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2010年12月07日

【期刊论文】四甲基吡嗪衍生物合成及其5-HT3受体拮抗活性的筛选

叶德泳, 江相清, 黄传满, 祝丽萍

高等学校化学学报,2005,26(4):683~685,-0001,():

摘要

暂无

关键词: 四甲基吡嗪衍生物, 5HT3受体拮抗剂, 构效关系

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2010年12月07日

【期刊论文】非甾体类孕酮受体激动剂5-亚苄基-1,2-二氢-5H-苯并吡喃并[3,4-f]喹啉衍生物三维定量构效关系

叶德泳, 江相清, 祝丽萍

复旦学报(医学版),2005,32(1):1~5,-0001,():

摘要

目的 建立非甾体类孕酮受体激动剂5-亚苄基-1,2-二氢-5H-苯并吡喃并[3,4-f]喹啉衍生物的三维定量构效模型,为设计高效的非甾体类孕酮受体激动剂提供理论依据。方法利用比较分子力场分析方法,建立31个非甾体类5-亚苄基类取代-1,2-二氢-5H-苯并吡喃并[3,4-f]喹啉人体内孕酮受体激动剂三维定量构效模型。结果 该模型的交叉验证相关系数q2=0.780,非交叉验证相关系数R2=0.983,标准误SE=0.092,F=157.531。用此模型预测了3个非甾体类孕酮受体激动剂的活性,结果与实验值相符。结论 该模型具有较好的预测能力,可为非甾体类孕酮受体激动剂的结构优化提供理论指导。

关键词: 药物化学, 构效关系, 比较分子力场分析, 孕酮, 受体激动剂

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2010年12月07日

【期刊论文】人类A3腺苷受体配基稠合1,2,4三唑并[1,5-c]嘧啶衍生物的3D-QSAR研究

叶德泳, 黄莉, 唐赟

复旦学报(医学版),2005,32(6):1~5,-0001,():

摘要

目的 建立人类A3腺苷受体配基稠合1,2,4一三唑并[1,5-c]嘧啶衍生物的三维定量构效关系,为设计高活性的该类化合物提供依据。方法利用比较分子场分析(CoMFA)和比较分子相似性指数分析(CoMSIA)建立39个该类化合物的三维定量构效关系模型。结果 CoMFA和CoMSIA模型均有良好的预测能力,但CoMSIA模型包含的力场较全面,给出信息更丰富。结论 CoMSIA模型可为该系列化合物的进一步结构改造提供指导。

关键词: 三维定量构效关系, 比较分子场分析, 比较分子相似性指数分析, 人类A3腺苷受体配基

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2009年03月30日

【期刊论文】Miyabenol C和K0bophenol A与雌激素受体的结合位点

宋后燕, 田春艳, 高海东, 张宇杲, 徐光*, 胡昌奇

生物化学与生物物理学报,2003(1):77-81,-0001,():

摘要

Mwabend c(Micy c)和kobophenol A(Kob A)是两种新型的植物雌激素。为了探讨Mw c和Kib A与雌激素受体(ER)的结合部位,运用计算机辅助分子模拟构建它们与ER结合的空司模型,找出结合位点,设计ER的两个突变体MlER(ERM M517 A G521D)和M2ER(ER E353G R394G);运用PcR技术将ER与Mw c或Kob A的结合位点进行突变;运用报告基因检测实验,检测Mw c和Kob A对突变的ER是否具有激活功能。结果显示Mw c激活M1ER使之促下游基因转录的作用下降,Kob A对MIER无激活作用;Miy c和Kob A对M2ER无激活作用。以上结果显示Miy c和Kob A与ER的结合位点可能为ER的Glu353、Arg394、Met517和Gly521。

关键词: 雌激素受体 结合位点, 植物雌激素

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2009年03月27日

【期刊论文】外源性碱性成纤维细胞生长因子对缺血大鼠脑内源性碱性成纤维细胞生长因子表达的影响

叶诸榕, 陆锦标, 刘颖, 施建英

中国神经科学杂志,2004,20(4):290~294,-0001,():

