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为探讨人参调控粒细胞发生的生物学机制，采用造血祖细胞和骨髓基质细胞体外培养、造血生长因子生物学活性检测、免疫细胞化学、核酸分子原位杂交、免疫沉淀和蛋白印迹等现代生物学技术，研究人参总皂甙（totalsaponinsofPanaxginseng，TSPC）对人粒-巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte-macrophagecolony-stimulatingfactor，GM-CSF）和粒一巨噬细胞集落刺激因子受体a（GM-CSFRa）表达的影响。结果：（1）经TSPG（50g/ml）诱导制备的骨髓基质细胞、胸腺细胞、脾细胞、血管内皮细胞和单核细胞条件培养液可显著提高粒单系造血祖细胞（CFU-GM）的集落产率；（2）经TSPG（50pg/ml）诱导后，上述细胞的GM-CSF蛋白（诱导24h）和mRNA（诱导12h）表达显著提高；（3）经TSPG（50pg/ml）诱导24h骨髓造血细胞的GM-CSFRa/蛋白表达增强；（4）经TSPG（50pjg/ml）刺激后2min，GM-CSFRa和Shc发生酪氨酸磷酸化，5min时达高峰，随后去磷酸化。上述结果表明，TSPG可能通过直接和／或间接途径促进淋巴细胞与骨髓基质细胞合成与分泌GM-CSF，诱导骨髓造血细胞表达GM-CSFRa，并刺激GM-CSFRa和Shc的酪氨酸可逆磷酸化，从而通过调控GM-CSF的信号转导过程，促进CFU-GM的增殖。

关键词：人参总皂甙，粒单系祖细胞，粒一巨噬细胞集落刺激因子，粒一巨噬细胞集落刺激因子受体α，信号转导

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2009年11月01日

【期刊论文】当归多糖对造血祖细胞增殖调控机理的研究

王亚平，祝彼得

中华医学杂志，1996，76（5）：363～366，-0001，（）：

摘要

探讨当归多糖（AP）对造血祖细胞增殖调控和“补血”的生物学机理。方法采用贫血小鼠模型，用造血祖细胞体外培养和造血生长因子检测等技术，测定AP对造血祖细胞克隆增殖等影响，结果AP对正常或贫血鼠的髓系造血祖细胞（BFU-E. CFU-E，CFU-GM和CFU-MK）增殖分化有显著促进作用；经AP，诱导制备的成纤维细胞、巨噬细胞、脾细胞和骨骼肌条件培养液能提高造血祖细胞集落产率。结论AP促进造血的机理可能与直接或间接刺激造血诱导微环境的巨噬细胞、成纤维细胞、淋巴细胞等分泌较高活性的造血生长因子有关。

关键词：当归多糖，造血系统，细胞增值

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2009年11月01日

【期刊论文】人参总皂甙诱导淋巴细胞表达GM-CSF的实验研究

王亚平，陈笛，王莎莉，王璐，姜蓉

免疫学杂志，2003，19（6）：411～414，-0001，（）：

摘要

目的研究人参总皂甙（TSPC）对人淋巴细胞表达CM-CSF的影晌，及其与人粒细胞，巨噬细胞系血细胞发生调控的关系。方法采用造血祖细胞、胸腺细胞和脾细胞体外培养、造血生长因子生物学括性检测、免疫细胞化学和核酸分子原位杂交等技术。结果TSPG能显著刺激粒细胞-巨噬细胞系造血祖细胞（CFU-GM）增殖；经TSPG诱导制备的胸腺细胞和脾细胞条件培养液富含GM-CSF样活性；TSPC能显著促进胸腺细胞和脾细胞的CM-CSF蛋白和mRNA表达。结论TSPG可能通过直接和/或间接途径促进淋巴细胞合成和分泌CM-CSF，进而促进CFU-CM的增殖分化。

关键词：人参总皂甙，粒细胞，巨噬细胞系造血祖细胞，粒细胞，巨噬细胞集落刺激因子

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2009年11月01日

【期刊论文】人原始生殖细胞的迁移及表面标志物变化的实验研究

王亚平，刘永刚，陈地龙，李芳菲，王莎莉

笫三军医大学学报，2005，27（8）：716～719，-0001，（）：

摘要

目的探讨人胚胎原始生殖细胞向生殖嵴迁移及其细胞标志物改变。方法人胚生殖嵴或生殖腺经石蜡切片；HE染色，光镜观察；免疫组化方法检测阶段特异性胚胎抗原SSEA-4和SSEA-1的表达；钙一钴法检测碱性磷酸酶（AP）活性；RT-PCR检测4.5、7、9、11用人胚胎生殖嵴中转录因子Oct-4的表达。结果人胚胎第4.5周生殖嵴未见有碱性磷酸酶、阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、SSFA-1阳性细胞，且不表达转录因子Oct-4；第5～11周胚胎生殖嵴中持续存在碱性磷酸酶、阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、SSEA-1阳性细胞，且表达转录因子Oct-4；第12周胚胎生殖嵴中阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、SSEA-l阳性细胞数量明显减少，但存在碱性磷酸酶阳性细胞。结论人胚胎原始生殖细胞自第5周后开始迁移至生殖嵴，直至第II周后完全分化，其形态学特征为碱性磷酸酶、阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、SSEA-1阳性，且表达转录因子Oct-4。

关键词：原始生殖细胞，生殖嵴，人

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2009年11月01日

【期刊论文】人胚胎生殖细胞在人胚胎成纤维细胞饲养层上的生长

王亚平，刘永刚，韩兵，陈地龙，李芳菲，王亚平*，王莎莉

解剖学报，2005，36（3）：716～719，-0001，（）：

摘要

目的探讨以人胚胎成纤维细胞为饲养层分离、培养人胚胎生殖细胞的方法和条件。方法分离、培养3-4月胚胎成纤维细胞，取3～15代细胞经丝裂酶素处理后铺板备用；分离6～11周胚胎原始生殖细胞，将其置于人胚胎成纤维细胞饲养层上，在含生长因子、分化抑制因子的培养体系中培养胚胎生殖细胞；用免疫细胞化学方法检测胚胎生殖细胞表面标志SSEA-1和SSEA-4；钙，钴法检测碱性磷酸酶活性；RT-PCR检测转录因子Oct-4的表达。结果人胚胎成纤维细胞可连续传代25代以上（6月），3～15代细胞可以用作饲养层细胞。分离的胚胎生殖细胞在饲养层上可增殖形成典型胚胎生殖细胞集落，并能连续在体外培养超过8代。集落未分化标志检测显示SSEA-1、SSEA-4呈阳性，碱性磷酸酶活性呈强阳性，Oct-4表达阳性。结论用人胚胎成纤维细胞作为饲养层能获得可连续增殖的胚胎生殖细胞。

关键词：胚胎生殖细胞，胚胎成纤维细胞，细胞培养，免疫细胞化学，逆转录聚合酶链反应，人胚

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