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    长期从事于临床血液病的诊治和研究,尤其是造血系统肿瘤的治疗和造血干细胞移植。

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2009年05月12日

【期刊论文】骨髓增生异常综合征患者T细胞亚型和CD3zeta表达的分析

刘霆 许芳*, 朱焕玲, 崔旭, 徐才刚, 毛咏秋

中国实验血液学杂志,2004,12(6):779-782,-0001,():

摘要

免疫介导的骨髓抑制和(或)造血异常被认为是导致MDS患者血细胞减少的重要机制之一。本研究旨在 通过分析11例骨髓增生异常综合征患者外周血T淋巴细胞亚群及CD3zeta的表达,以进一步评价MDS患者的免疫状态.探讨MDS患者血细胞减少可能的原因。对11例诊断明确的MDS患者,用流式细胞术计数外周血表达IFN7+CD4+细胞(Th1)、IL4+CD4+细胞(Th2)、IFN7+CD8+细胞(Tc1)及IL4+CD8+细胞(T02),同时分析CD3zeta在T细胞亚群中的表达。结果显示:CD8+细胞在MDS患者外周血中比例明显升高;T细胞亚群Th1/Th2、Te1/Tc2比值与正常对照无显著差异;T细胞活化信号传导通路上的功能蛋白CD3zeta在CD8+细胞中的表达明显增高。结论:MDS患者外周血T细胞亚群比例异常,以CD8+细胞增高为主要表现;CD3zeta在CD8+细胞中表达明显增高,在CD4+细胞中变化不大,提示MDS患者细胞免疫的过度活化主要与CD8+细胞有关;T细胞介导的细胞免疫过度活化是MDS患者外周血细胞减少的重要机制之一。

关键词: 骨髓增生异常综合征, T细胞亚型, CD3zeta

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2009年05月12日

【期刊论文】获得性纯红再障患者外周血T细胞亚群分析*

刘霆 代阳, 朱焕玲, 崔旭, 徐才刚, 毛咏秋

四川医学,2004,25(3):257~259,-0001,():

摘要

目的 本研究通过分析获得性纯红再障患者外周血T细胞亚群,进一步探讨该病的细胞免疫发病机制。方法用抗人CD3、CD4、CD8、IFN一7及IL广4单抗结合人外周血单个核细胞,流式细胞术分析单个核细胞中CD3+、CD4+、CD8+细胞数Th1、Th2、Tc1、Tc2细胞数以及CD4+/CD8+、Th1/Tb2、Tc1/Te2比值。结果贫血组患者,外周血CD3+细胞和CD8+细胞明显增加(P<0.01),CD4+/CD8+比例倒置(P<0.05);Tc2细胞明显增加(P<0.05),Tcl/Tc2比值降低(P<0.05),治疗后血象恢复的患者各增高的亚群细胞均有所恢复,接近正常。结论在获得性纯红再障患者T细胞明显增高,其中主要是CD8+细胞,而在CD8+细胞中,是Tc2细胞发挥了重要作用。经治疗有效的患者,其增高的T细胞亚群降低,提示以纠正病人细胞免疫异常为主的治疗方案有益于获得性纯红再障的治疗。

关键词: 纯红细胞再生障碍性贫血, 细胞免疫, T细胞亚群

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2009年05月12日

【期刊论文】骨髓增生异常综合征患者骨髓血管新生的初步观察*

刘霆 邹文蓉#, 刘霆△, 孟文彬, 余江, 牛挺

四川大学学报(医学版),2005,36(1):69~71,-0001,():

摘要

目的 观察骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓血管新生的变化及其对疾病的影响。方法 采用ELISA法测定MDS患者血清血管内皮生长因子(S-VEGF)的浓度,免疫组化法染色骨髓活检标本并计数微血管密度(MVD),并与年龄、病程及其他临床预后因素作统计学分析。结果 MDS患者的S-VEGF和MVD较正常对照组增高,两者呈正相关(P<0.05),以MDS/骨髓增生症MPD和RAEB-t亚型为最明显;S-VEGF和MVD与外周血常规、骨髓原始细胞比例密切相关。结论 MDS患者骨髓基质存在显著的血管新生,其S-VEGF和MVD较正常对照组高,S-VEGF和MVD增高反应疾病处于进展状态。

关键词: 骨髓增生异常综合征, 血管新生, 血管内皮生长因子, 微血管密度

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2009年05月12日

【期刊论文】bcr/abl特异性siRNA真核表达载体的构建及鉴定*

刘霆 席亚明, 刘霆Δ, 孟文彤, 汪宇辉, 顾玲, 陆晓茜, 龚玉萍

四川大学学报(医学版),2005,36(4):460~463,-0001,():