摘要

目的 研究外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)缩小局灶性脑缺血梗死灶的机制。方法 用免疫组化ABC法检测在局灶性脑缺血模型上给予生理盐水或bFGF后早期生长反应蛋白-1(Egr-1),bFGF,碱性成纤维细胞生长因子受体(bFGFR)的动态表达。结果给药组在3h-3d各时间段梗死灶均有不同程度的缩小。对照组和给药组Egr-1表达均表现为3~6h的增强过程,但给药组更强于对照组。对照组12h见有bFGF表达增强,而bFGFR表达3h到达高峰,6h起下降,12h时bFGFR的表达已恢复至正常水平(出现了配体和受体表达时相上不匹配)。给药组bFGF表达提前且增强,3h即见有bFGF表达增强,6h时出现第一峰,从而与bFGFR 3~6h的表达增强过程相吻合。结论 外源性bFGF能缩小梗死灶,该神经保护作用是通过Egr-1蛋白高表达使内源性bFGF的表达增高且提前,从而与bFCFR的表达增强过程重叠而实现的。

关键词: 脑缺血, 碱性成纤维细胞生长因子, 碱性成纤维细胞生长因子受体

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2009年03月27日

【期刊论文】bFGF, bFGFR及Egr-1基因蛋白在大鼠局灶性脑缺血后的表达

叶诸榕, 刘颖, 陆锦标, 朱建辉, 张秀荣, 赵仲华

中国神经科学杂志,2002,18(3):602~606,-0001,():

摘要

观察持续性局灶性脑缺血(permanent middle cerebral artery oeellasion, pMCAO)损伤后表达碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblas growth factor, bFGF)的细胞种类、时相与不同细胞之间的相互影响,并探讨Egr-1基因蛋白对bFGF表达的影响。结果表明:在持续性局灶性脑缺血后,缺血梗死灶周边区免疫组化结果显示bFGF表达出现双相增强。缺血1h缺血边缘区主要在星形胶质细胞(Astrocyte, As)中bFcF出现一过性增强,并见细胞外基质中出现bFGF点状着色。缺血6h~1d时bFCF染色再次增强,神经元及各类胶质细胞中的表达均有增强。但是经Western-blot定量测定发现脑组织bFGF含量仅在缺血后6h~1d时出现增强。缺血1h时,bFGF可能经缺血细胞受损的细胞膜到达细胞外,与细胞外硫酸肝素或相关分子结合,内化进入缺血边缘区细胞,从而造成bFGF免疫组化染色一过性增强。第二次增强可能是缺血损伤刺激及内化的bFGF诱导的蛋白合成的增加。缺血2~6h bFGFR在神经元及各类胶质细胞中的表达均增强,主要位于缺血区的边缘。由于bFGFR表达时程早于bFGF转录合成增加,因此限制了内源性bFGF发挥保护缺血损伤神经元的作用,这使得外源应用bFGF成为必要。Egr-1基因蛋白的表达在缺血损伤后1~6h增强,其表达增高的时相早于bFGF蛋白转录合成的增加,并且因为其能够促进bWGF启动子的活性,因而可能在bFGF自分泌机制中发挥重要作用。

关键词: 碱性成纤维细胞生长因子(, bFGF), 碱性成纤维细胞生长因子受体(, bFCFR), 早期生长反应蛋白-1(, Egr-1), 脑缺血

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2007年11月18日

【期刊论文】P2X2和P2X4受体在新生和成年大鼠延髓的表达

沈霖霖, 马岩, 宁穗, 卢宁, 李莉, 曹银祥, 钱源, 朱大年

复旦学报(医学版)Fudan Univ J Med Sci 2006, Sep 33 (5),-0001,():

摘要

目的 研究嘌呤能受体(purinergic receptors,P2) 家族中P2X 不同亚型在新生和成年SD大鼠延髓的表达。方法 成年SD大鼠(6-8w) 和新生SD大鼠(1-5d),各6只,雌雄不计,取延髓。应用免疫组织化学的方法和图像分析技术,比较P2X2和P2X4受体在新生和成年SD大鼠延髓的表达。结果 P2X2和P2X4嘌呤受体的阳性神经元和阳性纤维在新生鼠和成年鼠的延髓都有广泛表达,主要分布在孤束核、Ⅻ颅神经核和延髓腹外侧区,延髓其他区域为散在的分布。成年鼠和新生鼠的P2X2受体均比P2X4受体表达水平高。在新生鼠髓,P2X2 和P2X4的表达水平均比成年鼠低。结论 P2X2 和P2X4阳性神经元和阳性纤维广泛分布在大鼠延髓,为ATP对心血管活动、呼吸活动和痛觉等的调节作用提供了结合位点,也有利于实验中P2X受体亚型阻断剂的选择。随着动物发育成熟,P2X2和P2X4表达水平均增加。

