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2010年12月07日

【期刊论文】水牛卵泡GCs体外培养发生凋亡的生物学特征

余四九, 何宝祥, 杜玉兰, 冯贵雪, 郑喜邦, 余四九*, 李恭贺

中国兽医学报,2007,27(5):747~751,-0001,():

摘要

为了解水牛卵巢卵泡中颗粒细胞(GCs)和卵母细胞在体外培养过程中发生凋亡的变化特征,通过体外培养、血清撤除法诱导水牛卵泡GCs凋亡,并应用苏木精伊红(腿)染色和DNA原位末端标记的TUNEL方法观察其病理特征;通过水牛腔前卵泡体外培养、诱导或等待其中的卵母细胞及卵泡细胞发生凋亡,然后应用透射电镜技术检查其超微结构改变。结果显示:凋亡卵泡Gc8的眦染色特征包括细胞体积缩小,染色较深呈紫黑色,且多成簇分布。DNA原位末端标记检查的特征是DNA发生降解,其降解碎片呈,TUNEL阳性。原始卵泡体外培养中调亡卵母细胞的超微结构表现为胞核碎裂成电子密度高的大碎片,或出现形态奇特的凋亡小体;初级卵泡中的调亡GCs,细胞内外均出现凋亡小体,细胞内还见有典型的螺层状内质网结构,其中包涵部分核质。

关键词: 水牛, 卵泡, 颗粒细胞, 细胞凋亡, 体外培养

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2010年12月07日

【期刊论文】牦牛胎儿成纤维细胞的分离培养

余四九, 屠迪, 崔燕

中国兽医科学,2006,36(7):573~577,-0001,():

摘要

采用30d胚龄左右的牦牛胚胎,用2种不同的消化液消化后,将所得的牦牛胎儿成纤维细胞(vakembrvonlcflbrflblasts,YEF)培养于不同血清含量的RPMIl640培养液中,并接种于2种不同材质的培养瓶表面,对YEF的分离方法、培养所需胎牛血清(FBs)添加量和不同基质表面对YEF生长的影响进行了研究。结果表明,含150mL/LFBs的RPMIl640培养基最适合YEF生长,可传代27次以上;经用RPMIl640和D-Hank's液配制的2.5g/L胰蛋白酶消化,所得的YEF的细胞活率差异不显著(P>0.05),其原代细胞在含100mL/L胎牛血清的RPMll640培养液中的贴壁率差异极显著(P<0.01);不同生长基质对YEF的形态没有显著影响。

关键词: 牦牛, 胎儿成纤维细胞, 体外培养

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