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2009年09月05日

【期刊论文】PAI-1反义RNA对人主动脉平滑肌细胞中血管内皮生长因子的影响

李晖, 富路, 梅宇

,-0001,():

摘要

目的探讨纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogenactivatorinhibitor-1,pai-1)反义RNA对离体培养的主动脉平滑肌细胞(smoothmusclecell,SMC)PAI-1表达的作用及对血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的影响。方法PCR扩增PAI-1第2外显子,将PCR产物纯化克隆后连入真核细胞表达载体pcDNA3。1,构建PAI-1反义RNA重组质粒。将pcDNA3。1-反义PAI-1重组质粒转染SMC中。通过免疫组化。Western印迹,ELISA检测细胞中PAI-1表达的改变;通过免疫荧光技术观察细胞中PAI-1表达量的变化对VEGF的影响。结果转染后第3天,细胞中PAI-1含量最低,VEGF也相应增加。第7天,PAI-1含量接近于正常,CEGF也增加至正常水平。结论反义PAI-1RNA能有效阻断SMC中PAI-1的蛋白合成,同时抑制细胞中VEGFDE的表达。

关键词: 纤溶酶原激活物抑制剂-1, 反义RNA, 血管内皮生长因子 平滑肌细胞

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2007年05月10日

【期刊论文】PA I-1反义RNA 对人主动脉平滑肌细胞中血管内皮生长因子的影响

富路, 梅宇, 李晖

,-0001,():

摘要

目的探讨纤溶酶原激活物抑制剂-1 (plasminogen activator inhibitor-1, PA I-1) 反义RNA对离体培养的主动脉平滑肌细胞(smooth muscle cell, SMC) PA I-1 表达的作用及对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, V EGF) 表达的影响。方法PCR 扩增PA I-1 第2 外显子, 将PCR 产物纯化克隆后连入真核细胞表达载体pcDNA 311, 构建PA I-1 反义RNA 重组质粒。将pcDNA 3.1-反义PA I-1 重组质粒转染SMC 中。通过免疫组化、Western 印迹、EL ISA 检测细胞中PA I-1 表达的改变; 通过免疫荧光技术观察细胞中PA I-1 表达量的变化对V EGF 的影响。结果转染后第3 天, 细胞中PA I-1 含量最低,V EGF 的表达也减少。第5 天, PA I-1 含量逐渐升高,V EGF 也相应增加。第7 天, PA I-1 含量接近于正常,V EGF 也增至正常水平。结论反义PA I-1 RNA 能有效阻断SMC 中PA I-1 的蛋白合成, 同时抑制细胞中V EGF 的表达。

关键词: 纤溶酶原激活物抑制剂-1, 反义RNA, 血管内皮生长因子 平滑肌细胞

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