关键词: 嘌呤能受体 免疫组织化学, 大鼠, 延髓

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2007年11月18日

【期刊论文】应激性高血压大鼠脑干及下丘脑-垂体-肾上腺轴中肾上腺髓质素及其受体mRNA表达的改变

沈霖霖, LI Xia, LI Liang, SHEN Lin-Lin, QIAN Yuan, CAO Yin-Xiang, ZHU Da-Nian

Acta Physiologica Sinica, December 25, 2004, 56 (6): 723-729,-0001,():

摘要

采用逆转录-聚合酶链式反应检测了慢性足底电击结合噪声应激致高血压大鼠下丘脑、延髓、中脑、垂体和肾上腺等组织中编码肾上腺髓质素的肾上腺髓质素前肽原(preproadrenomedullin, ppADM) 基因以及ADM 的特异性受体组件降钙素受体样受体(calcitonin-receptor-like receptor,CRLR)和受体活性调节蛋白2和3(receptor-activity- modifying proteins, RAMP2 和RAMP3) 表达的变化。我们观察到:与对照组相比,以3- 磷酸甘油醛脱氢酶作为内参照,15d足底电击结合噪声应激引起下丘脑、垂体和肾上腺中ppADM mRNA表达上调,而在延髓和中脑表达明显下调(P<0.01 或 P<0.05); CRLR 基因表达量正常时在下丘脑相对较高,应激15 d 后CRLR 表达在延髓、中脑和下丘脑下调(P<0.01 或 P<0.05), 而在垂体和肾上腺的表达无明显变化;应激后RAMP2 基因在延髓和下丘脑表达上调,而在肾上腺表达显著下调(P < 0.01), 其他部位无明显变化;RAMP3 基因在对照组大鼠的中脑和下丘脑表达较高,在应激性高血压大鼠的下丘脑和垂体表达上调(P<0.01 或P<0.05), 而在中脑和肾上腺表达下调(P<0.05), 在延髓中的表达变化无统计学差异。上述结果提示:慢性足底电击结合噪声应激引起明显的中枢和下丘脑- 垂体- 肾上腺轴ADM 及其受体组件CRLR/RAMP2 或CRLR/RAMP3 基因的表达变化。但慢性应激后中枢源性ADM 及其受体的表达变化对应激和血压的调节以及在应激致高血压中的确切作用及机制尚待进一步研究。

关键词: 肾上腺髓质素, 受体 脑干, 下丘脑-垂体-肾上腺轴, 逆转录-聚合酶链式反应, 应激, 高血压大鼠

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2007年11月18日

【期刊论文】肾上腺髓质素对大鼠延髓头端腹外侧区压力反射敏感神经元的作用

沈霖霖, FAN Ming-Xin, LI Xia, WANG Jin, CAO Yin-Xiang, SHEN Lin-Lin, ZHU Da-Nian

Acta Physiologica Sinica, June., 2005, 2006, 58 (3): 193-200,-0001,():