摘要

目的 构建bcr/abl的特异性siRNA真核细胞表达载体,并初步探索对K562细胞bcr/ablmRNA和P210蛋白的影响。方法根据GenBank数据库提供的bcr/abl基因核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,选择设计双链小干扰RNA(smallinterfering RNA, siRNA),再转化为能表达其小发卡结构RNA(smallhairpinRNAs, shRNA)的DNA序列,并与pTER质粒定向连接,构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子H1的真核表达载体pTER117、pTER363,经限制性内切酶酶切和DNA测序进行鉴定;在脂质体的介导下转染K562细胞,用RT-PCR分析bcr/ablmRNA的表达,细胞化学染色检测P210蛋白的表达。结果构建bcr/abl融合基因siRNA真核表达载体pTER117、pTER363,经限制性内切酶酶切和DNA测序证实与设计完全一致,转染K562细胞24h后,pTER117、pTER363分别使bcr/ablmRNA的相对水平下降52%、43%,使P210蛋白分别下降47%、40%。结论bcr/abl融合基因siRNA真核细胞表达载体构建成功,并有效干扰K562细胞bcr/abl的表达。

关键词: 慢性髓细胞性白血病bcr/, abl融合基因真核表达载体RNA干扰K562

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2009年05月12日

【期刊论文】异基因造血干细胞移植治疗白血病临床总结

刘霆 李建军, 贾永前, 徐才刚, 向兵, 黄杰, 何茜, 王晖, 管利君, 卢忠平, 鲁建春

四川医学,2004,25(3):269~271,-0001,():

摘要

目的 总结84例异基因造血干细胞移植(包括:同胞异基因造血干细胞移植、无血缘关系异基因造血干细胞移植和脐血干细胞移植)治疗白血病的疗效和生存状况。方法预处理方案CML采用标准BuCy方案(马利兰4mmg/kg•d×4,环磷酰胺60mg/kg•d×2);ALL采用E-TglCy方案(VP-16 50mg/kg×l,TBll000-1100eGy,分3次完成,CTX60mg/kg•d×2);AML采用BuACv方案(马利兰4mg/kg•d×2,Ara-c3.0g/m2•d×2,CLLK60mg/kg•d×2)。移植物抗宿主病的预防采用CsA+MTX+IVIg方案。结果84例中47例仍然无病存活(54.7%)。移植后100天存活64人(75.2%);100天内死亡原因分别为:急性GVHD,MOF,CMV司质性肺炎,播散性感染,早期复发,和植入失败;移植后100天。2年内死亡16例,死亡原因分别为疾病复发、CMV感染和慢性GVttD,移植后存活超过2年者中无死亡病例,最长生存已9年。CML61例目前仍无病存活37例(60.6%),AMLl5例仍无病存活7例(46.6%),All8例仍无病存活3例(38%)。结论异基因造血干细胞移植可使相当部分白血病患者获得长期无病存活,其中部分患者获得治愈。本组患者移植后100天内死亡原因主要是急性GVttD;移植后100天。2年内死亡的主要原因是疾病复发和CMV感染;故除正确处理移植相关并发症,减少移植手术期死亡之外,还应加强患者移植后的医学监护和康复指导,进一步提高移植成功率。

关键词: 白血病, 治疗, 异基因造血干细胞移植

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2009年05月12日

【期刊论文】抗mdrl RNA干扰真核表达载体的构建

刘霆 顾玲m刘霆△, 龚玉萍, 王玉芳, 杨志梅, 席亚明

四川生理科学杂志,2005,27(1):6~9,-0001,():

摘要

目的:构建抗mdr1 RNA干扰真核表达载体。方法:根据Reynolds的设计原则,针对mdrl的序列及二级结构选择了三条靶序列,人工合成三条shRNA序列的编码DNA序列,重组入Pgen~il.1栽体中,转化大肠杆菌DH5a,碱裂解法提质粒,酶切及测序鉴定。结果:用PstI和Sail酶切鉴定质粒Pmdrlshl、Pmdrlsh2、Pmdrlsh3均符合设计要求。测序证实序列完全正确。结论:通过酶切和测序鉴定重组质粒Pmdrlshl、Pmdrlsh2、Pmdrlsh3插入位点正确,与设计序列一致,预期可用于逆转mdrl所致耐药。

关键词: mdrl基因, RNA干扰, 真核表达载体

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2009年05月12日

【期刊论文】聚醚砜中空纤维膜血浆分离器血浆分离功能与血液相容性的评价*

刘霆 余喜讯, 赵长生, 卢忠平, 程莉萍, 孟文彤, 乐以伦

生物医学工程学杂志,17(5):249~254,-0001,():

摘要

对新型材料聚醚砜制作的中空纤维膜血浆分离器进行动物实验,评价了膜对血浆蛋白的分离功能及材料的血液相容性。分离过程中,实验动物状况良好,无溶血现象发生,膜对血浆总蛋白、白蛋白和球蛋白的筛分系数均在95%以上,约60%的血浆从全血中分离出来。白细胞、血小板和四种凝血因子在分离开始时都有不同程度地减少,但均在临床允许的范围内。

