术(TUNEL)进行了研究。结果表明:5月龄胎儿卵巢上分布着大量的凋亡细胞;在皮质部存在的大量腔前卵泡中,均匀分布有单个凋亡的卵泡细胞和卵母细胞,凋亡细胞的主要组织学变化是细胞缩小,核浓缩;DNA末端标记变化主要显示出TuNEL阳性。上述结果提示:水牛卵泡细胞和卵母细胞凋亡在胎儿时期已经存在,细胞凋亡是启动水牛腔前卵泡闭锁的潜在机理。

关键词: 水牛胎儿, 卵巢, 细胞凋亡, 卵母细胞, 卵泡细胞

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2010年12月07日

【期刊论文】水牛健康与闭锁优势卵泡中颗粒细胞凋亡的生物学特征

余四九 何宝祥, 杜玉兰, 郑喜邦, 余四九*

中国兽医学报,2007,27(6):950~954,958,-0001,():

摘要

采用组织学苏木精伊红(HE)染色与光镜检查、荧光显微镜检查和DNA电泳技术,检查了水牛健康优势卵泡(HDF)和闭锁优势卵泡(ADF)中颗粒细胞(GCs)调亡的生物学特征。此外还应用孕酮处理早期的ADF。应用流式细胞术(FCM)方法检查该激素诱发CCs凋亡的情况。HE染色和荧光显微镜检查结果显示,HDF和ADF都含有凋亡的GCs,只是ADF中凋亡的GCs较多。凋亡GCs的HE染色表现细胞体积缩小,染色浓黑,荧光原位检测发现核浓缩。DNA电泳分析表明,在HDF中未发现GCs的DNA降解。而在ADF中因闱锁程度不同而表现不同程度的DNA降解,出现典型的“拖尾”带,但均未出现具有细胞凋亡特征的DNA“Ladder”。FCM检查结果见到早期的ADF存在着DNA的降解。孕酮处理使DNA降解碎片显著增加。上述结果提示。在水牛的HDF中,GCs的凋亡很少。在ADF中GCs的凋亡较多。水牛ADF中GCs的死亡。少量是以凋亡方式发生的。而坏死是主要方式。

关键词: 水牛, 卵泡颗粒细胞, 优势卵泡, 细胞凋亡

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2010年12月07日

【期刊论文】Successful embryo transfer in Tianzhu white yak using standard protocol

余四九 YU SiJiu?, JU XiangHong, WANG LiBin & FAN JiangFeng

Sci China Ser C-Life Sci Oct. 2007 vol.50 no.5 655-659,-0001,():

摘要

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关键词: Tianzhu white yak,, superovulation,, oestrus synchronization,, embryo transfer

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2010年12月07日

【期刊论文】抗坏血酸和NAC对水牛卵泡颗粒细胞存活的影响

余四九 何宝祥, 郑喜邦, 李彩萍, 杜玉兰, 房慧伶, 郭亚芬, 李恭贺

中国兽医科技,2004,35(7):542~546,-0001,():

摘要

体外培养水牛卵泡颗粒细胞(BFGCs),待一定阶段后撤除胎牛血清,在对照组培养基中不加任何抗氧化剂,在试验组培养基中分别加入不同浓度的抗坏血酸(AA)和N-乙酰L-半胱氨酸(NAC),培养6h后观察细胞生长变化,并用噻唑蓝比色法进行细胞计数,探讨了AA和NAC对撤除血清后BFGCs存活的影响。结果表明,对照组和试验组的BFGCs都有不同程度的体积变小、细胞浓缩、变圆、离壁等类似凋亡的特征。其中0.5和1.0mmol/LAA组凋亡细胞最少,150.0mmol/LAA组无存活细胞,0.5mmol/LAA组的细胞存活率显著高于对照组和除1mmol/LAA组以外的其他AA组(P<0.05)。5mmol/LNAC组凋亡的BFGCs最少,其余5个试验组随NAC浓度升高,凋亡细胞逐渐增多,5mmol/LNAC组BFGCs的存活数量显著高于对照组和其他各组(P<0.05)。说明抗氧化剂AA、NAC在低浓度时能抑制撤除血清后体外培养BFGCs的凋亡,而高浓度时可促进其凋亡,它们的作用都是双向的、剂量依赖性的。

关键词: 卵泡颗粒细胞, 抗坏血酸, N-乙酰L-半胱氨酸, 水牛, 细胞凋亡

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2010年12月07日

【期刊论文】牦牛发情周期黄体组织结构的观察

余四九 蒙学莲, 崔燕*, 刘学荣

中国兽医学报,2007,27(4):586~590,-0001,():

摘要

选用48头成年母牦牛,采用光镜和电镜技术对发情周期中不同时期黄体的组织结构进行了观察。结果表明,牦牛黄体主要由2种细胞组成,即颗粒黄体细胞(granulasaluteincell,GLC)和膜黄体细胞(thecaluteincell,TLC),其特征性变化主要表现在GLC和纤维的分布。成熟黄体中GLC及其胞核的平均直径分别为36.6μm和15.2μm,而TLC则分别为14.4μm和10.9μm。黄体细胞胞质中线粒体的比例随黄体的成熟而增高;脂滴在Ⅰ期黄体时较多,Ⅱ期时减少,Ⅲ期时显著增多,后又减少;滑面内质网也随黄体的成熟而增加,并随黄体的退化发生膨胀。黄体组织中有同心圆状或同心轮状的粗面内质网膜系统。黄体细胞间主要是缝隙连接,偶见中间连接。黄体组织中存在窗孔型毛细血管。

关键词: 牦牛, 发情周期, 黄体, 组织结构

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2010年12月07日

【期刊论文】成年牦牛松果体的光镜和电镜观察

余四九 王正波, 崔燕*

解剖学报,2007,38(4):470~475,-0001,():

摘要

目的探讨成年牦牛松果体形态结构特征,为哺乳动物松果体形态结构研究积累资料。方法光镜HE染色、浸银染色和透射电子显微镜技术。结果光镜下,牦牛松果体由松果体细胞、少量的神经胶质细胞、毛细血管和神经等组成。电镜下,松果体细胞电子致密度低,细胞质内含丰富的线粒体、粗面内质网、滑面内质网、微管、微丝和核糖体;高尔基复合体数量极少,典型异质细胞器突触带呈球形,多位于质膜附近。神经胶质细胞的细胞质内含丰富的线粒体,其胞体突起呈球形膨大伸入到松果体细胞之间。松果体细胞以及神经胶质细胞间均存在突触和连接复合体。牦牛松果体内毛细血管为连续型,其远腹侧血管周围可见色素细胞。结论成年牦牛松果体细胞内存在神经上皮样和腺上皮样2种细胞连接方式。毛细血管为连续型。松果体细胞内细胞器发达,但很少观察到高尔基复合体。

关键词: 松果体, 组织结构, 超微结构, 透射电子显微镜, 牦牛

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