摘要

采用多管微电泳结合细胞外记录的方法研究了肾上腺髓质素(adrenomedullin, ADM)对大鼠延髓头端腹外侧区(rostral ventrolateral medulla, rVLM)压力反射敏感性神经元电活动的作用及其可能机制。结果显示:在29 个rVLM压力反射敏感神经元中,20个神经元在30、60 和90 nA 的电流微电泳大鼠ADM (rADM)过程中,放电频率由(10.8±2.7) spikes/s分别增加到(14.6±3.6)、(19.8±4.7)和(31.9±6.4) spikes/s(P<0.05,n=20)。微电泳rADM特异性受体阻断剂人ADM (human ADM, hADM) (22-52)可明显减小神经元放电频率的增加幅度,比正常放电频率仅增15.4% [(11.4±2.5) sipkes/s, P<0.05, n=10],而降钙素基因相关肽1 (CGRP1)受体阻断剂hCGRP (8-37)对rADM兴奋性神经元电活动影响较小。在另外23个神经元中,10个神经元的放电频率在10、20 和40 nA 电流微电泳神经型NOS(nNOS)抑制剂7-NiNa 过程中放电减少,由正常的(10.1±3.5)spikes/s分别减少为 (7.5±2.5)、(5.3±2.1)和(3.1±1.4) spikes/s (P<0.05, n=10)。在微电泳7-NiNa 过程中同时微电泳rADM,则rADM增加神经元放电频率的效应减弱,增加幅度为基础水平的17% [(6.2±1.9) spikes/s]。8个神经元在10、20 和40 nA电流微电泳诱导型NOS 抑制剂(iNOS) aminoguanidine (AG)过程中放电频率由(11.5±5.1) spikes/s 增加到(17.8±5.6)、(22.5±6.3)和(29.1±6.4) spikes/s (P<0.05, n=8),rADM 与AG 同时微电泳时,AG对rADM本身增加神经元放电的效应无明显影响。上述结果提示,rADM在rVLM可通过其特异性受体或来源于nNOS 的NO作用于压力反射敏感神经元,使其活动增强而发挥调节心血管活动的作用。

关键词: 肾上腺髓质素, 受体 一氧化氮, 延髓头端腹外侧区, 微电泳, 细胞外记录

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2007年11月28日

【期刊论文】应用比较分子力场法对3-取代的4,6-二氯吲哚-2-甲酸类化合物进行3D-QSAR 的研究

闻韧, SONG

Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 2004, 13 (2),-0001,():

摘要

研究一系列新的C-3取代的4,6-二氯吲哚-2-甲酸类化合物的结构和它们与NMDA受体甘氨酸位点亲和活性之间的关系。方法 比较分子力场法(CoMFA)是一种三维定量构效关系(3D-QSAR) 研究方法。结果 所建立模型的交叉验证相关系数q2和非交叉验证相关系数r2分别为0.744和0.993,标准偏差E = 0.039,F = 261.343。结论 所得到的模型对该类化合物的活性会有较好的预测,用此模型设计的新化合物的活性预测数值也符合我们得到的结论。

关键词: 三维定量构效关系;比较分子力场法分析;C-3取代4 , 6-二氯吲哚-2-甲酸;N-甲基-D-天冬氨酸受体

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2006年07月21日

【期刊论文】尿激酶及其受体在人脑胶质瘤中的表达

陈衔城, 徐斌, 张福林*, 施达仁**, 鲍伟民, 孙安, 宋后燕***

上海医科大学学报,1998,25(5):341-344,-0001,():

摘要

目的:研究尿激酶(uPA)、尿激酶受体(uPAR)在人脑胶质瘤中的表达特征,评估其在胶质瘤恶性生长方式中的作用。方法:选取57例不同恶性程度的星形细胞瘤、13例良性脑膜瘤和10例正常脑组织,分别以抗uPA单克隆抗体和抗uPAR多克隆抗体用ABC法进行免疫组织化学染色和半定量分析。结果:uPA、1lPAR的表达程度与胶质瘤的恶性程度有关,胶质瘤恶性程度越高,表达程度越高;良性脑膜瘤的表达程度较低;正常脑组织则未见uPA、uPAR的表达。uPA染色除见于肿瘤细胞、血管内皮细胞外,还见于少数胶质增生带的正常胶质细胞和神经元。在肿瘤细胞增殖密集区域,UPA阳性的肿瘤细胞比例较低,而在肿瘤细胞生长较稀疏、肿瘤血管增殖旺盛的区域阳性细胞比例较高。UPAR的染色定位于肿瘤细胞和血管内皮细胞。结论:uPA和1lPAR的共同表达是浸润性生长的胶质瘤的特征之一。其表达程度可作为判断星形细胞瘤浸润性的重要参考指标。在人体内,表达uPA的细胞种类是较多的。uPA、uPAR的表达对胶质瘤的浸润和血管发生可能起着重要作用。

关键词: 胶质瘤, 尿激酶, 尿激酶受体 免疫组织化学染色, 半定量分析

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2006年07月06日

【期刊论文】依那朵林的合成

仇缀百, 焦萍

复旦学报(医学版),2005,32(1)105,-0001,():