关键词: 聚醚砜中空纤维膜, 血浆分离器筛分系数, 血液相容性

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2009年05月12日

【期刊论文】非血缘供者异基因骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病

刘霆 贾永前, 徐才刚, 管利君, 牛挺, 李英碧, 邓长安

华西医科大学学报,31(4):533~535,-0001,():

摘要

内容摘要探讨非血缘供者异基因骨髓移植对慢性粒细胞白血病的治疗,并对移植相关并发症作了详细观察和处理。预处理方案为标准BuCy,马利兰(Bu)4rag/(kg•d)×4;环磷酰胺(Cv)60rag/(kg•d)×2.2例供者均来自台湾慈济骨髓捐赠中心,HLA基因配型(SSOP法)与患者完全配合。采髓量分别为1230ml和1010ml,其中植入的单个核细胞为2 13×108/kg和2.38×108/kg;CD34+细胞为2.3×105/kg和2 8×105/kg;CFU GM 4.6×102个/kg和5 3×105个/kg,BFU E 1 2×105个/kg和1.7×105个/kg,CFU GEMM 3 6×105个/kg和4 5×105个/kg。移植物抗宿主病的预防采用环胞素A+氨甲蝶呤+人体丙种球蛋白。结果:在移植后+24和+16天患者中性粒细胞恢复达≥0 5×104/L,在+64和+45天血小板≥2.0×109/L,+30天骨髓染色体核型分析,2例均达90%以上供者嵌台,+100天达完全嵌台,Ph1染色体(一),血型转变为供者血型,DNA可变数目重复序列检测(VNTR)证实供者源造血重建。结论:HLA相台非血缘异基因骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病获得成功,重建了患者造血功能;移植相关并发症的及时发现和正确处理是保证移植成功的重要因素。

关键词: 无血缘异基因骨髓移棺, 慢性粒细胞白血病

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2009年05月12日

【期刊论文】非清髓性干细胞移植治疗骨髓增生异常综合征二例

刘霆 廖小梅, 黄杰, 向兵, 何茜, 邓长安

中华内科杂志,2002,41(4):272~273,-0001,():

摘要

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2009年05月12日

【期刊论文】STR-PCR定量分析非清髓性干细胞移植后造血嵌合体*

刘霆 汪宇春, 刘霆△.张霁

四川大学学报(医学版),2003,35(3):568~570,-0001,():

摘要

目的 建立对非清髓性造血干细胞移植术后造血嵌台体的STR PCR定量检测技术,初步探讨该技术在监测非清髓性造血干细胞移植术后植入状态中的应用。方法对3例非清髓性异基因造血干细胞移植术后的患者序列血样,在可区分供受者基因的STR位点上,应用凝胶图像分析技术进行供受者特异性等位基因的定量分析。结果 定量分析结果与DNA电泳条带法的定性分析结果,以及临床移植效果一致。在电泳条带已表现为供者源造血时,通过定量分析仍可检测出受者特异性等位基因。结论STR PCR定量分析技术较单纯电泳鉴定植入可观察到更为细微的变化,该法是检测非清髓性造血干细胞移植后供受者嵌台体更为有效的方法。

关键词: 短片段串联重复, 非清髓性造血干细胞移, 植嵌台体

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2009年05月12日

【期刊论文】人骨髓间充质干细胞对T淋巴细胞的免疫调节作用

刘霆 陆晓茜, 孟文彤, 朱焕玲, 席亚明, 刘咏梅

中国实验血液学杂志,2005,13(4):651-655,-0001,():

摘要

为了探讨人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)体外对T淋巴细胞的免疫调节作用,从人骨髓液中分离培养MSC,通过细胞形态、免疫组织化学及流式细胞术检测其表面标记进行鉴定;将植物血凝素(PHA)及从人脐血中分离培养的树突状细胞(dendritic cell,DC)作为刺激因素,经磁珠分选的人CD2+T淋巴细胞作为反应细胞。用3H-TdR标记8液体闪烁计数仪检测与MSC共培养前后T淋巴细胞增殖能力的变化;用流式细胞术检测与MSC共培养10天后的CD2+T细胞内各亚群Th1、Th2、Tc1、Tc2比例的变化。结果表明:MSC能明显抑制由Dc诱导的T淋巴细胞增殖(P=0.004),同时MSC抑制由PHA引起的T细胞增殖,但不具有显著性差异(P=0.26),MSC培养上清液单独并不具备抑制T细胞增殖的作用,与MSC共培养后的T细胞亚群中,Th2及Tc2亚群含量较共培养前明显增加(P<0.05)。结论:MSC对由Dc和PHA诱导的淋巴细胞增殖反应均具有抑制作用,并且这种作用可能与细胞间相互作用及诱导T细胞亚群的改变有关。

关键词: 骨髓间充质干细胞, T淋巴细胞, 树突状细胞, 免疫调节

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