摘要

对具有很高kappa受体亲和性和选择性的依那朵林进行了合成研究。以1,4环己二酮为原料,经缩合、环合、还原、环氧化等16步反应得到关键中间体1-[8-甲氨基-1-氧杂螺[4,5]癸烷-7-基]吡咯烷(16),再和4苯并呋喃乙酸在偶合剂CDI催化下得到目标化合物依那朵林。

关键词: 阿片受体 κ亚型, 激动剂, 依那朵林, 镇痛, 合成

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2005年11月16日

【期刊论文】血管紧张素I型受体反义寡枋苷酸对大鼠肾脏局部肾素-血管紧张系统的阻断作用

马骥, LIU Ying-li, SUN Jing, LU Fu-ming, LIU Shao-jin, LIN Sha-yan, CU Yong

中华肾脏病杂志,2005,21(4):199~204,-0001,():

摘要

研究血管紧张素I型受体(ATI)反义(AS)寡枋苷梭(ODN)对大鼠肾脏局中肾素-血管紧张素系统(RAS)的阻断作用。方法采用单侧肾动脉注射+原位电穿孔的方法,ATI AS-ODN导入到Wistar大鼠的一侧肾脏,观察以FITC荧光标记的ODN在肾脏的转移位置,以ATI放射自显影定量分析的方法观察转移基因的时间-效应曲线。在基因转移3d后以RT-PCR、Western印迹及饮疫组织化学方法检测肾脏ATI的mRNA的蛋白表达与公布,并与正义(Sen)ODM转移、似注射+肾脏原位电穿孔(Sham)作为对照。结果FITC标记的ODN在基因转移10min后主要定位于转移侧肾脏的肾小不,而对侧肾脏FITC荧学阴性。ATI放射自显影定量分析显示在基因转移的3d内,结合有血管紧张素II(Ang II)的ATI较未转移的对侧肾脏减少约70%。AT1 AS-ODA基因转移后3d,转移侧肾脏AT1 mRNA水平较对侧肾脏下降约43%,蛋白水平下降约67%,而与ATI Sen-ODN和Sham组转移侧肾脏比较,AT1 mRNA水平下降分别约47%和51%,蛋白水平下降分别63%和71%。免疫组化检醒发现ATI的阻断以系膜区的表达减少为主。结论本研究所用的单侧肾动肪注射+原位电穿孔的基因转移方法成功地抑制了单侧肾脏的肾小球ATI受体的表达,为研究全身性疾病肾损害中肾脏局部RAS的短期用用机制提供了一个比较理想的整体动作模型。

关键词: 肾素-血管紧张素系统, 基因转移技术, 血管紧张素I型受体 寡苷酸类, 反义

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2005年11月16日

【期刊论文】单侧输尿管梗阻大鼠肾脏过氧化物酶体增生物激活受体-γ的表达及其意义*

马骥, LN Qin, MA Ji, GU Yong, YANG Haichun, ZHU Weiyu, LN Shanyan

肾脏病与透析肾移植杂志,2003,12(2):126~131,-0001,():

摘要

观察不同时限单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾皮质过氧化物酶体增生物激活受体(PPAR)-γ的表达变化及其与巨噬细胞浸润的关系。方法:用免疫组化、PT-PCR以及Westem bloting的方法检测UUO大鼠梗阻3天、7天、14天的PPARγ在核酸水平和蛋白质水平的表达量变化以及表达位置的改变,其与ED-1阳性巨噬细胞浸润数的关系。结果:假手术对照组PPARγ主要表达于肾脏内髓集合管,而UUO状态下肾小管上皮细胞出现PPARγ的表达。半定量分析显示UUP后3天PPARγ的表达开始有增高趋势,UUO7天时PPARγ的mPNA和蛋白质水平达到峰值(与对照组相比分别为3.33倍和4.36倍),而梗阻后14天其表达已开始下降。病理学和免疫组化结果显示,UUO7天时巨噬细胞浸润明显,但纤维化改变尚不显著。UUO14天时炎性细胞积聚明显,但巨噬细胞浸润数下降,出现明显的小管萎缩和间质纤维化。UUO后PPARγ的表达与巨噬细胞浸润显著相关。结论:UUO模型大鼠肾皮质中PPARγ的表达量增加,并在肾小管部位出现PPARγ的表达PPARγ的表达与肾间质巨噬细胞浸润显著相关。

关键词: 输尿管梗阻, 过氧化物酶体增生物激活受体γ

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2006年08月18日

【期刊论文】气道稳定剂治疗支气管哮喘的临床和实验研究

董竞成, 石志芸, 徐德斌, 倪健, 崔玉林**

中国实验方剂学杂志,1997,3(5):32-35,-0001,():

摘要

气道稳定剂能有效地控制支气管哮喘,对抗气道过敏性炎症,提高患者的肺功能和降低气道敏感性,疗效优于一般西药组,实验研究结果表明,气道稳定剂能舒张支气管平滑肌,抑制气道粘膜及其周围组织嗜酸性细胞浸润,还能调节组胺受体。

关键词: 气道稳定剂, 支气管哮喘, 血小板活化因子, 组胺受体

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2006年10月10日

【期刊论文】血管内皮生长因子-C促进淋巴管内皮细胞的增殖、迁移和F-肌动蛋白重组

谭玉珍, 王海杰, 张文彩, 李奇, 孙丽莉, 李鸿帅

解剖学报,2003,34(6):634~637,-0001,():

摘要

目的 研究血管内皮生长因子-C(VEGF-C)对于淋巴管内皮细胞增殖和迁移的作用,探讨VEGF-C促进淋巴管新生的机制。方法 从狗的胸导管分离和培养淋巴管内皮细胞。标记内皮细胞的VEGFR-3和F-肌动蛋白,在荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜下观察。用VEGF刺激后,计数增殖细胞和迁移细胞,测量细胞迁移距离,并与bFGF和VEGF-C的作用进行比较。结果 淋巴管内皮细胞表达VEGFR-3,静脉内皮细胞为阴性。bFGF 和VEGF-C促进淋巴管内皮细胞的增殖,VEGF-C的作用比bFGF强。与对照组相比,bFGF、VEGF和VEGF-C组引起迁移细胞的数目增多和迁移距离增大,VEGF-C的作用最强。在VEGF-C组的迁移细胞,F2肌动蛋白和应力纤维明显增多。结论 淋巴管内皮细胞特异性表达VEGFR-3,VEGF-C促进淋巴管内皮细胞的增殖和迁移,引起F-肌动蛋白的重组和应力纤维形成。

关键词: 血管内皮生长因子-C, 血管内皮生长因子受体-3, 淋巴管内皮细胞, F2肌动蛋白,

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2006年07月31日

【期刊论文】肺腺癌SPC2A21细胞表皮生长因子受体表达水平对其增殖的影响

白春学, 张敏, 张新, 高磊, 毛翎, 陈杰

中华结核和呼吸杂志,2005,28(5):337-341,-0001,():

摘要

目的:探讨采用体外化学合成的针对表皮生长因子受体(EGFR)设计的双链RNA(double-stranded RNA, dsRNA),是否能诱导肺非小细胞肺癌(NSCLC)细胞出现序列特异性基因沉默,及抑制EGFR基因表达后NSCLC细胞的生物学特征。方法:体外合成EGFR序列特异性dsRNA(dsRNA-EGFR),结合脂质体2000转染肺腺癌SPC2A21细胞,用荧光显微镜及流式细胞仪测定转染细胞的EGFR受体数量;适时定量聚合酶链反应检测其EGFR基因表达水平。采用集落形成试验检测SPC2A21细胞的增殖和集落形成能力。建立裸鼠肿瘤模型,计算肿瘤抑制率。结果:dsRNA2EGFR可使EGFR在蛋白水平表达下降7113%、基因水平表达下降5010%, SPC2A21细胞集落形成下降6618%,并显著抑制在体肿瘤生长,肿瘤抑制率为7510%。结论:dsRNA2EGFR可序列特异性下调NSCLC细胞EGFR在基因及蛋白水平的表达,有效抑制肿瘤生长。

关键词: 癌,, 非小细胞肺,  受体,, 表皮生长因子,  RNA,, 双链,  生长抑制率

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2006年07月31日

【期刊论文】RNA干扰技术抑制A549细胞表皮生长因子受体表达的研究

白春学, 张敏, 张新, 陈杰, MinQ. Wei

中华肿瘤杂志,2004,26(12):713-716,-0001,():

摘要

目的:探讨RNA干扰(RNAi)技术抑制非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549细胞表皮生长因子受体(EGFR)表达后,对A549细胞生物学特性的影响。方法:体外化学合成EGFR 序列特异性双链RNA(dsRNA),用Lipofectamine 2000 转染A549细胞,采用Western blot技术和流式细胞仪检测EGFR的表达,并观察A549细胞周期、集落形成、化疗敏感性等生物学特性的改变。结果:序列特异性dsRNA-EGFR可显著抑制A549细胞EGFR表达;dsRNA-EGFR组细胞生长抑制率为85.0%,集落形成抑制率63.3%;细胞周期分析结果表明,dsRNA-EGFR组G0~G1期细胞数较对照组增加了12.7%,进入S期的细胞数较对照组减少了6.6%。转染dsRNA-EGFR后,可将A549细胞对顺铂的敏感性提高约4倍。结论:dsRNA-EGFR可有效抑制A549细胞EGFR的表达,并将更多的细胞阻滞在G0~G1期,抑制细胞增生,显著增加细胞对顺铂的敏感性。RNAi可能为NSCLC的基因治疗提供新策略。

关键词: 表皮生长因子受体 RNA干扰, 双链RNA, 癌,, 非小细胞肺, 肺肿瘤

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2005年09月07日

【期刊论文】血管内皮生长因子-C促进淋巴管内皮细胞的增殖、迁移和F-肌动蛋白重组

王海杰, 谭玉珍*, 张文彩, 李奇, 孙丽莉, 李鸿帅

解剖学报,2003,34(6):633~637,-0001,():

摘要

目的研究血管内皮生长因子-C(VEGF-C)对于淋巴管内皮细胞增殖和迁移的作用,探讨VEGF-C促进淋巴管新生的机制。方法从狗的胸导管分离和培养淋巴管内皮细胞。标记内皮细胞的VEGFR-3和F-肌动蛋白,在荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜下观察。用VEGF-C刺激后,计数增殖细胞和迁移细胞,测量细胞迁移距离,并与bFGF和VEGF的作用进行比较。结果淋巴管内皮细胞表达VEGFR-3,静脉内皮细胞为阴性。bFGF和VEGF-C促进淋巴管内皮细胞的增殖,VEGF-C的作用比bFGF强。与对照组相比,bFGF、VEGF和VEGF-C组引起迁移细胞的数目增多和迁移距离增大,VEGF-C的作用最强。在VEGF-C组的迁移细胞,F-肌动蛋白和应力纤维明显增多。结论淋巴管内皮细胞特异性表达VEGFR-3,VEGF-C促进淋巴管内皮细胞的增殖和迁移,引起F-肌动蛋白的重组和应力纤维形成。

关键词: 血管内皮生长因子-C, 血管内皮生长因子受体-3, 淋巴管内皮细胞, F-肌动蛋白,

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2005年07月21日

【期刊论文】大鼠肝脏、卵巢及肾上腺胰岛素受体结合性质的比较*

归绥琪, 李桂玲, 唐月华, 冯佑民

中国糖尿病杂志,2000,8(6):345-347,-0001,():

摘要

目的:比较大鼠肝脏、卵巢和肾上腺胰岛素受体(insulin receptor,IR)的结合性质。方法采用教射配体结合分析法对TK的数目(用结合容量表示)与亲和力(用饱和常数表示)进行检测。结果大鼠肝脏、卵巢和肾上腺m高亲和位点的结合容量分别为7.359×1012个/mg蛋白质、8.029X1012个/mg蛋白质和6.440X1012个/mg蛋白质,饱和常数分别为6.147X107M-1、1.527X107M-1、1.010Xl07M-1,IR低亲和位点的结合容量分别为2.403X1014个/mg蛋白质、2.03X1014个/mg蛋白质和2.257×1014个/mg蛋白质,饱和常数分别为2.920X105M-1、2.008X105M-1和0.433X10sM-1。结论卵巢和肾上腺也存在丰富的IR,其数量与肝脏的相似,而饱和常数小于肝脏的IR。提示胰岛素对卵巢和肾上藤可能有重要的调节作用。

关键词: 胰岛素受体 放射配体结合分析

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